【摘要】體細胞突變隨著機體衰老而不斷積累，進而驅動癌癥的發(fā)生發(fā)展，而慢性炎癥、誘變劑暴露等因素則大大加速該過程。描繪并理解非癌組織細胞如何累積和選擇這些突變，對于認識癌癥的發(fā)生發(fā)展過程至關重要，但目前人們在這方面的認識仍非常有限。借助近年來快速發(fā)展的高通量高深度二代測序技術，人們得以逐漸清晰地認識非癌組織細胞中的突變累積及克隆演進動力學。非癌組織細胞中的突變具有廣泛性、克隆性、選擇性，既有可能影響腫瘤發(fā)生，也有部分突變利于組織修復及再生。這些研究成果加深了人們對非癌組織細胞突變導致組織穩(wěn)態(tài)失衡及腫瘤發(fā)生的認識，為探究癌癥的起源提供了新的方向和思路。在此，本文對更新活躍、易于突變累積的消化系統(tǒng)器官(食管、結直腸、肝臟組織)在本領域的研究進展進行綜述，以豐富本問題的認知。

【關鍵詞】體細胞突變;非癌組織;食管;結直腸;肝臟

突變是指生物體、病毒基因組核苷酸序列的改變。造成突變的可能原因包括染色體重組、DNA錯誤復制、DNA修復機制缺陷、誘變劑暴露、病毒感染等。突變通過核苷酸替換、片段插入或缺失、染色體重排和拷貝數(shù)變化等方式，在一級結構上改變DNA序列，進而導致編碼蛋白量和質的變化［1］。一方面，突變是自然選擇的最初來源，是生物進化的動力;另一方面，經(jīng)典理論認為，關鍵癌基因、抑癌基因或其調控序列上發(fā)生的突變則是導致腫瘤發(fā)生的重要原因:突變將賦予早期腫瘤細胞克隆擴增優(yōu)勢，以及不受控制的生長、組織侵襲破壞、血管生成和逃避凋亡等能力。上述機制不斷驅動基因在腫瘤細胞中正向選擇，并造成腫瘤細胞克隆擴增，最終形成腫瘤演進過程中的正反饋，促進腫瘤形成和發(fā)展［2-3］。然而，在形態(tài)正常的細胞中，突變是如何選擇與累積的，細胞的生物學行為又是如何受其影響的，人們在這方面的認識尚較為有限。

1發(fā)現(xiàn)非癌組織細胞突變的測序技術

從測序通量與準確性上來說，一代測序(Sanger測序法)雖是鑒定DNA序列改變的“金標準”，但其通量低、操作繁瑣費時的弊端限制了人們對突變基因集的整體認識［4］。如今，以Illumina等公司為代表的二代測序技術利用橋式擴增及多片段拼接原理，則可對DNA進行高通量突變檢測，比如全基因組測序(wholegenomesequencing，WGS)及全外顯子測序技術(wholeexomesequencing，WES)。在二代測序平臺上，WGS可對生物體整個基因組序列進行測序，以獲得完整的基因組信息;WES可以檢測基因組上編碼區(qū)的突變情況，能夠發(fā)現(xiàn)直接影響蛋白質氨基酸序列的遺傳變異，目標性更強，測序成本也相對低廉，測序后數(shù)據(jù)的分析也相對簡單［5］。對于非癌組織細胞來說，突變往往僅存在于分散且數(shù)量有限的克隆之中［6］，因此，識別非惡性組織中的體細胞突變，需要通過足夠深度的測序才有可能得以實現(xiàn)［7-8］。近年來，隨著高通量深度測序技術的發(fā)展，人們在非癌組織中發(fā)現(xiàn)了越來越多的突變累積，比例甚至高達37%。也就是說，在100個非癌形態(tài)和/或非癌生物學行為的“正?！奔毎校薪?0%帶有不同程度的基因突變［9-10］。這些帶有突變的細胞群以小克隆的形式存在，在組織發(fā)育及細胞命運決定方面發(fā)揮著未被認識的新功能。目前，已在食管［11-13］、結直腸［14-16］、肝臟［17-19］、皮膚［20］、支氣管［21］、子宮內膜［22-23］、尿路上皮［24-25］、血液［26-28］等多種類型的非癌組織中發(fā)現(xiàn)有體細胞突變的存在。其中，食管、結直腸上皮黏膜及肝臟是人體更新最為活躍的部位之一，此處的非癌組織突變易于產(chǎn)生“放大效應”，因此，本文主要就前三種消化系統(tǒng)器官組織的非癌細胞突變作一概述。

2非癌組織細胞突變的發(fā)現(xiàn)及其意義

利用安全流變—突變理論開展心理學研究的可行性

(一)心理學的發(fā)展史是一部吸收融合新理論的發(fā)展史哲學是心理學的母體，哲學為心理學提供理論框架和指導思想，但哲學不能為心理學提供實證基礎。心理學擺脫哲學的附庸地位在于逐步采用了自然科學的觀察法和實驗法，最終逐步剝離哲學，正式成為一門獨立的科學。心理學究竟是自然科學還是人文科學，亦或是自然科學和人文科學的交叉學科，從心理學正式成為一門科學開始，就爭論不休，各執(zhí)一詞，直至目前心理學界也未達成共識?！按_定地說，心理學是一門介乎自然科學與社會科學之間的中間科學、邊緣科學、交叉科學?！保?］可以說，心理學的發(fā)展史是一部不斷融合最新理論、汲取其他學科營養(yǎng)(包括自然科學和人文科學等學科)來充實自身發(fā)展并不斷創(chuàng)新的歷史。回顧心理學的發(fā)展歷程，可以看出，各種新式理論均與心理學有淵源。新式理論應用于心理學，既擴大了新式理論的應用范圍，同時也促進了心理學的發(fā)展。理論借鑒雖有瑕疵，仍不失為一項不錯的嘗試。如勒溫的場論就借鑒了物理學中“場”的相關概念，費希納對物理刺激和它引起的感覺進行數(shù)量化研究創(chuàng)建心理物理學，認知心理學就應用了控制論、信息論、計算機科學的相關理論。近年來不斷有研究者將混沌學、非線性科學的相關理論應用到心理學的研究，從不同側面詮釋心理學內容，也取得了不錯的效果［8－9］。(二)心理問題屬于廣義上的安全問題辯證唯物主義認為，事物是不斷運動變化的，對立統(tǒng)一規(guī)律是物質世界運動、變化和發(fā)展的最根本的規(guī)律。在自然界和人類社會中，也始終存在著安全與危險這一對矛盾。“人類創(chuàng)造精神和物質財富的一切活動都在安全與危險的矛盾之中進行。自然資源的開采和利用帶來了自然環(huán)境的變化和破壞;機電設備的廣泛應用帶來了各種機電事故;人在越來越復雜的環(huán)境中活動，其自身的承受能力和心理狀態(tài)都會發(fā)生較顯著的變化。當這些變化超出一定的閾限后，人的安全狀態(tài)便進入危險狀態(tài)。因此，各學科領域都存在安全科學的內容?！保?］心理問題是由于個人及外界因素引起個體強烈的心理反應(思維、情感、動作行為、意志)并伴有明顯的軀體不適感，是大腦功能失調的外在表現(xiàn)。當心理變化達到人的承受能力極限時便進入危險狀態(tài)。廣義上講，心理問題也是安全問題。可以這么認為，心理安全屬于大安全理論范疇的一個分支，心理問題在某種意義上可以納入安全科學的研究范疇?；疽罁?jù)如下。從定義上看，安全科學是研究事物發(fā)展過程的安全演化規(guī)律的科學。心理學是研究心理現(xiàn)象發(fā)生、發(fā)展和活動規(guī)律的科學。心理的變化發(fā)展過程是事物發(fā)展的基本過程。從狀態(tài)概念上看，安全科學的狀態(tài)有安全、危險、事故等3個狀態(tài)，而心理狀態(tài)粗略講有健康、亞健康、病態(tài)等3個狀態(tài)。二者在形式和內容上都存在某種對應關系。從基本觀點上看，安全科學認為事物的安全狀態(tài)處于不斷的變化之中，安全是相對的，不安全是絕對的;事物安全狀態(tài)的變化符合量變到質變的原理。心理學同樣認為人的心理處于變化之中，健康是相對的，不健康是絕對的;心理狀態(tài)也符合量變到質變的原理。(三)利用安全流變—突變理論闡釋心理變化過程的可行性安全流變—突變規(guī)律是事物安全演化的基本規(guī)律和本質規(guī)律，其哲學思想和方法能揭示安全科學的普遍性概念和規(guī)律，為安全科學研究提供方法論指導?！白匀豢茖W方法在社會科學領域中的應用既有必要，也有可能?！保?0］安全科學的流變—突變理論是利用自然科學研究方法得出的結論，亦可適用于心理問題研究。有一種立場就主張心理學應該以現(xiàn)代自然科學的世界觀和方法論為基礎，注意現(xiàn)代自然科學對心理學的意義。同時，辯證唯物主義認為，客觀世界是一個相互聯(lián)系、不可分割的整體，世界具體有整體性和統(tǒng)一性。同時，心理學的發(fā)展史也已經(jīng)表明，自然科學的相關理論早已被移植到心理學研究當中，并有力地推動心理學不斷向前發(fā)展。從以上分析可以看出，利用安全科學已有的規(guī)律和理論來分析和闡釋心理問題是恰當?shù)?，也是可能的?/p>

安全流變—突變理論對心理學的啟示

(一)心理變化過程的新詮釋人的心理過程是動態(tài)的變化發(fā)展過程，隨著主觀意愿和客觀環(huán)境的變化而變化。心理變化過程一般都要經(jīng)歷發(fā)生、發(fā)展、消亡等幾大階段。按照安全流變—突變理論，個體心理變化過程一般遵循OAF-BCD曲線(如圖2所示)。當心理問題出現(xiàn)時就需要及時輔導或者干預，以便最大程度上減輕心理疾病帶來的困擾。下面僅以實施個體心理干預為例進行解釋。圖2實施干預的心理問題流變—突變示意圖在實施干預前，心理變化過程的各階段分別為:OA—孕育階段;AB—發(fā)生階段;BC—發(fā)展階段;CD—結束階段;DE—后效階段。當實施第一次心理干預后，各階段變?yōu)?OA—孕育階段;AFGHK—發(fā)生階段(又分為AF、FG、GH、HK四個階段)。當實施第二次心理干預后，變化情況類似于第一次，變成曲線KLMNQ。當心理干預在F點作用后，原有的心理變化過程由OAFBCD變?yōu)镺AFGHKIJ。經(jīng)過干預后，心理損傷流變—突變過程發(fā)生了改變。FG段為心理損傷減速降低階段，個體心理狀況好轉。到達G點時，心理變化趨于平穩(wěn)。進入GH段，即心理穩(wěn)定發(fā)展階段。HI為心理損傷加速增加階段，I點為心理突變的預警點，此時如果不繼續(xù)采取措施，個體將進入IJ段，J為突變點，超過J點個體進入突變階段。以此類推，若個體干預發(fā)生在K點，流變—突變曲線將由OAFGHKIJ變成OAFGHKLMNQ。到達L點時，心理變化趨于平穩(wěn)。進入LM段，即心理穩(wěn)定發(fā)展階段。MQ為心理損傷加速增加階段，N點為心理突變的預警點，此時如果不繼續(xù)采取措施，個體將進入NQ階段，N為予警點，Q為突變點，超過Q點個體進入突變階段。當然，個體有自我修復能力，在沒有外界干預情況下，很多時候依然能自我修復。但依然可以用圖2進行解釋。如心理變化達到F點時，個體開始自我修復，依然會將曲線從OAFBCD變?yōu)镺AFGHKIJ。(二)心理輔導或干預需要把握關鍵節(jié)點從圖2可以看出，對心理進行輔導或干預在不同的階段進行會產(chǎn)生不同的結果。若每一次后續(xù)干預都在系統(tǒng)流變階段的話(如在AB段的F點，GHI段的K點)，每一次都能延長個體安全流變的時限。所以，心理干預應該是持續(xù)的，不斷進行的，并不能期望依靠最開始的一次干預就能解決問題。后續(xù)干預的起始點是有選擇的，應該選擇在損傷量加速增加階段，最晚不能遲于預警點。只有這樣，才能使個體心理流變階段能夠盡量延長，從而最大限度的發(fā)揮心理干預的作用。安全流變—突變理論作為普適性理論，對自然科學和社會科學研究都有方法論意義。用安全流變—突變理論的角度來分析心理變化過程，能在對心理問題進行干預時的整體把握的基礎上進行相對嚴格的過程控制，為心理干預提供了指導。作為主觀的人的復雜性，決定了單單依靠某一個理論是難以準確、完整描述心理變化過程的。安全科學是一門新興科學，其自身也還在不斷發(fā)展、完善。利用安全流變—突變規(guī)律來詮釋心理發(fā)展變化過程還只是一種初步的探索，有些論述還不是很完善和充分。將安全理論的概念和方法引入心理學研究不失為一種新的嘗試，還有待深入研究。

本文作者：朱正中工作單位：中國礦業(yè)大學

面試中的應急突變試題主要考查在有壓力的情境下，應試者在思考和解決問題時，能否穩(wěn)定自己的情緒，迅速而靈巧地轉移角度、隨機應變、觸類旁通，從而做出正確的判斷和處理。萬學金路的魏魯寧老師認為考查主要體現(xiàn)在：人際間合作的主動性；對組織中權屬關系的意識（包括權限、服從、紀律等）；有效溝通；處理人際關系的原則性和靈活性；在受到強烈刺激情況下的表情和言語；為了更高或更遠的目標，抑制自己當前欲望的程度等。

在遇到這類問題時，最重要是不要慌，同時切勿急躁，回答要有條理。

第一，面對領導突發(fā)的錯誤和問題，如何應急突變。

例如：你給領導起草一個講話稿，領導正在發(fā)言，你發(fā)現(xiàn)發(fā)言稿上的數(shù)據(jù)有誤，可是在底下還要重復多次的提到這個數(shù)據(jù)，會議已經(jīng)開始了，你該怎么辦？

參考解答：尊敬的考官，您假設的這種情況在我今后的工作中是不會出現(xiàn)的，因為我作風嚴謹，對工作一絲不茗，認真細致。假如出現(xiàn)這種情況的話，我會鎮(zhèn)定情緒，快速作出補救有效措施，會按以上步驟進行補救：（1）我會按具體問題具體分析的原則，假如是在我單位舉辦的話，我如果有條件到主席臺上去的話，借倒水時寫一更正后的小紙條傳遞給領導。假如不在我單位召開的話，我會寫一更正后小紙條快速找到會議組的工作人員將其傳遞給領導。（2）會后寫出檢查，交付領導審閱，同時總結經(jīng)驗，吸取教訓，下不為例。

第二、面對失控局面和突發(fā)事件，如何應急突變。

細胞癌變及惡性腫瘤的形成是多因素、多階段、多基因變異所致的結果。在食管癌的發(fā)生和發(fā)展過程中也有許多癌基因和抑癌基因發(fā)生結構和功能的變化，出現(xiàn)失活和異常表達n0]。目前在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中已廣泛開展應用分子生物學技術研究癌基因的突變狀況。本實驗應用聚合酶鏈反應一單鏈構象多態(tài)性分析(PCR—SSCP)法檢測食管鱗狀細胞癌組織中P53抑癌基因的突變，旨在研究1：''''53基因突變與腫瘤的分化程度及淋巴結轉移情況的關系。

1資料與方法

1．1一般資料

選取我院2009—2010年食管鱗狀細胞癌患者36例，男25例，女11例；年齡39-75歲，中位年齡59歲；其中有淋巴結轉移21例。

1．2方法

1．2．1提取DNA：取手術切除標本，取組織蠟塊切片10片，厚度為1O一20m，放入試管中，用酚氯仿法提取DNA。試劑由達柯公司提供。

【關鍵詞】,抗病毒藥；,,耐藥性；,,耐藥機制

摘要：目前臨床應用的抗病毒藥物達40多種，為病毒引起的疾病的治療發(fā)揮了重大作用。與臨床其他抗感染藥物一樣，抗病毒藥物長期應用易產(chǎn)生耐藥性，降低療效，成為臨床治療及新藥開發(fā)的重要問題。本文就抗艾滋病毒藥物、抗乙型肝炎病毒藥物、抗流感病毒藥物及抗皰疹病毒藥物耐藥性及耐藥機制研究進行綜述。

關鍵詞：抗病毒藥；耐藥性；耐藥機制

Advancesinantiviraldrugresistanceandresistancemechanisms

ABSTRACTTherearemorethan40antivirusdrugsintheclinicaluse,whichhaveplayedveryimportantroleinthetreatmentofviraldiseases.Likeotherkindofantiinfectiondrugs,antivirusdrugscanalsoinduceresistanceinlongtimeusethatresultsthereducingoftherapeuticefficacyandbecomingaverytoughproblemintheclinicaltreatmentandthedevelopmentofnewdrugs.ThispaperbrieflyreviewedtherecentadvancesinresistanceandresistancemechanismsofantiHIVdrugs,antiHBVdrugs,antiinfluenzadrugsandantiHSVdrugs.

KEYWORDSAntivirusdrugs;Resistance;Resistancemechanisms

摘要根據(jù)生物進化理論深入理解害蟲抗藥性進化的遺傳起源，并根據(jù)解釋基因新功能進化的基因重復理論，推測認為基因重復為抗性基因變異提供了原材料。最后，根據(jù)現(xiàn)有抗性報道的例子將抗性突變的分子機制進行歸類，并發(fā)現(xiàn)在多樣化的抗性突變中存在一定的規(guī)律性，如靶標位點的點突變導致抗性的機制是靶標抗性機制的主要形式，基因擴增或基因過表達導致的代謝酶活性增加是代謝抗性的重要機制，這種規(guī)律性與變異的適合度密切相關。

關鍵詞害蟲，抗藥性，進化，起源，遺傳，機制

害蟲對化學農(nóng)藥的抗性進化歷史不到100年，就已經(jīng)有500多種害蟲對一種或多種殺蟲劑產(chǎn)生了抗性。害蟲抗藥性的進化導致化學防治的失效，給農(nóng)業(yè)產(chǎn)量造成很大的經(jīng)濟損失，例如據(jù)Palumbi估計，在美國每年由于害蟲產(chǎn)生抗性導致的損失至少有30多億美元，這其中包括由于抗性加大農(nóng)藥使用的額外消費以及抗性害蟲對農(nóng)產(chǎn)品的直接損失。

早在1951年Dobzhansky就認為，殺蟲劑抗性是一種進化現(xiàn)象。遺傳分析可以有助于研究抗性機制和制訂抗性治理策略，是研究抗性的一個主要工具。本文從遺傳角度對抗性進化的本質進行探討，并歸納分析抗性基因突變的主要類型，以期對害蟲抗藥性的進化的有更好的理解。

1、害蟲抗藥性進化的遺傳起源

1.1遺傳變異是害蟲抗藥性進化的基礎

【摘要】X-連鎖無丙種球蛋白血癥（X-linkedagammaglobulinemia，XLA）屬于原發(fā)性體液免疫缺陷病中的一種，又叫Bruton病。近年來，由于Bruton酪氨酸激酶（Bruton’sagammaglobulinemiatyrosinekinase，BTK）基因突變導致B細胞發(fā)育障礙，所以不能產(chǎn)生免疫球蛋白。本文就近年來對BTK的遺傳學特性、基因突變分析、分子致病機制及診斷和治療等的研究進展作一綜述。

【關鍵詞】X-連鎖無丙種球蛋白血癥（XLA）；Burton酪氨酸激酶（BTK）；診斷；治療

【Abstract】X-linkedagammaglobulinemia（XLA）belongstotheprimaryimmunodeficiencydisease（PID），whichcallsBrutondisease.Recently，itcannotgenerateimmuneglobulin，becauseofthemutationoftheBruton’sagammaglobulinemiatyrosinekinase（BTK）gene，whichleadstodevelopmentaldisorderoftheBcell.Thisarticlereviewsthegeneticcharacters，mutationanalysis，molecularpathogenicmechanismandtherapyoftheBKTgene.

【Keywords】XLA；BTK；diagnosis；therapy

X連鎖無丙種球蛋白血癥（X-linkedagammaglobulinemia，XLA），又稱Bruton無丙種球蛋白血癥，是最早發(fā)現(xiàn)的人類原發(fā)性免疫缺陷病（primaryimmunodeficiencydisease，PID）之一，Bruton（1952年）首次報道?；颊吲R床上以反復細菌感染為特征，血清中各類免疫球蛋白明顯降低或缺乏，對抗原刺激不能產(chǎn)生抗體應答，血循環(huán)中B淋巴細胞減少，淋巴結及淋巴組織缺乏生發(fā)中心和淋巴濾泡，骨髓中無漿細胞，但前B淋巴細胞數(shù)量正常，T淋巴細胞數(shù)量及功能正常。典型病例為出生后半年左右開始反復化膿感染（如肺炎鏈球菌或嗜血流感桿菌）或遲至幼年發(fā)病，患者體內缺少成熟B細胞，基本上不能自主產(chǎn)生免疫球蛋白，必須依靠免疫替代療法維持體液免疫水平。該病嚴重危害患者健康，危及患者生命。80%～90%［1］臨床診斷病例可檢出相關致病基因BTK發(fā)生突變，而其他10%～20%［1］的病人存在其他問題，有研究顯示常染色體編碼Igφ［2，3］、μHC［4］和LC的基因存在突變。

1BTK的遺傳學特性大多數(shù)PID的遺傳形式已經(jīng)明確，幾乎均為單基因遺傳，多數(shù)為常染色體隱性遺傳，其次為X連鎖隱性和常染色體顯性遺傳。大多數(shù)情況男性發(fā)病，女性攜帶，但也有男性攜帶者不發(fā)病的報道。60%的PID突變基因的DNA序列已被克隆，突變位點（包括突變基因定位的染色體節(jié)段和基因位點）和突變形式（單個核苷酸缺失、替代、插入、移碼突變、無義或錯義突變等）也已確定［5］。在WHOPID專家委員會的指導下，成立了有關疾病基因庫，記錄登記全球范圍的PID基因突變及其類型。多基因遺傳性PID的確定較困難，至今尚無確切的報道。

理論模型

要考慮匯率、外匯儲備與國內通貨膨脹三者之間的關系，必然涉及產(chǎn)品市場、貨幣市場以及國際市場。因此，本文借助于產(chǎn)品市場的IS曲線、貨幣市場的LM曲線以及國際收支的BP曲線將三者聯(lián)系起來，從而分析其中的具體關系。產(chǎn)品市場均衡時：IS曲線為Y=c(y)+i(r)+g+nx(y,e,p,pf)（1）將消費函數(shù)、投資函數(shù)以及凈出口函數(shù)代入上式得y=α+e+g+q-βt+nEpfp1-β+γ-d1-β+γr（2）y=L1+L2r（3其中L1=α+e+g+q-βt+nEpfp1-β+γ；L2=-d1-β+γr式中d為投資對利率的敏感系數(shù)，e為自發(fā)投資，α為自發(fā)消費，β為邊際消費傾向，t為稅收，g為政府購買，E為匯率、Pf為國外價格，P為國內價格，y為國民收入，r為利率，γ表示邊際進口傾向。q，n為進出口函數(shù)中的相關參數(shù)。貨幣市場均衡時：LM曲線為f(y,r)=M/p（4）進一步的r=kyh+Mph（5）其中M/P指實際貨幣供應量，k為貨幣需求對收入的敏感性，h為貨幣需求對利率的敏感性。國際資本市場:國際收支曲線：BP=nx-F（6）將凈出口函數(shù)以及資本流出函數(shù)代入上式得r=BP-q+γy-nEpfp+σrfσ（7）其中，BP指國際收支項，當國際收支平衡時BP為零，pf為國外的價格，rf為國外的利率，σ為資本流出函數(shù)中的參數(shù)由（1）（2）（3）聯(lián)立得p=Mσ(Kσ-hγ)(L1-L2r)-h(BP-q-nER+σrf)（8）其中ER=Epfp表示實際匯率即可以簡寫成p=f(BP,ER,M,r,rf)（9）由于BP反映了國際收支的具體狀況，因此其反映了我國外匯儲備的增減，從而用外匯儲備的變動代表BP,（4）式變?yōu)镻=f(FER,ER,M,r,rf)（10）由上式可知，匯率、外匯儲備等變動均會對物價水平產(chǎn)生影響。具體而言當外匯儲備增多時，物價水平會呈上升趨勢；當匯率上升時，物價水平則會下降。

實證模型

（一）結構變化單位根（ZA）檢驗傳統(tǒng)的單位根檢驗（ADF、DF-GLS以及PP檢驗）并沒有考慮數(shù)據(jù)發(fā)生結構突變的情形。Perron對在結構突變是外生給定的情形下的單位根進行了研究，發(fā)現(xiàn)結構突變將使常規(guī)的單位根檢驗無效。而通常而言，結構突變均被認為是內生的，因此，Zivot和An-drews避免了perron的結構突變外生化的假定，利用數(shù)據(jù)的自身特征找出其結構變化點，從而實現(xiàn)結構突變內生化。本文則沿用Zivot和Andrews的內生結構突變的方程檢驗形式。這一檢驗的具體模型如下：模型A：截距項發(fā)生突變的方程Δyt=c+αyt-1+βt+θDUt(λ)+kj=1ΣdjΔyt-j+εt（11）模型B:時間趨勢項均發(fā)生突變的方程Δyt=c+αyt-1+βt+γDTt(λ)+kj=1ΣdjΔyt-j+εt（12）模型c:截距項與時間趨勢項均發(fā)生突變的方程Δyt=c+αyt-1+βt+θDUt(λ)+θDUt(λ)+kj=1ΣdjΔyt-j+εt（13）以上三個模型的原假設均是α=0,即原序列是不含有結構突變的單位根序列，備則假設則是α<0，即yt是結構突變的趨勢平穩(wěn)序列。其中，TB為結構突變發(fā)生的時間，λ=TB/T,表示突變點發(fā)生的具體時點位置，DUt是一個表示其截距項發(fā)生結構突變的虛擬變量，而DTt則是其斜率項發(fā)生結構突變的虛擬變量。DUt=1t>TB0otherwisτeDTt=t-TBt>TB0otherwisτeZA檢驗把時間段內的樣本點都看成潛在的結構突變點ti（i=1,2…），并對每一個點逐次進行單位根檢驗，從而計算t統(tǒng)計量，從中選取最小的t值，然后與相應的臨界值比較，若大于臨界值則接受原假設，反之，則拒絕原假設。（二）結構變化協(xié)整（GH）檢驗在探討變量之間的長期關系時，通常采用的協(xié)整檢驗常常會忽略結構突變對此的影響，對此，GregoryandHansen將zivotandAndrews的方法推廣到協(xié)整領域，提出了內生結構突變的協(xié)整檢驗，其備則模型具體形式如下：模型A：截距項存在結構突變(C)y1t=u1+u2Dtτ+αTy2t+εtt=1.2….n（14）其中μ1表示改變前的截距，μ2表示結構變化發(fā)生后截距項的偏移。模型B：含時間趨勢的截距項存在結構突變(C/T)y1t=u1+βt+u2Dtτ+αTy2t+εtt=1.2…n（15）模型C：截距項與斜率均發(fā)生結構突變(C/S)y1t=u1+u2Dtτ+αTy2t+αT2y2tDtτ+εtt=1.2…n（16）其中虛擬變量Dtτ定義為：Dtτ=1t≤[nτ]0t>[nττ]以上三個模型的原假設是序列不存在協(xié)整關系，備則假設則是序列存在協(xié)整關系且發(fā)生過結構突變。式中,Dtτ為虛擬變量，刻畫模型的結構變化，參數(shù)τ為結構突變點在時間序列的相對位置，[]表示取整運算。同樣，仍假定每一個樣本點均是潛在的結構突變點，然后對每一個點逐次回歸得到殘差序列，對殘差序列進行單位根檢驗，進而算出每一個點對應的統(tǒng)計量，從中選取最小的值，然后將統(tǒng)計量與臨界值進行比較，最終作出判斷。

實證檢驗與分析

（一）數(shù)據(jù)來源本文以區(qū)間為1994年1月到2011年9月的共計213個數(shù)據(jù)作為樣本數(shù)據(jù)。其中，人民幣實際匯率（RER），為了真實反映人民幣實際價值，采用國際清算銀行公布的人民幣實際有效匯率的月度數(shù)據(jù)；國內市場物價水平采用居民消費價格指數(shù)（CPI）的月度數(shù)據(jù)來衡量。外匯儲備(FER)的數(shù)據(jù)則來源于外匯管理局網(wǎng)站的外匯儲備月度數(shù)據(jù)。對于月度數(shù)據(jù)，常常需要對此進行季節(jié)調整，以便消除季節(jié)變動對結果產(chǎn)生的影響，從而更好地反應季度序列的特征和基本趨勢。本文采用X-11法對數(shù)據(jù)進行調整，調整后的數(shù)據(jù)標以sa，然后對調整后的數(shù)據(jù)取自然對數(shù)，以消除時間序列的異方差，從而最終變量分別為：LFERsa、LR-ERsa、LCPIsa。（二）數(shù)據(jù)平穩(wěn)性檢驗對于時間序列，需要分析數(shù)據(jù)的平穩(wěn)性,否則會出現(xiàn)偽回歸的問題，因此首先對各變量進行ADF檢驗,如檢驗發(fā)現(xiàn)是單位根序列，再對此進行ZA單位根檢驗，進一步判定是否是結構突變的趨勢穩(wěn)定序列，如果檢驗發(fā)現(xiàn)序列是平穩(wěn)序列，那么對此進行ZA單位根檢驗則純屬多余。因此，先對以上各位變量做ADF檢驗，結果如下。表1變量的ADF檢驗結果注：其中C,T,N分別表示常數(shù)項、趨勢項與滯后階數(shù)由ADF檢驗可以看出，外匯儲備、真實有效匯率、物價水平均是單位根序列，且是一階單整序列，因此為了更精確地反應數(shù)據(jù)之間的統(tǒng)計特征，以防把結構突變的平穩(wěn)序列看成是單位根序列，下面對這些變量進行ZA單位根檢驗，檢驗結果如下：表2LFERsa、LRERsa、LCPIsa的ZA單位根檢驗結果注：za檢驗在1%、5%、10%的臨界值分別為-5.34、-5.08、-4.82由表2的ZA檢驗結果可知：外匯儲備、真實有效匯率以及物價水平均是不平穩(wěn)的，且是一階單整過程，這進一步證明了上述三個變量的單位根過程。其中外匯儲備的變化時期是在2004年1月，真實有效匯率的結構變化時期是在2002年3月，這可能是因為自從2001年12月中國正式加入世貿組織以后，對外貿易環(huán)境得到了變化，進出口總額發(fā)生了很大的改變；同時，北京申奧成功也促使國內出現(xiàn)了新一輪的投資熱潮，再者，在2003年，人民幣升值預期形成，大量游資開始涌入國內，這些因素都會對匯率、外匯儲備產(chǎn)生影響。而物價水平的結構變化時期則發(fā)生在1997年1月，這可能是因為當時實行的宏觀經(jīng)濟政策所致，經(jīng)濟增速自1993年起加快，物價水平曾一躍上升到1994年的24.1%，抑制通貨膨脹是當局的首要任務，通過綜合治理，使得國民經(jīng)濟至1996年底成功實現(xiàn)軟著落，物價水平大幅度下降。（三）數(shù)據(jù)相關性檢驗1、人民幣匯率與物價水平的關系。由于LRERsa、LCPIsa、LFERsa這些變量差分后都通過了單位根檢驗，且都是一階單整變量，所以對此進行協(xié)整檢驗以考察兩者之間是否存在一種長期穩(wěn)定的關系。而由于傳統(tǒng)的協(xié)整檢驗并沒有考慮結構變化對變量間長期穩(wěn)定關系的影響，因此為了更全面地考察變量間的協(xié)整關系，我們對變量進行了考慮結構突變的GH協(xié)整檢驗，檢驗結果如表3。表3物價水平與匯率之間的GH檢驗結果注:1.ADF*、Zt*、Zα*為GH協(xié)整檢驗三個檢驗統(tǒng)計量,臨界值表參閱文獻[1];2.**分別表示在5%的顯著水平上拒絕零假設,即變量間存在該形式的協(xié)整關系。下同表3分別給出了這兩變量間三種GH檢驗備則模型的檢驗結果，發(fā)現(xiàn)，三種模型中，無論是ADF*統(tǒng)計量，還是Zt*或者Za*統(tǒng)計量均不能在10%的顯著性水平上拒絕原假設，這說明匯率與物價水平間不存在任何形式的雙變量協(xié)整關系，即匯率與物價水平間不存在長期穩(wěn)定的關系，也表明匯率并不會引起物價水平的變動，物價水平的波動也不會帶來匯率的相應變化。這與理論推導的結果不一樣，可能是因為我國現(xiàn)階段匯率仍缺乏足夠的彈性，且匯率與物價水平兩者之間的傳導機制仍沒有打通，從而導致兩者之間的互動不是很顯著。2、外匯儲備與物價水平的關系。表4物價水平與外匯儲備之間的GH協(xié)整檢驗結果由表4可知，當外匯儲備作為解釋變量，物價作為被解釋變量進行GH檢驗時，在5%的顯著水平上，C/S模型的ADF*統(tǒng)計量檢驗拒絕了其原假設，這說明物價水平與外匯儲備之間存在C/S形式的協(xié)整關系，且存在著結構突變。而當把物價作為解釋變量，外匯儲備作為被解釋變量做GH檢驗時我們發(fā)現(xiàn)兩者間不存在任何形式的協(xié)整關系。這說明這兩變量間存在單向的協(xié)整關系，外匯儲備的變動引起了物價的變動，而物價的變動并沒有影響到外匯儲備的波動。為了考察外匯儲備的具體變動是如何對物價水平產(chǎn)生影響的，下面對C/S形式的協(xié)整方程進行估計。根據(jù)C/S結構變化形態(tài)方程的形式設方程的具體形式如下：LCPIsat=γ1+γ2Dtτ+γ3LFERsat+γ4LFERsatDtτ+εtt=1.2…n…（17）其中γ1表示發(fā)生結構變化前的截距，γ2表示結構變化發(fā)生后截距的偏移，γ3表示結構變化前斜率的系數(shù)，γ4表示結構變化發(fā)生后斜率的偏移，Dtτ表示發(fā)生結構變化的虛擬變量，參數(shù)τ為結構突變點在時間序列中的相對位置，由表5可知τ=0.211268，而本文的樣本容量為213個，因此結構變化發(fā)生的時間點為1997年9月，虛擬變量Dtτ取值如下：Dtτ=1t≤1997.90t>1997.≤9因此，利用eviews對這一模型各變量的系數(shù)進行估計，結果如下：LCPIsa=5.641-1.144D-0.139LFERsa+0.154LFER-sa.D（18）(119.49)(-23.23)(-19.29)(20.78)其中括號內的數(shù)值表示t統(tǒng)計量，回歸結果表明，在1997年9月以前協(xié)整方程還未出現(xiàn)結構變化，物價對外匯儲備的彈性為-0.139，外匯儲備與國內物價水平之間是負相關的關系，外匯儲備每增加1%，不僅不會使物價上漲，反而會促使物價降低0.139%。這與理論推導兩者之間同向關系的結論相悖，可能因為，一方面是1997年7月源于泰國的亞洲金融危機中，中國堅持人民幣匯率穩(wěn)定，不貶值，對進出口貿易和引進外資都受到了沖擊，外匯儲備也由前幾年的快速增加，變?yōu)橄陆?；另一方面，中國前一段時間實行的宏觀經(jīng)濟政策也對物價的下降起著至關重要的作用。然而在1997年9月發(fā)生結構突變后，這一突變使得協(xié)整變量間的關系發(fā)生了顯著的變化，物價對外匯儲備的彈性開始由負向的-0.139變?yōu)檎?.015（-0.139+0.154）。這一結論支持了理論推導的結果，但盡管外匯儲備對物價的影響為正，作用仍不是很明顯，1%的外匯儲備增加，物價將上升0.015%，究其原因可能是央行采取了沖銷政策，央行會通過提高存款準備金率、發(fā)行央行票據(jù)、公開市場操作或者綜合使用這幾種工具去沖銷過多的基礎貨幣回收過多的流動性，這也說明央行采取的沖銷政策在現(xiàn)階段是有效可行的。3、人民幣匯率、外匯儲備與物價水平的關系。以上分別將匯率、外匯儲備與物價水平之間的長期關系進行了分析發(fā)現(xiàn)，匯率與物價之間并不存在長期穩(wěn)定的關系，而外匯儲備對物價水平在長期內則存在單向的穩(wěn)定關系。下面將匯率引入外匯儲備對物價影響的模型，進一步考察兩者共同對物價水平的影響效果，以考察三者間的長期穩(wěn)定關系。三者GH檢驗的結果如下：表5匯率、外匯儲備與物價水平之間的GH協(xié)整檢驗結果由表5可知，當將外匯儲備、匯率共同作為解釋變量時，GH檢驗表明外匯儲備、匯率與物價水平三者之間不能存在任何形式的協(xié)整關系。這表明匯率與外匯儲備、物價均不存在長期的穩(wěn)定關系，且匯率的引入使得外匯儲備與物價水平之間的長期穩(wěn)定關系消失，這說明匯率的引入使得外匯儲備與物價之間的關系變得更加復雜化。

慢性中性粒細胞白血?。╟hronicneutrophilleukemia，CNL）是一種極為少見的BCR－ABL陰性骨髓增殖性腫瘤（myeloproliferativeneoplasms，MPN），其特征是持續(xù)地外周血成熟中性粒細胞明顯增多、骨髓粒系增生和肝脾腫大，無髓系細胞發(fā)育異常形態(tài)改變和BCR－ABL1、PDGFRA、PDG－FRB、FGFR1重排。以往由于缺乏特定的分子標志，本病的明確診斷很大程度上取決于仔細地鑒別反應性粒細胞增多和表現(xiàn)相近的其他髓系腫瘤，基本屬于排除性診斷。隨著2013年發(fā)現(xiàn)大多數(shù)患者具有集落刺激因子3受體基因（CSF3R）突變［1］，并經(jīng)嚴格定義的CNL中驗證，確認其為CNL發(fā)病分子基礎，2016年WHO淋巴與造血組織腫瘤分類中納入CSF3R突變作為CNL診斷主要指標［2］，使得CNL不再是排除性的診斷，而成為一種形態(tài)學和分子遺傳學定義的髓系腫瘤?，F(xiàn)就CNL分子診斷研究進展介紹如下。

1CSFR

CSF3R基因定位于染色體1p34．3，含有17個外顯子，編碼813個氨基酸的集落刺激因子跨膜受體，為粒細胞提供增殖和生存信號，并有助于其分化和功能。CSF3R是一單鏈細胞表面受體，屬于細胞因子受體Ⅰ型超家族，其胞質部分包括有不同的功能區(qū)，即近膜區(qū)域有絲分裂信號傳導，行使增殖功能；遠端區(qū)域羧基末端與成熟信號傳導有關，行使分化和增殖調節(jié)功能［3］。CSF3R與其配體G－CSF結合后，通過經(jīng)典的下游途徑，包括JAK－STAT，SRC家族激酶（尤其是LYN），非受體酪氨酸激酶SYK、Ras／Raf／MAP激酶和PI3K／Akt通路發(fā)揮作用，誘導中性粒細胞分化、增殖、存活，并刺激中性粒細胞功能。研究證明CSF3和CSF3R在粒細胞生成過程起著非常重要作用，小鼠缺乏CSF和CSF3R基因缺陷可表現(xiàn)嚴重的粒細胞缺乏。在嚴重先天性粒細胞缺乏患者，除了明確的遺傳性致病基因（如ELANE或HAX1）突變外，有報道40％可伴有獲得性造血干細胞CSF3R胞質遠端羧基末端過早截斷的基因無義突變，通過與其它癌基因共同作用延長細胞生存，增加克隆優(yōu)勢，被認為與高急性白血病轉化相關［4－5］。另外，CSF3R基因胚系突變尚可導致顯性遺傳的先天性中性粒細胞增多或家族性慢性中性粒細胞白血?。?－7］，偶爾在急性髓系白血病也報道檢出這種類似突變。

2CSF3R突變與CNL診斷

為了查找潛在的分子發(fā)病原因，2013年Max－son等［1］采用原代細胞深度測序結合酪氨酸激酶特異的小干擾RNA或小分子激酶抑制劑作用的方法，對傳統(tǒng)臨床診斷的CNL和不典型慢性髓系白血?。╝CML）進行研究，27例患者中16例（59％）檢出CSF3R突變，其中9例CNL患者中8例（89％）檢出CSF3R突變，均涉及位于外顯子14的胞外近膜結構域點突變，7例（78％）為CSF3RT618I突變，1例為CSF3RT615A突變。這些近膜結構域點突變單獨發(fā)生更為多見，少部分與另一類導致CSF3R胞質尾部過早截斷的移碼突變或無義突變共同存在，形成復合突變。胞外近膜結構域點突變和胞質尾部過早截斷突變兩種類型突變分別通過下游JAK－STAT通路和SRC酪氨酸激酶通路介導，均具有體外轉化能力，并相應地對激酶抑制劑蘆可替尼和達沙替尼呈現(xiàn)不同敏感性。以CSF3RT618I表達的造血細胞進行移植，小鼠發(fā)生致死性的MPN，表現(xiàn)為突出的成熟粒細胞增多、骨髓明顯活躍和肝脾成熟粒細胞浸潤［8］。Pardanani等［9］在按照嚴格WHO標準診斷的12例CNL患者中更是100％檢出CSF3R基因突變，10例為CSF3RT618I突變；而aCML、漿細胞病相關CNL、原發(fā)性骨髓纖維化癥（PMF）和慢性粒－單細胞白血病（CMML）患者無一例檢出該突變。這些均表明CSF3R突變在CNL非常常見，是CNL一致性的生物學特征；CSF3RT618I是CNL敏感而特異的分子標志，應納入CNL診斷標準。2016年修訂的WHOCNL診斷標準將CSF3RT618I和其他激活突變納入診斷［2］，即：①外周血白細胞計數(shù)≥25×109／L，分葉核＋帶狀核中性粒細胞≥80％，前體中性粒細胞（早幼、中幼和晚幼粒細胞）＜10％，原粒細胞少見，單核細胞＜1×109／L，無粒系形態(tài)發(fā)育異常；②骨髓增生活躍，中性粒細胞比例及數(shù)量增多，中性粒細胞形態(tài)正常，原粒細胞占有核細胞比例＜5％；③不符合WHO定義的BCR－ABL1陽性慢性粒細胞白血?。–ML）、真性紅細胞增多癥（PV）、原發(fā)性血小板增多癥（ET），或原發(fā)性骨髓纖維化（PMF）；④無PDGFRA、PDGFRB或FGFR1基因重排，無PCM1－JAK2融合基因；⑤CSF3RT618I或其他活化CSF3R基因突變，或持續(xù)性（≥3個月）的中性粒細胞增多、脾腫大，且沒有可識別原因的反應性中性粒細胞增多，包括無漿細胞腫瘤，或者如果存在漿細胞病，須有髓系細胞細胞遺傳學或分子學研究證實的克隆性證據(jù)。

3繼發(fā)性或反應性粒細胞增多的排除更為方便

摘要:進入21世紀以來，生物工程技術突飛猛進，蛋白質工程技術是生物工程技術的一個重要組成方面。目前，人們已經(jīng)可以利用蛋白質工程技術在基因水平上對DNA進行設計、重組，通過轉錄、翻譯等過程合成自然界中不存在的蛋白質。這一技術目前被廣泛地應用于生物藥物的研發(fā)當中，本文將簡要對生物藥物研發(fā)中的蛋白質工程技術進行額分析。

關鍵詞:生物藥物研發(fā);蛋白質工程;技術應用

生物工程技術自從上世紀70年代興起以來，已經(jīng)發(fā)展了將近50年的時間。到了21世紀，生物工程技術特別是其中的蛋白質工程技術的迅猛發(fā)展，正推動這生命科學的不斷進步。利用蛋白質工程技術，我們可以對分子進行設計，對DNA進行重組，以生產(chǎn)我們需要的但自然界中不存在的蛋白質。蛋白質工程技術已經(jīng)成為生物藥物生產(chǎn)中不可或缺的一個重要的組成部分。

一、生物藥物

生物藥物是綜合了生物學、生物化學以及醫(yī)學的極高融合度的產(chǎn)物，生物藥物的生產(chǎn)主要是在生物體內，利用生物體的組織細胞和體液等進行。生物藥物的種類繁多，按照藥物的功能大致可分為治療藥物、預防藥物和診斷疫苗。由于生物藥物大多產(chǎn)自于生物體內，因此生物藥物具有普通藥物不具備的優(yōu)越的藥理學性質，生物藥物的藥理活性比普通藥物更高;治療腫瘤、艾滋病等的治療藥物其比普通藥物的針對性更高，毒副作用小，會減少藥物對于體內正常細胞的損傷。除了應用于醫(yī)療行業(yè)，生物藥物還被廣泛應用于保健品行業(yè)和化妝品領域，具有較為廣泛的應用領域。根據(jù)上述的分析，生物藥物具有十分廣泛的應用，在國內國外也擁有著廣闊的市場。但是由于我國的生物藥物行業(yè)起步較晚，生物藥物的制造生產(chǎn)相對歐美等發(fā)達國家較為落后，但由于市場的刺激，我國的生物藥物行業(yè)發(fā)展十分迅速，生物藥物的制造技術和水平得到了大幅度的提高。

二、蛋白質工程技術在生物藥物研發(fā)中的優(yōu)勢