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篇1

[關(guān)鍵詞] 病毒滅活血漿；新鮮冰凍血漿；血漿置換；效果

[中圖分類號] R457.1+4 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2013）05（b）-0062-02

亞甲藍(lán)光化學(xué)（MB）法滅活血漿中的病毒是一種最安全、有效的適合于臨床用單袋血漿病毒滅活的方法，其滅活效果已被大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)[1-2]，輸注病毒滅活血漿成為當(dāng)前國內(nèi)外預(yù)防輸注血漿制品傳播傳染病的有效措施，MB法病毒滅活血漿技術(shù)，已被推廣應(yīng)用于全國部分血站。對于MB法病毒滅活血漿后，對于血漿內(nèi)有效成分的影響國內(nèi)各家血站報(bào)道不一，但是都一致顯示MB法病毒滅活后的血漿有效成分有所改變[3-4]。但是這些或多或少的改變是否影響臨床應(yīng)用效果，尤其是在血漿置換中大量應(yīng)用血漿時是否有影響，國內(nèi)目前尚無報(bào)道。筆者對此情況進(jìn)行了研究，具體如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

2012年1～6月隨機(jī)采用庫存新鮮冰凍血漿。無償獻(xiàn)血者的血液（400 mL/袋），于采集后6 h內(nèi)分離制備的新鮮血漿（5000 g/min，10 min，4℃），按照操作規(guī)程制備成新鮮冰凍血漿（200 mL/袋）。在凈化間將血漿與一次性病毒滅活輸血過濾器相連。向血漿中加入亞甲藍(lán)，混勻后使亞甲藍(lán)的濃度為1 μg/mL，并在31800LX強(qiáng)度的光照下4℃搖動照射30 min，然后把經(jīng)光照后的血漿通過一次性血漿滅活血袋的濾器濾除亞甲藍(lán)，制備成病毒滅活血漿。

同期選擇在洛陽市所進(jìn)行的血漿置換患者26例，其中重癥肝病患者19例，有機(jī)磷農(nóng)藥中毒7例，患者年齡在15～50歲，中位年齡31歲，其中，男性17例，女性9例，以上病例在血漿置換中12例置換液采用新鮮冰凍血漿，采用病毒滅活血漿14例。

1.2 方法

光照病毒滅活：（1）采用中?？滇t(yī)療器具有限公司生產(chǎn)的ZBK-YBM-01型醫(yī)用血槳病毒滅活柜，操作按說明書；（2）采用上海輸血技術(shù)有限公司生產(chǎn)的HDME-1醫(yī)用血漿病毒滅活柜，操作按說明書。

血漿置換法：采用美國血液技術(shù)公司生產(chǎn)的MCS+型血細(xì)胞分離機(jī)，選擇血漿置換程序及TPE規(guī)程卡、980E耗材，置換液采用新鮮冰凍血漿或病毒滅活血漿。

主要儀器：SORVAL 3BP離心機(jī)（美國Thermo 公司），ZBK-YBM-01型醫(yī)用血漿病毒滅活柜及耗材（淄博中?？滇t(yī)療器具有限公司），MCS+型血細(xì)胞分離機(jī)及耗材（美國血液技術(shù)公司生產(chǎn)），奧林巴斯全自動生化分析儀。

1.3 觀察指標(biāo)

血漿凝血因子活性側(cè)定：應(yīng)用國際通用的一期法檢測血漿。血漿清蛋白測定： 用雙縮脈法檢測血漿總蛋白。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

應(yīng)用SPSS 12.0分析軟件，分析應(yīng)用新鮮冰凍血漿和病毒滅活血漿血漿置換兩組間的凝血時間、血漿蛋白比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 不同血漿置換前后患者凝血因子比較

應(yīng)用新鮮冰凍血漿、病毒滅活血漿進(jìn)行血漿置換治療后，凝血因子結(jié)果見表1。結(jié)果顯示應(yīng)用病毒滅活血漿組治療后患者PT、APTT與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。

2.2 不同血漿置換前后患者血漿蛋白比較

應(yīng)用新鮮冰凍血漿、病毒滅活血漿血漿置換治療后，血漿蛋白結(jié)果表2。結(jié)果顯示兩組治療前后清蛋白檢測差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意（P > 0.05）。

3 討論

血漿是可發(fā)生經(jīng)輸血傳播疾病的主要血液成分之一，近幾年的用量持續(xù)增加，因此在保證血漿臨床輸用安全的同時，提高血漿質(zhì)量和應(yīng)用效果是非常重要的。病毒滅活作為一種降低輸血風(fēng)險(xiǎn)的新技術(shù)，除應(yīng)能有效地滅活血液成分中可能存在的病毒外，更重要的是對血液成分的功能應(yīng)無顯著性影響，保證血液成分的足夠療效。MB光化學(xué)法是近年發(fā)展起來的新技術(shù)[5-6]。光化學(xué)法滅活病毒的機(jī)制主要是依靠光敏劑在光照射下，產(chǎn)生自由基（一類機(jī)制）或單線態(tài)氧（二類機(jī)制）氧化損傷病毒的分子結(jié)構(gòu)，從而殺滅病毒，由于目前全國各地血站供臨床使用的血漿均為單人份血漿，其可能內(nèi)含的脂質(zhì)包膜病毒，對人體健康有危害，為了克服此危害，必須對脂質(zhì)包膜病毒滅活。大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明，用亞甲藍(lán)光化學(xué)處理血漿可完全滅活血漿內(nèi)所含的VSV和Sindbis病毒（這2種病毒是國內(nèi)外公認(rèn)的血液制品病毒滅活有效性的指示病毒，其中VSV是HIV的模型病毒，Sindbis是HCV的模型病毒，均為RNA脂質(zhì)包膜病毒），病毒滴度明顯下降。同時保證血漿主要凝血因子（Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ）的回收率>80%，白、球蛋白的回收率>90%。血漿蛋白的免疫原性無變化，總蛋白損失輕微[7]。

血漿置換因患者病情需幾乎置換出患者體內(nèi)原有血漿，本研究旨在研究大量應(yīng)用病毒滅活冰凍血漿后患者體內(nèi)的凝血狀態(tài)以及血清蛋白的變化。研究結(jié)果表明，大量的新鮮冰凍血漿應(yīng)用后患者體內(nèi)的凝血狀態(tài)以及血清蛋白均無明顯變化，但是病毒滅活冰凍血漿應(yīng)用后，患者體內(nèi)凝PT、APTT均有所延長，但是延長均在正常范圍內(nèi)，說明病毒滅活冰凍血漿應(yīng)用量較大時可以影響患者體內(nèi)凝血。凝血因子絕大多數(shù)在肝臟合成，肝實(shí)質(zhì)損傷可導(dǎo)致凝血因子的合成減少，表現(xiàn)為凝血酶原（PT）延長，患者有出血傾向。因此肝病患者在血漿置換過程中，推薦使用新鮮冰凍血漿（FFP）做置換液，臨床效果更佳。筆者在多例臨床血漿置換術(shù)應(yīng)用當(dāng)中，根據(jù)不同患者、不同病情使用不同血漿（新鮮冰凍血漿、病毒滅活血漿），均獲得良好療效。

有研究表明雖然過濾前后FⅧ和FⅨ因子活性幾乎無改變，但是對因子影響最大的是滅活過程[8]。經(jīng)過MB光化學(xué)法對血漿進(jìn)行病毒滅活處理后，血漿中的FⅨ因子滅活前后變化不大，F(xiàn)Ⅷ因子水平下降，但活性水平仍大于75%，仍在國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)允許范圍內(nèi)，雖然對因子有一定的損傷作用，但結(jié)合其滅活性能，MB光化學(xué)病毒滅活工藝對單人份血漿的病毒滅活還是一種比較有效的方法，其對臨床輸血安全性具有重要意義。臨床在應(yīng)用病毒滅活血漿時，可以適當(dāng)增加用量，保證治療效果，如將原來10～15 mL/kg的應(yīng)用劑量增加25%用量，提高至13～19 mL/kg[2]。

要從根本上控制和杜絕血源性的傳染病，除加強(qiáng)篩查以外，還必須對血液進(jìn)行滅活病毒處理，才能達(dá)到輸血安全的目的。血液成分的病毒滅活是實(shí)現(xiàn)安全輸血的唯一途徑。尤其在進(jìn)行血漿置換術(shù)中，大量應(yīng)用血漿制品時，病毒滅活血漿安全性仍較高。

[參考文獻(xiàn)]

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篇2

關(guān)鍵詞：獸用疫苗 滅活 工藝 設(shè)備選型計(jì)算

中圖分類號：S852 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）04（b）-0225-01

1 滅活苗簡述

疫苗：凡是具有良好免疫原性的病原微生物，經(jīng)繁殖和處理后制成的制品，用以接種動物能產(chǎn)生相應(yīng)的免疫力者。除一般活菌（毒）疫苗、滅活疫苗外，還包括類毒素、類毒素與菌體混合疫苗、亞單位組份苗、基因缺失疫苗、活載體疫苗、人工合成疫苗、抗獨(dú)特型抗體疫苗等。

滅活疫苗：用物理方法或化學(xué)方法將其滅活后制成的疫苗。

2 各種動物疫苗工藝流程示例

（1）滅活苗生產(chǎn)工藝過程簡述

滅活雞胚苗：采用國內(nèi)成熟的雞胚培養(yǎng)病毒的技術(shù)。將種毒接種于9～11日齡非免疫雞胚，接種后的雞胚放在孵化箱中繼續(xù)孵化，棄去接種后24 h內(nèi)死亡的雞胚，培養(yǎng)好的雞胚取出，放在2～8 ℃冷庫中冷藏，之后收獲雞胚尿囊液等。收獲的雞胚尿囊液等加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的雞胚尿囊液等置2～8 ℃冷庫冷藏備用。

（2）滅活細(xì)胞苗：將配制好的細(xì)胞培養(yǎng)液加入轉(zhuǎn)瓶，將轉(zhuǎn)瓶置于溫室中培養(yǎng)，待轉(zhuǎn)瓶內(nèi)長成單層細(xì)胞后，將毒種接種入轉(zhuǎn)瓶中，之后在溫室中繼續(xù)培養(yǎng)，收獲病毒原液。收獲的病毒原液加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的病毒原液置2～8 ℃冷庫冷藏備用。

（3）滅活細(xì)菌苗：采用發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)細(xì)菌和固體培養(yǎng)細(xì)菌兩種技術(shù)。將菌種接種于培養(yǎng)液中，經(jīng)發(fā)酵罐培養(yǎng)或接種在瓊脂平板上培養(yǎng)，收獲菌液（苔）。收獲的細(xì)菌加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的菌液置2～8 ℃冷庫或儲液罐中冷藏備用。

（4）乳化配滅活苗：在乳化罐中加入佐劑，滅菌冷卻后，按配比加入從冷庫中取出的抗原液，經(jīng)乳化后分裝入疫苗瓶，分裝后的產(chǎn)品待檢驗(yàn)合格后，包裝入庫。

3 滅活疫苗工藝設(shè)備計(jì)算示例

滅活疫苗車間的計(jì)算

A.前孵化箱計(jì)算

根據(jù)生產(chǎn)大綱，若年產(chǎn)雞胚滅活疫苗10000萬mL，疫苗水相與油相的配比為25%：75%，折合水相（病毒原液）2500萬mL。

每枚非免疫雞胚可生產(chǎn)病毒原液10 mL，雞胚前孵化成功率為90%，后孵化成功率為90%，疫苗分裝成品率為90%，則年需雞胚量為：

2500萬mL/年÷10mL/胚÷90%÷90%÷90%≈342.9萬胚/年

雞胚前孵化10天計(jì)，每年生產(chǎn)日數(shù)為300天，則全年可孵化30批。

每批需孵化雞胚

342.9萬胚/年÷30批/年≈11.4萬胚/批

前孵化采用6臺19200蛋位的孵化箱可滿足生產(chǎn)的需要。

B.后孵化箱計(jì)算

本項(xiàng)目雞胚接毒后采用孵化箱繼續(xù)孵化，年孵化量為

2500萬mL/年÷10mL/胚÷90%÷90%≈308.6萬胚/年

雞胚后孵化時間以3天計(jì)，每年生產(chǎn)日數(shù)為300天，則全年可孵化100批。

每批需孵化雞胚

308.6萬胚/年÷100批/年≈3.09萬胚/批

本項(xiàng)目配置3臺19200蛋位的孵化箱作為后孵化箱，可以滿足生產(chǎn)的需要。

C.轉(zhuǎn)瓶機(jī)計(jì)算

年產(chǎn)細(xì)胞滅活苗2000萬ml，

滅活苗水相（病毒原液）：油相=25%：75%

則年需病毒原液

2000萬ml/年×25%=500萬ml/年

采用容積為3000ml的轉(zhuǎn)瓶，轉(zhuǎn)瓶的裝量為轉(zhuǎn)瓶容積的10%，即300ml/轉(zhuǎn)瓶，細(xì)胞培養(yǎng)的成功率為90%，病毒培養(yǎng)的收獲率為90%，疫苗分裝成品率為90%。

全年需培養(yǎng)細(xì)胞：

500萬mL/年÷90%÷90%÷90%≈685.9萬mL/年

細(xì)胞培養(yǎng)的時間為4天，全年生產(chǎn)日數(shù)為300天每批需培養(yǎng)細(xì)胞：

685.9萬mL/年÷75批/年÷300mL/轉(zhuǎn)瓶≈305轉(zhuǎn)瓶/批

需配置3000mL、40瓶位轉(zhuǎn)瓶機(jī)

305轉(zhuǎn)瓶/批÷40瓶/臺≈8臺

全年需培養(yǎng)病毒：

500萬mL/年÷90%÷90%≈617.3萬mL/年

病毒培養(yǎng)時間為2天，全年生產(chǎn)日數(shù)為300天，每批需培養(yǎng)病毒：

617.3萬mL/年÷150批/年÷300mL/轉(zhuǎn)瓶≈137轉(zhuǎn)瓶/批

需配置3000mL、40瓶位轉(zhuǎn)瓶機(jī)

137轉(zhuǎn)瓶/批÷40瓶/臺≈4臺

D.發(fā)酵罐計(jì)算

根據(jù)生產(chǎn)大綱，年產(chǎn)細(xì)菌滅活疫苗650萬mL，滅活苗水相（細(xì)菌原液）：油相=25%：75%

則年需細(xì)菌原液

650萬mL/年×25%=162.5萬mL/年

年工作日按300天計(jì)，細(xì)菌液每5天可培養(yǎng)一批，全年可培養(yǎng)60批，每批需培養(yǎng)細(xì)菌原液（細(xì)菌培養(yǎng)的成功率為90%，細(xì)菌液的收獲率為90%，疫苗分裝成品率為90%。）

162.5萬mL/年÷60批/年÷90%÷ 90%÷90%≈3.7萬mL/批

細(xì)菌發(fā)酵罐裝量為罐容積的70%，則發(fā)酵罐的容積為：

3.7萬mL÷70%≈5.3萬mL=53L

故配置100L發(fā)酵罐一套，可滿足生產(chǎn)的要求，并預(yù)留一定的生產(chǎn)能力以滿足擴(kuò)產(chǎn)的需要。

E.乳化分裝工序設(shè)備計(jì)算

根據(jù)生產(chǎn)大綱，滅活疫苗年產(chǎn)量為12650萬mL，共分為120批進(jìn)行配苗乳化，則每批需配苗

12650萬mL/年÷120批/年≈100萬mL/批

配置一套1500L的乳化設(shè)備（含油佐劑制備罐1臺，乳化罐1臺，儲液罐1臺，高壓勻漿泵1臺），可滿足生產(chǎn)的需要。

液體灌裝機(jī)：

每批疫苗需分裝的瓶數(shù)為

100萬mL/批÷100mL/瓶=10000瓶/批（以100mL/瓶計(jì)）

選用2臺ZD-Ⅱ型全自動液體灌裝機(jī)，該機(jī)灌裝速度為60瓶/min，每小時可灌裝3600瓶，2 h可完成全部灌裝量，滿足生產(chǎn)的需要。

軋蓋機(jī)、貼簽機(jī)、熱風(fēng)循環(huán)烘箱、脈動真空蒸汽滅菌器、細(xì)胞瓶洗瓶機(jī)等設(shè)備按生產(chǎn)能力配套設(shè)置。

參考文獻(xiàn)

[1] 中國獸藥典委員會.中國獸藥典[M].中國農(nóng)業(yè)出版社，2010.

篇3

【關(guān)鍵詞】 改良疣體包埋術(shù)；疣體滅活劑；扁平疣；臨床療效

扁平疣是臨床上常見且難治愈的皮膚病之一， 目前臨床治療扁平疣的方法很多， 如：口服烏羅托品、氧化鎂， 聚肌胞肌內(nèi)注射， 局部1%噴昔洛韋霜外用， 激光、冷凍治療等， 但療效均不十分顯著[1， 2]。本科2012年10月～2013年10月應(yīng)用改良自身疣體皮下埋植結(jié)合自制疣體滅活劑肌內(nèi)注射治療難治性扁平疣53例取得很好療效?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2012年10月～2013年10月收治的103例難治性扁平疣患者， 年齡18～60歲， 病程1～10年， 皮疹分布以面部、頸部、四肢為主。經(jīng)過口服、肌內(nèi)注射抗病毒藥物治療、口服中藥治療效果不佳， 治療時間≥6個月。將患者隨機(jī)分為對照組（50例）與治療組（53例）。治療組年齡20～60歲， 平均年齡（35.00±8.22）歲；對照組年齡20～60歲， 平均年齡（35.02±8.32）歲；兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 治療方法

1. 2. 1 兩組相同的治療方法 改良型疣體包埋術(shù)， 具體操作方法如下：取生長部位相對隱蔽的疣體2個， 消毒、鋪巾， 用手術(shù)刀沿疣體取至基底層， 取新鮮疣體后壓迫止血， 修剪疣體表面角質(zhì)層， 將疣體剪成直徑約0.4 mm碎片， 選取患者前臂中段伸側(cè)， 消毒， 由自制針式推進(jìn)器（由9號注射器針頭和針芯組成， 針芯為針灸針0.6 mm型毫針剪去尖端、磨平， 長度與9號注射器針頭長度相同， 其外徑與9號注射器針管內(nèi)徑相仿）。取無菌9號注射器針頭1枚， 眼科鑷夾取疣體顆粒從針管尖端塞入約填入半針管， 接口端置入針芯半截。轉(zhuǎn)入前臂上1/3屈側(cè)區(qū)， 消毒， 針頭斜面向上和皮膚呈30～40°， 左手捏起患者皮膚， 右手持已填充疣體顆粒的針頭從捏住皮膚一側(cè)進(jìn)針， 深度約0.5～1.0 cm， 左手松開， 輕撥動針頭尾部推進(jìn)疣體顆粒， 邊固定針芯邊退針， 術(shù)畢， 創(chuàng)可貼覆蓋創(chuàng)口[3， 4]。

1. 2. 2 兩組不同的治療方法 治療組采用改良疣體包埋術(shù)聯(lián)合疣體滅活劑肌內(nèi)注射治療。術(shù)后1周肌內(nèi)注射疣體滅活劑。疣體滅活劑具體制作方法如下：取另一個切除下來的疣體， 給予生理鹽水清洗、紫外線消殺、95%酒精固定， 次日液氮冷凍滅活疣體， 疣體研磨后， 再次給予紫外線消殺， 培養(yǎng)基接種排除雜菌生長， 2 ml生理鹽水稀釋， 疣體滅活劑制作完成， 存于4℃冰箱冷藏備用[5， 6]。于前臂三角肌肌內(nèi)注射1 ml。術(shù)后2周同上法再次肌內(nèi)注射剩余1 ml疣體滅活劑。1個療程結(jié)束， 3個月觀察療效并隨訪。對照組采用改良疣體包埋術(shù)結(jié)合隔日肌內(nèi)注射注射用胸腺五肽針（深圳翰宇藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)， 10 mg/支） 10 mg/次， 2個月為1個療程。

1. 3 療效判定標(biāo)準(zhǔn) 痊愈：皮損全部消退， 隨訪期間無復(fù)發(fā)；顯效：皮損消退≥70%或疣體明顯萎縮；進(jìn)步：皮損消退≥40%；無效：皮損消退

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS14.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P

2 結(jié)果

治療組的痊愈率和有效率優(yōu)于對照組（P

3 討論

扁平疣其發(fā)病跟患者的細(xì)胞免疫關(guān)系密切， 改良型疣體包埋術(shù)是一種微創(chuàng)形式的刺激機(jī)體產(chǎn)生主動免疫的方法[7]。包埋的疣體相當(dāng)于微毒株的自體生物制劑[8-10]。疣體滅活劑是將該自體微毒株給予化學(xué)滅活， 但仍保留其免疫原性。因其是自身疣體包埋更易刺激機(jī)體而獲得強(qiáng)而持久的免疫力。注射用胸腺五肽， 是臨床常用的免疫調(diào)節(jié)劑， 可調(diào)節(jié)和增強(qiáng)人體細(xì)胞免疫功能， 臨床治療扁平疣取得很好療效。治療組的有效率為96.23%明顯高于對照組的82.00%（P

綜上所述， 疣體包埋術(shù)聯(lián)合疣體滅活劑治療較疣體包埋術(shù)聯(lián)合注射用胸腺五肽針對難治性扁平疣有較高的痊愈率和有效率， 值得臨床推廣。

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篇4

關(guān)鍵詞 家蠶；病原體；過碳酸鈉；消毒；效果

中圖分類號 S884.1+1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-5739（2017）02-0240-01

現(xiàn)在蠶業(yè)生產(chǎn)上多用醛制劑[1-2]、氯制劑[3-6]對家蠶的病原體進(jìn)行消毒，醛制劑和氯制劑對環(huán)境有影響，需要研究新的消毒劑進(jìn)行替代以減少對環(huán)境的污染。過碳酸鈉，又稱過氧碳酸鈉，分子式為2Na2CO3?3H2O2，是碳酸鈉和過氧化氫的加成復(fù)合物，過碳酸鈉具有無毒、無臭、無污染等優(yōu)點(diǎn)，遇水釋放出H2O2，具有漂白、殺菌等效果[7-10]。本文通過用不同濃度的過碳酸鈉水溶液與病原體混合的方法，研究了過碳酸鈉對幾種家蠶主要病原體的消毒效果。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試家蠶品種。供試家蠶品種為山東廣通蠶種集團(tuán)有限公司提供的菁松×皓月。蠶卵正常環(huán)境下催青孵化，幼蟲在溫度為24～28 ℃、相對濕度為70%的環(huán)境條件下飼喂桑葉。

1.1.2 供試藥品。供試藥品為過碳酸鈉，活性氧含量≥13.5%，由國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號為20150828。

1.1.3 供試病原。供試病原均由山東省蠶業(yè)研究所蠶病研究室保存。家蠶病原白僵菌（Beauveria bassiana）從5齡幼蟲接種白僵菌后發(fā)病死亡的蠶體中分離所得；黃曲霉（Asper-gillus flavus）從5齡幼蟲接種黃曲霉菌后l病死亡的蠶體中分離所得。對家蠶病原白僵菌、黃曲霉2種病原真菌取分生孢子加一定量的吐溫-80，使其于滅菌蒸餾水中處于懸浮狀態(tài)，使用2層紗布進(jìn)行過濾，稀釋至1.0億個/mL置冰箱中于4 ℃環(huán)境溫度下保存?zhèn)溆?，保存時間為30 d以內(nèi)。家蠶核型多角體病毒（BmNPV）多角體通過家蠶繼代制取，病毒多角體精制后配成0.5億個/mL的病毒多角體懸液，并置于4 ℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 對核型多角體病毒（BmNPV）的消毒效果試驗(yàn)

將0.5億個/mL的BmNPV病毒多角體懸液200 μL分別與質(zhì)量濃度為50.0、25.0、12.5 mg/mL的過碳酸鈉藥液200 μL混合，30 min后涂于桑葉正反面，給蟻蠶添食24 h，飼養(yǎng)2個齡期后調(diào)查滅活率。以自來水替代藥液處理為毒對照。

1.3 對白僵菌、曲霉菌的消毒效果試驗(yàn)

將配制的1.0億個/mL白僵菌、曲霉菌的孢子懸液分別與質(zhì)量濃度為20.0、10.0、5.0、2.5、1.3 mg/mL的過碳酸鈉藥液各200 μL等量混合30 min，曲霉菌處理組涂于蟻蠶體表、白僵菌處理組涂于2齡起蠶體表，保濕飼育24 h，2個齡期后進(jìn)行滅活率調(diào)查。以自來水替代過碳酸鈉藥液處理為毒對照。

2 結(jié)果與分析

2.1 對核型多角體病毒（BmNPV）的消毒效果

不同濃度過碳酸鈉溶液對核型多角體病毒（BmNPV）的消毒效果見表1。從表中看出，過碳酸鈉對多角體病毒的消毒能力較差，當(dāng)濃度達(dá)到25.0 g/L時，對核型多角體病毒（BmNPV）的滅活率只有12.0%，當(dāng)濃度繼續(xù)增大到50.0 g/L時，對桑葉造成損害，已無消毒意義。

2.2 對白僵菌、曲霉菌的消毒效果

不同濃度的過碳酸鈉溶液對白僵菌、曲霉菌的消毒效果見表2。從表中看出，過碳酸鈉對白僵菌的消毒能力隨濃度的降低下降明顯，而對曲霉菌的消毒能力則下降較慢；當(dāng)濃度為20.0 g/L時，對白僵菌的消毒效果強(qiáng)于對曲霉菌的消毒效果，對白僵菌的滅活率達(dá)到100.0%，對曲霉菌的滅活率為84.8%，當(dāng)濃度降低到到1.3 g/L時，對白僵菌的滅活率已為0，對曲霉菌的滅活率仍有19.0%。

3 結(jié)論

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果可知，過碳酸鈉對家蠶核型多角體病毒（BmNPV）的消毒能力差，對白僵菌、曲霉菌有一定的消毒效果。雖然過碳酸鈉有無毒、無臭、無污染，可殺滅大腸桿菌、葡萄球菌、肝炎病毒等常見病菌等優(yōu)點(diǎn)，但由于對家蠶的幾種病原菌消毒效果不理想，所以以過碳酸鈉作為單獨(dú)成分的消毒劑在蠶業(yè)生產(chǎn)方面應(yīng)用效果不佳，需配合其他藥劑來使用。

4 參考文獻(xiàn)

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篇5

一、生化藥物的制備方法

生化制藥就是將動物、植物或微生物機(jī)體內(nèi)的生物活性物質(zhì)在其結(jié)構(gòu)和功能不遭破壞的前提下，采用多種生化分離的方法提取、純化的工藝過程。 ？？生化制藥的六個階段：原料的選擇和預(yù)處理；組織及細(xì)胞的破碎；從破碎的細(xì)胞中提取有效成分制成粗品；采用多種生化技術(shù)從粗品中將目的物精制出來；干燥及保存；制劑。以上各階段在不同的生化藥物制備中，根據(jù)所選材料的不同，可靈活取舍選擇使用

生化藥物的分離純化方法主要有五類：根據(jù)分子大小和形狀不同進(jìn)行分離，如凝膠過濾法、透析和超濾法、密度梯度離心法等；根據(jù)分子的帶電性質(zhì)進(jìn)行分離，如離子交換層析法、電泳法、等電聚焦法；根據(jù)分子極性大小及溶解度不同進(jìn)行分離，如等電點(diǎn)沉淀法、鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、逆流分配法等；根據(jù)配體特異性進(jìn)行分離，如親和層析法；根據(jù)物質(zhì)吸附性質(zhì)不同進(jìn)行分離，如選擇性吸附和吸附層析法。

二、生化藥物質(zhì)量控制研究要點(diǎn)

（一）臟器生化藥物

臟器生化藥是指從動物來源的生化藥物，即從動物的組織、器官、腺體、體液、分泌物以及胎盤、毛、皮、角和蹄甲等提取的藥物。臟器生化藥物中多數(shù)有效成分不明確，多屬高分子物質(zhì)，現(xiàn)在多數(shù)還不能用合成的方法生產(chǎn)，有的物質(zhì)還需要有同時存在的其它物質(zhì)的協(xié)同作用才能發(fā)揮較好的生理功能。

（二）臟器生化藥物的研究和質(zhì)量控制要點(diǎn)

因動物的來源復(fù)雜（包括動物的種屬、健康狀況、飼養(yǎng)環(huán)境、年齡、采集時間、采集方法等），提取純化工藝簡單，其有效成分的含量和比例會產(chǎn)生較大的差異，因此，單靠質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不能全面控制產(chǎn)品的質(zhì)量，而需要控制源頭和工藝過程，再結(jié)合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)才能較有效地控制產(chǎn)品的質(zhì)量，確保臨床應(yīng)用的安全性和有效性。換句話說，生化藥物的質(zhì)量控制重點(diǎn)就是要保證生產(chǎn)產(chǎn)品與臨床研究樣品質(zhì)量一致，這種質(zhì)量的一致性單憑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的質(zhì)量控制指標(biāo)不能全面地反映出來（這一點(diǎn)不同于化學(xué)藥物），必須通過嚴(yán)格地控制源頭和工藝過程來實(shí)現(xiàn)，這一點(diǎn)類似于生物制品。

1、臟器生化藥物研究的一般過程

研究臟器生化藥物首先要固定源頭（原材料），包括動物的種屬、健康狀況、飼養(yǎng)環(huán)境（封閉飼養(yǎng)）、年齡、采集時間和采集方法等，并制訂原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。然后研究合適的提取純化方法，包括動物源性病毒的滅活和驗(yàn)證，確定原液（或半成品）的生產(chǎn)工藝；研究原液（或半成品）中的主要成分、含量、主成分的比例，以及其它成分的控制方法等，制訂原液（或半成品）的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。進(jìn)行制劑的處方工藝研究，最后制成臨床應(yīng)用的制劑（成品），并進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量研究，制訂成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

2、動物源性病毒的滅活工藝及驗(yàn)證

因組織來源動物的種類不同，其自然攜帶或者感染病毒的種類也會有所不同，再加上目前動物來源的原材料可控性較差，故必須要對動物源性病毒進(jìn)行滅活或去除，并對滅活或去除工藝進(jìn)行驗(yàn)證。滅活或去除動物源性病毒，首先要了解選定動物的病毒情況，重點(diǎn)關(guān)注已確認(rèn)對人類具有感染和致病能力的病毒（例如牛和豬的口蹄疫病毒，豬的乙型腦炎病毒等）及已有試驗(yàn)提示與人類疾病具有關(guān)聯(lián)性的病毒（例如牛腹瀉病毒，豬的戊肝病毒等），了解病毒的生物學(xué)和對理化因素敏感性等方面的特性。檢驗(yàn)原材料中病毒的污染程度和負(fù)載量，為采取相應(yīng)的處理工藝提供研究數(shù)據(jù)。如果已知原材料中污染了對人感染或者致病的病毒，或者檢出了內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒、具有種屬特異性的其它污染病毒，則必須廢棄該原材料并妥善處理。

3、臟器生化藥物的質(zhì)量控制要點(diǎn)

根據(jù)臟器生化藥物研究的一般過程，其質(zhì)量控制要點(diǎn)主要分以下三個方面：固定源頭（原材料），包括動物的種屬、健康狀況、飼養(yǎng)環(huán)境（封閉飼養(yǎng)）、年齡、采集時間和采集方法等，并制訂原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；研究合適的提取純化方法，包括動物源性病毒的滅活和驗(yàn)證，確定原液（或半成品）的生產(chǎn)工藝，研究原液（或半成品）中的主要成分、含量、主成分的比例，以及其它成分的控制方法等，制訂原液（或半成品）的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；進(jìn)行制劑的處方工藝研究，制成臨床應(yīng)用的制劑（成品），并進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量研究，制訂成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)?？傊K器生化藥物質(zhì)量控制的核心就是全程控制（從源頭到終產(chǎn)品，工藝過程控制和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制）。

三、生化藥物研究應(yīng)注意的問題

因生化藥物的來源復(fù)雜，不同的原材料和生產(chǎn)工藝得到的產(chǎn)品的質(zhì)量會有差異，包括主要成分的含量、比例，以及其它成分的種類和/或含量等，而這些差異往往質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)反映不出來，從嚴(yán)格意義上說，生化藥物沒有仿制。所以，在進(jìn)行生化藥物研究時首先要基于“不可仿制”來考慮問題。

1、注重原材料和工藝過程控制，結(jié)合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，較全面地控制產(chǎn)品的質(zhì)量。

2、產(chǎn)品上市后不要輕易更換原材料、變更生產(chǎn)工藝、改換劑型（尤其是水針、粉針、大輸液互換）、延長有效期等。如果需要進(jìn)行以上變更，應(yīng)針對變更情況對產(chǎn)品的質(zhì)量、安全性和有效性的影響（這種影響是指產(chǎn)品的真實(shí)質(zhì)量，并不只是質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的質(zhì)量控制指標(biāo)）進(jìn)行相應(yīng)的研究工作，包括藥學(xué)、藥理毒理和臨床研究。

3、因?yàn)樯幬锏馁|(zhì)量是靠全程控制來保證，其原液（或半成品）應(yīng)不可以自由銷售，否則不僅增大了流通環(huán)節(jié)再次染菌的可能性，又不利于成品全程的質(zhì)量控制。

4、動物源性病毒的滅活工藝及驗(yàn)證是一個需要研發(fā)者、審評人員，以及有關(guān)方面的專家共同研究和探討的課題。因?yàn)槿藗儗游镌葱圆《镜恼J(rèn)識，以及動物源性病毒與人類感染性疾病的關(guān)系的認(rèn)識是在逐步地深入，對病毒的滅活和工藝驗(yàn)證也會隨著人們認(rèn)識的提高而不斷地趨于更科學(xué)和合理。

參考文獻(xiàn)：

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篇6

記者：目前，國內(nèi)很多的食品及飲料企業(yè)對安特藍(lán)德公司還不太熟悉，請您為我們簡要介紹下貴公司及其產(chǎn)品的相關(guān)情況。

塔力亞：安特藍(lán)德公司是家以色列企業(yè)，成立于2003年?，F(xiàn)已開發(fā)了水光消毒技術(shù)TM，這是一種基于中壓紫外線的創(chuàng)新性水消毒技術(shù)，它將紫外線消毒與領(lǐng)先的水力和光纖原理相結(jié)合，為一些主要用水行業(yè)，如食品飲料、乳制品、制藥、水產(chǎn)養(yǎng)殖，以及市政供水提供安全用水，以滿足對安全用水越來越高的要求。

水光消毒TM系統(tǒng)卓越、持續(xù)的性能可實(shí)現(xiàn)高級別的微生物滅活，同時提供穩(wěn)定的水流量，滿足各種生產(chǎn)要求。安特藍(lán)德公司的解決方案成本效益高、易于維護(hù)運(yùn)行、綠色環(huán)保、不產(chǎn)生消毒副產(chǎn)品、節(jié)省能源和降低水耗，能夠達(dá)到其他消毒系統(tǒng)此前從未達(dá)到的水安全級別。

在全球食品飲料市場中，安特藍(lán)德公司經(jīng)過實(shí)踐驗(yàn)證的技術(shù)保護(hù)了產(chǎn)品用水，始終如一地提供符合規(guī)定的不含微生物水。主要應(yīng)用包括防火墻、GAC后消毒、濾膜保護(hù)、產(chǎn)品水消毒、臭氧替換、臭氧破壞等。安特藍(lán)德公司水光消毒系統(tǒng)經(jīng)過包括美國環(huán)保署(EDA)，美國食品及藥物管理局(FDA)和巴氏殺菌奶條例(PMO)等最嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)的驗(yàn)證，在國際上擁有眾多客戶安裝使用的基礎(chǔ)。

記者：據(jù)您介紹貴公司的產(chǎn)品在水處理方面擁有如此多的優(yōu)勢，請介紹產(chǎn)品的工作原理。

塔力亞：安特藍(lán)德公司技術(shù)解決方案的核心是一個用優(yōu)質(zhì)石英(而不是傳統(tǒng)的金屬材質(zhì))制作的水消毒腔，并且采用空氣環(huán)繞密封，從而利用光纖原理捕獲紫外光束，并使紫外光束在腔體內(nèi)循環(huán)反射，進(jìn)而優(yōu)化每一束紫外光線的效率，以實(shí)現(xiàn)高級別的消毒。產(chǎn)品系統(tǒng)是采用中壓高強(qiáng)度紫外燈管，該燈管采用全部紫外線殺菌光譜，可以滅活(用物理或化學(xué)手段殺死病毒、細(xì)菌等，但不損害它們體內(nèi)有用抗原的方法)各種微生物并使其修復(fù)機(jī)制失效。此紫外線系統(tǒng)全自動運(yùn)行，是唯一集成高級軟件的紫外線系統(tǒng)，能夠進(jìn)行連續(xù)實(shí)時監(jiān)控、系統(tǒng)效能控制及全部重要參數(shù)的控制。每只紫外燈管配備有2個傳感器，可以保證該系統(tǒng)始終保持微生物滅活所需的紫外線劑量，完全區(qū)別與其他只提供個傳感器紫外線系統(tǒng)而不考慮紫外燈管數(shù)量的整套系統(tǒng)，監(jiān)視器可以提供所有參數(shù)以及實(shí)際發(fā)生劑量的實(shí)時狀態(tài)顯示，并且?guī)в袛?shù)據(jù)日志系統(tǒng)，能夠跟蹤過去所有時問的監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)，而且，可以一鍵生成分析報(bào)告和合規(guī)性證據(jù)。

記者：貴公司提供的消毒方法與傳統(tǒng)的消毒方法相比有哪些優(yōu)勢?

塔力亞：光學(xué)消毒TM系統(tǒng)，克服了傳統(tǒng)反應(yīng)器使用中的三大障礙：性能、可靠性、劑量控制與監(jiān)控。該系統(tǒng)的技術(shù)和配置實(shí)現(xiàn)了此前未能達(dá)到或驗(yàn)證的微生物滅活級別。系統(tǒng)配備實(shí)時監(jiān)控和控制，在整個消毒過程中，劑量輸送保持不變。該系統(tǒng)還為那些此前被認(rèn)為不適合采用紫外光消毒的一系列應(yīng)用者采用水光學(xué)消毒鋪平了道路。

長期以來用水行業(yè)和市政供水都依賴于化學(xué)藥品，如氯和臭氧，或是依賴于高能耗過程，例如巴氏殺菌法，進(jìn)行水處理。與此相反，紫外光的自然消毒屙性被證明是一種環(huán)境友好型、能源高效型的水消毒解決方案，此解決方案不含化學(xué)品，也不產(chǎn)生消毒副產(chǎn)物。安特藍(lán)德公司的消毒系統(tǒng)經(jīng)過驗(yàn)證，可提供滿足美國食品和藥品管理局(FDA)標(biāo)準(zhǔn)的、巴氏殺菌法同等效果的處理水。這就是說，可以采用此系統(tǒng)替代傳統(tǒng)的熱法巴氏殺菌，熱法巴氏殺菌需要高能耗，例如能耗150kw／小時的熱法巴氏殺菌系統(tǒng)，而實(shí)現(xiàn)同樣效果的安特藍(lán)德系統(tǒng)的耗能僅為3kw／小時。

安特藍(lán)德系統(tǒng)中的其他應(yīng)用方面也實(shí)現(xiàn)了節(jié)能?；钚蕴窟^濾器是那些有可能進(jìn)入生產(chǎn)過程的細(xì)菌的滋生地。而安特藍(lán)德系統(tǒng)是緊隨活性炭過濾器之后安裝的，減少了下游環(huán)節(jié)生物污染的形成，也就意味著可以更少進(jìn)行生產(chǎn)線的蒸汽吹掃的頻次，從而節(jié)省了水和能源成本。濾膜的生物污染降低了水的產(chǎn)量，也升高了使水通過濾膜所需的壓力。安特藍(lán)德系統(tǒng)抑制了生物膜在濾膜上的滋生，大大延長了濾膜的壽命，也節(jié)省了使水通過濾膜所需的能源。

記者：目前貴公司的設(shè)備主要適應(yīng)于哪些領(lǐng)域?

塔力亞：食品飲料、生物制藥、水產(chǎn)養(yǎng)殖、都是用水等領(lǐng)域，可以為客戶帶來全程的水處理方案。在食品飲料行業(yè)中，安特藍(lán)德公司的消毒解決方案為客戶定制式，能夠殺滅假單細(xì)胞菌、埃布氏菌、大腸菌、乳酸菌，霉菌和其他微生物等水生微生物，滿足客戶需求。安特藍(lán)德公司在全球各地都有成功的現(xiàn)場應(yīng)用，其系統(tǒng)適用于監(jiān)管要求高、涉及公共衛(wèi)生安全的主要用水行業(yè)。

記者：我們知道貴公司進(jìn)入中國市場的時間還不長，那么貴公司在中國未來幾年的市場戰(zhàn)略是怎樣的?

塔力亞：目前，中國明智地把重點(diǎn)放在食品安全和衛(wèi)生保健方面，致力于為客戶創(chuàng)造不斷尋求創(chuàng)新型、經(jīng)濟(jì)型和可靠的解決方案。我認(rèn)為在公共衛(wèi)生安全方面，國內(nèi)制造業(yè)不能冒任何風(fēng)險(xiǎn)，他們需要可以信賴的技術(shù)，用以向客戶提供安全優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

篇7

[關(guān)鍵詞] T細(xì)胞疫苗;胰島細(xì)胞;異種移植;免疫耐受

[中圖分類號] R349.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)04-19-03

The Effects of T Cell Vaccination on Xenogeneic Islet Cell TransplantationHU Chunlei1ZHAO Zhenlin2

1.Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China;2.The Second Hospital of Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China

[Abstract] Objective To explore the the effects of T cell vaccination on xenogeneic islet cell transplantation. Methods Balb/c mice (H2-d) were used as recipients and Wistar rats were used as donors. TypeⅠdiabetes mice model were made by injecting streptozotocin intravenously. Type Ⅰ diabetes mice were randomLy divided into three groups,Group A:Diabetic mice with no transplantation and no TCV, Group B: Islet cell transplantation +RPMI1640 culture medium, Group C(experimental group): Islet cell transplantation+TCV.T cell vaccine was made by using attenuated spleen lymphocytes from Balb/c mice which were challenged with Wistar rat spleen lymphocytes in vitro and were stimulated with Con A. Balb/c mice as recipients were immunized with TCV on the time points of d1,d7,d14,d21 and;RPMI1640 culture medium was used in control group. One-way mixed lymphocyte reaction(MLR) was performed with effector of immunized Balb/c mice peripheric lymphocytes and stimulator of Wistar rat peripheric lymphocytes on the second day of T cell vaccination. Islet cells were isolated from Wistar rat pancreas using the protocol of enzyme digestion and density gradient centrifμgation. Islet cells were transplanted into immunized Balb/c mice at the density of 1200～1500IEQ/kg by the way of portal vein injection. Recipient's blood glucose was monitored everyday and body weight was recorded weekly after transplantation. Results Xenogeneic islet cell transplantation can induce type I diabetic mice blood glucose to normal levels and remain for some time,the control group mice after transplantation(5.12±1.36) days, which happened rejection,the experimental group graft survival time of up to(20.25±3.45)days. Conclusion T cell vaccination can significantly prolong the survival time of xenogeneic pancreatic islet grafts;T cell vaccination is a potential approach to to induce xenogeneic islet transplant tolerance.

[Key words] T cell vaccine;Islet cell;Xenogeneic transplantation;Immune tolerance

異種移植為胰島移植治療I型糖尿病提供了充足的供體,但嚴(yán)重的排斥反應(yīng)限制了這一方法的應(yīng)用,應(yīng)用常規(guī)的免疫抑制劑不能抑制異種免疫排斥反應(yīng),因此如何誘導(dǎo)免疫耐受成為一個重要課題。T細(xì)胞疫苗(TCV)是特異性抗原活化的反應(yīng)性T細(xì)胞經(jīng)過化學(xué)或物理方法處理滅活后制成的,是目前免疫耐受研究中較新的領(lǐng)域[1]。已有研究證明T細(xì)胞疫苗可以誘導(dǎo)同種異體移植免疫耐受[2-4]。本實(shí)驗(yàn)通過T細(xì)胞疫苗誘導(dǎo)受體對異種胰島移植的免疫耐受狀態(tài),探討TCV在誘導(dǎo)異種胰島移植免疫耐受中的可行性。

1材料與方法

1.1動物

供者為Wistar雄性大鼠,180～200g,由山西醫(yī)科大學(xué)生理教研室提供;受者為BALB/c(H-2d)雄性小鼠,20～25g;由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院動物研究所提供。

1.2試劑及藥品

胎牛血清(四季青公司);RPMI細(xì)胞培養(yǎng)基(HYCLONG);淋巴細(xì)胞分離液(TBD);絲裂霉素C(協(xié)和發(fā)酵工業(yè)株式);刀豆蛋白A(Sigma);鏈脲霉素(Sigma);ficoll400(sigma);膠原酶V(Sigma)。

1.3制備Wistar大鼠和Balb/c小鼠脾臟單個核淋巴細(xì)胞懸液

無菌取大鼠脾臟,研磨制成勻漿,Hanks液稀釋,200目不銹鋼網(wǎng)過濾,制成細(xì)胞懸液,10倍細(xì)胞壓積的比例加入紅細(xì)胞裂解液,充分吹打混勻后,Hanks液洗兩次,輕輕加入到淋巴細(xì)胞分離液上層密度梯度離心,收集界面層細(xì)胞,即為單個核淋巴細(xì)胞,Hanks液洗滌兩次,臺盼蘭拒染法鑒定活細(xì)胞數(shù)大于95%,RPMI1640培養(yǎng)液調(diào)細(xì)胞濃度至2×105/mL,絲裂霉素C(25μg/mL)37℃水浴45min滅活細(xì)胞,PBS洗滌3次,調(diào)細(xì)胞濃度至2×105/mL。同樣方法制備小鼠脾淋巴細(xì)胞懸液,調(diào)細(xì)胞濃度至2×105/mL,分裝于100mL的培養(yǎng)瓶內(nèi)(5mL/瓶),不行絲裂霉素處理。

1.4制備T細(xì)胞疫苗

滅活大鼠脾淋巴細(xì)胞5mL接種于小鼠淋巴細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi),混合后加入ConA2.5μg/mL,37℃,95%O2,5%CO2孵箱中培養(yǎng)48h 后收集細(xì)胞,然后加入絲裂霉素(25μg/mL)處理滅活細(xì)胞(37℃水浴45min),RPMI1640培養(yǎng)液調(diào)細(xì)胞濃度至1×107/mL,制成供者特異性T淋巴細(xì)胞疫苗。

1.5小鼠Ⅰ型糖尿病模型的制備

將鏈脲霉素(STZ)用0.1mmol/l無菌枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液配成2%溶液,調(diào)節(jié)PH4.5,濾菌器除菌。小鼠過夜禁食12h,按160mg/kg體重一次性腹腔注射STZ溶液,24h內(nèi)隨機(jī)測血糖≥16.5mmol/l,穩(wěn)定一周即可視為造模成功,作為受體。

1.6胰島細(xì)胞的獲取和分離純化

麻醉大鼠逆行注射膠原酶V10mL充盈胰腺組織,迅速完整取下胰腺組織,進(jìn)一步去除脂肪和血凝塊,加體積兩倍的膠原酶V在37℃水浴鍋內(nèi)震蕩消化15min,胎牛血清終止反應(yīng)后100目不銹鋼網(wǎng)過濾,Hanks液和1640液洗滌離心,用Ficoll400液不連續(xù)密度梯度離心純化胰島細(xì)胞后重懸于20mL完全PPMI1640培養(yǎng)液中,37℃,95%O2,5%CO2條件下培養(yǎng)24h。

1.7實(shí)驗(yàn)分組

T細(xì)胞疫苗免疫接種及異種胰島細(xì)胞移植 將Ⅰ型糖尿病模型小鼠隨機(jī)分為四組,每組8只,A組糖尿病小鼠,B組糖尿病小鼠+胰島細(xì)胞+1640培養(yǎng)液(對照組),C組糖尿病小鼠+胰島細(xì)胞+T細(xì)胞疫苗(實(shí)驗(yàn)組),胰島移植前實(shí)驗(yàn)組注射TCV(1×107/mL、0.2mL/次、1次/周),連續(xù)3周,B組用1640液替代。第3次免疫后7d,B、C組經(jīng)門靜脈穿刺按1200～1500IEQ/kg導(dǎo)入大鼠胰島細(xì)胞。

1.8單向混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MTT法)

接種前和每次接種后第5天進(jìn)行單向混合淋巴細(xì)胞反應(yīng),Balb/c小鼠的脾細(xì)胞作為反應(yīng)細(xì)胞,絲裂霉素處理的Wistar大鼠脾細(xì)胞作為刺激細(xì)胞,兩者細(xì)胞濃度均為1×106/mL。取96孔板,每孔加入刺激細(xì)胞和反應(yīng)細(xì)胞各100μl,每份標(biāo)本設(shè)3個復(fù)孔,在孵育箱中培養(yǎng)72h,終止前4h每孔加入MTT10μl,培養(yǎng)結(jié)束后加入二甲基亞砜150μl,37℃下振蕩20min,用酶標(biāo)儀測每孔OD570值計(jì)算抑制率;抑制率=(1-實(shí)驗(yàn)組OD/對照組OD)×100。

1.9小鼠血糖和體重的檢測

胰島細(xì)胞經(jīng)門靜脈移植導(dǎo)入小鼠體內(nèi),每日相同時間點(diǎn)測空腹血糖,以非禁食血糖值≤10mmol/判定為移植物存活,移植有效;若連續(xù)2次血糖值≥11.1mmol/l為移植物排斥,以第一次的時間為排斥時間。每周相同時間點(diǎn)觀察小鼠的體重變化。

1.10統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(χ±s)表示,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)、方差分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,P

2結(jié)果

2.1單向混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)

t檢驗(yàn)結(jié)果示:TCV組的平均OD值每次接種后比接種前有明顯下降(P0.05),免疫后TCV組相同時間點(diǎn)同空白對照組比較,平均OD值有明顯差異(P

2.2不同組間血糖控制水平的比較

方差分析(S-N-K法)結(jié)果示:移植組同非移植組之間的比較,A組與其他二組比較(P0.05)。見表2。

2.3移植組有效控制血糖天數(shù)的比較

t檢驗(yàn)結(jié)果示:C組與B組比較(P

2.4不同組小鼠體重的變化趨勢圖

從趨勢圖中可以看出從造模成功到移植前3周,三組小鼠體重變化趨勢相似,移植胰島細(xì)胞后,非移植組體重隨著時間延長不斷下降,移植后的B、C組體重隨時間延長逐漸回升,但B組體重回升一段時間后又開始下降。見圖1。

3討論

T細(xì)胞疫苗誘導(dǎo)免疫耐受可能涉及以下幾個方面的機(jī)制:1)細(xì)胞免疫TCV可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗獨(dú)特型T細(xì)胞,抑制體內(nèi)活化的獨(dú)特型抗原特異性T細(xì)胞,其中CD8+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在免疫應(yīng)答的水平上對Th細(xì)胞表型進(jìn)行調(diào)節(jié),從而誘導(dǎo)免疫耐受的形成[5,6]。2)體液免疫TCV是由自身反應(yīng)性T細(xì)胞經(jīng)過化學(xué)或物理的方法滅活后制備而成的,本身表達(dá)一組特定的TCR,誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對TCR的抗體,也就是抗獨(dú)特型抗體,導(dǎo)致機(jī)體對某種特定抗原的免疫無應(yīng)答,此作用具有明顯的抗原特異性。另外,TCV也具有與活化T細(xì)胞相同的表位,如IL-2R、IL-4R和CD4、CD8等黏附分子,誘導(dǎo)產(chǎn)生針對T細(xì)胞表面活化分子的抗體如IL-2R抗體等,此作用不具有抗原特異性[7,8]。另外有研究發(fā)現(xiàn)TCV可激活調(diào)節(jié)性T細(xì)胞誘導(dǎo)免疫耐受[9],上述機(jī)制共同參與細(xì)胞凋亡的過程。在移植研究中,目前制備疫苗方法大多是先用供體抗原致敏受體,再收集相應(yīng)部位的淋巴結(jié)細(xì)胞或脾細(xì)胞,用低濃度ConA 體外培養(yǎng)48h激活同種抗原特異性T 細(xì)胞,最后用化學(xué)或物理的方法滅活細(xì)胞。

本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用體外培養(yǎng)的方法制作T細(xì)胞疫苗,以滅活的供體脾細(xì)胞作為刺激細(xì)胞,受體脾細(xì)胞作為反應(yīng)細(xì)胞,兩者混合低濃度ConA刺激增值,形成供體抗原特異性T細(xì)胞,然后絲裂霉素滅活制成T細(xì)胞疫苗,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,接種疫苗后抑制率隨免疫次數(shù)的增加而增加,第三次免疫后抑制率達(dá)到86.1%,說明接種疫苗后,小鼠對特異性抗原的免疫排斥反應(yīng)降低。移植物存活時間實(shí)驗(yàn)組同對照組比較有顯著延長,證實(shí)體外制備的TCV可以誘導(dǎo)受體產(chǎn)生抗原特異性免疫耐受,延長了移植物的存活時間。

與傳統(tǒng)方法比較,體外方法在體外用抗原刺激受體細(xì)胞制成供體抗原特異性T細(xì)胞,不僅避免反復(fù)致敏受體給機(jī)體帶來的痛苦,也縮短了疫苗制備的時間,更利于在臨床上的推廣應(yīng)用。本次研究的創(chuàng)新在于用體外方法制備T細(xì)胞疫苗并誘導(dǎo)了異種胰島移植的免疫耐受,說明其有一定的可行性。但是與體內(nèi)方法作用效果的比較,在制備疫苗過程中細(xì)胞的濃度、致敏受體時疫苗的最佳濃度等問題仍需進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

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[4] 黃錦慶,陳德,錢世,等. 大鼠T細(xì)胞疫苗的制備及其抗移植皮膚排斥作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中華普外科學(xué)文獻(xiàn)(電子版),2007,4(1):208 -211.

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[6] 趙振林,郭永章,李立,等. T細(xì)胞免疫前后外周血CD4+和CD8+T細(xì)胞變化的分析[J]. 免疫學(xué)雜志,2003,3(19):27-30.

[7] 陳永良,何球藻. 移植免疫中T細(xì)胞疫苗作用機(jī)制的初步分析[J]. 上海免疫學(xué)雜志,1996,16(2):138-140.

[8] 趙振林,郭永章,李立,等. T細(xì)胞疫苗誘導(dǎo)免疫耐受于外周血T細(xì)胞凋亡關(guān)系的探討[J]. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2003,4(10):359- 361.

篇8

（黑龍江省齊齊哈爾市獸醫(yī)衛(wèi)生防疫站 161006）

對動物按程序定期進(jìn)行免疫注射，是預(yù)防動物傳染病的關(guān)鍵。成功的免疫取決于有效的疫苗、熟練的操作技術(shù)和健康的易感動物等方面因素。?

1 疫苗概述?

活毒疫苗可以分為強(qiáng)毒疫苗、弱毒疫苗、異源疫苗和重組疫苗。弱毒疫苗的應(yīng)用比較廣泛，是利用毒力減弱的細(xì)菌或病毒等微生物經(jīng)大量繁殖后制成的活苗。制備弱毒苗所用的弱毒菌株和病毒株有的是從自然界中篩選出來的，如雞新城疫Ⅱ系苗和Ⅳ系苗等；也有的為人工致弱毒（菌）株或病毒株，如豬丹毒弱毒疫苗和豬瘟兔化弱毒疫苗等。此類疫苗免疫效果好，使被免疫動物產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力，免疫期長，但存在散毒和新疫源的問題。?

強(qiáng)毒或弱毒大量繁殖后，采用物理的或化學(xué)的方法使其滅活，但仍保留其免疫原性制成的苗即為滅活苗，又叫做死苗。滅活苗比較安全，對母源抗體的干擾作用不敏感，但需要免疫佐劑增強(qiáng)免疫應(yīng)答。由于滅活苗不能在體內(nèi)復(fù)制繁殖，因而需要2～3周才能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫保護(hù)力。?

將同種細(xì)菌或病毒的不同血清型混合制成的疫苗，稱為多價(jià)疫苗。多價(jià)疫苗在流行毒株存在不同血清型時，可拓寬保護(hù)范圍，提高疫苗的保護(hù)力。聯(lián)苗是由兩種及兩種以上的細(xì)菌或病毒聯(lián)合制成的疫苗，1次免疫可達(dá)到預(yù)防多種疫病的目的。?

2 獸用生物制品?

運(yùn)輸、儲存不當(dāng)按照生物制品的運(yùn)輸要求，生物制品的運(yùn)輸必須在冷凍（冷藏）條件下運(yùn)輸。目前，許多運(yùn)輸生物制品的條件不符合要求，有的是用保溫箱運(yùn)輸，有的干脆就放在公共汽車上進(jìn)行長途運(yùn)輸，由于儲存條件不合格，勢必影響到生物制品的效力。在生物制品的保管過程中，相當(dāng)一部分經(jīng)營戶沒有所規(guī)定的保管條件，有的隨意堆放，銷售之前放在冰箱里凍一下；有的不分凍干苗還是滅活苗都放入冰箱冷凍室；有的生物制品經(jīng)營戶為了省電，往往是白天將冰箱通電，夜晚將冰箱斷電，使生物制品反復(fù)凍融。由于生物制品效力的不可逆性，必然會影響生物制品的質(zhì)量，從而影響免疫質(zhì)量。?

3 免疫計(jì)劃及免疫注射技術(shù)?

流行的疾病與免疫接種的疫苗血清型或亞型不相吻合。致使畜禽機(jī)體內(nèi)對流行的傳染病沒有相應(yīng)抗體，不能保護(hù)機(jī)體不發(fā)病。人為增加接種劑量或免疫過頻。致使畜禽產(chǎn)生免疫耐受，對疫苗不引起免疫應(yīng)答，還抑制再次使用時淋巴細(xì)胞的激活。?

在動物防疫工作實(shí)踐中，有許多防疫人員不能很好地按照規(guī)范操作，對防疫器械、注射部位極少進(jìn)行消毒，更不規(guī)范的是某些防疫人員一只注射器不作認(rèn)真處理就用于多種生物制品的注射。注射后不進(jìn)行認(rèn)真觀察，也不作任何記錄生物制品注射對動物是一種應(yīng)激性刺激，根據(jù)機(jī)體個體狀況，可能出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)，如果加強(qiáng)觀察，及時用腎上腺素等藥物急救治療，完全可以減少損失。不作記錄常造成漏打或重復(fù)注射，并對以后的補(bǔ)防補(bǔ)打造成困難。在免疫過程中，有的防疫人員隨意加大注射劑量，有的擔(dān)心產(chǎn)生注苗反應(yīng)而隨意減少劑量。有的防疫人員自以為技術(shù)熟練，沒有將生物制品注射到說明書要求的部位，而是采取“飛針”的方法，在很大程度上影響了注射劑量和注射的準(zhǔn)確性。?

篇9

【摘要】

目的提取野生抱莖蓼花中的揮發(fā)油，分析揮發(fā)油的組分，探討其生物活性，為開發(fā)這一資源提供理論依據(jù)。方法用水蒸氣蒸餾法從抱莖蓼的花中提取揮發(fā)油，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對揮發(fā)油組分進(jìn)行分離和鑒定，運(yùn)用氣相色譜面積歸一化法確定各組分的相對含量，并利用正構(gòu)烷烴系列物質(zhì)對各組分進(jìn)行定性確定，對抱莖蓼花的揮發(fā)油進(jìn)行抗菌實(shí)驗(yàn)。結(jié)果從抱莖蓼花的揮發(fā)油中檢出69個組分，鑒定出66個組分，占全油的96.92%；抱莖蓼花的揮發(fā)油有明顯地抗菌活性。結(jié)論 抱莖蓼花的揮發(fā)油中主要以單萜和倍半萜為主，含量較高的組分是石竹烯（12.01 %）、3-己烯-1-醇(10.78%)、α-里哪醇(6.88%)、3-辛烯-3-醇（6.32%）等，其揮發(fā)油對大腸埃希菌、傷寒沙門菌、腸炎沙門菌和金黃色葡萄球菌有明顯地抑制和滅活作用。

【關(guān)鍵詞】 抱莖蓼；抱莖蓼花；揮發(fā)油；氣相色譜-質(zhì)譜法；抗菌活性

Abstract：ObjectiveTo extract and analyze the constituents of the essential oil from the flower of Polygonum amplexicaule， so as to provide scientific proof for its exploitation of biological activity compositions. MethodsThe essential oil from the flower of Polygonum amplexicaule was extracted by steam distillation， the components of the essential oil were separated and structurally identified by gas chromatography/mass spectrometry， the relative contents of these components by the peak-area normalization method adopted in gas chromatography， and all components of the essential oil are calibrated with a standard mixture of homologous n-alkane series. The essential oil was investigated by antimicrobial activities. Results69 components were separated， 66 components were identified and accounted for 96.92 % of the all peak area， the essential oil had antimicrobial activity. ConclusionThe main chemical constituents of the essential oil are monoterpenoids and sesquiterpenoids compounds， the major components are Caryophyllen (12.01 %)， 3-Hexen-l-ol (10.78 %)， α-Linalool (6.88%)， 3-Octen-3-ol(6.32%)， etc. The essential oil has obvious inhibitory effect against Escherichia coli， Salmonella typhi， Salmonella enteritidis and Staphylococcus aureus.

Key words：Polygonum amplexicaule; Flower; Essential oil; Gas chromatography-mass spectrometry; Antimicrobial activity

陜西南部秦巴山區(qū)野生的抱莖蓼Polygonum amplexicaule D.Don是蓼科Polynonaceae蓼屬Polygonum L.的一種草本植物，又名紅三七［1］。蓼屬植物具有清熱解毒、散結(jié)消腫、活血止痛、順氣解痙、收斂止瀉等功效，有些還具有抗菌消炎、抗氧化、抗腫瘤、殺蟲等多種生物活性［2］，因此對該屬植物生物活性成分的研究較多［3］，對該屬植物的揮發(fā)油也有一些研究報(bào)道［4］。抱莖蓼地上和地下部分的生物活性成分已有文獻(xiàn)報(bào)道［5，6］，抱莖蓼葉子的揮發(fā)油也已有研究［1］，抱莖蓼花中的揮發(fā)性成分分析尚未見報(bào)道，揮發(fā)油有許多獨(dú)特的生理活性如殺菌消炎、抗氧化、清熱解毒等作用，有的已用于醫(yī)療和保健，因此，深入研究抱莖蓼揮發(fā)油有重要的價(jià)值和意義。本實(shí)驗(yàn)從秦巴山區(qū)野生抱莖蓼的花中提取揮發(fā)油，分析其組分并確定各個組分的相對含量，并運(yùn)用正構(gòu)烷烴系列物質(zhì)對各組分進(jìn)行定性，對其揮發(fā)油進(jìn)行初步地抗菌活性實(shí)驗(yàn)，以期為抱莖蓼揮發(fā)油的開發(fā)利用提供可靠的科學(xué)依據(jù)。

1 器材與方法

1.1 材料

抱莖蓼的花于200608上旬在四川境內(nèi)的大巴山上收集，全草經(jīng)陜西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院田先華教授鑒定確認(rèn)為抱莖蓼Polygonum amplexicaule D.Don（標(biāo)本編號SNU 05-11-29 LIU）。

1.2 試劑

無水硫酸鈉、乙醚、氯化鈉（均為分析純，西安化學(xué)試劑廠），水為蒸餾水，正構(gòu)烷烴系列物質(zhì)(C6～C20)為色標(biāo)（北京化學(xué)試劑公司進(jìn)口分裝）。MH肉湯，肉湯培養(yǎng)基，普通瓊脂平板培養(yǎng)基?；钚詫?shí)驗(yàn)所用標(biāo)準(zhǔn)菌株凍干品購自中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京藥品生藥制品鑒定所中國醫(yī)學(xué)細(xì)菌保藏中心。

1.3 儀器

Finnigan-Trace DSQ型GC/MS儀（美國熱電公司），GC（美國安捷倫利科技有限公司，Agilent GC 6890N，F(xiàn)ID），打漿機(jī)，96孔培養(yǎng)板，普通培養(yǎng)箱，水蒸氣蒸餾裝置。

1.4 方法

1.4.1 揮發(fā)油的提取

從新鮮的抱莖蓼上取花20 g，用打漿機(jī)打碎成泥漿狀，水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油12 h。餾出液經(jīng)NaCl飽和后用乙醚萃取3次，萃取液用無水硫酸鈉干燥24 h，蒸餾回收乙醚后得到一種有清香氣味的淡黃色揮發(fā)油0.112 g，得油率為0.56 %。密封0℃下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 GC-MS工作條件

Finnigan-Trace DSQ型GC/MS儀，色譜柱型號：DB-5 (30 m×0.25 mm×0.25 μm)。色譜條件：載氣為He氣，柱溫50～280 ℃；初始溫度為50℃，保持3 min后，以10 ℃/min程序升溫，升至280 ℃并保持3 min；進(jìn)樣口溫度為250 ℃，衡流模式流量為1 ml/min，進(jìn)樣量為0.1 μl，分流比為30:1，色質(zhì)界面溫度為250 ℃。質(zhì)譜條件：EI離子源，電離能量70 eV，離子源溫度200 ℃，倍增器電壓976 V，掃描范圍40～500質(zhì)量單位。定量和定性方法：各色譜峰對應(yīng)的質(zhì)譜圖經(jīng)計(jì)算機(jī)譜庫（NIST庫）檢索進(jìn)行定性，各組分的相對含量根據(jù)總離子流圖由計(jì)算機(jī)采用峰面積歸一化法計(jì)算。

1.4.3 正構(gòu)烷烴系列物質(zhì)對揮發(fā)油中各組分的定性

利用GC對揮發(fā)油各組分依據(jù)正構(gòu)烷烴系列(C6～C20)進(jìn)行定性，確定各組分的Kovats保留指數(shù)RI值［7］。GC工作條件:色譜柱型號HP-5（5%Phenyl Methyl Siloxane; capillary:30.0 m×320 μm×0.25 μm），柱溫50～280 ℃；初始溫度50℃，保持3 min以10℃/min程序升溫；進(jìn)樣口溫度為250 ℃，檢測器溫度為250℃，衡流模式流量為1.5 ml/min，進(jìn)樣量為0.2 μl，分流比30:1，檢測器為FID，載氣為N2。

1.4.4 抗菌實(shí)驗(yàn)

抗菌實(shí)驗(yàn)菌株為大腸埃希菌、傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、鼠傷寒沙門菌、福氏志賀菌、金黃色葡萄球菌和白色假絲酵母菌。試驗(yàn)菌液配置：細(xì)菌接種于MH肉湯，置普通培養(yǎng)箱37 ℃下24 h培養(yǎng)，以比濁法計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液調(diào)配成106 CFU/ml，培養(yǎng)基用肉湯培養(yǎng)基和普通瓊脂平板培養(yǎng)基，同時設(shè)立細(xì)菌對照，采用微量二倍連續(xù)梯度稀釋法確定最小抑菌濃度（MIC），平板轉(zhuǎn)種法確定最小殺菌濃度(MBC)［1］。

2 結(jié)果

2.1 抱莖蓼花的揮發(fā)油組分分析抱莖蓼花的揮發(fā)油經(jīng)GC-MS分離的總離子流圖如圖1，分離出69個組分，各峰經(jīng)質(zhì)譜掃描后所得的質(zhì)譜圖用計(jì)算機(jī)譜庫檢索，結(jié)合人工譜圖解析，對基峰、質(zhì)荷比和相對豐度等分別對各峰加以確認(rèn)，鑒定出66個組分，占全油的96.92%。抱莖蓼花的揮發(fā)油成分分析結(jié)果列于表1。表1中的RI值是選用一系列正構(gòu)烷烴作為參比物，其他各組分的保留行為用在色譜圖譜上緊靠它的兩個正構(gòu)烷烴來標(biāo)定，保留值挨得很近，保留指數(shù)的測定可精確得到1個I單位，甚至0.1個I單位，相對偏差僅為0.1%～0.2%，使用RI值減少了許多外部因素，重現(xiàn)性得到提高。

抱莖蓼花的揮發(fā)油組分中含量較高的組分是石竹烯(12.01%)、3-己烯-1-醇(10.78%)、α-里哪醇(6.88%)、3-辛烯-3-醇(6.32%)、β-環(huán)檸檬醛(5.31%)等，它們占到了揮發(fā)油總量的41.30%。在這些含量較高的物質(zhì)結(jié)構(gòu)中均含有不飽和雙鍵，含不飽和雙鍵的化合物往往會表現(xiàn)出一系列的生理活性，這些含量較高物質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征預(yù)示著抱莖蓼花的揮發(fā)油可能具有一定的生理活性。和文獻(xiàn)報(bào)道的抱莖蓼葉子中揮發(fā)油的主要成分是一致的，但葉子揮發(fā)油和花揮發(fā)油的組成存在著很大的差異［1］，從抱莖蓼的葉子揮發(fā)油中僅鑒定出38個組分，可見抱莖蓼花的揮發(fā)油組成是復(fù)雜多樣的。

從抱莖蓼花的揮發(fā)油成分種類來看以醇、酮、烯烴、酯類居多，其中醇類21種，烯類10種，酮類9種，酯類9種，雜環(huán)化合物有兩個。揮發(fā)性醇類一般具有令人興奮的調(diào)和性氣味且有抗腐敗、抗濾過性病毒等特性，如橙花叔醇有玫瑰花香，屬于高級烯醇類物質(zhì)，有愉快持久的香氣；α-萜品醇有顯著的平喘功效，也可作為空氣消毒劑，是一種麝香型萜烯類物質(zhì)；里哪醇也叫芳樟醇，是世界三大香醇之一，是香料、日用和醫(yī)藥等工業(yè)必不可少的原料，芳樟醇及酯常用于各種人造精油的調(diào)和原料，也用于配制化妝香精和皂用香精等；葉綠醇也叫植醇，是一種無環(huán)二萜化合物，是合成維生素E、維生素K1的原料；石竹烯對皮膚炎癥及消化系統(tǒng)潰瘍有較好的療效，具有抗氧化作用，廣泛應(yīng)用于香料、食品工業(yè)、和藥物合成中間體等領(lǐng)域。抱莖蓼花的揮發(fā)油成分以單萜和倍半萜類居多，萜類化合物一般具有提神、抗菌消炎和鎮(zhèn)痛等作用。這預(yù)示著抱莖蓼花的揮發(fā)油有一定的藥理活性，抱莖蓼花的揮發(fā)油具有良好的應(yīng)用開發(fā)價(jià)值，有必要進(jìn)一步研究其藥理活性。表1 抱莖蓼花的揮發(fā)油化學(xué)組分（略）

2.2 抗菌活性結(jié)果分析抱莖蓼花的揮發(fā)油對8個標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC和MBC如表2。從表2中結(jié)果可以看出抱莖蓼花的揮發(fā)油對實(shí)驗(yàn)所選用的8個試驗(yàn)菌株均有明顯的抑制作用和滅活作用，能有效地抵抗常見腸道致病菌的感染。抱莖蓼花的揮發(fā)油對大腸埃希菌ATCC 25922株和金黃色葡萄球菌ATCC 25925株的MIC值是3.68μl/ml和3.88μl/ml，表明抱莖蓼花的揮發(fā)油對這兩個細(xì)菌有顯著的抑制作用。該揮發(fā)油對腸炎沙門菌50 040株和傷寒沙門菌50127株的MIC值分別是4.56 μl/ml和4.92 μl/ml，表明該揮發(fā)油對這兩個細(xì)菌也有非常明顯的抑制作用。抱莖蓼花的揮發(fā)油對其他細(xì)菌的MIC值相對較大一些，但也表現(xiàn)出一定的抑菌活性，抱莖蓼花的揮發(fā)油對實(shí)驗(yàn)的8個菌株均有明顯地抑制作用。抱莖蓼花的揮發(fā)油對大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌的MBC值是5.02 μl/ml和5.26 μl/ml，表明該揮發(fā)油對兩個細(xì)菌有顯著的殺滅作用；抱莖蓼花的揮發(fā)油對腸炎沙門菌和傷寒沙門菌的MBC值分別是6.78 μl/ml和6.32 μl/ml，表明該揮發(fā)油對這兩個細(xì)菌也有非常明顯的殺滅作用；抱莖蓼花的揮發(fā)油對實(shí)驗(yàn)的8個菌株均有明顯的殺滅作用。抱莖蓼花的揮發(fā)油對大腸埃希菌、傷寒沙門菌、腸炎沙門菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用和滅活作用更為顯著。表2 抱莖蓼花的揮發(fā)油對標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC 和MBC值（略）

3 結(jié)論

水蒸氣蒸餾法提取抱莖蓼花中的揮發(fā)油簡單、方便，用GC-MS和GC分析揮發(fā)油成分和含量準(zhǔn)確性高。該揮發(fā)油對實(shí)驗(yàn)菌株的抑制作用和滅活作用顯著，這為開發(fā)利用這一資源可提供科學(xué)的依據(jù)。抱莖蓼花的揮發(fā)油組成復(fù)雜多樣，與文獻(xiàn)報(bào)道的抱莖蓼葉子中的揮發(fā)油組成和蓼屬其他植物揮發(fā)油化學(xué)成分中的一些主要成分是一致的［1］，以單萜和倍半萜為主［3，4］，這說明物種與其化學(xué)組成具有一定的相關(guān)性，其中的主要化學(xué)成分對該屬植物的鑒定有參考價(jià)值，但由于種類、地域、來源的不同和植物部位的不同揮發(fā)油化學(xué)組成會存在著一定的差異，這意味著揮發(fā)油的生物活性也存在著差異?？咕鷮?shí)驗(yàn)結(jié)果表明秦巴山區(qū)野生抱莖蓼花的揮發(fā)油對實(shí)驗(yàn)所選用的8個菌株均有明顯的抑制作用和滅活作用，這和抱莖蓼全草的水提物具有廣譜抗菌作用的結(jié)果相一致［2］。本實(shí)驗(yàn)只對其花揮發(fā)油的抗菌活性作了初步研究，其他生物活性試驗(yàn)還有探討的價(jià)值和意義。

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篇10

Key word: water treatment; chironomus larva; prevention

搖蚊幼蟲（紅蟲）大量孳生是由于水體污染導(dǎo)致的富營養(yǎng)化而變得日益突出的困擾供水界的新問題。搖蚊幼蟲的抗氧化性較強(qiáng)，常規(guī)水處理的消毒工藝難以將其有效地殺滅，使得在我國一些大中城市的水廠清水池乃至管網(wǎng)水中都曾發(fā)現(xiàn)過搖蚊幼蟲。在我國南方一些城市，由于氣候具有常年溫暖潮濕的特征，適于昆蟲繁殖，問題更加突出。搖蚊幼蟲不僅給用戶帶來了不良的感官影響，引起用戶對水質(zhì)信心的下降與恐慌，更為重要的是搖蚊幼蟲還是人類多種傳染疾病的傳播媒介，對居民的飲用水安全帶來極大的威脅。

1.搖蚊幼蟲的生活習(xí)性及分布

搖蚊分屬昆蟲雙翅目搖蚊科[1]，由于身體內(nèi)含有血紅蛋白而成紅色。搖蚊的生活史經(jīng)過卵—幼蟲—蛹—成蟲四個階段。有的兩年只有一個世代，有的一年卻有七個世代，但大多數(shù)每年有兩個世代，第一個在春季（5~6月），第二個在夏季（8~9月）。

搖蚊的卵產(chǎn)于水面，卵塊內(nèi)有300~700個卵。初孵的搖蚊幼蟲具趨光性，經(jīng)過3~6天浮游生活后，轉(zhuǎn)入底棲生活，利用藻類、腐屑、細(xì)沙、淤泥、唾液腺所分泌絲狀物筑巢，多數(shù)種類筑成兩頭開口的管型巢。隨著幼蟲轉(zhuǎn)入底棲，幼蟲由趨光性改為背光性。幼蟲經(jīng)四次蛻皮后進(jìn)入蛹階段，每蛻皮1次，體色加深，從淡紅色、鮮紅色、深紅色至變成黑褐色的蛹。幼蟲的食性，除了環(huán)足搖蚊屬Cricotopus中某些專吃植物的種類外，其余種類可分肉食性與雜食性兩大類。肉食性種類以甲殼類、寡毛類和其他搖蚊幼蟲為食。而雜食性則以細(xì)菌、藻類、水生植物和小動物為食。幼蟲的攝食方式有：粘食、濾食、沉食、采食和捕食幾種[2]。

搖蚊分布很廣，其幼蟲幾乎在任何水域中均可見到，它們適應(yīng)性亦強(qiáng)，如在海拔3200余米的青海湖、海拔4000多米的西藏阿里班公湖附近均有分布。在阿塞拜疆，一年積雪達(dá)8個月之久的哈里湖，也有羽搖蚊的棲息。大多數(shù)種類幼蟲生活在淡水中，但也有在鹽份很高的水體中生活的，如鹽生搖蚊T.gr.salinarius，它不但在氯離子濃度較高的青海湖中生存，也能在堿性蘇打型的水體中生存[2]。

2 影響搖蚊生長繁殖的主要環(huán)境因素

環(huán)境因子對搖蚊生長繁殖的影響作用是一個十分復(fù)雜的論題，表現(xiàn)為不僅因子眾多，加之在不同的底棲環(huán)境中因子有不同的影響作用，因此至今尚未有一個較全面的理解，一般文獻(xiàn)中探討的內(nèi)容主要從以下幾個方面來進(jìn)行闡述。

2.1溫度

在食物和其他環(huán)境條件適宜的條件下，升高溫度可加快搖蚊的生長發(fā)育速度，縮短周轉(zhuǎn)率[3]。溫度與世代時間呈負(fù)相關(guān)性，搖蚊完成一個世代的時間隨溫度的變化情況如圖1[4]。

2.2 溶氧

許多深水湖泊或其他遭受有機(jī)污染的水體中底質(zhì)環(huán)境的溶氧常處于相對較低水平，這對于生活在這種環(huán)境中的底棲動物來說，溶氧明顯地成為它們的限制因子。Kitagawa認(rèn)為，決定搖蚊幼蟲分布的主要因素是湖體底部的溶解氧含量[5]。也有研究發(fā)現(xiàn)，含氧量與搖蚊羽化成蟲數(shù)量呈負(fù)相關(guān)，即含氧量增高時羽化成蟲數(shù)量卻減少 [6]。有研究認(rèn)為，搖蚊幼蟲的呼吸是通過體壁從水中交換氣體的。體色血紅色的幼蟲體內(nèi)含有血紅蛋白，它比非紅色幼蟲耐缺氧，甚至在無氧條件下也能生存30~120天。這是體內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)不經(jīng)氧化分解成乳酸或脂肪酸，以釋放能量維持生命[2]。

2.3 pH值

pH值也是影響搖蚊幼蟲生長的環(huán)境因素之一。搖蚊的多數(shù)種類能生存于pH為6～8的水域，個別種類如Cacerbiphilus能生活在pH為1.4的極酸性水域中[2]。在實(shí)際的水廠生產(chǎn)中，水的pH值一般都控制在7.0~8.0，是搖蚊幼蟲生長的最佳pH值范圍，為搖蚊幼蟲的孳生提供了良好的水質(zhì)環(huán)境。

2.4底質(zhì)

無論在湖泊還是河流，底質(zhì)的特性與組成都是一個影響搖蚊幼蟲的重要環(huán)境因子。搖蚊幼蟲能夠直接利用有機(jī)物，可以認(rèn)為，水體中搖蚊幼蟲的分布在很大程度上由底質(zhì)中的有機(jī)物含量所決定，而有機(jī)物的含量在一定程度上反映了水體的富營養(yǎng)化狀態(tài)和污染水平。Lundbeak的研究成果認(rèn)為:湖泊與水庫水體中底質(zhì)中的有機(jī)質(zhì)含量決定了搖蚊幼蟲的種類組成和數(shù)量[7]。據(jù)劉建康等的資料，武漢東湖腐泥底質(zhì)中搖蚊幼蟲密度和生物量大于沙泥等其他底質(zhì)[8]。所以有機(jī)物耗氧量的年平均值與底棲動物生物量之間存在非常顯著的正相關(guān)。

轉(zhuǎn)貼于 3搖蚊幼蟲在水處理流程中的發(fā)生與分布規(guī)律

天然水體污染程度的加重，直接導(dǎo)致底棲動物多樣性明顯降低，而適應(yīng)富營養(yǎng)水體的搖蚊類水生昆蟲在水體中卻占優(yōu)勢地位，在水體富營養(yǎng)嚴(yán)重時?？砂l(fā)現(xiàn)大量的搖蚊科幼蟲。搖蚊幼蟲在水廠中的產(chǎn)生經(jīng)由兩個方面，一方面搖蚊在水源的地表水體水面產(chǎn)卵并在水中繁殖，大量的搖蚊幼蟲及蟲卵個體隨著水流進(jìn)入水處理系統(tǒng)，通過掛網(wǎng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)進(jìn)入水廠的原水中含有大量的搖蚊蟲卵及低齡的幼蟲；另一方面，搖蚊成蟲在水處理流程中的沉淀池等敞開水面產(chǎn)卵并在水中繁殖。這兩個形成因素協(xié)同作用，使得搖蚊幼蟲污染問題很難通過單一的辦法來解決。

搖蚊幼蟲孳生要有理想的筑巢場所，觀察發(fā)現(xiàn)在水處理工藝中平流沉淀池由于只有四壁可以適合幼蟲的筑巢，所以搖蚊幼蟲污染現(xiàn)象比較輕微；而對于斜板（斜管）沉淀池，由于斜板（斜管）表面粗糙，易于沉積礬花淤泥，因而搖蚊幼蟲可以在斜板（斜管）上及沉淀池的池底利用絮凝體、泥土等筑巢，以水中的藻類、有機(jī)物為食，并羽化為搖蚊成蟲；搖蚊成蟲在沉淀池池壁上產(chǎn)卵，卵孵化成幼蟲后，一些幼蟲沉入池底生長，一些就隨水流進(jìn)入濾池。由于剛孵化的幼蟲直徑僅80μm，對常規(guī)的濾池有可能穿透并進(jìn)入清水池，就可能在清水池內(nèi)進(jìn)行二次繁殖或直接進(jìn)入管網(wǎng)(如圖2所示) [9]。

4 搖蚊幼蟲污染防治技術(shù)

國內(nèi)自1996年起至今，在上海、廣州、北京和寧波等地城市供水系統(tǒng)發(fā)生了搖蚊幼蟲污染事件[10]，引起了水處理工作者的關(guān)注，一些研究者對搖蚊幼蟲污染防治技術(shù)進(jìn)行了研究，主要包括如下幾個方面。

4.1物理防治

物理防治是利用機(jī)械方法，以及聲、光、電、溫度等條件，捕殺、誘殺或驅(qū)除害蟲。近年來，在這方面研究得較多的是光電誘殺，利用蚊蟲的趨光性，用一定波長的燈光，將害蟲誘來，再用燈外的高壓電去殺，或用機(jī)電動力將蚊蟲吸入網(wǎng)內(nèi)。

抑制搖蚊成蟲產(chǎn)卵，從而可以達(dá)到控制搖蚊幼蟲數(shù)量的目的。由于水池池壁是搖蚊棲息、產(chǎn)卵的主要場所。在沉淀池面上架裝噴霧裝置來隔斷搖蚊成蟲后到水面上產(chǎn)卵的途徑，同時迫使羽化不久的成蟲翅被打濕而不能飛起、，基本上能達(dá)到杜絕搖蚊在水池池壁上產(chǎn)卵的目的[11]。

代田昭彥指出[12]，搖蚊產(chǎn)卵大體與成蟲形成蚊柱的時間一致，光強(qiáng)在300lx以上搖蚊就不再產(chǎn)卵。400W橘黃色探照燈較為合適，該光源光束集中，穿透力強(qiáng)，當(dāng)光強(qiáng)超過300lx時，光照能從很大程度上抑制搖蚊產(chǎn)卵，但還不能徹底根除[11]。

超聲波對大齡搖蚊幼蟲殺滅率隨著溶解氧濃度的提高和超聲波幅射時間的延長而上升；而且超聲波與二氧化氯、液氯之間存在著明顯的協(xié)同增效效應(yīng)，且余氯的效果要優(yōu)于二氧化氯，這可能與大齡搖蚊幼蟲身體構(gòu)造有關(guān)[13]。

由于水廠的原水中含有大量的搖蚊蟲卵及低齡的幼蟲，造成了搖蚊幼蟲在水處理工藝中富集，使物理方法不能從根本上抑制搖蚊幼蟲在水廠中的孳生，所以物理方法只能作為一種輔助手段來使用。

4.2化學(xué)防治

化學(xué)藥劑對生物的滅活作用主要是由于生物接觸藥劑后其體內(nèi)的蛋白酶遭到破壞，不能參與氧化還原系統(tǒng)的活動，代謝機(jī)能發(fā)生障礙而引起的[14]?；瘜W(xué)藥劑可通過吸附、滲透作用或直接破壞生物體壁的結(jié)構(gòu)而進(jìn)入到生物體中。藥劑氧化性能的高低導(dǎo)致其在搖蚊幼蟲滅活率方面的差異，需要有強(qiáng)氧化能力的化學(xué)藥劑、并且有足夠的作用時間，才能對其進(jìn)行有效滅活。John.C.Hoff與Edwin E.Geldreich對大腸桿菌和病原體的滅活試驗(yàn)研究表明，幾種氧化劑的氧化能力由高到低依次為：O3>ClO2>Cl2>NH2Cl，可見二氧化氯和臭氧的氧化能力高于氯氣。但是由于臭氧在水體中的分解速度較快很難保證較長時間的持續(xù)滅活能力[15]，所以盡管它的氧化能力比二氧化氯強(qiáng)，但由于有效滅活作用的接觸時間短使得它達(dá)到100％滅活率時的投藥量高于二氧化氯。

無論是二氧化氯、液氯還是過氧化氫、臭氧，只要保證在一定的投加量（表1）以上，都能在較短時間內(nèi)將搖蚊幼蟲殺滅。在幾種藥劑的對比中，現(xiàn)場發(fā)生二氧化氯的殺蟲能力最強(qiáng)，適宜的投加量很低[11]。

Michael K.Alexander曾采用美國卡爾崗公司生產(chǎn)的絮凝劑和濃度為35％的過氧化氫溶液進(jìn)行針對搖蚊幼蟲的短期和長期殺滅實(shí)驗(yàn)，得出了短期半致死濃度均為112 mg/L，長期半致死濃度分別為13 mg/L和51 mg/L [16]。

葉勁[10]進(jìn)行了過氧化氫、次氯酸鈉、高錳酸鉀、石灰水等化學(xué)藥劑噴灑和浸泡殺滅實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明：噴灑5%濃度的過氧化氫效果最佳，能在短時間內(nèi)殺死搖蚊幼蟲，而過氧化氫、次氯酸鈉的浸泡殺滅效果較佳。在成都市某水廠快濾池的生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)表明，過氧化氫實(shí)際濃度為0.23％（有效濃度），浸泡時間2h，殺滅搖蚊幼蟲效果顯著。

液氯是水處理工藝中最常用的化學(xué)氧化劑，但是搖蚊幼蟲的生物體對不良環(huán)境會產(chǎn)生一定的抗性，若連續(xù)提高投氯量會使搖蚊幼蟲對氯產(chǎn)生較強(qiáng)的抗性，所以可以采用間歇提高前加氯量的方法，使搖蚊幼蟲未來得及產(chǎn)生抗性前毒殺它們，這樣效果較顯著，且節(jié)約了氯耗。但搖蚊的蟲卵對水中余氯有較強(qiáng)的抵抗力，2mg/L的余氯量對之并無影響，在自來水中蟲卵孵化率可達(dá)95%以上[17]。

深圳水司的實(shí)踐表明，采用一定濃度的液氯浸泡沉淀池，可以長時間抑制搖蚊幼蟲的發(fā)生與孳生。但是由于液氯浸池的時間長達(dá)24h，影響了水廠的正常供水，所以這種方法可以在搖蚊幼蟲大規(guī)模爆發(fā)時采用。在不影響水廠正常生產(chǎn)的情況下，在沉淀池中投加化學(xué)氧化劑，可以利用搖蚊幼蟲在凝絮體中筑巢的生理特點(diǎn)，往往使滅活率較高。但是該方法既增加了生產(chǎn)成本，又由于加大氧化劑的投量而加劇了副產(chǎn)物的生成，給出廠水的水質(zhì)安全造成新的問題。

4.3 微生物防治

微生物防治害蟲是生物防治的一個重要組成部分。特定微生物能直接殺死害蟲，不污染環(huán)境。目前國內(nèi)外尚無微生物殺蟲劑用于飲用水的報(bào)道。1987年后期美國印第安那州的洛厄爾城發(fā)生了城市供水系統(tǒng)搖蚊幼蟲污染。洛厄爾城實(shí)施了清洗消毒等處理措施，但是沒有取得明顯的效果。他們曾嘗試?yán)锰K云金桿菌以色列變種(以下簡稱Bti)來治理，但提案被印第安那州政府否決，首先是因?yàn)锽ti尚未被批準(zhǔn)應(yīng)用在飲用水中，其次是因?yàn)樵谙嚓P(guān)法規(guī)上，不允許在飲用水中投加殺蟲劑。最后他們采用Cat-floc Ls食品級聚合物來治理，其作用是作為水絮凝劑去除搖蚊幼蟲所需的食物—硫化細(xì)菌和鐵細(xì)菌[16]。

4.4 環(huán)境防治

環(huán)境防治是通過環(huán)境改造以防止或減少害蟲的孳生繁殖。環(huán)境防治是對昆蟲生態(tài)學(xué)的實(shí)際應(yīng)用，它是根據(jù)害蟲生物學(xué)的特點(diǎn)，對害蟲生活環(huán)境治理，使之不利于害蟲的生長、繁殖，而達(dá)到防治害蟲的目的。

搖蚊幼蟲以水中的有機(jī)物碎屑、細(xì)菌及藻類為食[10]。強(qiáng)化混凝，通過投加聚丙烯酰胺助凝，控制待濾水濁度小于3NTU，可以提高原水中有機(jī)物和藻類等的去除率，減少幼蟲的食物來源，使其生活環(huán)境質(zhì)量下降，降低幼蟲的生存機(jī)率；針對搖蚊幼蟲可在沉淀池底泥中越冬生活的特點(diǎn)，增加冬季和秋季的大強(qiáng)度清洗工作，可以除去底泥中存在的搖蚊幼蟲，抑制其再度生長繁殖；加強(qiáng)濾池管理，保證濾池的正常運(yùn)行，濾池池壁要勤洗刷，對氣水反沖洗濾池的池底水區(qū)要經(jīng)常排空，以保持池體的清潔，同樣可以減少搖蚊幼蟲的滋生機(jī)率[9]。

4.5 生物操縱技術(shù)

“生物操縱”技術(shù)其內(nèi)容就是利用生態(tài)系統(tǒng)食物鏈攝取原理和生物的相生相克關(guān)系，通過改變水體的生物群落結(jié)構(gòu)來達(dá)到改善水質(zhì)恢復(fù)生態(tài)平衡的目的[18]。搖蚊幼蟲是多數(shù)經(jīng)濟(jì)魚類的優(yōu)良天然餌料，在浮游階段時，可被不少幼魚攝取；當(dāng)轉(zhuǎn)入底棲時，則是底層魚類鯉、鯽、青魚等的良好鉺料。魚類屬于水生生態(tài)系統(tǒng)中食物網(wǎng)的頂級消費(fèi)者，放養(yǎng)大型不同食性的魚類，勢必影響魚類的群落結(jié)構(gòu)，并對其他生物群落，特別對餌料生物群落產(chǎn)生極大的影響，進(jìn)而影響整個生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能[19]。所以利用生物種群間的捕食關(guān)系，從生態(tài)學(xué)的角度入手，可以通過生物操縱技術(shù)來抑制搖蚊幼蟲的滋生。

周令等人[11]對原水前加氯的情況下沉淀池養(yǎng)魚的可行性進(jìn)行了試驗(yàn)研究，試驗(yàn)魚種采用鯽魚魚苗。結(jié)果表明：(1)沉淀水余氯＜1.0mg/L，魚苗在沉淀水中生長良好，沒有出現(xiàn)不適應(yīng)癥狀；(2)魚喜食搖蚊幼蟲特別是老齡紅蟲，有利于滅蚊和控制紅蟲數(shù)量；(3)幾種魚類配合放養(yǎng)，使魚在沉淀池中呈立體分布，有利于消滅不同生活習(xí)性的各發(fā)育階段的搖蚊幼蟲；(4)放養(yǎng)魚苗的沉淀池出水濁度及氨氮含量與未放養(yǎng)魚沉淀池出水相差不大，說明魚的正?；顒蛹捌渑判刮锊粫绊懗恋硇Ч?。

沉淀池養(yǎng)魚由于可操作性差，有一定的局限性，但此方法可在水源中使用以控制原水中的搖蚊幼蟲及蟲卵。在水體中實(shí)施以生態(tài)治理為目的的魚類放養(yǎng)，其放養(yǎng)的生物量應(yīng)遠(yuǎn)低于以提高魚產(chǎn)量為目標(biāo)的水體漁業(yè)養(yǎng)殖中的高密度放養(yǎng)量。在微型生態(tài)系統(tǒng)中魚類放養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明，在放養(yǎng)生物量為30g/m3的條件下，水體中的氮、磷等營養(yǎng)物質(zhì)得到了一定程度的去除，有機(jī)物的指標(biāo)下降、溶解氧的濃度有所提高，浮游植物藻類尤其是藍(lán)、綠藻的生物量也被控制在較低的水平，有效地控制和緩解了水體富營養(yǎng)化的進(jìn)程?！吧锊倏v”技術(shù)可以在水體生態(tài)治理中發(fā)揮重要作用，這也是解決水處理工藝中搖蚊幼蟲污染問題的重要途徑之一。

總之，單憑某一種物理、化學(xué)或生物的方法還不能對城市給水處理過程中搖蚊幼蟲的孳生進(jìn)行卓有成效的控制，必須各種方法兼用，互相滲透，多級設(shè)防，多層屏障，貫穿于整個凈水廠凈水工藝系統(tǒng)中。

5研究展望

水處理過程中搖蚊幼蟲污染問題的研究，目前仍處于探索階段，今后應(yīng)從以下幾個方面進(jìn)行深入研究，以期早日實(shí)現(xiàn)搖蚊幼蟲污染防治的系統(tǒng)化，確保飲用水的安全。

5.1進(jìn)行傳統(tǒng)制水工藝的各凈水單元對搖蚊幼蟲去除的特性研究，了解搖蚊幼蟲在工藝中的孳生規(guī)律及機(jī)理，以指導(dǎo)水廠在其暴發(fā)期間采取強(qiáng)化工藝或應(yīng)急措施。

5.2進(jìn)行搖蚊幼蟲在飲用水深度處理工藝(如紫外—臭氧氧化、膜濾、臭氧—生物活性炭等)中的去除規(guī)律及機(jī)理研究，為水廠采用深度處理工藝去除搖蚊幼蟲污染提供理論指導(dǎo)。

5.3從生態(tài)學(xué)角度出發(fā)，研究搖蚊幼蟲、魚類、營養(yǎng)物質(zhì)水平之間的關(guān)系，建立有效的生物控制方法。

水處理工藝中搖蚊幼蟲污染控制是一項(xiàng)復(fù)雜的系統(tǒng)工程，應(yīng)結(jié)合污染的實(shí)際狀況采取適當(dāng)?shù)拇胧?，把水源水富營養(yǎng)化控制與凈水處理工藝有機(jī)地結(jié)合起來。從長遠(yuǎn)來看，強(qiáng)化水源水體的保護(hù)與管理，對已被污染的水源采取有效方法治理，是解決飲用水搖蚊幼蟲污染乃至水體富營養(yǎng)化的根本措施。

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