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篇1

（青海省果洛州久治縣獸醫(yī)站 624700）

摘要：免疫副反應(yīng)是動(dòng)物強(qiáng)制免疫時(shí)經(jīng)常發(fā)生的，是阻礙免疫工作順利進(jìn)行的“絆腳石”。應(yīng)對(duì)其原因進(jìn)行分析，通過(guò)狠抓疫苗管理，規(guī)范免疫操作，增強(qiáng)畜禽體質(zhì)，提高人員素質(zhì)等措施，有效減少免疫副反應(yīng)。

關(guān)鍵詞 ：動(dòng)物；強(qiáng)制免疫；副反應(yīng)；原因；處理方法

動(dòng)物疫苗免疫接種是有效預(yù)防和控制動(dòng)物疫病的發(fā)生，保護(hù)畜禽健康的重要途徑，但疫苗免疫接種時(shí)，常常出現(xiàn)各種不良副反應(yīng)，有甚者得不到有效診治常導(dǎo)致死亡，給養(yǎng)殖戶造成免疫恐懼心理，并導(dǎo)致一定的經(jīng)濟(jì)損失，致使免疫接種工作開(kāi)展不順利，甚至出現(xiàn)拒防等現(xiàn)象。因此加強(qiáng)對(duì)免疫副反應(yīng)的原因分析，并探索處理辦法對(duì)提升動(dòng)物免疫接種質(zhì)量，保護(hù)動(dòng)物健康有著重要的意義。

1 強(qiáng)制免疫副反應(yīng)的原因

1.1 疫苗本身的因素

接種活性動(dòng)物疫苗后，活毒株在動(dòng)物體內(nèi)繁殖、復(fù)制，并出現(xiàn)輕微的自然感染的臨床癥狀。同時(shí)在疫苗生產(chǎn)的過(guò)程中，需要添加其他物質(zhì)，如果不能除盡，這些殘留常會(huì)出現(xiàn)免疫接種后的副反應(yīng)。

1.2 疫苗保管及使用不當(dāng)

各種疫苗對(duì)運(yùn)輸條件有不同要求，運(yùn)輸時(shí)要按照要求和規(guī)定經(jīng)銷、保存與運(yùn)輸。除此使用不當(dāng)也是疫苗發(fā)生副反應(yīng)的重要的因素，各種疫苗的稀釋劑和稀釋方法都各不相同，在操作前應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書，按照要求進(jìn)行使用。

1.3 疫苗接種方法不當(dāng)

對(duì)動(dòng)物的免疫接種方法很多，有皮下、肌肉、飲水等，接種時(shí)不能按照要求進(jìn)行，出現(xiàn)接種失敗。肌注免疫時(shí)出現(xiàn)“飛針”情況，疫苗沒(méi)有注射進(jìn)去或流失，會(huì)造成注射量不足。飲水免疫時(shí)，要提前3個(gè)小時(shí)停止供水，使用非金屬飲水器皿而且要避免陽(yáng)光直射；接種部位不正確導(dǎo)致疫苗不能發(fā)揮有效作用；消毒不嚴(yán)，接種時(shí)不能做到一畜一針極易引發(fā)傳染?。辉诮臃N前未對(duì)接種疫苗進(jìn)行檢查，注射過(guò)期或性狀改變的疫苗，直接注射后引發(fā)動(dòng)物應(yīng)激等副反應(yīng)。

1.4 免疫程序因素

制定科學(xué)合理的免疫程序是實(shí)施有效防疫工作的重要環(huán)節(jié)，如免疫程序不合理直接會(huì)導(dǎo)致免疫失敗，如免疫程序不科學(xué)不合理、免疫的時(shí)機(jī)選擇不當(dāng)，直接對(duì)免疫的效果產(chǎn)生較大的影響。過(guò)早免疫接種，受母源抗體干擾，導(dǎo)致免疫失敗；過(guò)遲接種，會(huì)出現(xiàn)免疫空白期，易造成豬群發(fā)病。同時(shí)進(jìn)行多種疫苗免疫，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)疫苗間相互抑制的現(xiàn)象，從而形成疫苗的免疫失敗。

1.5 應(yīng)激因素

動(dòng)物機(jī)體的免疫功能在一定程度上受到神經(jīng)、體液和內(nèi)分泌的調(diào)節(jié)。在氣候突變、濕度過(guò)大、通風(fēng)不良、噪音、環(huán)境和飼料的改變等應(yīng)激因素的影響下，給動(dòng)物接種疫苗，會(huì)引起機(jī)體細(xì)胞介導(dǎo)免疫功能下降，使豬的免疫應(yīng)答能力減弱，從而降低豬的抗體水平。遭遇溫度驟變，噪音、濕度過(guò)大或發(fā)霉飼料等各種刺激都能是動(dòng)物體產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致免疫失敗。

1.6 疾病及個(gè)體因素

動(dòng)物接種疫苗時(shí)，已處于疾病潛伏期或存在嚴(yán)重寄生蟲感染，導(dǎo)致接種疫苗后動(dòng)物迅速發(fā)病。有些接種對(duì)象由于健康狀況、品種或處于某種病理生理狀態(tài)，接種疫苗后，常導(dǎo)致免疫副反應(yīng)發(fā)生。

2 處理方法

2.1 嚴(yán)格選購(gòu)疫苗

疫苗旨在經(jīng)免疫使畜禽產(chǎn)生特異性抗體，產(chǎn)生免疫效果。疫苗本身質(zhì)量是導(dǎo)致免疫副反應(yīng)產(chǎn)生的重要因素。選擇有生產(chǎn)資質(zhì)、有生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)的疫苗生產(chǎn)廠，選擇疫苗質(zhì)量穩(wěn)定、免疫質(zhì)量好、副反應(yīng)發(fā)生幾率小、疫苗價(jià)格適宜的企業(yè)，確保疫苗質(zhì)量。

2.2 加強(qiáng)疫苗管理

疫苗如保存和運(yùn)輸不恰當(dāng)均會(huì)導(dǎo)致疫苗的變質(zhì)和效價(jià)降低，對(duì)畜禽機(jī)體產(chǎn)生刺激，增大了免疫副反應(yīng)。因此要重視疫苗管理，嚴(yán)格疫苗儲(chǔ)藏環(huán)境，根據(jù)不同疫苗的種類和貯存，設(shè)置不同的貯存環(huán)境，避免因貯存不當(dāng)而失敗。同時(shí)要嚴(yán)防高溫和陽(yáng)光照射。在疫苗使用過(guò)程中不得與消毒劑接觸，并注意檢查和記錄疫苗的貯存情況，在領(lǐng)用時(shí)要做好記錄，確保疫苗在有效期內(nèi)使用。運(yùn)輸時(shí)要按要求使用冷藏車運(yùn)輸?shù)剿璧貐^(qū)。動(dòng)物防疫人員要做好保存工作，備用的疫苗要按要求進(jìn)行冰箱儲(chǔ)備，外出接種的疫苗要放置在有冰塊的保溫盒中。從出廠到疫苗的使用要做到冷鏈不斷，確保疫苗價(jià)效。

2.3 規(guī)范免疫行為

免疫接種時(shí)選擇良好的天氣，避免高熱和寒冷或氣候突變時(shí)進(jìn)行免疫接種，盡量減少氣候原因帶來(lái)的免疫副反應(yīng)；在注射免疫時(shí)根據(jù)畜禽的種類、大小、體重選擇適合的針頭進(jìn)行注射，避免因針頭過(guò)短、過(guò)長(zhǎng)對(duì)畜禽產(chǎn)生刺激，誘發(fā)免疫副反應(yīng)的發(fā)生。

2.4 嚴(yán)格器械消毒

免疫器械的衛(wèi)生潔凈也是影響免疫接種的重要因素，在免疫接種時(shí)要對(duì)注射器和針頭進(jìn)行消毒處理，并確保使用過(guò)程中的潔凈衛(wèi)生。使用后的針頭應(yīng)與未用的針頭分別放置，做到一畜一針頭，嚴(yán)格注射部位消毒，減少因免疫注射帶來(lái)的免疫副反應(yīng)。

篇2

關(guān)鍵詞：強(qiáng)制免疫；現(xiàn)狀；措施；縉云縣

中圖分類號(hào)：S851.33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1007-273X（2013）09-0082-01

隨著畜牧業(yè)發(fā)展的需要，畜禽養(yǎng)殖規(guī)?；潭纫膊粩嗵岣?。但是，如果一旦發(fā)生重大傳染性疫病，將給養(yǎng)殖戶造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，如何做好畜禽規(guī)模養(yǎng)殖的疫病防治工作，已成為所有養(yǎng)殖場(chǎng)戶中最重要的問(wèn)題。免疫是防控重大動(dòng)物疫病的關(guān)鍵所在，目前，我縣對(duì)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的重大動(dòng)物疫病實(shí)行強(qiáng)制免疫，采取自防和防疫監(jiān)督相結(jié)合的工作方法，由于種種主觀和客觀原因的存在，往往達(dá)不到預(yù)期的效果。為此，筆者簡(jiǎn)要談一下自己的看法，希望對(duì)廣大養(yǎng)殖戶有所借鑒。

1 縉云縣規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)強(qiáng)制免疫的現(xiàn)狀及問(wèn)題

（1）養(yǎng)殖場(chǎng)戶防疫意識(shí)淡薄?？N云縣縣以中小型養(yǎng)殖場(chǎng)偏多，而這些養(yǎng)殖場(chǎng)中的業(yè)主文化水平和技術(shù)素質(zhì)普遍不高，并且沒(méi)有配備專職的畜牧獸醫(yī)技術(shù)人員，重大動(dòng)物疫病防疫意識(shí)淡薄，存在僥幸和懶惰心理，弄虛作假現(xiàn)象嚴(yán)重。

（2）動(dòng)物防疫現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督不到位。根據(jù)規(guī)定，養(yǎng)殖場(chǎng)戶對(duì)畜禽進(jìn)行免疫時(shí)，動(dòng)物防疫監(jiān)督員必須到場(chǎng)指導(dǎo)和監(jiān)督，以確保免疫措施全面得到落實(shí)。實(shí)踐證明，有的鄉(xiāng)鎮(zhèn)畜禽規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)分布分散和偏遠(yuǎn)，畜主又沒(méi)有及時(shí)通知等原因，有時(shí)不能及時(shí)到場(chǎng)有效地進(jìn)行技術(shù)指導(dǎo)和監(jiān)督，導(dǎo)致動(dòng)物防疫到場(chǎng)監(jiān)督形同虛設(shè)。經(jīng)過(guò)調(diào)查研究，筆者認(rèn)為實(shí)行動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督員親臨免疫現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督這做法有侍進(jìn)一步探討。

（3）許多縣市對(duì)動(dòng)物產(chǎn)地檢疫工作并沒(méi)有全面開(kāi)展，同時(shí)個(gè)別檢疫人員出證行為不規(guī)范等問(wèn)題，達(dá)不到“以檢促防”的目的，導(dǎo)致了對(duì)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的強(qiáng)制免疫行為缺乏有效監(jiān)督和約束。

（4）基層動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督執(zhí)法力量薄弱，沒(méi)有嚴(yán)格按《動(dòng)物防疫法》執(zhí)行，導(dǎo)致某些養(yǎng)殖場(chǎng)業(yè)主不重視。

2 建議

（1）加強(qiáng)對(duì)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)戶的技術(shù)培訓(xùn)。通過(guò)講座、短期學(xué)習(xí)和專業(yè)進(jìn)修等方法，認(rèn)真學(xué)習(xí)畜牧獸醫(yī)專業(yè)技術(shù)知識(shí)和《動(dòng)物防疫法》等法律法規(guī)，以提高養(yǎng)殖戶的專業(yè)技術(shù)水平和動(dòng)物防疫法律意識(shí)。

（2）改規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)自防為村級(jí)動(dòng)物防疫員統(tǒng)一防疫。這一做法的好處是，能真正做到強(qiáng)制免疫工作的主動(dòng)性，真正做到免疫密度達(dá)100%，免疫規(guī)范操作有利于進(jìn)一步提升免疫質(zhì)量，同時(shí)減少疫苗運(yùn)輸、保存、使用的中間環(huán)節(jié)和減少疫苗的人為性浪費(fèi)，提高免疫效果，以真正達(dá)到有效地控制重大動(dòng)物疫病發(fā)生的目的。同時(shí)可以通過(guò)對(duì)畜禽采血樣進(jìn)行抗體水平的監(jiān)測(cè)來(lái)驗(yàn)證免疫效果。

篇3

關(guān)鍵詞：動(dòng)物免疫；疫苗冷藏使用；接種時(shí)注意事項(xiàng)

動(dòng)物傳染病，是養(yǎng)殖業(yè)的勁敵。若動(dòng)物染上疫病，將會(huì)對(duì)人畜構(gòu)成危害，影響到商貿(mào)流通、社會(huì)穩(wěn)定。給養(yǎng)殖戶帶來(lái)的損失是巨大的，因此，動(dòng)物的防疫工作就顯得尤為重要與迫切。

一、搞好動(dòng)物免疫工作

1、重視免疫工作。

防控重大動(dòng)物疫病的有效措施是免疫，免疫是避免和減少動(dòng)物疫情發(fā)生的關(guān)鍵。切實(shí)搞好免疫工作，有效防止重大動(dòng)物疫病的發(fā)生，保護(hù)畜牧業(yè)的健康發(fā)展與公共衛(wèi)生安全。做好重點(diǎn)時(shí)期、重點(diǎn)地區(qū)與環(huán)節(jié)的動(dòng)物免疫，做好口蹄疫、禽流感、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟、布魯氏桿菌病、狂犬病、新城疫等免疫接種。

要堅(jiān)持實(shí)行散養(yǎng)農(nóng)戶春秋集中防疫與日常補(bǔ)針相結(jié)合；規(guī)模集約化養(yǎng)殖場(chǎng)常年按照免疫程序的做法，對(duì)新入欄、病后已健康、產(chǎn)后孕畜、仔畜均要進(jìn)行適時(shí)補(bǔ)免；種豬配種、仔豬斷奶前要進(jìn)行高致病性藍(lán)耳病強(qiáng)化免疫。重點(diǎn)做好種畜禽場(chǎng)、養(yǎng)殖大戶、規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)以及農(nóng)戶散養(yǎng)動(dòng)物的免疫，以提高免疫密度與質(zhì)量。盡量做到免疫到位，不留空當(dāng)，以防漏免引發(fā)疫情。

疫苗免疫是對(duì)動(dòng)物疫病采用的主要有效防控方法。疫苗的種類很多，當(dāng)前使用的疫苗主要有兩類：

（1）滅活苗，比如高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病疫苗等；

（2）弱毒苗，比如雞新城疫、豬瘟疫苗等。根據(jù)種類不同的動(dòng)物，疫病種類，科學(xué)選疫苗，并接種，真正發(fā)揮疫苗的免疫保護(hù)效果，使疫病減少發(fā)生且最終達(dá)到消滅疫病。

2、免疫前準(zhǔn)備。

動(dòng)物在進(jìn)行免疫接種前，要充分了解動(dòng)物的數(shù)量、日齡、體重、免疫與否、營(yíng)養(yǎng)水平、健康狀況、飼養(yǎng)管理、衛(wèi)生消毒、場(chǎng)地清潔等。注意以下幾點(diǎn)：

（1）對(duì)健康動(dòng)物免疫接種；

（2）依據(jù)往年免疫經(jīng)驗(yàn)、免疫程序與當(dāng)?shù)貏?dòng)物疫病流行情況等進(jìn)行接種；

（3）按照疫苗說(shuō)明書使用疫（菌）苗，禁止隨意增量或減量，更不得憑經(jīng)驗(yàn)亂用疫苗。

選擇合適的免疫時(shí)間，對(duì)免疫效果影響較大。要對(duì)動(dòng)物進(jìn)行適時(shí)的疫苗接種，以防動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng)，保證疫苗效果，比如免疫接種豬牛羊選擇在夏暑季涼爽的早晚為宜，冬春寒冷選擇午暖時(shí)進(jìn)行。刮大風(fēng)、雨雪天氣突變時(shí)免疫要停止，待天氣好轉(zhuǎn)時(shí)再免。夏季免疫，要避免陽(yáng)光照射與高溫環(huán)境。對(duì)禽類在夜晚進(jìn)行免疫為宜，免疫時(shí)應(yīng)激小。

二、疫苗的保管與使用

1、要按照說(shuō)明書的規(guī)定嚴(yán)格保管存放疫苗。通常滅活疫苗，或者是液體狀得疫苗，要在2～8℃條件下進(jìn)行冷藏保存，疫苗不能凍結(jié)；弱毒苗或者是呈凍干固態(tài)狀疫苗，要在-15℃～-20℃條件下保存。滅活疫苗、弱毒活疫苗，保存的溫度均要恒溫，忌忽冷忽熱，切斷電源。疫苗在運(yùn)輸過(guò)程中，要保持相應(yīng)的恒溫，或按疫苗的說(shuō)明書保存。

2、疫苗在使用前，要對(duì)疫苗的名稱、廠家、批號(hào)、有效期、貯藏條件等進(jìn)行檢查。核實(shí)使用說(shuō)明書與瓶簽標(biāo)示的內(nèi)容是否一致。搞清楚裝量、每頭劑量、使用方法及注意事項(xiàng)，并嚴(yán)格遵守。對(duì)過(guò)期、無(wú)批號(hào)、失真空及變色、有沉淀或瓶塞松動(dòng)、瓶身破裂等現(xiàn)象或不明來(lái)源的疫苗禁止使用。

3、使用。

滅活疫苗在使用前2小時(shí)左右從冰柜或冷藏室取出，使用時(shí)要充分搖勻，在使用過(guò)程中要保持勻質(zhì)。要24小時(shí)內(nèi)用完在疫苗啟封后，過(guò)期禁用。凍干茁在使用前需要稀釋，每種疫苗對(duì)使用的稀釋劑，稀釋倍數(shù)及方法都有一定的要求，要嚴(yán)格按照規(guī)定處理，要優(yōu)先使用專用的稀釋液，無(wú)專用的可用生理鹽水或蒸餾水等代替。

疫苗要現(xiàn)配現(xiàn)用，使用注射法免疫時(shí)，要當(dāng)天打開(kāi)滅活苗且當(dāng)天用完。弱毒苗稀釋后，要放置冷暗處并在2小時(shí)內(nèi)用完。

三、接種時(shí)的注意事項(xiàng)

1、使用前要檢查疫苗的質(zhì)量，如顏色、包裝、有效期、批號(hào)，瓶口和膠蓋封閉有無(wú)完好，瓶子有無(wú)裂紋，瓶?jī)?nèi)有無(wú)異物；

2、對(duì)疫苗的說(shuō)明書要認(rèn)真閱讀，疫苗種類不同，其性能、用法、用量、不良反應(yīng)、注意事項(xiàng)各不相同，要按說(shuō)明書上對(duì)所用疫苗的性能、用途、用法、接種方法進(jìn)行全面了解，按瓶簽規(guī)定的要求嚴(yán)格接種。

3、疫苗稀釋要用規(guī)定的稀釋液，按規(guī)定稀釋，通常細(xì)菌性疫苗用鋁膠水或鋁膠生理鹽水稀釋，病毒性疫苗用專用稀釋液或生理鹽水稀釋；禁止用熱水、溫水或含氯等消毒劑的水稀釋。

4、疫苗要現(xiàn)用現(xiàn)配，稀釋好的疫苗爭(zhēng)取在最短的時(shí)間（2小時(shí)）內(nèi)接種完畢，要一次用完。若免疫時(shí)間如超過(guò)2小時(shí)或半天，必須將疫苗液放在4℃冰箱內(nèi)暫時(shí)貯存，若無(wú)條件也要放有冰袋或冰塊。

5、對(duì)注射免疫時(shí)注射用具要嚴(yán)格消毒，并做到一針一用，以防交叉感染，禁止使用粗短針頭與打飛針。

6、不能兩種疫苗混合使用，若同時(shí)注射兩種疫苗時(shí)，要分開(kāi)部位進(jìn)行。

7、用飲水免疫時(shí)，飲水中嚴(yán)禁混入消毒藥，且不能含有漂白粉等能殺滅或抑制疫苗活力的有毒化學(xué)物質(zhì)，禁用金屬容器。

8、注射細(xì)菌性疫苗后1周內(nèi)不要使用各種抗生素藥，注射病毒性疫苗后2天內(nèi)不能使用各種抗病毒藥。因?yàn)榫哂幸种谱饔谩?/p>

9、要注意疫苗的使用方法，若雞痘、喉氣管等需刺種或抹攛的不能肌注。

10、患病豬不能注射疫苗，病愈后再補(bǔ)注。

11、若注射疫苗出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)時(shí)，要馬上用腎上腺素等抗過(guò)敏藥物搶救。

篇4

關(guān)鍵詞：動(dòng)物；傳染?。环酪?；措施

動(dòng)物疫病是影響?zhàn)B殖業(yè)健康發(fā)展的大害，它能引起大批動(dòng)物發(fā)病死亡和動(dòng)物產(chǎn)品的損失，影響動(dòng)物及其產(chǎn)品的安全，造成環(huán)境污染。動(dòng)物防疫工作是一項(xiàng)技術(shù)性和實(shí)效性很強(qiáng)的工作，其目的就是利用科學(xué)的技術(shù)手段，采取綜合性防疫措施，有效預(yù)防、控制、撲滅和消滅動(dòng)物疫病，提高動(dòng)物健康水平和動(dòng)物產(chǎn)品的衛(wèi)生質(zhì)量。

1 江城縣動(dòng)物疫病防治現(xiàn)狀

長(zhǎng)期以來(lái)，我縣的動(dòng)物防疫工作堅(jiān)持以“預(yù)防為主”的方針和“因病設(shè)防、突出重點(diǎn)、科學(xué)免疫、綜合防制、分級(jí)負(fù)責(zé)、協(xié)同作戰(zhàn)、規(guī)范管理、講求實(shí)效”的原則，積極落實(shí)各項(xiàng)任務(wù)，取得了較好的效果。

1.1 行政推動(dòng)措施得力 動(dòng)物防疫作為確保畜產(chǎn)品安全和社會(huì)穩(wěn)定的重要內(nèi)容得到了各鄉(xiāng)鎮(zhèn)和畜牧部門的高度重視并納入重要議事日程，在加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)、落實(shí)政策、目標(biāo)管理等方面采取了切實(shí)可行的措施?？h政府成立了“江城縣重大動(dòng)物疫病防治指揮部”，下發(fā)了《江城縣重大動(dòng)物疫情應(yīng)急預(yù)案》，全縣51個(gè)行政村都配備了村獸醫(yī)防疫員。

1.2 動(dòng)物疫病防制工作進(jìn)展有序 豬、雞“兩瘟”的防疫密度達(dá)到了88.8%和80.2%，牛、羊、豬、五號(hào)病的免疫密度也達(dá)到88.6%、50%、60.4%，同時(shí)有針對(duì)性的加強(qiáng)了疫病監(jiān)控和免疫等措施，切斷了疫病傳播途徑，做到了有備無(wú)患，提高了我縣動(dòng)物防疫滅病的能力，建立了嚴(yán)格的免疫檔案和免疫標(biāo)記制度，并指定專人負(fù)責(zé)疫苗、耳標(biāo)、耳號(hào)鉗、打孔鉗的發(fā)放及管理工作，規(guī)范了免疫檔案和耳標(biāo)管理，建立健全了縣、鄉(xiāng)、村三級(jí)動(dòng)物疫情監(jiān)測(cè)報(bào)告網(wǎng)，指定專人做疫情的收集、匯總、分析和報(bào)告工作，為全縣動(dòng)物防疫工作提供全面、準(zhǔn)確的信息。

1.3 抓緊了動(dòng)物防疫監(jiān)督和檢疫工作 實(shí)行了強(qiáng)制免疫標(biāo)識(shí)管理，把產(chǎn)地檢疫、屠宰檢疫、運(yùn)輸檢疫、監(jiān)督檢查緊密結(jié)合起來(lái)，并在江城縣整康公路動(dòng)物防疫監(jiān)督檢查站設(shè)卡，對(duì)運(yùn)載動(dòng)物及其動(dòng)物產(chǎn)品的過(guò)往車輛嚴(yán)格查證驗(yàn)標(biāo)、點(diǎn)物及登記，使全縣開(kāi)展產(chǎn)地檢疫的鄉(xiāng)鎮(zhèn)達(dá)到了 100 %，開(kāi)展產(chǎn)地檢疫的村達(dá)到了 30 %以上。

1.4 獸藥監(jiān)督和飼料監(jiān)控管理水平有新的提高 畜牧部門采用多種形式加大對(duì)《獸藥管理?xiàng)l例》、《飼料管理?xiàng)l例》及配套法規(guī)的宣傳力度，做了獸藥、飼料的抽檢工作，嚴(yán)厲查處了無(wú)證經(jīng)營(yíng)制售假冒偽劣獸藥和在飼料中亂添濫用違禁獸藥和飼料添加劑的違法行為，進(jìn)一步規(guī)范和凈化了獸藥飼料市場(chǎng)。

2 動(dòng)物疫病防治應(yīng)采取的措施

2.1 貫徹“預(yù)防為主”的方針 在防疫工作中始終貫徹“預(yù)防為主”的方針，采取“養(yǎng)、防、檢、治”等諸環(huán)節(jié)的綜合性防治措施；有效控制動(dòng)物疫病。對(duì)于動(dòng)物疫病，首要的是防止其發(fā)生與流行。預(yù)防工作做好了，可做到事半功倍的效果。動(dòng)物疫病在防疫方面有其共同的規(guī)律，只要通過(guò)控制傳染源、切斷傳播途徑和增強(qiáng)動(dòng)物的免疫力3個(gè)方面進(jìn)行綜合防控，就能取得良好的成效。

控制、撲滅動(dòng)物疫病，要因時(shí)因地制宜。獸醫(yī)防治人員須根據(jù)每種傳染病在不同時(shí)間、地區(qū)的具體流行特點(diǎn)采取相應(yīng)措施。動(dòng)物傳染病是在病原微生物侵入機(jī)體以后，機(jī)體抵抗力減弱而發(fā)生的。傳染病的流行有3個(gè)環(huán)節(jié)：傳染來(lái)源、傳播途徑及易感動(dòng)物。這3個(gè)環(huán)節(jié)聯(lián)結(jié)在一起，才能引起傳染病的流行。預(yù)防和控制、撲滅動(dòng)物傳染病，應(yīng)針對(duì)些環(huán)節(jié)和條件，采取相應(yīng)的措施。

2.2 及時(shí)報(bào)告疫情與動(dòng)物檢疫 預(yù)防、控制、撲滅動(dòng)物傳染病，首先要了解疫情。只有掌握疫情，才能為制訂有效的防疫措施提供可靠的依據(jù)。了解疫情、掌握疫情，是控制、撲滅動(dòng)物疫病的首要條件，是控制、撲滅動(dòng)物疫病工作必須首先解決的問(wèn)題。

掌握疫情的基本要求，概括起來(lái)是“快、準(zhǔn)、全”等三個(gè)方面。發(fā)現(xiàn)疫情盡早向上級(jí)主管部門報(bào)告，及時(shí)做出正確診斷，迅速采取控制和撲滅措施；動(dòng)物檢疫是預(yù)防動(dòng)物疫病發(fā)生，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫病，防止動(dòng)物疫病擴(kuò)散蔓延，以及防止疫病傳人、傳出的重要措施。養(yǎng)殖人員應(yīng)對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)所、圈舍及設(shè)備有充分的了解，對(duì)動(dòng)物群體健康狀況要心中有數(shù)，每天進(jìn)行認(rèn)真檢查，發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)及時(shí)報(bào)告和正確處理，做到及早發(fā)現(xiàn)問(wèn)題和解決問(wèn)題，并采取相應(yīng)的措施，防止疫病的發(fā)生與傳播。對(duì)畜禽要勤觀察，并按當(dāng)?shù)匾咔槎ㄆ跈z查，可采取臨床檢查和必要的血清學(xué)反應(yīng)和變態(tài)反應(yīng)方法等。把檢出的患病動(dòng)物和健康動(dòng)物分開(kāi)飼養(yǎng)以控制傳染源，防止疫情繼續(xù)擴(kuò)大，將疫情限制在最小范圍內(nèi)就地?fù)錅纭Ｍ瑫r(shí)也便于對(duì)有病動(dòng)物的治療和對(duì)健康動(dòng)物實(shí)施緊急免疫接種等防疫措施。新引進(jìn)動(dòng)物應(yīng)堅(jiān)持從非疫區(qū)購(gòu)買，并經(jīng)過(guò)免疫接種，免疫接種證明在有效期內(nèi)，有檢疫證明的動(dòng)物方可引進(jìn)。把新引進(jìn)的動(dòng)物放入隔離舍內(nèi)進(jìn)行觀察，各種傳染病的最長(zhǎng)潛伏期的期限，一般為1個(gè)月。觀察期滿，確認(rèn)健康時(shí)，才能與原有的動(dòng)物合群飼養(yǎng)。

2.3 預(yù)防接種和藥物預(yù)防 在規(guī)模化集約化養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)數(shù)量大、相對(duì)密度高，隨時(shí)都有可能受到傳染病的威脅與侵襲。為了防患于未然，在平時(shí)就要有計(jì)劃地對(duì)健康動(dòng)物群進(jìn)行免疫接種，目前疫苗種類多、免疫方法各不相同，被接種的動(dòng)物經(jīng)一定時(shí)間的免疫力。根據(jù)免疫接種進(jìn)行的時(shí)機(jī)不同，可以分為預(yù)防接種和緊急接種兩類。

2.3.1 預(yù)防接種 預(yù)防接種是為了預(yù)防某些傳染病的發(fā)生和流行，平時(shí)有計(jì)劃地給健康動(dòng)物進(jìn)行的免疫接種。預(yù)防接種通常使用免疫原如疫苗、菌苗、類毒素等。免疫原接種后出現(xiàn)免疫力較慢，一般在接種后1～3周才產(chǎn)生，但維持時(shí)間較長(zhǎng)，可達(dá)半年至數(shù)年。―般而言，活疫（菌）苗接種后免疫力產(chǎn)生快，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)；滅活疫（菌）苗接種后，免疫力產(chǎn)生慢，持續(xù)時(shí)間短。

2.3.2 緊急接種 緊急接種是在發(fā)生傳染病時(shí)，為迅速控制和撲滅疫病的流行，而對(duì)疫區(qū)和受威脅區(qū)尚未發(fā)病的動(dòng)物進(jìn)行的免疫接種。在疫區(qū)用疫苗作緊急接種前，必須對(duì)動(dòng)物逐頭逐只地詳細(xì)觀察和檢查，只能對(duì)沒(méi)有臨床癥狀的動(dòng)物進(jìn)行緊急接種，對(duì)患病動(dòng)物及處于潛伏期的動(dòng)物，應(yīng)立即隔離治療或撲殺。如果患病動(dòng)物和潛伏期的動(dòng)物按種疫苗后，不僅不能得到保護(hù)，反而促進(jìn)其發(fā)病，造成損失。

防治動(dòng)物疫病除正確和合理應(yīng)用疫（菌）苗預(yù)防外，使用藥物進(jìn)行防治也是不可忽視的一項(xiàng)措施。同時(shí)，有許多藥物對(duì)動(dòng)物有調(diào)節(jié)代謝、促進(jìn)生長(zhǎng)、改善消化吸收、提高飼科利用率等作用.成為科學(xué)養(yǎng)畜、提高生產(chǎn)效益的重要手段之一，所以越來(lái)越多的藥物被用于養(yǎng)殖業(yè)中。

篇5

【摘要】 目的：研究以重組復(fù)制缺陷型腺病毒為載體的Fas配體（FasLigand，即FasL）基因和白細(xì)胞介素10（即IL10）基因治療實(shí)驗(yàn)性自身免疫性感音神經(jīng)性聾。方法：采用同種內(nèi)耳組織抗原加弗氏佐劑免疫豚鼠，造成自身免疫性感音神經(jīng)性聾的動(dòng)物模型28只，按配對(duì)設(shè)計(jì)將其分為4組，通過(guò)鼓階微量注射的方式，A組注入攜帶FasL基因的腺病毒（AdFasL），B組注入攜帶IL10基因的腺病毒（AdIL10），C組單純注入腺病毒（攜帶綠色熒光蛋白，即AdGFP），D組注入等量的磷酸鹽緩沖液?；?qū)? d后行聽(tīng)覺(jué)腦干誘發(fā)電位（ABR）測(cè)試，后取顳骨制作石蠟切片并行HE染色和光鏡觀察，每組各取兩耳行螺旋韌帶和基底膜透射電鏡觀察。每組各取3只（6耳）行免疫熒光和酶免疫組織化學(xué)試驗(yàn)，以檢測(cè)基因產(chǎn)物表達(dá)和腺病毒轉(zhuǎn)染情況。結(jié)果：免疫組織化學(xué)顯示攜帶目的基因的腺病毒可以轉(zhuǎn)染血管紋、螺旋韌帶、Corti器、螺旋神經(jīng)節(jié)、蝸軸小血管周圍及其耳蝸的骨壁等部位的細(xì)胞，并產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白產(chǎn)物（IL10和FasL）。ABRⅢ波閾值的均值對(duì)比結(jié)果顯示，A組和B組明顯低于C組和D組。內(nèi)耳組織的免疫炎性反應(yīng)亦明顯較C組減輕。結(jié)論：重組復(fù)制缺陷型腺病毒可以攜帶目的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入內(nèi)耳，并在內(nèi)耳表達(dá)基因產(chǎn)物，其抑制炎癥反應(yīng)的作用可有效地減輕自身免疫性感音神經(jīng)性聾的內(nèi)耳組織免疫炎性損傷和聽(tīng)覺(jué)功能障礙，有望成為治療自身免疫性感音神經(jīng)性聾新的方法和途徑。

【關(guān)鍵詞】 基因治療； 自身免疫性感音神經(jīng)性聾； 豚鼠

1979年McCabe依據(jù)其臨床發(fā)現(xiàn)，即18例聽(tīng)力障礙患者經(jīng)過(guò)免疫抑制治療后聽(tīng)力有明顯改善，提出了自身免疫性感音神經(jīng)性聾(autoimmune sensorineural hearing loss，ASNHL)的概念。之后的進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，自身免疫性損害不僅可累及耳蝸，還可波及前庭，故又提出了自身免疫性內(nèi)耳?。╝utoimmune inner ear disease，AIED）［12］概念。目前ASNHL的病因和發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，臨床缺乏特異性診斷方法，對(duì)于ASNHL患者的治療亦存在著一些問(wèn)題，主要是采用皮質(zhì)激素或免疫抑制劑治療，雖然療效較快、較好，但該類藥物毒副作用多，而且還存在停藥后復(fù)發(fā)率較高等問(wèn)題。

近年來(lái)隨著分子生物學(xué)研究的深入和基因工程技術(shù)的進(jìn)展，基因治療已成為許多相關(guān)疾病治療研究方面的熱點(diǎn)和新希望?；蛑委熓歉鶕?jù)特定的治療目的基因?qū)NA導(dǎo)入到宿主細(xì)胞中并在其中表達(dá)。1996年Lalwani等［34］報(bào)道了將基因?qū)雱?dòng)物內(nèi)耳，以后關(guān)于內(nèi)耳的基因治療成為一個(gè)熱點(diǎn)，并在載體選擇、導(dǎo)入方法和安全性評(píng)估等方面取得了很大的進(jìn)步?；蚬こ碳夹g(shù)已能構(gòu)建特異性載體，可攜帶治療基因?qū)雱?dòng)物耳內(nèi)，在動(dòng)物內(nèi)耳獲得高效表達(dá)［4］，產(chǎn)生具有高度生物活性的穩(wěn)定的基因產(chǎn)物，并且不產(chǎn)生病毒相關(guān)的耳毒性反應(yīng)，這為基因治療感音神經(jīng)性聾提供了生物學(xué)證據(jù)。

目前因?yàn)閺?fù)制缺陷性腺病毒載體具有病毒滴度高、轉(zhuǎn)染效率高（100%）、宿主細(xì)胞范圍廣、外源基因容量大、穩(wěn)定和無(wú)插入突變危險(xiǎn)等特點(diǎn)，已經(jīng)成為基因轉(zhuǎn)導(dǎo)研究中應(yīng)用最多的載體之一。Yagi等［5］將腺病毒攜帶的GDNF基因從圓窗膜注射入鼓階，GDNF基因在蝸內(nèi)得到表達(dá)并發(fā)揮作用。

基于上述研究狀況和現(xiàn)有研究工作基礎(chǔ)，本項(xiàng)目組擬將利用基因治療的獨(dú)特性和內(nèi)耳可行局部治療的獨(dú)特解剖特點(diǎn)，對(duì)自身免疫性感音神經(jīng)性聾模型動(dòng)物進(jìn)行內(nèi)耳免疫抑制或調(diào)節(jié)基因的試驗(yàn)性治療研究，以探討其治療效果和可能發(fā)生的副反應(yīng)情況。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康成熟豚鼠，白色紅目，體重300 g左右，耳廓反應(yīng)正常，耳鏡檢查排除中耳疾患，所有動(dòng)物均由南京青龍山養(yǎng)殖場(chǎng)提供。

1.2 內(nèi)耳組織粗制抗原（crude inner ear antigens，CIEAgs）制備

豚鼠CIEAgs制取方法參考文獻(xiàn)［4］，主要步驟：將豚鼠清醒斷頭，取出顳骨，快速打開(kāi)聽(tīng)泡，在解剖顯微鏡下分離全膜迷路，包括基底膜、螺旋韌帶、膜半規(guī)管、橢圓囊和球囊（祛除耳石器），放入0.01 mol·L-1 pH 7.4 PBS中，經(jīng)研磨、凍溶、超聲粉碎、勻漿、離心（1 000 r·min-1，5 min）后取上清液，采用紫外分光光度計(jì)測(cè)定蛋白含量，分裝后低溫干燥制成CIEAgs干粉備用，保存于-80 ℃冰箱。

1.3 ASNHL動(dòng)物模型制備

首次免疫每只動(dòng)物采用CIEAgs 400 mg·（0.4 ml）-1，加等量完全弗氏佐劑，注射于右后足墊；2周后以CIEAgs 200 mg·（0.4 ml）-1加等量不完全弗氏佐劑，注射于背部多點(diǎn)皮下；間隔2周后，再同樣強(qiáng)化免疫1次。依據(jù)聽(tīng)覺(jué)誘發(fā)電位Ⅲ波的閾值升高（超過(guò)免疫前全部動(dòng)物均值加2倍標(biāo)準(zhǔn)差）和出現(xiàn)針對(duì)CIEAgs特異性抗體（ELISA法，波長(zhǎng)490 nm時(shí)A值超過(guò)免疫前全部動(dòng)物均值加2倍標(biāo)準(zhǔn)差），判斷為ASNHL模型動(dòng)物制備成功［6］。

1.4 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

ASNHL模型動(dòng)物共28只，按配對(duì)設(shè)計(jì)分為4組，每組7只：A、B和C組分別向鼓階內(nèi)注入攜帶FasL基因的重組腺病毒(AdFasL)、攜帶IL10基因的重組腺病毒(AdIL10)和攜帶綠色熒光蛋白的腺病毒(AdGFP)；D組(即對(duì)照組)用同樣方法僅向鼓階內(nèi)注射磷酸鹽緩沖液。

1.5 重組基因載體鼓階內(nèi)注射

末次免疫后2周進(jìn)行。豚鼠用1%的戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉（30 mg·kg-1）后，在耳廓后方作一長(zhǎng)3～4 cm弧形切口，顯露聽(tīng)泡，用微型電鉆打開(kāi)聽(tīng)泡，暴露耳蝸底轉(zhuǎn)，用針尖輕輕磨薄耳蝸鼓階側(cè)壁的骨壁，鉆一針尖大小的孔，用微推進(jìn)器將小兒頭皮針的針尖（針尖斜面已打磨變小）插入鼓階，深度不超過(guò)1 mm，先抽取少量（約10 μl）的外淋巴液，再用微量注射機(jī)將重組腺病毒或腺病毒液緩慢（1 μl·min-1）注入鼓階，A組給予AdFASL（病毒滴度為2.5×10 10 pfu·ml-1）20 μl，B組給予AdIL10（病毒滴度為1.0×108 pfu·ml-1）20 μl，C組給予ADGFP（病毒滴度為1.0×109 pfu·ml-1）20 μl，D組給予等量的磷酸鹽緩沖液，骨蠟封閉耳蝸底轉(zhuǎn)，抗生素沖洗中耳腔3次，部分局部放置氧氟沙星明膠海綿預(yù)防感染。骨蠟封閉聽(tīng)泡骨孔，逐層縫合傷口。所有操作應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌原則。

1.6 特異性免疫反應(yīng)測(cè)試

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)定特異性抗體。分別于免疫前和末次免疫后2周進(jìn)行。心臟采血，分離血清。用100 μg·ml-1的CIEAgs溶液包被ELISA板，于4 ℃過(guò)夜并封閉，加入1∶10稀釋的豚鼠血清37 ℃下孵育2 h，洗板4次，加入1∶2 000稀釋的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal protein AHRP，SPAHRP）37 ℃下孵育1 h，洗板4次，以鄰苯二胺過(guò)氧化氫溶液為底物顯色10 min后用H2SO4終止顯色，在酶標(biāo)儀下測(cè)定波長(zhǎng)為490 nm的吸光度A值。

1.7 聽(tīng)覺(jué)腦干誘發(fā)電位（auditory brainstem response，ABR）測(cè)試

分別于免疫前、末次免疫后2周和鼓階內(nèi)注射后（1周），采用聽(tīng)覺(jué)誘發(fā)電位測(cè)試系統(tǒng)，豚鼠頭頂冠狀縫與矢狀縫交界處插入針形電極作為測(cè)試電極，參考電極置于耳廓后方靠近乳突尖，接地電極置于對(duì)測(cè)乳突，刺激聲信號(hào)采用Click，重復(fù)頻率為11次·min-1，疊加2 048次，記錄時(shí)程10 ms，測(cè)定Ⅲ波的閾值、潛伏期和波幅。

1.8 內(nèi)耳光鏡觀察

各組聽(tīng)覺(jué)測(cè)試后各取3只豚鼠，麻醉后斷頭，立即取出顳骨，打開(kāi)聽(tīng)泡，放置于4%多聚甲醛固定液中，12 h后換EDTA脫鈣7～10 d，修剪后流水沖洗1～2 h，常規(guī)脫水、透明、浸蠟、定向包埋。耳蝸中軸切片，片厚5 μm，漂片、撈片、粘片，常規(guī)HE染色，封片，光鏡觀察。

1.9 免疫組織化學(xué)試驗(yàn)

1.9.1 內(nèi)耳石蠟包埋 各組于聽(tīng)覺(jué)測(cè)試后各取豚鼠3只，麻醉、斷頭，迅速取顳骨，打開(kāi)聽(tīng)泡，放置于4%多聚甲醛固定液中，用針挑開(kāi)圓窗，在蝸尖鉆一小孔，快速灌注數(shù)次，固定12 h，采用EDTA脫鈣7～10 d，修剪后流水沖洗1～2 h，常規(guī)脫水、透明、浸蠟、定向包埋。

1.9.2 免疫熒光化學(xué)試驗(yàn) 將C組2只動(dòng)物的顳骨蠟塊行耳蝸中軸切片，片厚5 μm，漂片、撈片、粘片后常規(guī)脫蠟至水，在倒置熒光顯微鏡下觀察和攝片。

1.9.3 酶免疫組織化學(xué)試驗(yàn) 按上述方法獲得切片，用胰酶（0.2%）修復(fù)抗原，余具體步驟：正常山羊血清封閉10 min，加PBS稀釋的第一抗體（A組加入兔抗鼠FASL，B組加入兔抗鼠IL10，C、D組加入兔抗鼠FASL和兔抗鼠IL10兩種抗體），4 ℃過(guò)夜，PBS洗5 min×3次，加入HRP標(biāo)記的SPA作為二抗，37 ℃孵育30 min，PBS洗5 min×3次，DAB染色，封片劑封片，光學(xué)顯微鏡觀察攝片。以上試劑均購(gòu)買自武漢博士德生物工程有限公司。

1.10 內(nèi)耳透射電鏡觀察

各組聽(tīng)覺(jué)試驗(yàn)后各取1只豚鼠，麻醉后斷頭，迅速取出顳骨，經(jīng)固定后取出全內(nèi)耳膜迷路（螺旋韌帶、血管紋），后固定、脫水、浸透、樹(shù)脂定向包埋，聚合后修整包埋塊，超薄切片，染色后透射電鏡觀察攝片。

2 結(jié)

果

2.1 特異性免疫反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果

見(jiàn)表1。結(jié)果顯示：與免疫前相比，各實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組免疫后抗體水平均明顯升高，差異有顯著性（配對(duì)t檢驗(yàn)，P＜0.05）。免疫前和免疫后的各組間對(duì)比，未顯示有顯著性差異（配對(duì)t檢驗(yàn)，P＞0.05）。表1 各組血清中針對(duì)CIEAgs特異性抗體水平

2.2 聽(tīng)覺(jué)功能

以ARB的Ⅲ波反應(yīng)閾作為評(píng)定聽(tīng)力水平的指標(biāo)，結(jié)果見(jiàn)表2。與免疫前相比，免疫后各組ABR平均閾值升高，差異均有顯著性（t檢驗(yàn)，P＜0.05）。與內(nèi)耳抗原免疫后相比，A組和B組內(nèi)耳局部基因治療后ABR平均閾值降低，差異亦均有顯著性（t檢驗(yàn)，P＜0.05）；A組平均閾值降低更為明顯，但與B組相比差異無(wú)顯著性（t檢驗(yàn)，P﹥0.05）。C組和D組內(nèi)耳局部給藥前后對(duì)比，差異無(wú)顯著性。各組內(nèi)同期左右耳對(duì)比差異均無(wú)顯著性（t檢驗(yàn)，P﹥0.05）。A組和B組分別以其免疫后的ABR平均閾值減2倍標(biāo)準(zhǔn)差作為判斷治療后聽(tīng)覺(jué)功能改善標(biāo)準(zhǔn)，A組有3只（5耳）、B組有2只（3耳）經(jīng)局部基因治療后聽(tīng)覺(jué)功能明顯提高，治療有效率分別為35.71%（5耳/14耳）和23.08%（3耳/13耳），B組1耳并發(fā)感染不計(jì)。同樣分別以C組和D組免疫后的ABR平均閾值減2倍標(biāo)準(zhǔn)差作為判斷治療后聽(tīng)覺(jué)功能改善標(biāo)準(zhǔn)，內(nèi)耳局部給藥后，未發(fā)現(xiàn)有明顯聽(tīng)力功能提高耳。表2 各組ABR測(cè)試結(jié)果

2.3 內(nèi)耳光鏡觀察結(jié)果

見(jiàn)圖1。C組和D組出現(xiàn)較為顯著的內(nèi)耳組織炎癥反應(yīng)，包括：出現(xiàn)Rosenthal管中炎癥細(xì)胞（以單個(gè)細(xì)胞為主）浸潤(rùn)，螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞變少，耳蝸?lái)敾毓潜趦?nèi)及血管紋有散在的黃色含鐵血黃素顆粒，部分動(dòng)物蝸管或鼓階內(nèi)可見(jiàn)絮狀物沉積，蝸管內(nèi)出現(xiàn)“漂浮細(xì)胞”。Corti器和血管紋未見(jiàn)明顯異常。A組和B組的炎癥反應(yīng)明顯較C組和D組為輕，尤其是聽(tīng)覺(jué)功能改善耳，僅在蝸軸血管周圍有部分單個(gè)核細(xì)胞浸潤(rùn)，但螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)基本正常，Corti器和血管紋未見(jiàn)明顯異常。鼓階內(nèi)見(jiàn)部分絮狀物，但未見(jiàn)“漂浮細(xì)胞”。

2.4 免疫組織化學(xué)試驗(yàn)

2.4.1 免疫熒光試驗(yàn) 見(jiàn)圖2。結(jié)果顯示：C組見(jiàn)明顯熒光顯示的部位主要分布于耳蝸骨壁、骨螺旋板的蝸管內(nèi)唇部、螺旋韌帶和血管紋等部位。

2.4.2 酶免疫組織化學(xué) 見(jiàn)圖3。結(jié)果顯示：A組主要顯色反應(yīng)（即FASL表達(dá)）部位包括螺旋神經(jīng)節(jié)、Corti器、血管紋、蝸軸小血管周圍、耳蝸骨壁以及壺腹嵴等。B組主要顯色反應(yīng)（即IL10表達(dá)）部位包括血管紋、螺旋韌帶、Corti器、螺旋神經(jīng)節(jié)以及耳蝸的骨壁。C組和D組僅在螺旋神經(jīng)節(jié)和耳蝸骨壁有較弱的顯色。

2.5 透射電鏡攝片結(jié)果

各組顯示均未出現(xiàn)特殊的細(xì)胞和細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的病理變化，僅見(jiàn)C組的1耳血管紋上皮細(xì)胞內(nèi)部分線粒體腫脹（圖4）。

3 討

論

目前ASNHL的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，但對(duì)許多自身免疫性疾病的發(fā)生和病理變化研究中發(fā)現(xiàn)，部分細(xì)胞因子起著重要作用。已有實(shí)驗(yàn)表明，IL10等免疫調(diào)節(jié)分子在自身免疫性疾病的預(yù)防和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、自身免疫性甲狀腺炎及自身免疫性眼葡萄膜炎等動(dòng)物模型的基因治療中取得了良好的效果［78］。我們已成功構(gòu)建了ASNHL的動(dòng)物模型［9］，本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究采用豚鼠的同種內(nèi)耳抗原免疫后，成功地造成部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)感音神經(jīng)性聾和血清特異性抗體水平升高，即制成了ASNHL動(dòng)物模型。再將重組腺病毒攜帶免疫調(diào)節(jié)分子基因（即抗炎癥分子的基因AdIL10）和干擾自身免疫反應(yīng)信號(hào)傳遞過(guò)程并可導(dǎo)致細(xì)胞程序性死亡的分子基因（即調(diào)控細(xì)胞凋亡分子的基因AdFasL）采用鼓階注射的方法導(dǎo)入豚鼠內(nèi)耳，并于導(dǎo)入后7 d測(cè)試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的聽(tīng)覺(jué)功能、內(nèi)耳組織中病毒轉(zhuǎn)染和導(dǎo)入基因產(chǎn)物的表達(dá)情況。結(jié)果顯示ASNHL實(shí)驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)內(nèi)耳局部注射攜帶免疫調(diào)節(jié)基因的重組腺病毒后，部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的聽(tīng)覺(jué)功能明顯提高，即ABRⅢ波閾值降低，組間閾值的均值對(duì)比，均較對(duì)照組有顯著性差異。耳蝸病理組織形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的內(nèi)耳免疫炎性反應(yīng)亦較對(duì)照組動(dòng)物為輕，僅見(jiàn)部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)蝸管內(nèi)絮狀物，未出現(xiàn)螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)量變化，Corti器和血管紋形態(tài)基本正常，從而提示內(nèi)耳局部的免疫調(diào)節(jié)基因治療具有較好的效果，即調(diào)節(jié)和抑制了由于自身免疫所造成的內(nèi)耳炎性反應(yīng)和損傷，進(jìn)而逆轉(zhuǎn)和提高了聽(tīng)覺(jué)功能。

內(nèi)耳免疫組織化學(xué)試驗(yàn)結(jié)果顯示，重組腺病毒可以成功轉(zhuǎn)染豚鼠內(nèi)耳，主要分布于耳蝸骨壁、骨螺旋板的蝸管內(nèi)唇部、螺旋韌帶和血管紋等部位。FasL基因表達(dá)產(chǎn)物主要分布于螺旋神經(jīng)節(jié)、Corti器、血管紋、蝸軸小血管周圍、耳蝸骨壁以及壺腹嵴等部位。IL10基因產(chǎn)物主要分布于血管紋、螺旋韌帶、Corti器、螺旋神經(jīng)節(jié)以及耳蝸的骨壁?；虍a(chǎn)物表達(dá)于殼子、耳蝸血管紋、螺旋韌帶、Corti器、小血管周圍。單一鼓階內(nèi)的一點(diǎn)注射可以較為廣泛地分布于內(nèi)耳各部位組織中，依據(jù)內(nèi)耳解剖學(xué)和組織學(xué)特點(diǎn)，我們推測(cè)可能有3個(gè)途徑使腺病毒從鼓階分布到蝸管：（1）通過(guò)骨螺旋板下層中的小孔與鼓階的外淋巴液相交通；（2）通過(guò)蝸神經(jīng)纖維穿過(guò)的細(xì)孔與鼓階的外淋巴液相交通；（3）鼓階和前庭階在頂回以蝸孔相交通，蝸管中的內(nèi)淋巴液通過(guò)前庭膜與外淋巴液相交通。具體實(shí)際情況有待進(jìn)一步研究和探明。

另一有趣的現(xiàn)象是兩個(gè)實(shí)驗(yàn)治療組的動(dòng)物免疫組織化學(xué)試驗(yàn)結(jié)果顯示，在耳蝸的骨壁均有顯著的病毒轉(zhuǎn)染和免疫調(diào)節(jié)基因產(chǎn)物的表達(dá)，具體機(jī)制尚不清楚。依據(jù)本組在以往實(shí)驗(yàn)研究中的發(fā)現(xiàn)，即同種內(nèi)耳組織抗原免疫豚鼠后，部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳蝸骨壁內(nèi)出現(xiàn)明顯的炎性病灶［10］（與骨硬化癥的病變極為相似，從而支持該病的自身免疫性病因?qū)W假說(shuō)），此次基因治療的方法對(duì)于自身免疫性耳硬化癥是否能發(fā)揮一定的治療效果，有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

此次實(shí)驗(yàn)研究中，我們對(duì)于一組ASNHL的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物鼓階內(nèi)單純注射腺病毒后，結(jié)果顯示聽(tīng)覺(jué)功能無(wú)顯著變化，內(nèi)耳病理形態(tài)學(xué)改變與內(nèi)耳局部注射緩沖液的對(duì)照組相似，即提示腺病毒對(duì)于ASNHL治療無(wú)顯著效果，但亦未造成進(jìn)一步損傷。

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篇6

一、指導(dǎo)思想

認(rèn)真貫徹《動(dòng)物防疫法》，全面落實(shí)科學(xué)發(fā)展觀，堅(jiān)持“預(yù)防為主、群防群控、依法防治、科學(xué)防治“的方針，以防控重大動(dòng)物疫病為中心，以維護(hù)公共衛(wèi)生安全為目的，以高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟等重大動(dòng)物疫病防控為重點(diǎn)，狠抓強(qiáng)制免疫、疫病監(jiān)測(cè)、抗體檢測(cè)、消毒滅源、檢疫監(jiān)督等綜合防控措施的落實(shí)，實(shí)現(xiàn)全年重大動(dòng)物疫病防控目標(biāo)，保障畜牧業(yè)健康發(fā)展。

二、時(shí)間安排

此次春防工作從2月10日開(kāi)始，3月20日全部結(jié)束。區(qū)級(jí)集中免疫抗體監(jiān)測(cè)工作將于3月30日開(kāi)始，各鎮(zhèn)、街道辦事處在開(kāi)展春防工作時(shí)，要兼顧不同病種、不同畜種合理安排免疫時(shí)間。

三、總體目標(biāo)和內(nèi)容

今年春季重大動(dòng)物疫病防控總體目標(biāo)是：高致病性禽流感、牲畜口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟等重大動(dòng)物疫病應(yīng)免畜禽免疫密度達(dá)到100％，免疫畜禽群體平均免疫抗體合格率達(dá)90％以上，豬、牛、羊耳標(biāo)配戴率100％，免疫記錄、免疫檔案與標(biāo)識(shí)相符，使用免疫疫苗合理，免疫操作規(guī)范，免疫效果可靠，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)完成以強(qiáng)制免疫為主的春防任務(wù)。

（一）高致病性禽流感

對(duì)所有家禽實(shí)行強(qiáng)制免疫。

1、對(duì)新補(bǔ)欄種雞、蛋雞以及雖已免疫但已過(guò)免疫保護(hù)期的種（蛋）雞全部使用重組禽流感H5N1亞型（Re-4株+Re-5株）二價(jià)苗免疫，對(duì)首次免疫的種（蛋）雞在3-4周后進(jìn)行加強(qiáng)免疫。

2、對(duì)種（蛋）鴨、種（蛋）鵝，用H5N1亞型（Re-4株+Re-5株）禽流感滅活苗免疫。對(duì)新生雛鴨或雛鵝14-21日齡時(shí)初免，間隔3-4周加強(qiáng)免疫。

3、對(duì)所有散養(yǎng)禽進(jìn)行一次集中免疫，用H5N1亞型（Re-4株+Re-5株）二價(jià)苗免疫。

4、免疫效果監(jiān)測(cè)及判定標(biāo)準(zhǔn)：

⑴所有應(yīng)免家禽免疫密度要求達(dá)到100％；

⑵免疫抗體效價(jià)（HI）試驗(yàn)≥24判定為合格；

⑶禽群免疫抗體合格率達(dá)90％以上。

（二）牲畜口蹄疫

對(duì)所有豬、牛、羊?qū)嵭袕?qiáng)制免疫。

1、豬使用O型口蹄疫滅活苗（優(yōu)先采用合成肽苗），對(duì)新生仔豬以及雖已免疫但已過(guò)免疫保護(hù)期的豬使用O型口蹄疫滅活疫苗進(jìn)行免疫，對(duì)新生仔豬在28-35日齡時(shí)首次免疫，間隔1個(gè)月后進(jìn)行一次強(qiáng)化免疫。

2、對(duì)新生犢牛、羔羊以及雖已免疫但已過(guò)免疫保護(hù)期的牛、羊使用O型-亞洲I型口蹄疫二價(jià)滅活疫苗進(jìn)行免疫，對(duì)新生犢牛在90日齡、新生羔羊在28-35日齡左右進(jìn)行初免，間隔1個(gè)月后進(jìn)行一次強(qiáng)化免疫。

3、對(duì)新生犢牛以及雖已免疫但已過(guò)免疫保護(hù)期的奶牛加免A型口蹄疫疫苗進(jìn)行免疫，新生犢牛免疫后間隔1個(gè)月后進(jìn)行一次強(qiáng)化免疫。

4、對(duì)所有散養(yǎng)豬、牛、羊用相應(yīng)疫苗進(jìn)行一次集中免疫。

5、免疫效果監(jiān)測(cè)及判定標(biāo)準(zhǔn)：

⑴所有應(yīng)免家畜免疫密度要求達(dá)到100％；

⑵豬免疫21天后，其它畜15天后，進(jìn)行免疫效果監(jiān)測(cè)，牛、羊亞洲I型，液相阻斷ELISA的抗體效價(jià)≥26判定為合格；牛、羊、豬的O型口蹄疫抗體，正向間接血凝試驗(yàn)的抗體效價(jià)≥25判定為合格，液相阻斷ELISA的抗體效價(jià)≥26判定為合格；豬合成肽疫苗VP1結(jié)構(gòu)蛋白ELISA抗體效價(jià)≥25判定為合格；

（3）所有應(yīng)免家畜免疫抗體合格率≥90%判定合格。

（三）高致病性豬藍(lán)耳病

對(duì)所有豬進(jìn)行高致病性豬藍(lán)耳病滅活疫苗進(jìn)行強(qiáng)制免疫。

1、新生仔豬斷奶后使用滅活苗初免（先于豬瘟、口蹄疫免疫一周左右免疫）。

2、已免疫的種母豬在配種前使用滅活苗加強(qiáng)免疫1次。

3、后備種豬、種公豬使用滅活苗，每間隔4個(gè)月免疫1次。

4、免疫效果監(jiān)測(cè)及判定標(biāo)準(zhǔn)：

（1）所有應(yīng)免豬免疫密度要求達(dá)到100%；

（2）豬免疫21天后，用豬藍(lán)耳病間接ELISA方法檢測(cè)，抗體陽(yáng)性判定為免疫合格；

（3）所有應(yīng)免豬免疫抗體合格率≥90%判定為合格。

（四）豬瘟

對(duì)所有豬進(jìn)行豬瘟疫苗強(qiáng)制免疫。

1、新生仔豬以及雖已免疫但已過(guò)免疫保護(hù)期的豬使用豬瘟脾淋苗進(jìn)行免疫，對(duì)新生仔豬在25-35日齡時(shí)初免，60-70日齡加強(qiáng)免疫1次。

2、所有散養(yǎng)豬進(jìn)行1次集中免疫。

3、免疫效果監(jiān)測(cè)及判定標(biāo)準(zhǔn)：

（1）所有應(yīng)免家畜免疫密度要求達(dá)到100%；

（2）豬免疫后21天，用豬瘟抗體阻斷ELISA方法檢測(cè)，抗體陽(yáng)性判定為免疫合格；

（3）所有應(yīng)免豬免疫抗體合格率≥90%判定為合格。

四、具體措施

（一）、強(qiáng)化防控責(zé)任落實(shí)。

按照國(guó)務(wù)院的要求和《動(dòng)物防疫法》的規(guī)定，地方政府對(duì)重大動(dòng)物疫病防控工作負(fù)總責(zé)，縣區(qū)畜牧局組織實(shí)施動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃，鄉(xiāng)級(jí)人民政府、街道辦事處組織本轄區(qū)域內(nèi)飼養(yǎng)動(dòng)物的單位和個(gè)人做好強(qiáng)制免疫工作。切實(shí)落實(shí)各項(xiàng)防控措施，做到職責(zé)到崗、責(zé)任到人，形成人人有責(zé)任的工作格局。對(duì)因集中免疫不力、資金不落實(shí)、免疫密度和效果達(dá)不到要求、疫情報(bào)告不及時(shí)、處置不徹底等造成疫情發(fā)生蔓延的，要依法依紀(jì)追究相關(guān)人員的責(zé)任，切實(shí)落實(shí)防控工作責(zé)任制和責(zé)任追究制。

（二）強(qiáng)化防控措施落實(shí)。嚴(yán)格落實(shí)以免疫注射為重點(diǎn)的綜合防控措施，各鎮(zhèn)、街道辦事處要充分認(rèn)識(shí)免疫的重要性，扎實(shí)做好強(qiáng)制免疫的組織、指導(dǎo)工作，及時(shí)處理免疫應(yīng)激反應(yīng)，保障免疫工作的順利進(jìn)行。要嚴(yán)格實(shí)行“政府保免疫密度，業(yè)務(wù)部門保免疫質(zhì)量”的動(dòng)物防疫雙軌制，確保免疫密度和質(zhì)量。

（三）、強(qiáng)化疫情監(jiān)測(cè)。抓住集中免疫的有利時(shí)機(jī)，做好疫情監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查工作。重點(diǎn)強(qiáng)化種畜禽場(chǎng)、交易市場(chǎng)、養(yǎng)殖密集區(qū)等重點(diǎn)地區(qū)的疫情監(jiān)測(cè)工作。嚴(yán)格執(zhí)行疫情報(bào)告和疫情舉報(bào)制度，及時(shí)上報(bào)疫情。

（四）、強(qiáng)化檢疫監(jiān)督。加強(qiáng)對(duì)動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品的屠宰、經(jīng)營(yíng)、運(yùn)輸、儲(chǔ)藏等環(huán)節(jié)的監(jiān)督檢查，進(jìn)一步強(qiáng)化產(chǎn)地檢疫和屠宰檢疫，認(rèn)真查證驗(yàn)物，對(duì)病死畜禽嚴(yán)格按照“四不一處理”的要求，進(jìn)行無(wú)害化處理。

篇7

1. 疫苗因素

①疫苗本身質(zhì)量問(wèn)題引起保護(hù)性能差。如弱毒苗的關(guān)鍵是免疫原性和毒價(jià)，滅活苗的關(guān)鍵是有效病毒含量，因此疫苗的使用和采購(gòu)廠商要選用通過(guò)農(nóng)業(yè)部GMP認(rèn)證的企業(yè)，不要使用來(lái)源不明、標(biāo)志不清、非法生產(chǎn)和非法進(jìn)口的疫苗。②疫苗毒（菌）株與本地流行毒（菌）株血清型或亞型不一致，或流行株的血清型發(fā)生了變化，或疫苗選擇不當(dāng)，甚至用錯(cuò)了疫苗。③疫苗運(yùn)輸、保管不當(dāng)。不同的疫苗株和劑型，保存溫度不同，須按說(shuō)明要求保存。疫苗稀釋后未及時(shí)使用，會(huì)造成疫苗活力和效價(jià)降低。④疫苗的相互干擾，不同疫苗同時(shí)接種或疫苗接種間隔時(shí)間太短，都易在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)影響彼此的免疫應(yīng)答，導(dǎo)致免疫失敗。

2. 動(dòng)物因素

①接種活苗時(shí)動(dòng)物較高的母源抗體或前次免疫殘留的抗體，對(duì)疫苗產(chǎn)生了免疫干擾。②接種時(shí)動(dòng)物已處于潛伏感染，或在接種時(shí)由接種人員及工具帶入病原體。③動(dòng)物先天的免疫器官發(fā)育不全或者先天免疫系統(tǒng)缺陷。④動(dòng)物群中有免疫抑制性疾病存在，或有其他疫病存在，使免疫力暫時(shí)下降導(dǎo)致免疫失敗。

3. 人為因素

①免疫接種工作不認(rèn)真，例如飲水免疫時(shí)飲水器不足，疫苗稀釋錯(cuò)誤或稀釋不均勻，接種量不足，接種有遺漏、接種過(guò)期疫苗等。②免疫接種途徑或方法錯(cuò)誤，如只能注射的滅活苗卻采用飲水法接種。③惡劣的飼養(yǎng)環(huán)境如畜禽舍酷熱、寒冷、擁擠、潮濕、不通風(fēng)，轉(zhuǎn)群，突換飼料等應(yīng)激引起免疫力下降，造成免疫失敗。④管理不善，致使飼料霉變，釋放霉菌毒素引起免疫失敗。⑤免疫接種前后使用了免疫抑制性藥物，或在活菌免疫時(shí)使用了抗菌藥物都會(huì)影響免疫效果。

篇8

關(guān)鍵詞：動(dòng)物免疫學(xué);自主學(xué)習(xí);教學(xué)改革

中圖分類號(hào)：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2016）42-0114-02

引言：

《動(dòng)物免疫學(xué)》、《獸醫(yī)免疫學(xué)》是高等院校動(dòng)物醫(yī)學(xué)專業(yè)極為重要的一門專業(yè)基礎(chǔ)課。免疫學(xué)已滲透到生命科學(xué)的所有學(xué)科，而動(dòng)物免疫學(xué)作為免疫學(xué)的一個(gè)分支，也已滲透到獸醫(yī)學(xué)及生物科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。在獸醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用主要包含：

1.免疫診斷。例如，基于抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng)的血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)，目前已廣泛應(yīng)用于各種動(dòng)物疫病的診斷。

2.免疫預(yù)防。疫苗免疫已經(jīng)成為防控我國(guó)動(dòng)物傳染病的重要手段。目前，我國(guó)對(duì)豬瘟、口蹄疫、高致病性禽流感以及高致病性豬繁殖與呼吸綜合癥等四種重大動(dòng)物疫病實(shí)行強(qiáng)制免疫。

3.免疫治療。例如，對(duì)發(fā)病個(gè)體進(jìn)行抗血清被動(dòng)免疫的緊急預(yù)防治療。然而，由于《動(dòng)物免疫學(xué)》具有理論抽象難懂、知識(shí)點(diǎn)分散繁多等課程特點(diǎn)，加之與《獸醫(yī)傳染病學(xué)》、《動(dòng)物生物化學(xué)》等課程的滲透交叉，是動(dòng)物醫(yī)學(xué)專業(yè)學(xué)生普遍認(rèn)為較為難學(xué)的一門課程。

自主學(xué)習(xí)教學(xué)法基于美國(guó)心理學(xué)家Carl R. Rogers非指導(dǎo)性教學(xué)理論，是一種以學(xué)習(xí)者為中心，以人為本，引導(dǎo)學(xué)習(xí)者獨(dú)立、主動(dòng)學(xué)習(xí)的教學(xué)方法。在免疫學(xué)的理論與實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程中，我們嘗試通過(guò)引導(dǎo)學(xué)生自主學(xué)習(xí)，激發(fā)對(duì)免疫學(xué)的興趣，提高學(xué)習(xí)積極性，從而改善教學(xué)效果。本文作者主要根據(jù)切身經(jīng)歷的中美高校獸醫(yī)學(xué)院《動(dòng)物免疫學(xué)》課程教學(xué)，通過(guò)比較探討，總結(jié)出以下幾點(diǎn)建議，為我們《動(dòng)物免疫學(xué)》教學(xué)改革提供參考。

一、通過(guò)采用問(wèn)答教學(xué)方式鼓勵(lì)學(xué)生做好課前預(yù)習(xí)

筆者在美國(guó)堪薩斯州立大學(xué)（KSU）學(xué)習(xí)工作期間，選修過(guò)獸醫(yī)學(xué)院的《獸醫(yī)免疫學(xué)》與生物學(xué)院的《免疫學(xué)》兩門課程。與國(guó)內(nèi)的《動(dòng)物免疫學(xué)》課程相比，美國(guó)《獸醫(yī)免疫學(xué)》課程，明顯更加強(qiáng)調(diào)互動(dòng)教學(xué)。最簡(jiǎn)單的一點(diǎn)，國(guó)內(nèi)上《動(dòng)物免疫學(xué)》時(shí)，雖然老師也會(huì)提醒學(xué)生提前預(yù)習(xí)課程內(nèi)容，但是由于傳統(tǒng)教學(xué)方法通常是按教材滿堂灌，學(xué)生預(yù)習(xí)與否對(duì)上課影響不大，因此，造成大多數(shù)學(xué)生都沒(méi)有養(yǎng)成認(rèn)真預(yù)習(xí)的習(xí)慣。然而，在美國(guó)《獸醫(yī)免疫學(xué)》或者《免疫學(xué)》課堂上，主要是進(jìn)行免疫學(xué)相關(guān)問(wèn)題的探討。老師會(huì)通過(guò)連續(xù)問(wèn)問(wèn)題的方式引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)，而學(xué)生則根據(jù)預(yù)習(xí)所自學(xué)內(nèi)容分析、討論這些問(wèn)題，這一問(wèn)答教學(xué)方式使得課前預(yù)習(xí)變得非常重要。如果沒(méi)有很好的課前預(yù)習(xí)，很難跟上教學(xué)進(jìn)程。因此，課前預(yù)習(xí)已成為美國(guó)大學(xué)生最重要的學(xué)習(xí)任務(wù)之一。

二、通過(guò)實(shí)際案例講解增強(qiáng)對(duì)免疫學(xué)理論知識(shí)的理解

美國(guó)本科生學(xué)習(xí)《獸醫(yī)免疫學(xué)》和《免疫學(xué)》課程時(shí)，教師主要是通過(guò)實(shí)例教學(xué)完成重點(diǎn)免疫學(xué)知識(shí)講解。常用的實(shí)例來(lái)源包括：

1.最新發(fā)表在免疫學(xué)相關(guān)頂級(jí)雜志上的研究?jī)?nèi)容。通過(guò)最新研究結(jié)果探討，講解課程上要介紹免疫學(xué)知識(shí)，以增強(qiáng)學(xué)生對(duì)這一知識(shí)點(diǎn)的興趣并加深理解。

2.通過(guò)給學(xué)生提前發(fā)放將要講解的知識(shí)點(diǎn)相關(guān)經(jīng)典文獻(xiàn)或者案例供學(xué)生自學(xué)，再在課堂上進(jìn)行特定案例探討。

3.通過(guò)介紹由于免疫學(xué)相關(guān)研究而獲得諾貝爾獎(jiǎng)的實(shí)例介紹免疫學(xué)知識(shí)點(diǎn)。具體案例如：（1）在談到先天性免疫缺陷（SCID）時(shí)，通過(guò)講述氣泡男孩David Vetter因?yàn)榛加蠸CID，在與世隔絕的氣泡內(nèi)生活了12年的故事，使大家對(duì)SCID留下深刻的印象。（2）在談到疫苗的作用時(shí)，通過(guò)講述1979年天花消滅以及2012年牛瘟撲滅的例子，說(shuō)明疫苗免疫在傳染病防控中的重要作用。（3）德國(guó)醫(yī)學(xué)家Emil Von Behring因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)抗體并建立血清療法而在1901年獲得首屆諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。美國(guó)免疫學(xué)家Bruce A. Beutler與法國(guó)生物學(xué)家Jules A. Hoffmann由于在天然免疫功能方面的研究，與加拿大免疫學(xué)家Ralph M. Steinman關(guān)于樹(shù)突狀細(xì)胞在獲得性免疫功能方面的研究，而共同分享了2011年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。通過(guò)介紹這些偉大的科研成就，提高學(xué)生學(xué)習(xí)免疫學(xué)的興趣并鼓勵(lì)學(xué)生積極參與免疫學(xué)相關(guān)的研究工作。

三、通過(guò)任務(wù)安排使學(xué)生自主完成部分教學(xué)內(nèi)容

KSU本科生在《獸醫(yī)免疫學(xué)》、《免疫學(xué)》教學(xué)過(guò)程中，與國(guó)內(nèi)學(xué)生相比，所需自主參與完成的教學(xué)任務(wù)明顯較多。例如，任課教師會(huì)選擇部分重要知識(shí)點(diǎn)，根據(jù)班級(jí)學(xué)生人數(shù)，安排3―5名學(xué)生為一小組，完成某一知識(shí)點(diǎn)的自主教學(xué)任務(wù)，組內(nèi)人員分工完成相關(guān)資料查詢、教學(xué)課件準(zhǔn)備，并以PPT形式向所有學(xué)生口頭匯報(bào)。其他學(xué)生可在課堂上提問(wèn)，由該組學(xué)生解答。任課老師需在他們完成自主教學(xué)過(guò)程中，給予引導(dǎo)、幫助，并做相應(yīng)的補(bǔ)充，以獲得較為良好的教學(xué)效果。此外，學(xué)生需要自主選擇一個(gè)較為感興趣的免疫學(xué)相關(guān)問(wèn)題，通過(guò)查閱文獻(xiàn)書籍等資料，寫一份關(guān)于該問(wèn)題或者知識(shí)點(diǎn)的綜述報(bào)告，老師會(huì)根據(jù)綜述報(bào)告完成情況，給予點(diǎn)評(píng)并打分。自主教學(xué)與綜述報(bào)告都是期末最終考核的重要組成部分。

四、通過(guò)雙語(yǔ)教學(xué)促進(jìn)獸醫(yī)專業(yè)課程教學(xué)與國(guó)際接軌

隨著教育國(guó)際化進(jìn)程的日益推進(jìn)，獸醫(yī)專業(yè)本科教育需要積極使用英語(yǔ)等外語(yǔ)進(jìn)行專業(yè)課教學(xué)。特別是近幾年許多高校都從海外引進(jìn)了一批高層次人才，在師資力量上，雙語(yǔ)專業(yè)課教學(xué)已經(jīng)完全可能實(shí)現(xiàn)。為推進(jìn)我校獸醫(yī)專業(yè)本科生的雙語(yǔ)教學(xué)改革，建議先采用小班試點(diǎn)制，對(duì)部分專業(yè)基礎(chǔ)課或?qū)I(yè)課進(jìn)行雙語(yǔ)教學(xué)實(shí)踐。雙語(yǔ)專業(yè)課試點(diǎn)班的順利進(jìn)行需滿足如下要求：

1.試點(diǎn)班學(xué)生必須主觀支持對(duì)《動(dòng)物免疫學(xué)》等專業(yè)基礎(chǔ)課進(jìn)行雙語(yǔ)教學(xué)。同時(shí)，試點(diǎn)班學(xué)生還應(yīng)該具有較為良好的英語(yǔ)基礎(chǔ)和一定的專業(yè)知識(shí)基礎(chǔ)。

2.專業(yè)課教學(xué)必須采用雙語(yǔ)教材，可以選用較為權(quán)威的英文原版教材為主要教材，并輔以現(xiàn)有的中文教材。

3.試點(diǎn)班任課老師必須同時(shí)具有較高的專業(yè)教學(xué)水平與外語(yǔ)水平，可以側(cè)重在具有海外留學(xué)工作背景的教師中選擇合適的專業(yè)課老師進(jìn)行試驗(yàn)性教學(xué)。

4.要求學(xué)生做好課前預(yù)習(xí)和課后復(fù)習(xí)，課堂上教師可多采用問(wèn)答教學(xué)方式，鼓勵(lì)學(xué)生主動(dòng)參與部分教學(xué)工作，調(diào)動(dòng)學(xué)生自主參與的積極性，鼓勵(lì)創(chuàng)造性思考，提高學(xué)習(xí)興趣和教學(xué)質(zhì)量。

五、小結(jié)

有效進(jìn)行問(wèn)答教學(xué)、實(shí)例教學(xué)、自主教學(xué)和雙語(yǔ)教學(xué)等，必將有助于提高《動(dòng)物免疫學(xué)》的教學(xué)效果，但是這一方法的有效實(shí)施要求學(xué)生必須積極配合，也要求學(xué)生具有一定的專業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)和較強(qiáng)的自學(xué)能力。同時(shí)，對(duì)任課教師自身的水平也有更高的要求。因此，為切實(shí)做好《動(dòng)物免疫學(xué)》教學(xué)改革工作，需要根據(jù)生源水平、師資力量等實(shí)際情況，與中國(guó)學(xué)生目前更加適應(yīng)的傳統(tǒng)教學(xué)法等相互結(jié)合，循序漸進(jìn)地改善《動(dòng)物免疫學(xué)》教學(xué)效果。

參考文獻(xiàn)：

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Enlightenment From the Teaching-learning Model of Veterinary Immunology in United States

CHEN Nan-hua，ZHU Jian-zhong *

（College of Veterinary Medicine，Yangzhou University，Yangzhou，Jiangsu 225009，China）

篇9

關(guān)鍵詞 動(dòng)物免疫；免疫失??；影響因素；疫苗；檢疫

中圖分類號(hào) S852.52 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2015）14-0274-01

對(duì)動(dòng)物進(jìn)行疫苗免疫是動(dòng)物養(yǎng)殖過(guò)程中一種可以有效預(yù)防動(dòng)物傳染性病害的方法。通過(guò)疫苗免疫，使動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性機(jī)能，形成免疫性，從而維護(hù)機(jī)體的生理平衡和穩(wěn)定，使機(jī)體獲得堅(jiān)強(qiáng)的抵抗力，從而有效預(yù)防各類動(dòng)物傳染病和寄生蟲病。免疫應(yīng)答是動(dòng)物機(jī)體對(duì)于各類傳染性病害的免疫性保護(hù)機(jī)制，保護(hù)動(dòng)物機(jī)體免受各類傳染性病害的侵襲，其影響因素較多，包括飼養(yǎng)管理、環(huán)境、應(yīng)激等多種因素，不同的因素可以通過(guò)不同的方式影響疫苗的免疫效果，從而導(dǎo)致動(dòng)物機(jī)體免疫抵抗力降低，導(dǎo)致動(dòng)物個(gè)體群體發(fā)生流行性疾病，危害動(dòng)物機(jī)體健康，降低動(dòng)物養(yǎng)殖效益。現(xiàn)根據(jù)筆者多年工作經(jīng)驗(yàn)，對(duì)影響動(dòng)物免疫效果的諸多影響因素進(jìn)行具體總結(jié)，分析各影響因素對(duì)具體免疫過(guò)程的不利影響，以期為動(dòng)物免疫過(guò)程中避免免疫效果降低、提高動(dòng)物免疫效果提供借鑒。

1 疫苗影響因素

1.1 疫苗質(zhì)量

一是疫苗質(zhì)量原因，疫苗質(zhì)量好壞是影響免疫效果的直接因素，是免疫成敗的物質(zhì)基礎(chǔ)，毒力較弱的疫苗接種后在動(dòng)物體內(nèi)有一個(gè)階段性過(guò)程。接種疫苗中必須保證含有足夠量的抗原。由于滅活苗接種后沒(méi)有繁殖過(guò)程，所以必須保證有足夠的 抗原量，才能刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。二是未充分考慮疫苗接種的相斥性。同時(shí)給畜禽接種2種或2種以上不同種類的疫苗，由于疫苗之間互相干擾，從而造成疫苗效果降低，導(dǎo)致免疫失敗[1-4]。

1.2 疫苗的保存與運(yùn)輸

疫苗的保存與運(yùn)輸是疫苗的質(zhì)量保障，保存不當(dāng)或者運(yùn)輸條件不合理會(huì)降低疫苗效果，甚至使疫苗失效，因此應(yīng)妥善保存疫苗，運(yùn)輸過(guò)程也要符合疫苗運(yùn)輸?shù)囊?。由于疫苗是較為特殊的生物制品，為保證疫苗的使用效果，應(yīng)根據(jù)不同疫苗的具體保存運(yùn)輸要求選擇合適的保存與運(yùn)輸條件。但部分基層獸醫(yī)站設(shè)備條件簡(jiǎn)陋，無(wú)法保證疫苗保存所需的適合環(huán)境條件，疫苗一般通過(guò)微生物及其代謝物制成，一般均怕熱、怕光，需要冷藏或冷凍保存，并且在使用過(guò)程中需保證合理的稀釋倍數(shù)，使用符合要求的稀釋器皿，同時(shí)避免陽(yáng)光直射，從而避免造成疫苗效價(jià)降低或免疫失敗[5-7]。

2 防疫操作影響因素

一級(jí)防疫隊(duì)伍和村級(jí)防疫員由于工作待遇較差而產(chǎn)生消極情緒，有的防疫員免疫技術(shù)不高，使用疫苗時(shí)未按規(guī)定操作，粗心大意，不注意更換免疫接種針頭，消毒不到位，打飛針、劑量不足等問(wèn)題更是比比皆是，甚至動(dòng)物注射部位發(fā)生偏差，嚴(yán)重影響了免疫的效果。還有部分防疫員為了圖省事直接將疫苗交由畜主，這都會(huì)造成疫苗效價(jià)降低或免疫失敗。

疫苗注射應(yīng)與相應(yīng)的藥物會(huì)發(fā)生排斥反應(yīng)。因此，在注射疫苗前應(yīng)避免使用與之發(fā)生排斥的相關(guān)藥物。例如細(xì)菌類活疫苗注射前后不得使用抗菌藥物，如注射豬鏈球菌疫苗前后使用青霉素、磺胺類抗菌藥物，就會(huì)大大影響免疫效果，疫苗免疫期間使用皮質(zhì)激素也會(huì)導(dǎo)致機(jī)體的免疫技能降低。

3 動(dòng)物自身影響因素

有些疾病可引起免疫抑制，從而嚴(yán)重影響免疫效果，如非典型豬瘟存活的帶毒仔豬對(duì)豬瘟疫苗產(chǎn)生免疫抑制，注射豬瘟疫苗后，不產(chǎn)生豬瘟抗體，先天感染的仔豬無(wú)論是吃初乳、注射疫苗都不可避免死亡或終身帶毒，另外一些寄生蟲病對(duì)疫苗免疫效果都有不同程度的影響，有的動(dòng)物患病后未及時(shí)發(fā)現(xiàn)，仍注射疫苗便會(huì)造成動(dòng)物死亡。

4 環(huán)境因素

環(huán)境因素是影響動(dòng)物免疫應(yīng)答能力的重要影響因素，當(dāng)動(dòng)物機(jī)體受到不良環(huán)境因素的影響時(shí)，易產(chǎn)生應(yīng)激，如高濕、高熱、寒冷、飼養(yǎng)密度過(guò)大、通風(fēng)換氣條件差都會(huì)引起動(dòng)物不同程度的應(yīng)激反應(yīng)，這些都會(huì)影響注射疫苗免疫效果。

一般疫苗接種后需要經(jīng)過(guò)7～14 d才能發(fā)揮免疫效果，若環(huán)境病原微生物密度較大，動(dòng)物發(fā)生感染的時(shí)期較早而易導(dǎo)致免疫失敗，免疫接種所產(chǎn)生的保護(hù)力是有限的，當(dāng)免疫接種的保護(hù)能力不及病原的侵害能力時(shí)，動(dòng)物易患病，即使免疫接種比較成功，也會(huì)有個(gè)別動(dòng)物免疫能力不足，從而造成病原感染，成為傳染源，甚至引起流行。

5 飼養(yǎng)管理影響因素

免疫接種前后的飼養(yǎng)管理是非常重要的，飼養(yǎng)管理不當(dāng)，在接種前后會(huì)出現(xiàn)各種不良應(yīng)激因素，如打耳標(biāo)、抓捕、去勢(shì)等操作不當(dāng)就會(huì)引起動(dòng)物應(yīng)激，造成免疫系統(tǒng)功能水平降低，從而導(dǎo)致動(dòng)物機(jī)體免疫力降低。因此，在免疫前后要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，使動(dòng)物在接種疫苗的誘導(dǎo)期避免出現(xiàn)應(yīng)激。

6 檢疫與監(jiān)督影響因素

檢疫是為了及時(shí)發(fā)現(xiàn)病害畜禽、及時(shí)掌握疫情動(dòng)態(tài)，而大多數(shù)鄉(xiāng)鎮(zhèn)檢疫員重收費(fèi)、輕檢疫，甚至只收費(fèi)、不檢疫，加之現(xiàn)在實(shí)行了免收檢疫費(fèi)，致使個(gè)別檢疫人員責(zé)任意識(shí)強(qiáng)而不作為，沒(méi)有起到以檢促防的作用。

7 養(yǎng)殖觀念影響因素

農(nóng)村大多為傳統(tǒng)、分散養(yǎng)殖，養(yǎng)殖規(guī)?；⒓s化程度低，個(gè)別養(yǎng)殖戶對(duì)動(dòng)物免疫缺乏高度重視，存在懶于免疫的僥幸心理，致使免疫密度不高，一旦一戶畜禽有傳染病，就會(huì)很快傳播到鄰近的養(yǎng)殖戶，引起傳染性疾病暴發(fā)流行。

8 結(jié)語(yǔ)

總之，造成免疫失敗的因素較多，出現(xiàn)免疫失敗時(shí)要全面考慮，查找原因，提出應(yīng)對(duì)措施，以確保畜群安全無(wú)疫。

9 參考文獻(xiàn)

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篇10

關(guān)鍵詞：疫病預(yù)防；免疫監(jiān)測(cè)；防疫規(guī)范

中圖分類號(hào)： S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-0432(2011)-01-0084-1

隨著目前養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)發(fā)展，一些傳染性比較強(qiáng)、危害性比較大的疾病成為生豬養(yǎng)殖業(yè)的頭號(hào)殺手，全世界普遍采用預(yù)防接種作為預(yù)防和控制這類疾病的主要手段。然而，當(dāng)疫苗接種到動(dòng)物體內(nèi)后，必須要經(jīng)過(guò)一系列復(fù)雜的反應(yīng)之后才能夠產(chǎn)生保護(hù)力，而這種保護(hù)力的產(chǎn)生往往又容易受到多種因素的影響，如疫苗方面、動(dòng)物方面、接種方式方法及時(shí)機(jī)選擇、飼養(yǎng)管理以及環(huán)境等，每一個(gè)方面的因素出現(xiàn)變化都有可能對(duì)免疫效果產(chǎn)生或多或少的影響，而接種抗原所產(chǎn)生的抗體滴度或效價(jià)的高低直接影響著免疫效果，因此從監(jiān)測(cè)即時(shí)抗體水平或抗體水平的動(dòng)態(tài)變化來(lái)判斷動(dòng)物對(duì)某種疾病的抵抗力或某種疫苗的免疫效果變的尤為重要。

1免疫監(jiān)測(cè)的概念

免疫監(jiān)測(cè)是通過(guò)免疫血清學(xué)的方法對(duì)免疫后機(jī)體抗體水平的測(cè)定，根據(jù)免疫監(jiān)測(cè)的結(jié)果來(lái)檢驗(yàn)免疫成效的一種技術(shù)方法。血清學(xué)試驗(yàn)是運(yùn)用敏感、特異的手段來(lái)檢測(cè)機(jī)體針對(duì)微生物的抗體應(yīng)答。這種可引起機(jī)體發(fā)生抗體應(yīng)答的微生物可以是病原微生物，也可以是因注射疫苗而誘導(dǎo)的，也可以是無(wú)致病性的微生物或者機(jī)體內(nèi)正常存在的菌群的一部分。目前應(yīng)用于動(dòng)物血清定抗體檢測(cè)的方法有很多，這些方法主要有血凝試驗(yàn)(HA)、血凝抑制試驗(yàn)(HI)、瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)(AGID)、病毒中和試驗(yàn)( NV)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)等。在這些方法中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是一個(gè)準(zhǔn)確性、安全性高，實(shí)用性強(qiáng)的檢測(cè)技術(shù)，其特點(diǎn)為特異性強(qiáng)、靈敏度高、速度快。目前我國(guó)獸醫(yī)部門日常動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)首選使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法。

2免疫監(jiān)測(cè)的重要性

2.1 掌握豬群整體免疫狀態(tài)，預(yù)防重大疫病爆發(fā)

隨著我國(guó)畜禽養(yǎng)殖業(yè)規(guī)?；⒓s化和商品化程度的增高，畜禽流動(dòng)和引種工作的頻繁，一些疾病的發(fā)生、發(fā)展變得越來(lái)越復(fù)雜，能夠快速掌握本場(chǎng)豬群的整體免疫狀態(tài)變的至關(guān)重要，稍不在意，一個(gè)細(xì)小的問(wèn)題就會(huì)導(dǎo)致整個(gè)豬場(chǎng)暴發(fā)疫病，損失慘重。為了控制豬口蹄疫、豬高致病性藍(lán)耳病、豬瘟、豬偽狂犬病等重大傳染病的流行，豬場(chǎng)管理者應(yīng)嚴(yán)格而又認(rèn)真的進(jìn)行疫病免疫檢測(cè)。

2.2 加強(qiáng)豬場(chǎng)免疫監(jiān)測(cè)，減少免疫失敗發(fā)生

目前絕大多數(shù)養(yǎng)豬場(chǎng)沒(méi)有充分利用實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)手段，在養(yǎng)殖生產(chǎn)中使用疫苗方面存在很多問(wèn)題，免疫效果不理想，甚至接種了疫苗后豬群仍然暴發(fā)該疾病。豬場(chǎng)人員應(yīng)對(duì)不同階段的豬進(jìn)行定期采取血樣，采集的血樣盡量廣泛而具有代表性，送到有實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力的相關(guān)部門（如各地縣級(jí)或市級(jí)畜牧獸醫(yī)站）作出科學(xué)的檢測(cè)報(bào)告，進(jìn)行分析決策。通過(guò)動(dòng)態(tài)采樣監(jiān)測(cè)了解豬群中到底有哪些疾病的存在，同時(shí)掌握檢測(cè)出的疾病感染程度，什么時(shí)間、什么疾病感染了哪個(gè)階段的豬群，這樣才能因地制宜適時(shí)而正確的選擇疫苗接種的種類和接種疫苗的時(shí)機(jī)，同時(shí)也能夠掌握疫苗的免疫效果，也就是經(jīng)過(guò)疫苗接種后摸清了某些疾病的抗體水平的高低、群體豬的抗體效價(jià)的均勻度、疫苗的保護(hù)率和保護(hù)時(shí)間。對(duì)于出現(xiàn)抗體滴度不合格的豬，應(yīng)及時(shí)給予補(bǔ)免，從而避免因免疫失敗再次感染該疾病的可能。

2.3 指導(dǎo)豬場(chǎng)的群體防疫準(zhǔn)則，制定科學(xué)的免疫程序

免疫程序受母源抗體和自身抗體水平高低、免疫時(shí)間、免疫方法、疫苗種類、免疫次數(shù)和當(dāng)?shù)匾卟×餍星闆r等因素的影響。良好免疫效果的獲得依賴于首次免疫和再次免疫時(shí)機(jī)是否合適，母源抗體水平?jīng)Q定首次免疫的時(shí)間，上次免疫時(shí)體內(nèi)的殘留抗體水平?jīng)Q定再次免疫的時(shí)間，由于各方面的影響，一個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的免疫程序應(yīng)根據(jù)每年免疫監(jiān)測(cè)情況適時(shí)加以調(diào)整修訂。一味照搬別場(chǎng)免疫程序，或連年不變的做法難免會(huì)失誤，進(jìn)而引發(fā)疫病的流行。因此，不能教條地仿效其他豬場(chǎng)的免疫程序，只有以根據(jù)本場(chǎng)所測(cè)的實(shí)際抗體水平為依據(jù)，結(jié)合當(dāng)?shù)氐膶?shí)際，才能制定出適合本場(chǎng)的免疫程序，這一切都是依賴于抗體水平的監(jiān)測(cè)。

3總結(jié)