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篇1

關(guān)鍵詞：細(xì)胞生物學(xué);醫(yī)學(xué)遺傳學(xué);實(shí)驗(yàn)教學(xué);教學(xué)質(zhì)量

中圖分類號：G40-034 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1008-3561（2015）03-0085-01

細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)是醫(yī)學(xué)院校的基礎(chǔ)課程，也是一門實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的學(xué)科。細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)的教學(xué)分為理論教學(xué)和實(shí)驗(yàn)教學(xué)兩部分。實(shí)驗(yàn)教學(xué)與理論教學(xué)聯(lián)系密切，相輔相成，不可或缺。細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)要重視對學(xué)生獨(dú)立觀察、思考和操作能力的培養(yǎng)，學(xué)習(xí)能力和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)，以及分析問題、總結(jié)問題能力的培養(yǎng)。綜合多年來對臨床醫(yī)學(xué)、口腔醫(yī)學(xué)等專業(yè)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)踐和探索，筆者就實(shí)驗(yàn)教學(xué)提出幾點(diǎn)體會，以期培養(yǎng)出高素質(zhì)專業(yè)型醫(yī)學(xué)人才。

一、提高教師自身素質(zhì)

首先，教師應(yīng)通過網(wǎng)絡(luò)高校教師在線培訓(xùn)和查閱最新文獻(xiàn)，不斷學(xué)習(xí)新的理論和技術(shù)，應(yīng)用到日常實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，讓學(xué)生了解一些科學(xué)前沿的知識，充實(shí)教學(xué)內(nèi)容。其次，基礎(chǔ)學(xué)科教師還要兼具臨床醫(yī)學(xué)方面的知識，為學(xué)生日后走向臨床打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。另外，高素質(zhì)的師資隊(duì)伍是保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)水平不斷提高的關(guān)鍵。近年來，我科室教師不斷提升自己的學(xué)歷，通過在職進(jìn)修、脫產(chǎn)學(xué)習(xí)等方式提升師資隊(duì)伍的學(xué)歷水平。

二、改變教學(xué)模式，提高學(xué)習(xí)興趣

在以往的教學(xué)中，學(xué)生的一切實(shí)驗(yàn)行為都由教師安排，教師是主體，學(xué)生只是被動地接受，忽視了學(xué)生的自主意識。標(biāo)本片都是教師給準(zhǔn)備好的，直接在顯微鏡觀察即可。整個(gè)教學(xué)過程學(xué)生缺乏主動性，教學(xué)效果欠佳。如學(xué)生進(jìn)入教室，首先就把教師提前在黑板上寫好的目的、原理和實(shí)驗(yàn)步驟抄寫下來，顯微鏡下觀察標(biāo)本片也是敷衍看看，結(jié)果有的就按照書上畫，或者互相抄襲，如同完成任務(wù)一樣完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。事實(shí)上，在細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)課中，學(xué)生也應(yīng)該是實(shí)驗(yàn)的參與者，而不是任務(wù)的執(zhí)行者。因此，適當(dāng)?shù)匕才乓恍┯蓪W(xué)生自己動手制作完成的實(shí)驗(yàn)用品對于提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣能起到很好的作用。如以前我們實(shí)驗(yàn)課學(xué)習(xí)顯微鏡的使用，我們讓學(xué)生學(xué)會顯微鏡如何操作后，給學(xué)生一些已經(jīng)制作好的各種組織的標(biāo)本片進(jìn)行觀察。而現(xiàn)在，我們讓學(xué)生自己動手制作標(biāo)本片，取材更是取自學(xué)生自己的口腔上皮細(xì)胞，這樣，學(xué)生的制作熱情和觀察熱情就被激發(fā)了出來。每個(gè)學(xué)生都積極地制作一張自己的口腔上皮細(xì)胞標(biāo)本片，放在顯微鏡下仔細(xì)觀察，認(rèn)真繪圖。有的學(xué)生還用手機(jī)拍下來，看著自己親手制作的標(biāo)本片，很有成就感和參與感，教學(xué)效果顯著提高。

三、采用多種教學(xué)手段輔助教學(xué)

有些實(shí)驗(yàn)理論較為抽象，學(xué)生理解起來有一定的難度。尤其是對于文科學(xué)生，細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)的知識以前幾乎沒有學(xué)習(xí)過，基礎(chǔ)薄弱。怎么能讓這些學(xué)生快速入門呢？我們除了常規(guī)的板書以外，應(yīng)利用現(xiàn)代科技手段、多媒體動畫輔助教學(xué)，真正做到抽象的理論直觀化，讓學(xué)生對于整個(gè)實(shí)驗(yàn)原理是如何發(fā)生發(fā)展的一目了然。舉例來說，在細(xì)胞有絲分裂觀察實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞有絲分裂的過程既是重點(diǎn)又是難點(diǎn)，復(fù)雜且抽象。但是借助于三維立體動畫展示，可把整個(gè)有絲分裂過程，即兩組完全一樣的染色體如何精確分離的過程清晰明了的呈現(xiàn)在學(xué)生眼前。通過這樣的展示，學(xué)生輕松地掌握了實(shí)驗(yàn)理論，為接下來的細(xì)胞形態(tài)觀察和畫圖打下了良好的理論基礎(chǔ)。

四、改進(jìn)教學(xué)方法，理論與實(shí)際相結(jié)合

教師在教學(xué)過程中常規(guī)使用的教學(xué)方法是講授法，這樣學(xué)生理解起來比較被動，只能跟著教師的思路走，忽視了學(xué)生對知識獲得的自主性和能動性。現(xiàn)在，我們除了講授法外還加入啟發(fā)式教學(xué)，并注重理論與實(shí)際結(jié)合起來，調(diào)動了學(xué)生思維的主動性，為學(xué)生的持續(xù)發(fā)展創(chuàng)造了更廣闊的空間。例如人類染色體觀察與核型分析實(shí)驗(yàn)中，在講授正常染色體形態(tài)、數(shù)目前，先提問學(xué)生是否見過先天愚型的人。學(xué)生在教師的啟發(fā)下開始積極思考，回答出自己見過哪些人，有什么樣的特征，如表情呆滯、發(fā)育遲緩、身材矮小等。教師接著提問這些人為什么有這樣的缺陷，學(xué)生一般答不上來。教師就可以解釋因?yàn)樗麄兌嗔艘粭l23號染色體，就造成了人生這么大的缺憾，所以今天我們要先把正常染色體的形態(tài)數(shù)目了解清楚，才能對一些遺傳學(xué)疾病采取積極地預(yù)防措施。通過這樣的講解，學(xué)生明白了學(xué)習(xí)和研究染色體的重大意義，學(xué)習(xí)態(tài)度也認(rèn)真了許多。同時(shí)，還激發(fā)了學(xué)生投身科研、造福人類的熱情。

五、教學(xué)相長，亦師亦友

傳統(tǒng)教學(xué)中，學(xué)生對老師是比較敬畏的，課堂氣氛也比較嚴(yán)肅，教師在前面講，學(xué)生在下面做筆記。實(shí)際上，我們應(yīng)該改變這種刻板的場景，與學(xué)生多一些交流與溝通。如可讓學(xué)生暢談自己對于某些理論、某些現(xiàn)象的看法，教師給予糾正和補(bǔ)充，從而加深學(xué)生對知識的理解與記憶。尤其是實(shí)驗(yàn)課，學(xué)生有任何問題隨時(shí)都可以提出來讓老師幫助解決，或者學(xué)生有更好的建議可以應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)教學(xué)，這樣才能做到教學(xué)相長。

通過以上幾點(diǎn)，充分調(diào)動了學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性，活躍了課堂氣氛，豐富了教學(xué)內(nèi)容，培養(yǎng)了學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)態(tài)度和科研意識，細(xì)胞生物學(xué)和醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)取得了較好的教學(xué)效果。

參考文獻(xiàn)：

篇2

關(guān)鍵詞：研究生；創(chuàng)新能力；細(xì)胞生物學(xué)

中圖分類號：G643 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1674-9324（2015）26-0265-02

人類社會已經(jīng)步入創(chuàng)新不斷涌現(xiàn)和競爭不斷加劇的重要時(shí)期。在知識經(jīng)濟(jì)時(shí)代，科學(xué)技術(shù)創(chuàng)新是國家發(fā)展的決定性因素，是國家競爭力的核心，而科學(xué)技術(shù)創(chuàng)新離不開具有創(chuàng)新能力的高素質(zhì)人才。高等學(xué)校擔(dān)負(fù)著全面推進(jìn)素質(zhì)教育，培養(yǎng)高素質(zhì)的創(chuàng)新型人才的歷史使命，更新教育觀念，深化教育改革，構(gòu)建高校創(chuàng)新型人才培養(yǎng)模式成為第一要務(wù)。教育觀念的更新，首要更新的是高等教育體系中龐大的師資隊(duì)伍，他們是教學(xué)改革的執(zhí)行者，是課堂和實(shí)驗(yàn)教學(xué)的組織者，是學(xué)生創(chuàng)新能力培養(yǎng)和素質(zhì)提高中最有力的影響者，畢竟學(xué)生創(chuàng)新能力的提高是多學(xué)科、多層面長期共同努力的結(jié)果。

細(xì)胞生物學(xué)被列為生命科學(xué)的四大基礎(chǔ)學(xué)科之一，是在生命科學(xué)領(lǐng)域和高等教育體系中均占有重要位置的前沿學(xué)科。醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的許多重大發(fā)現(xiàn)與細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展創(chuàng)新有著密不可分的關(guān)系，掌握細(xì)胞生物學(xué)的基本理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)對醫(yī)學(xué)院校的碩士研究生培養(yǎng)而言意義日益突出。在醫(yī)學(xué)研究生課程體系中開設(shè)的細(xì)胞生物學(xué)課程，在有助于幫助學(xué)生掌握基本技能、培養(yǎng)科研思維的同時(shí)，如何利用課程授課的機(jī)會，培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力，做好創(chuàng)新能力培養(yǎng)的關(guān)鍵一環(huán)，是我們當(dāng)前面對的教育課題之一。我們在研究生細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)中更有針對性地加強(qiáng)創(chuàng)新能力和實(shí)踐能力的培養(yǎng)，在教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法和考核方式等方面進(jìn)行改革探索，在教學(xué)改革的實(shí)踐中對改革的迫切性、系統(tǒng)性有了更深的體會。

一、更新教育觀念，加強(qiáng)師資隊(duì)伍建設(shè)

1.教育觀念更新是前提。我們在教學(xué)實(shí)踐中也認(rèn)識到忽視能力培養(yǎng)是制約創(chuàng)新型人才成長的主要原因，具體表現(xiàn)在三個(gè)方面：一是忽視實(shí)踐能力的培養(yǎng)，按著教學(xué)計(jì)劃和教科書一章一節(jié)地向?qū)W生講授，學(xué)生熟背理論而與實(shí)踐脫節(jié)。二是忽視自主能力的培養(yǎng)，限定領(lǐng)域不考慮學(xué)生的興趣和愛好，不主張學(xué)生的自主發(fā)揮，學(xué)生理解書本但不會思考。三是忽視學(xué)生探索能力的培養(yǎng)，只學(xué)習(xí)已有結(jié)論和經(jīng)驗(yàn)，忽視未知領(lǐng)域的大膽探索和形成結(jié)論的深入研究[1]。在實(shí)現(xiàn)碩士研究生創(chuàng)新能力培養(yǎng)的過程中，導(dǎo)師及教學(xué)團(tuán)隊(duì)的教學(xué)觀念的更新是前提，也是基礎(chǔ)。各指導(dǎo)教師的創(chuàng)新力的保持和對教育教學(xué)先進(jìn)理念和技術(shù)的不斷學(xué)習(xí)有助于保持教學(xué)的生命力。

2.師資隊(duì)伍加強(qiáng)是保障。國務(wù)院學(xué)位委員會辦公室主任、中科院院士楊玉良曾說過：“改革研究生培養(yǎng)機(jī)制、不斷提高研究生教育質(zhì)量，加速培養(yǎng)創(chuàng)新型人才，是一個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)工程，不僅要重視提高研究生本身的質(zhì)量，更要重視提高研究生導(dǎo)師的質(zhì)量?！盵2]研究生和導(dǎo)師之間關(guān)系的滿意度調(diào)查顯示師生雙方的總體滿意度較高，但依然存在一定的問題，并認(rèn)為導(dǎo)師的學(xué)術(shù)素質(zhì)是影響研究生培養(yǎng)的關(guān)鍵因素之一[3-4]。我們的師資隊(duì)伍建設(shè)目標(biāo)是業(yè)務(wù)精湛、勇于創(chuàng)新、師德高尚、教風(fēng)嚴(yán)謹(jǐn)，梯隊(duì)合理。搭建技術(shù)力量雄厚的師資成為高素質(zhì)創(chuàng)新人才培養(yǎng)的強(qiáng)有力的保障。我們在師資隊(duì)伍的建設(shè)中，重引進(jìn)也更重培養(yǎng)，引進(jìn)看學(xué)歷、選專業(yè)、重學(xué)緣，培養(yǎng)分批次、重堅(jiān)持，力求優(yōu)勢互補(bǔ)；在日常工作中，我們以小型的學(xué)術(shù)報(bào)告會的形式加強(qiáng)交流，互助共進(jìn)；在梯隊(duì)建設(shè)上，看重專家教授的經(jīng)驗(yàn)，也注意吸納思維活躍的中青年學(xué)者；并依據(jù)多學(xué)科交叉和融合，學(xué)生的興趣主導(dǎo)，確立了雙導(dǎo)師制，并注意雙師型教師的培養(yǎng)。

二、深化課堂改革，推行創(chuàng)新課堂

1.課程設(shè)置合理化。研究生課程體系的設(shè)置做到適時(shí)調(diào)整，豐富選課資源的同時(shí)，加強(qiáng)學(xué)生選課的自主性，充分考慮學(xué)生的個(gè)性化培養(yǎng)的需求。

2.優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容。創(chuàng)新型人才培養(yǎng)模式改革首要是課程改革，而課程改革首先要解決的問題是教學(xué)內(nèi)容的優(yōu)化。研究生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)應(yīng)該是建立在知識、能力、素質(zhì)的辯證統(tǒng)一的基礎(chǔ)上。知識作為能力和素質(zhì)的載體，是不可或缺的重要一環(huán)，研究生階段知識的獲取不應(yīng)該局限于本科階段的某一本教材的重復(fù)拓展。我們在課堂設(shè)計(jì)中集思廣益，打破教材的局限，以學(xué)生興趣為出發(fā)點(diǎn)，設(shè)置了十個(gè)小的專題題目，專題內(nèi)容涉及細(xì)胞生物學(xué)的基本技術(shù)及其創(chuàng)新、前沿知識、熱點(diǎn)領(lǐng)域，并充分考慮細(xì)胞生物學(xué)與醫(yī)學(xué)的密切關(guān)系。如細(xì)胞通訊、細(xì)胞信號跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)及其與疾病的關(guān)系，端粒、端粒酶和腫瘤的關(guān)系及其研究進(jìn)展，細(xì)胞骨架與運(yùn)動和神經(jīng)系統(tǒng)疾病的關(guān)系舉例（原因分析、分子細(xì)胞學(xué)調(diào)整、研究進(jìn)展）等。學(xué)生既能從中鞏固提煉的基本理論框架，又能獲得豐富的前沿信息，在學(xué)習(xí)中還有助于科研方向的確立和科研思維的培養(yǎng)。

3.改革教學(xué)方法。我們在前幾年的教學(xué)中留心對研究生的理論基礎(chǔ)、能力水平和喜歡的教學(xué)模式做了問卷調(diào)查，相對于本科生研究生階段學(xué)生的特點(diǎn)突出表現(xiàn)為：已經(jīng)具有比較廣泛、系統(tǒng)的理論知識基礎(chǔ)，并具備一定的分析問題的能力，更向往自由的思維和互動表達(dá)。綜合研究生的特點(diǎn)和現(xiàn)代教育技術(shù)的發(fā)展，我們在課堂教學(xué)中試行教學(xué)方法改革，徹底改變教師灌輸知識的單一模式，更多地讓學(xué)生自主學(xué)習(xí)，教師擔(dān)負(fù)引導(dǎo)、組織實(shí)施、總結(jié)和考評的職責(zé)，更多的時(shí)候也是討論和爭論的主體之一，變師徒關(guān)系為伙伴關(guān)系。具體實(shí)施是依據(jù)學(xué)生興趣分組，3～4人/組，組內(nèi)分工協(xié)作，依據(jù)自己所選的感興趣的專題查閱資料，開展討論并推舉一人以PPT文稿的形式圖文結(jié)合在課堂上匯報(bào)講解，同學(xué)可以自由提問，教師做針對性的點(diǎn)評、補(bǔ)充。創(chuàng)新的課堂組織從學(xué)生的興趣出發(fā)保障了自主學(xué)習(xí)的效率，協(xié)作中鍛煉了學(xué)生的團(tuán)隊(duì)意識和合作能力，課堂表達(dá)和提問互動有效地活躍了學(xué)習(xí)氣氛，調(diào)動了學(xué)習(xí)的積極性，并提高了學(xué)生綜述及表達(dá)能力。此種形式受到了選課學(xué)生的一致好評，也吸引了更多的研究生加入我們的學(xué)習(xí)隊(duì)伍中。

4.考評手段合理化。在轉(zhuǎn)變教師單向傳授知識模式的同時(shí)，打破以考試分?jǐn)?shù)作為衡量教育成果的唯一標(biāo)準(zhǔn)的劃一呆板的考評制度。對學(xué)生學(xué)習(xí)的評價(jià)主要是課堂表現(xiàn)和實(shí)踐實(shí)訓(xùn)，各占50%。課堂表現(xiàn)的評價(jià)中以小組匯報(bào)講解中的綜合能力表現(xiàn)作為主要的考評指標(biāo)，并逐步完善了評分標(biāo)準(zhǔn)，簡介如下：基本原理簡明扼要、切中要點(diǎn)、通俗易懂；研究應(yīng)用舉例典型、兼顧多方面；重視結(jié)果分析（盡量使用圖表）；重視技術(shù)發(fā)展的進(jìn)展和研究理論進(jìn)展（突出新意）。除了陳述者有獎勵(lì)分之外，課堂提問及回答者都有酌情加分，極大地調(diào)動了學(xué)生的積極性。學(xué)生課前準(zhǔn)備、課堂提問、課后總結(jié)的學(xué)習(xí)資料都可以組織建立個(gè)人學(xué)習(xí)檔案，學(xué)習(xí)檔案也可作為酌情加分的因素。

三、反饋與思考

教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法及新的考評方法改革的突出優(yōu)勢在于愛護(hù)和培養(yǎng)學(xué)生的好奇心、求知欲，幫助學(xué)生自主學(xué)習(xí)，獨(dú)立思考，保護(hù)學(xué)生的探索精神、創(chuàng)新思維，營造崇尚真知、追求真理的氛圍，為學(xué)生的稟賦和潛能的充分開發(fā)創(chuàng)造一種寬松的環(huán)境。讓學(xué)生感受、理解知識產(chǎn)生和發(fā)展的過程，培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)精神和創(chuàng)新思維，重視培養(yǎng)學(xué)生收集處理信息的能力，獲取新知識的能力，分析問題和解決問題的能力，語言文字表達(dá)以及團(tuán)結(jié)協(xié)作能力。

但在試行新的教學(xué)方法的同時(shí)，我們也發(fā)現(xiàn)了一些有待于改進(jìn)的問題。在課程體系的設(shè)置中需要合理調(diào)研，依據(jù)社會、培養(yǎng)目標(biāo)和學(xué)生主體的需求做出調(diào)整，充分適應(yīng)多學(xué)科交叉融合的需求。在教學(xué)內(nèi)容的優(yōu)化上，學(xué)生更注重研究進(jìn)展的討論和熱點(diǎn)文獻(xiàn)的分析，教學(xué)內(nèi)容需要每年更新，不能一成不變。在教學(xué)方法改革中，試行討論式課堂的問題反應(yīng)在四個(gè)方面：個(gè)別小組成員因自制力不強(qiáng)、計(jì)算機(jī)水平限制、口頭表達(dá)能力欠缺等原因?qū)λx專題的基本理論或研究進(jìn)展陳述不清楚，會一定程度上影響其他同學(xué)對該專題領(lǐng)域的學(xué)習(xí)。在課堂匯報(bào)環(huán)節(jié)，受部分同學(xué)表達(dá)能力的影響，學(xué)生的注意力不容易集中，課堂進(jìn)展的節(jié)奏會略顯拖沓。在教學(xué)過程中容易出現(xiàn)兩極分化的現(xiàn)象，部分學(xué)生的主動性得到了很好的發(fā)揮，綜合能力得到了比較充分的鍛煉，也有個(gè)別學(xué)生在混學(xué)分，并沒有進(jìn)行真正的自主學(xué)習(xí)。且教師對新的教學(xué)方法的理解和掌握的程度也一定程度上影響了學(xué)生的學(xué)習(xí)效果。在評價(jià)體系中，給學(xué)生公正、全面、合理的評價(jià)影響著學(xué)生的學(xué)習(xí)態(tài)度和熱情，但其過程是相當(dāng)煩瑣的，需要教師團(tuán)隊(duì)比較多的精力投入，適當(dāng)?shù)募?lì)機(jī)制能更好地配合教學(xué)改革的推進(jìn)。

四、展望

創(chuàng)新能力是科技發(fā)展的核心動力，碩士研究生培養(yǎng)作為高等教育的重要一環(huán)，更需要創(chuàng)新能力。碩士研究生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)需要更多體現(xiàn)在實(shí)踐實(shí)訓(xùn)中，是一個(gè)循序漸進(jìn)的過程，需要學(xué)校、學(xué)院、導(dǎo)師和學(xué)生等多個(gè)主體的重視和參與，但基礎(chǔ)是作為碩士研究生培養(yǎng)的導(dǎo)師或?qū)焾F(tuán)隊(duì)中的每一位教師，都能保持教育改革的熱情，及時(shí)地發(fā)現(xiàn)現(xiàn)代教育中存在的問題，并能擁有足夠的改革的勇氣和決心。教師的教育理念的轉(zhuǎn)變和教學(xué)技術(shù)、方法的不斷提高完善，才能真正推動碩士研究生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。

參考文獻(xiàn)：

[1]江龍華.論基于創(chuàng)新型人才培養(yǎng)的高校教學(xué)模式改革[J].現(xiàn)代大學(xué)教育，2007，（5）：102-105.

[2]周晉，王樹葉，劉述川.醫(yī)學(xué)研究生教育的發(fā)展與創(chuàng)新[J].西北醫(yī)學(xué)教育，2007，15（5）：787-789.

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0.009）；單克隆p75NTR陽性細(xì)胞再培養(yǎng)2周后，p75NTR陽性細(xì)胞率分別降為14.5%（Tca-8113）和5.8%（Cal-27）；p75NTR陽性細(xì)胞體外增殖能力顯著增強(qiáng)，且具有明顯的侵襲遷移能力。結(jié)論 p75NTR陽性舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞具有腫瘤干細(xì)胞的特性。

[關(guān)鍵詞] 舌鱗狀細(xì)胞癌； 腫瘤干細(xì)胞； p75神經(jīng)營養(yǎng)蛋白受體

[中圖分類號] R 739.86 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A [doi] 10.7518/hxkq.2014.01.005

Study of the biological characteristics of p75 neurotrophin receptor positive tongue squamous cell carcinoma cells Tong Dongdong1，2， Zhang Fenghe1，2， Yao Yao3， Zhang Zhaotao1，2， Wang Jinbing1，2， Li Qing1，2， Zhang Xinlian1，2. （1. Dept. of Oral and Maxillofacial Surgery， Stomatology Hospital of Shandong University， Jinan 250012， China； 2. Shandong Provincial Key Labo-ratory of Oral Biomedicine， Jinan 250012， China； 3. Dept. of Stomatology， Anhui No.2 Provincial People’s Hospital， Anhui 230022， China）

[Abstract] Objective To study the biological characteristics of p75 neurotrophin receptor positive （p75NTR+） tongue squa-mous cell carcinoma cells which were separated by flow cytometry cell sorting. Methods To determine the biological cha-racteristics of p75NTR+ cells which were separated from Tca-8113 and Cal-27 tongue squamous cell carcinoma cells by flow cytometry cell sorting， including study the capacity of cloning， 3-（4，5）-demethylthiazo（z-y1）-3，5-diphenytetrazoliumromide （MTT） assay， wound healing assay. p75NTR+ cells with non-sorted cells were as control group. Results In Tca-8ll3 and Cal-27 tongue squamous cell carcinoma cell lines， the percentage of p75NTR+ cells were 3.1% and 1.9%. Compared with p75NTR+ cells with non-sorted cells， p75NTR+ cells possess higher capacity of cloning （Tca-8113， P=0.024； Cal-27， P=0.009）. The per-centage of p75NTR+ cells of the progeny cells generated from monoclonal p75NTR+ cells decreased to 14.5% （Tca-8113） and 5.8% （Cal-27） after cultured two weeks. p75NTR+ cells possessed higher proliferation ability and higher metastasis ability than non-sorted cells. Conclusion p75NTR+ cells isolated from tongue squamous cell carcinoma have the characteristics of cancer stem cells.

[Key words] tongue squamous cell carcinoma； cancer stem cells； p75 neurotrophin receptor

腫瘤干細(xì)胞（cancer stem cells，CSCs）是腫瘤組織中具有自我更新、多向分化及較強(qiáng)增殖能力的少量干細(xì)胞樣癌細(xì)胞亞群，是腫瘤起源、生長、轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)的根源所在。近年來，尋找靶向殺死腫瘤干細(xì)胞的抗癌策略已成為研究的熱點(diǎn)。其中，選擇何種細(xì)胞表面標(biāo)志物來證實(shí)舌癌中腫瘤干細(xì)胞的存在并完成對腫瘤干細(xì)胞的提取和鑒別是首要亟待解決的問題。研究發(fā)現(xiàn)p75神經(jīng)營養(yǎng)蛋白受體（p75 neu-rotrophin receptor，p75NTR）的表達(dá)與多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展相關(guān)，并已證實(shí)其在全身多種腫瘤中可以作為一種腫瘤干細(xì)胞的表面標(biāo)志物[1]。本實(shí)驗(yàn)采用p75NTR對舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Tca-8113及Cal-27進(jìn)行標(biāo)記、檢測、分選，并對分選后的p75NTR陽性細(xì)胞進(jìn)行生物學(xué)特性研究，探討p75NTR作為腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物和預(yù)測口腔鱗狀細(xì)胞癌愈后指標(biāo)的可能性，為深入研究舌鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)病機(jī)理和尋找新的治療靶點(diǎn)提供線索。

1 材料和方法

1.1 材料

Tca-8113、Cal-27細(xì)胞株來源于口腔舌鱗狀細(xì)胞癌，由上海交通大學(xué)附屬第九人民醫(yī)院口腔頜面外科腫瘤生物實(shí)驗(yàn)室惠贈。Tca-8113細(xì)胞株用含10%FBS（杭州四季青生物工程材料研究所）的RPMI1640培養(yǎng)液培養(yǎng)。Cal-27細(xì)胞株用含10%FBS（GIBCO公司，美國）的高糖DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)。PE標(biāo)記的鼠抗人p75NTR抗體及PE標(biāo)記的小鼠骨髓瘤蛋白IgG1，κ抗體均購自美國BD公司。

1.2 流式細(xì)胞儀檢測p75NTR陽性細(xì)胞的表達(dá)

將生長狀況良好并處于對數(shù)生長期的Tca-8113細(xì)胞制備成單細(xì)胞懸液，并且調(diào)整細(xì)胞密度為1.0×106個(gè)·mL-1 。實(shí)驗(yàn)分為2組，實(shí)驗(yàn)組加入100 μL PE標(biāo)記小鼠抗人p75NTR抗體，對照組加入等量的PE標(biāo)記小鼠骨髓瘤蛋白IgG1，κ。放入冰里置于震蕩箱中蔽光孵育半小時(shí)，1 000 r·min-1離心5 min，吸棄上清后Buffer I l mL沖洗吹打（反復(fù)沖洗、離心2次），重懸于400 μL PBS中。將加入等量PE標(biāo)記小鼠骨髓瘤蛋白IgG1，κ的對照組先上機(jī)調(diào)節(jié)機(jī)器參數(shù)，然后取實(shí)驗(yàn)組上機(jī)檢測細(xì)胞熒光值，分析p75NTR陽性細(xì)胞的百分含量，重復(fù)3次取平均值。同法處理Cal-27細(xì)胞。

1.3 p75NTR陽性細(xì)胞生物學(xué)特性檢測

1.3.1 以p75NTR為標(biāo)記分選陽性細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組 將生長狀況良好并處于對數(shù)生長期的較大數(shù)量的2種舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞（約1.0×108個(gè)·mL-1）如上法處理后上機(jī)進(jìn)行高速分選，獲得p75NTR陽性細(xì)胞，作為實(shí)驗(yàn)組。為了保證分選后富集的p75NTR陽性細(xì)胞的純度，分選時(shí)選取強(qiáng)陽性區(qū)域。重復(fù)上機(jī)一次，以避免標(biāo)記物丟失造成的陽性率偏低。并取適量分選后的細(xì)胞上機(jī)檢測p75NTR陽性細(xì)胞的純度。

1.3.2 對照組處理 將同等條件培養(yǎng)的2種舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系細(xì)胞制備成單細(xì)胞懸液，加入PE標(biāo)記小鼠抗人p75NTR抗體，放入冰里置于震蕩箱中蔽光孵育半小時(shí)，再放入離心機(jī)離心5 min（1 000 r·min-1），棄上清后Buffer I l mL沖洗吹打（反復(fù)沖洗、離心2次），作為對照組備用。

1.3.3 單克隆培養(yǎng) 取對數(shù)生長期的2組細(xì)胞于超凈臺中常規(guī)消化制成單細(xì)胞懸液后，用有限稀釋法接種于96孔板中。5%CO2、37 ℃飽和溫度環(huán)境培養(yǎng)觀察細(xì)胞貼壁情況，記錄僅有一個(gè)細(xì)胞的孔，并做標(biāo)記。2周后統(tǒng)計(jì)單克隆形成率。收集p75NTR陽性細(xì)胞形成的單克隆細(xì)胞，培養(yǎng)于培養(yǎng)瓶中，再培養(yǎng)2周后進(jìn)行p75NTR的流式細(xì)胞檢測。

1.3.4 四甲基偶氮唑鹽比色法[（3-（4，5）-demethylthiazo

（z-y1）-3，5-diphenytetrazoliumromide，MTT]實(shí)驗(yàn) 收集2組細(xì)胞，分別接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中（每孔約4×103個(gè)細(xì)胞）（周邊空不加），再各加入200 μL培養(yǎng)液（周邊空不加，B3孔只加入PBS作為對照）。培養(yǎng)24 h后，換液，B3孔換200 μL PBS。每孔加入20 μL MTT溶液，培養(yǎng)4 h后吸出上清液，加入150 μL二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO），置于搖床上低速震蕩10 min。以B3孔為調(diào)零孔，上酶聯(lián)免疫檢測儀，以490 nm吸光度值量化活細(xì)胞數(shù)，每次檢測一豎列的6個(gè)平行孔，每組所得數(shù)據(jù)取平均值，連續(xù)檢測7 d。以生長時(shí)間為橫坐標(biāo)，以光密度（op-tical density，OD）值為縱坐標(biāo)，繪制細(xì)胞的生長曲線。

1.3.5 劃痕實(shí)驗(yàn) 將2組細(xì)胞以每孔1×105個(gè)的密度接種于六孔板中，待細(xì)胞生長到80%～90%時(shí)，無菌條件下更換為無血清的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)12 h后，于超凈臺中用200 μL槍頭在每個(gè)孔的中間劃一條豎直的線，PBS沖洗3遍。每孔加入2 mL完全培養(yǎng)液，倒置顯微鏡下觀察并拍照記錄。之后每天換液，拍照，連續(xù)8 d。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各組間的比較采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行分析，P

2 結(jié)果

2.1 流式細(xì)胞儀檢測p75NTR陽性細(xì)胞的表達(dá)

舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株Tca-8113、Cal-27細(xì)胞中，p75NTR陽性細(xì)胞的比例分別為3.1%和1.9%。

2.2 流式細(xì)胞分選及純度檢測

分選后p75NTR陽性細(xì)胞的比例分別為98.1%（Tca-

8113）和97.4%（Cal-27）。這表明目的細(xì)胞陽性率比較高。

2.3 單克隆培養(yǎng)

2組單克隆形成能力的比較見表1。從表1可見，只有小部分細(xì)胞能持續(xù)分裂增殖。實(shí)驗(yàn)組的單克隆形成能力高于對照組（Tca-8113細(xì)胞，P=0.024；Cal-

27細(xì)胞，P=0.009）。這表明p75NTR陽性細(xì)胞具有自我更新和分化能力。單克隆細(xì)胞再培養(yǎng)2周后，Tca-

8113的p75NTR陽性細(xì)胞率降為14.5%，Cal-27的p75NTR陽性細(xì)胞率降為5.8%。

2.4 MTT實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞生長曲線（圖1、2）表明：2組細(xì)胞第1天生長情況無明顯差異，從第3天之后實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞較之對照組細(xì)胞體外增殖能力明顯增強(qiáng)，第5天及第7天時(shí)更加顯著（P

2.5 劃痕實(shí)驗(yàn)

劃痕后7 d，實(shí)驗(yàn)組較對照組具有明顯的愈合能力（圖3、4）。Tca-8113實(shí)驗(yàn)組到第8天已經(jīng)基本被細(xì)胞長滿，而對照組卻仍有空白區(qū)域（圖5），Cal-

27實(shí)驗(yàn)組到第5天已經(jīng)基本長滿劃痕區(qū)域，完全長滿需要7 d（圖6）。這說明實(shí)驗(yàn)組具有明顯的侵襲遷移能力。

圖 1 2組Tca-8113細(xì)胞生長曲線（MTT實(shí)驗(yàn)）

Fig 1 Cells growth curve of Tca-8113 of two groups （MTT test）

圖 2 2組Cal-27細(xì)胞生長曲線（MTT實(shí)驗(yàn)）

Fig 2 Cells growth curve of Cal-27 of two groups （MTT test）

圖 5 2組Tca-8113細(xì)胞不同時(shí)間的劃痕距離比較

Fig 5 The comparison of scratch distance in different times of Tca-

8113 of two groups

圖 6 2組Cal-27細(xì)胞不同時(shí)間的劃痕距離比較

Fig 6 The comparison of scratch distance in different times of Cal-

27 of two groups

3 討論

腫瘤干細(xì)胞是腫瘤起源、生長、轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)的根源所在。近年來，通過對其生物學(xué)特性的研究，尋找靶向殺死腫瘤干細(xì)胞的抗癌策略成為研究的熱點(diǎn)。p75NTR是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子的低親和力受體，可通過不同的信號傳導(dǎo)通路誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生增殖、分化、遷移、凋亡等生物學(xué)行為。近年來，研究發(fā)現(xiàn)p75NTR的表達(dá)與胃癌[2] 、視網(wǎng)膜成神經(jīng)細(xì)胞瘤[3]、前列腺癌[4]、胰腺癌[5]、黑色素瘤[6]等多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展相關(guān)，并已證實(shí)其在全身多種腫瘤中可作為一種腫瘤干細(xì)胞的表面標(biāo)志物[1]。本實(shí)驗(yàn)檢測發(fā)現(xiàn)p75NTR在舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Tca-8113及Cal-27中都有陽性表達(dá)，且其陽性率分別為3.1%和1.9%。這與以往報(bào)道中腫瘤干細(xì)胞數(shù)量相當(dāng)[7-8] 。

腫瘤細(xì)胞的克隆形成能力與其致瘤能力呈正相關(guān)[9]，并且只有腫瘤干細(xì)胞具有單克隆形成能力和強(qiáng)致瘤性[10-11]。本研究單克隆培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)細(xì)胞株的p75NTR陽性細(xì)胞的體外單克隆形成能力相對于未分選的細(xì)胞均顯著增強(qiáng)，符合其是具有自我更新能力的腫瘤干細(xì)胞的理論。同時(shí)，本實(shí)驗(yàn)利用流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)單克隆4周后的p75NTR陽性細(xì)胞的p75NTR陽性率明顯下降，其分化產(chǎn)生了大量p75NTR陰性細(xì)胞，該結(jié)果說明p75NTR陽性細(xì)胞具有較強(qiáng)的克隆形成能力并具有一定的分化潛能。

本研究用MTT法對舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株Tca-8113和Cal-27中的p75NTR陽性細(xì)胞及未分選細(xì)胞的體外增殖能力進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)p75NTR陽性細(xì)胞的生長速度明顯快于未分選的細(xì)胞，這也表明p75NTR陽性細(xì)胞具有較強(qiáng)的增殖能力，符合其作為腫瘤干細(xì)胞的特性。侵襲轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最重要的生物學(xué)行為，是導(dǎo)致手術(shù)、放療、化療失敗和患者死亡的主要原因。劃痕實(shí)驗(yàn)證明p75NTR陽性細(xì)胞具有更強(qiáng)的遷移能力。由于2種細(xì)胞的生長速度差別較大，所以在劃痕實(shí)驗(yàn)中沒有做同期的橫向比較。

綜上，筆者認(rèn)為p75NTR可作為舌鱗狀細(xì)胞癌干細(xì)胞的一種表面標(biāo)志物。由于本課題組前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)p75NTR在正常舌組織中是陰性表達(dá)的[12]，那么針對p75NTR這個(gè)新的靶點(diǎn)對腫瘤進(jìn)行的治療就不會對正常舌干細(xì)胞構(gòu)成傷害。當(dāng)然，針對臨床應(yīng)用還需要更深入的研究，但是相信隨著研究的不斷進(jìn)展，其將有望為舌癌的臨床預(yù)防和診治開辟新的思路和策略。

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篇4

關(guān)鍵詞：服務(wù)外包；英語教學(xué)；人才需求；人才培養(yǎng)；就業(yè)

中圖分類號：TP393 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1009-3044（2016）22-0111-03

1 研究背景

軟件服務(wù)外包是近些年來較為熱門的一個(gè)話題，所謂軟件服務(wù)外包即將軟件開發(fā)過程中一部分非核心的開發(fā)項(xiàng)目通過對外發(fā)包的方式交給其他公司負(fù)責(zé)開發(fā)完成，在此過程中由于不同地區(qū)人力資源成本不同，從而可降低軟件開發(fā)中的人力資源成本。眾所周知，在軟件開發(fā)的成本中，人力資源成本占比達(dá)70%以上，所以軟件服務(wù)外包能有效地降低軟件公司的開發(fā)成本。

我國的軟件服務(wù)外包產(chǎn)業(yè)仍在快速的發(fā)展中，美、歐、港、日為國際服務(wù)的主要發(fā)包市場，因此，從事軟件服務(wù)外包方面工作的人員往往需要具備一定的英語語言交際能力。目前我國的一些軟件企業(yè)在承接來自歐美的外包項(xiàng)目時(shí)顯得力不從心，便是因?yàn)槠鋯T工的英語語言溝通能力不夠理想。

目前許多高校中僅重視專業(yè)知識的培養(yǎng)，對于學(xué)生的外語能力僅要求其能夠獲得大學(xué)英語能力四級或六級證書，而不是將專業(yè)知識與英語溝通能力有機(jī)地結(jié)合起來。本文通過分析合肥學(xué)院計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)系學(xué)生的需求，結(jié)合企業(yè)的需求探究影響軟件服務(wù)外包專業(yè)學(xué)生英語學(xué)習(xí)的因素及英語與軟件服務(wù)外包專業(yè)學(xué)生其職業(yè)生涯的關(guān)聯(lián)，為學(xué)生實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量就業(yè)打下堅(jiān)實(shí)的語言基礎(chǔ)。

2 對影響大學(xué)生英語學(xué)習(xí)的因素的探究

為了解影響軟件外包專業(yè)學(xué)生英語技能學(xué)習(xí)的因素，我們向合肥學(xué)院計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)專業(yè)2011、2012級學(xué)生發(fā)放調(diào)研問卷83份，收回調(diào)研問卷78份，回收率為93.97%，其中有效問卷75份，占發(fā)放問卷的90.36%。

2.1 影響英語技能學(xué)習(xí)的學(xué)生因素

1）性別分布

在75份有效問卷中，男性61人，占總?cè)藬?shù)的81.33%，女性14人，占總?cè)藬?shù)的18.64%。

2）年級分布

在75份有效問卷中，2011級計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)（4）班39人，2012級計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)（3）班36人。

3）四、六級通過情況

在75份有效問卷中，僅通過四級的學(xué)生32人，占總?cè)藬?shù)的42.66%，通過6級的學(xué)生10人，占總?cè)藬?shù)的13.34%，未通過四級的學(xué)生33人，占總?cè)藬?shù)的44.00%。

4）學(xué)生學(xué)習(xí)英語的目的

調(diào)查表明，學(xué)生學(xué)習(xí)英語的主要目的為“將來求職需要”，占總?cè)藬?shù)的77.33%，其次是“交流、了解英語文化”與“應(yīng)付考試”分別占總?cè)藬?shù)的32%與30.67%，“學(xué)校要求”占總?cè)藬?shù)的24%。而“為出國準(zhǔn)備”占比最少，占總?cè)藬?shù)10.67%。

5）英語學(xué)習(xí)中最重要的是什么

從圖2中可以看出學(xué)生更加重視“與人交流”（50.67%）與“課外閱讀”（49.33%）而不是“背單詞、學(xué)課文、做練習(xí)”（45.33%）與“課后聽力、寫作訓(xùn)練”（34.67%）。這說明學(xué)生對現(xiàn)在課堂教學(xué)感到不滿足，除了書本知識外，還需要擴(kuò)展閱讀與實(shí)際運(yùn)用。

6）是否有計(jì)劃的學(xué)習(xí)英語

在問及學(xué)生是否有計(jì)劃地學(xué)習(xí)英語時(shí)，表示“沒有計(jì)劃”（46.67%）的人數(shù)最多，其次是“有短期計(jì)劃”（42.67%），而“有長期計(jì)劃”（9.33%）的人數(shù)較少，僅有1人“有長期計(jì)劃并分解為短期計(jì)劃”（1.33%）。

2.2 影響大學(xué)生英語技能學(xué)習(xí)的教學(xué)因素

1）學(xué)生認(rèn)為大學(xué)英語教學(xué)應(yīng)側(cè)重哪方面

從圖4中可以明顯地看出，學(xué)生希望教學(xué)中能側(cè)重對“聽說、讀寫技巧”（48%）的教學(xué)，而不是“詞匯、語法”（34.67%）、“英語文化背景”（10.67%）和“四、六級考試相關(guān)內(nèi)容”（6.67%）。

2）學(xué)生認(rèn)為大學(xué)英語的教學(xué)質(zhì)量

在目前的教學(xué)模式中，多數(shù)學(xué)生表示教學(xué)質(zhì)量“一般”（58.67%），僅有少數(shù)學(xué)生表示“很好”（9.33%），表示“較滿意”與不滿意的分別占總?cè)藬?shù)的18.67%與13.33%。

3）英語課中什么時(shí)候注意力最為集中

從圖6中可以看出，大部分學(xué)生在“教師與學(xué)生互動時(shí)”（54.67%）注意力最為集中，在“聽力練習(xí)時(shí)”（25.33%）較少，而“講授考試知識時(shí)”（14.67%）與“傳授課本知識時(shí)”（5.33%）時(shí)注意力最集中的學(xué)生人數(shù)，遠(yuǎn)少于前兩者。

4）為了更好的就業(yè)，學(xué)校在英語教學(xué)時(shí)應(yīng)該注重哪方面

從上圖中可以看出，為了更好就業(yè)，學(xué)生希望多學(xué)習(xí)“與計(jì)算機(jī)專業(yè)相關(guān)的英語知識”（46.67%）與“閱讀、寫作、聽力、口語等實(shí)用技能”（44%）而不是“基礎(chǔ)知識儲備”（9.33%）。

2.3 學(xué)生對入職后英語技能要求的自我認(rèn)識

1）英語對今后的工作是否會有幫助

從圖8中不難看出大部分學(xué)生認(rèn)為英語對今后工作“有一定幫助”（62.67%），但認(rèn)為有“有很大幫助”（29.33%）較少，也有極少數(shù)學(xué)生認(rèn)為“沒有幫助”（8%）。

2）學(xué)生對目前計(jì)算機(jī)行業(yè)市場上“計(jì)算機(jī)與英語雙優(yōu)”的復(fù)合型人才狀況的認(rèn)識

上圖表明，半數(shù)的學(xué)生認(rèn)為復(fù)合型人才屬于“供不應(yīng)求，緊缺”（50.67%），少數(shù)學(xué)生表示“不清楚”（24%），認(rèn)為“供需關(guān)系平衡”與“供過于求”分別占總?cè)藬?shù)的13.33%與12%。

3）學(xué)生最希望在入職時(shí)接受英語技能培訓(xùn)的分布

從上圖中可以看出，最希望接受“計(jì)算機(jī)專業(yè)英語”（40%）培訓(xùn)的學(xué)生最多，其次是“聽說能力”（26.67%）、“閱讀能力”（22.67%）、“英文寫作”（10.67%）。

3 對影響大學(xué)英語學(xué)習(xí)的因素的分析

3.1 學(xué)生因素

從整體情況上來看，合肥學(xué)院軟件服務(wù)外包專業(yè)學(xué)生中取得四、六級證書的比例并不高，僅為56%，通過對比取得四、六級證書的男、女生人數(shù)，發(fā)現(xiàn)女生的取得證書的比例要高于男生。

從“影響英語技能學(xué)習(xí)的學(xué)生因素”中可以發(fā)現(xiàn)，44.27%的學(xué)生學(xué)習(xí)英語的目的是為將來求職做準(zhǔn)備。學(xué)生在學(xué)習(xí)的過程中沒有明顯的側(cè)重點(diǎn)。對于英語學(xué)習(xí)，僅8%的學(xué)生表示能持之以恒，而非三天打魚兩天曬網(wǎng)，46.67%的學(xué)生表示沒有制訂學(xué)習(xí)計(jì)劃。

通過分析，不難得出結(jié)論，英語并沒有被軟件服務(wù)外包專業(yè)學(xué)生重視。學(xué)生雖然有較為明確的學(xué)習(xí)目的，但并未對英語學(xué)習(xí)投入足夠的時(shí)間與精力。這也是導(dǎo)致取得四、六級證書人數(shù)占比不高的主要原因。

3.2 教學(xué)因素

據(jù)調(diào)查顯示，48%的學(xué)生希望教師在教學(xué)時(shí)能側(cè)重“聽說、讀寫技巧”，同時(shí)58.67%的學(xué)生表示現(xiàn)有的英語教學(xué)質(zhì)量“一般”，僅有9.33%的學(xué)生表示“很好”。當(dāng)問及該怎樣提升教學(xué)質(zhì)量時(shí)，認(rèn)為應(yīng)將課堂教學(xué)中心由老師轉(zhuǎn)為學(xué)生 （32%）和使教學(xué)內(nèi)容重視實(shí)用性（37.33%）為主流的意見。

學(xué)生對目前的教學(xué)狀況感到不滿足，但也無法明確給出改善建議。在關(guān)于“教學(xué)課時(shí)”的調(diào)查中，半數(shù)以上的學(xué)生表示教學(xué)課時(shí)不充足。

85.33%的學(xué)生認(rèn)為英語學(xué)習(xí)需要特定的氛圍，54.67%的學(xué)生認(rèn)為教師與學(xué)生互動時(shí)學(xué)生的注意力最為集中。不愿參加課堂口語訓(xùn)練的學(xué)生中，70.18%表示是因?yàn)樽约嚎谡Z差、不敢說。71.67%的學(xué)生認(rèn)為考試在英語教學(xué)活動中占有重要地位。

為了更好地就業(yè)，大部分學(xué)生希望教師重視英語教學(xué)的實(shí)用性，希望教師著重教導(dǎo)閱讀、寫作、聽力、口語等實(shí)用技能及計(jì)算機(jī)專業(yè)英語知識。

綜上所述，學(xué)生不滿足于現(xiàn)有的教學(xué)質(zhì)量，希望通過與教師溝通達(dá)到提升教學(xué)質(zhì)量的效果，但學(xué)生對自己的需求并不明確。提升教學(xué)質(zhì)量，需提高學(xué)生在課堂中的主動性，才能在有限的教學(xué)時(shí)間中達(dá)到較好的教學(xué)效果。也需要教師了解企業(yè)的需求，有計(jì)劃地將學(xué)生需求與企業(yè)需求相融合，引導(dǎo)學(xué)生掌握能為職業(yè)生涯提供助力的英語技能。

3.3 求職因素

多數(shù)在校學(xué)生的職業(yè)規(guī)劃模糊，對就業(yè)前景無準(zhǔn)確的認(rèn)識。92%的學(xué)生認(rèn)為英語對今后工作能產(chǎn)生幫助。50.67%的學(xué)生認(rèn)為“計(jì)算機(jī)與英語雙優(yōu)”的復(fù)合型人才屬于緊缺人才。50.67%的學(xué)生認(rèn)為企業(yè)看中員工的英文閱讀能力。40%的學(xué)生希望在入職時(shí)，接受計(jì)算機(jī)專業(yè)英語培訓(xùn)。70.67%的學(xué)生認(rèn)為精通英語“可以更好的掌握國外的一些先進(jìn)技術(shù)（通過自己閱讀原著），使自己能完成更困難的工作”，但大多數(shù)學(xué)生并不認(rèn)為自己以后需要經(jīng)常使用英語與人交流。

通過對以上情況進(jìn)行分析，大多數(shù)學(xué)生認(rèn)為英語對職業(yè)生涯的幫助局限于通過閱讀專業(yè)文獻(xiàn)提升自己的編程水平，英語的口語及書面語交際能力并不被重視。

4 對大學(xué)英語學(xué)習(xí)與職業(yè)生涯關(guān)系的思考

通過對調(diào)查結(jié)果的分析，我們發(fā)現(xiàn)大部分軟件服務(wù)外包專業(yè)學(xué)生在學(xué)習(xí)英語時(shí)偏重于計(jì)算機(jī)專業(yè)英語的學(xué)習(xí)，在“閱讀、寫作、聽力、口語”等實(shí)用技能中，學(xué)生更加重視“閱讀”。為了探究英語對軟件服務(wù)外包專業(yè)學(xué)生的職業(yè)生涯是否有影響，調(diào)查人員咨詢了文思海輝技術(shù)有限公司的大區(qū)招聘經(jīng)理，希望能了解到這家世界一流的IT咨詢、解決方案和外包服務(wù)公司內(nèi)部對英語的真實(shí)要求。

通過訪談，我們發(fā)現(xiàn)在軟件外包企業(yè)中，特別是在一家有著外資背景的企業(yè)中，英語被普遍的使用。因?yàn)榘l(fā)包商多為歐美、東南亞諸國公司的原因，外包企業(yè)文化偏向于外企文化，日常的工作文檔、郵件大多數(shù)為英文書寫。如果員工的英語基礎(chǔ)扎實(shí)，且計(jì)算機(jī)水平足夠，將有機(jī)會被公司外派出國。軟件外包公司對英語及計(jì)算機(jī)雙優(yōu)型人才需求較大，其普通員工也需要有一定的聽說、讀寫等英語表達(dá)能力，是否通過四、六級會成為員工入職時(shí)英語水平的參考依據(jù)之一。

通過與往屆畢業(yè)生交流，上述的情況得以驗(yàn)證。并且，在他們工作的諸多公司中，部分公司明確表示取得大學(xué)英語水平四級證書是錄用的最低標(biāo)準(zhǔn)，且公司內(nèi)部對英語交流能力的要求高于閱讀。

英語水平的優(yōu)秀與否，將能左右軟件服務(wù)外包專業(yè)學(xué)生今后的職業(yè)生涯，學(xué)好英語已成為軟件服務(wù)外包專業(yè)學(xué)生必須達(dá)成的目標(biāo)，這關(guān)乎其職業(yè)生涯道路的寬廣與否。

參考文獻(xiàn)：

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篇5

【摘要】 目的 觀察不同年齡段大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adiposederived stromal cells， ADSCs)生物學(xué)特點(diǎn)與年齡的關(guān)系，為臨床尋找理想的種子細(xì)胞并迅速獲取所需ADSCs提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法 使用密度梯度離心法分離不同年齡段脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，保留貼壁細(xì)胞傳代，分析脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的純度，觀察細(xì)胞生長情況，檢測其增殖活性、細(xì)胞周期。結(jié)果 不同年齡段ADSCs均貼壁生長，呈典型ADSCs形態(tài)和生長特征，傳代細(xì)胞的增殖速度比原代細(xì)胞快，但隨著年齡的增長，原代及傳代培養(yǎng)ADSCs的增殖能力下降，生長周期延長。結(jié)論 ADSCs的增殖能力和活性隨著年齡的增長而降低，但各年齡段ADSCs均可滿足臨床不同患者組織工程種子細(xì)胞的要求。

【關(guān)鍵詞】 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞；年齡；大鼠；細(xì)胞培養(yǎng)；增殖

ABSTRACT: Objective To investigate biological characteristics of rat adiposederived stromal cells (ADSCs) of different ages. Methods ADSCs were isolated by density gradient centrifugation from different age stages， and cultured in vitro. The adherent cells were preserved to passage， the purity of ADSCs was analyzed by immunocytochemistry method， and cell growth was observed， then proliferation capability and cell cycle were detected. Results All the ADSCs obtained from different age stages grew well and showed good morphology and growth characteristics. The proliferation rate of passage cells was higher than that of primary cells， but the proliferation activity reduced with aging， and cell cycle was prolonged. Conclusion The proliferation capability and activity of ADSCs decreased with aging. However， ADSCs of different age stages can all meet the needs of different patients for tissue engineering seed cells.

KEY WORDS: adipose derived stem cell; age; rat; cell culture; proliferation

組織工程的興起和迅猛發(fā)展為臨床修復(fù)重建帶來了新的治療途徑，成為目前最有前景的生理性修復(fù)技術(shù)[12]。種子細(xì)胞的選擇是組織工程的基礎(chǔ)和關(guān)鍵之一。2001年ZUK等[3]通過脂肪抽吸術(shù)獲得脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adiposederived stromal cells， ADSCs)。ADSCs具有來源豐富、易于獲取、自體移植可以避免排斥反應(yīng)以及許多倫理問題等優(yōu)點(diǎn)。大量研究發(fā)現(xiàn)，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells， BMSCs)的含量、質(zhì)量以及活性隨著年齡的增長而下降[4]。但是不同年齡的ADSCs在體外生長及增殖能力是否具有差異，是否能夠滿足臨床修復(fù)的需要?ADSCs能否成為組織工程新的最理想的種子細(xì)胞?本研究旨在探討不同年齡階段ADSCs的生長增殖能力及其機(jī)制，為ADSCs的體外培養(yǎng)及臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑 DMEM、胎牛血清(Gibco)、Ⅰ型膠原酶(Sigma)、EDTA、MTT(Amerison)、CD34、CD44、CD49d、CD106(Sigma)。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物分組 健康SD大鼠，雌雄不限，按月齡分為幼年組(1月齡)、成年組(12月齡)和老年組(24月齡)。體重分別約為150、400、750g。

1.3 ADSCs的分離培養(yǎng)及傳代 取SD大鼠，脫頸處死，消毒，無菌條件下取腹股溝部及腎下1g脂肪組織，去除其他組織，用PBS沖洗3次，將脂肪組織剪成大約1mm3小塊，置2g/LⅠ型膠原酶中，消化60min，然后1000r/min，離心10min，棄上清，用含100mL/L胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)，接種于培養(yǎng)瓶中，常規(guī)培養(yǎng)。待細(xì)胞融合達(dá)80%時(shí)1∶2傳代、擴(kuò)增培養(yǎng)。

1.4 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察 每日在倒置顯微鏡下觀察原代及傳代細(xì)胞的生長情況以及形態(tài)特點(diǎn)。

1.5 ADSCs表面標(biāo)記的檢測 取第3代的ADSCs，分為4份，分別滴加兔抗鼠CD34、CD44、CD49d、CD106一抗，4℃反應(yīng)30min后，PBS洗滌2次，滴加異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的抗兔IgG，避光固定，經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面CD34、CD44、CD49d、CD106陽性細(xì)胞的表達(dá)。將第3代ADSCs多聚甲醛固定后，免疫細(xì)胞化學(xué)方法染色鑒定。

1.6 ADSCs生長周期的測定 取第3代細(xì)胞達(dá)80%融合時(shí)消化制成細(xì)胞懸液，滴入4℃預(yù)冷的700mL/L乙醇中固定30min，PBS漂洗離心，RNAseA處理30min，離心，加入碘化丙啶0.5mL，4℃避光染色30min，流式細(xì)胞儀488nm檢測。

1.7 繪制ADSCs的生長曲線 取各年齡組ADSCs以1×104/mL的密度接種于96孔培養(yǎng)板內(nèi)，每孔200μL，常規(guī)培養(yǎng)。每天同一時(shí)間隨機(jī)抽取6孔細(xì)胞，加入50g/L MTT 20μL/孔，培養(yǎng)4～6h，DMSO震蕩10min，酶聯(lián)免疫測定儀測定波長490nm處的吸光度。取6孔吸光度的均值，以時(shí)間(d)為橫坐標(biāo)，吸收值(A)為縱坐標(biāo)，繪制生長曲線。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。所有數(shù)據(jù)采用±s表示。組間比較采用單因素方差分析，方差不齊組經(jīng)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后再進(jìn)行方差分析；各組細(xì)胞生長曲線用重復(fù)測量的方差分析(Repeatedmeasures ANOVA)。P

2 結(jié)

果

2.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察

2.1.1 原代培養(yǎng)ADSCs的形態(tài)學(xué)觀察 通過密度梯度離心獲得的ADSCs接種后在懸液中細(xì)胞呈圓形，不能辨認(rèn)細(xì)胞核，各年齡組在原代培養(yǎng)24h，可見細(xì)胞開始貼壁，細(xì)胞呈星形，胞體較??；培養(yǎng)第4天，各組細(xì)胞形態(tài)無差別，均呈梭形、多角形；幼年組細(xì)胞數(shù)量多，形成集落明顯，克隆性生長(圖1A)；成年組細(xì)胞數(shù)量較多，克隆性生長(圖1B)；老年組細(xì)胞數(shù)量少，散在分布(圖1C)。幼年組ADSCs大約5d左右達(dá)到80%細(xì)胞融合基本鋪滿瓶底，成年組和老年組ADSCs分別需要6、8d左右才可以達(dá)到80%細(xì)胞融合，進(jìn)行傳代。

2.1.2 傳代培養(yǎng)ADSCs的形態(tài)學(xué)觀察 各年齡組均呈現(xiàn)特征性生長模式，傳代培養(yǎng)的ADSCs生長模式與原代培養(yǎng)細(xì)胞相似，但細(xì)胞增殖速度比原代明顯加快(圖2)，幼年組、成年組、老年組細(xì)胞分別為3、4、5d左右傳代，ADSCs多呈短梭形。

2.2 細(xì)胞表面標(biāo)記檢測 對各組第3代ADSCs通過流式細(xì)胞儀檢測了CD34、CD44、CD49d、CD106四個(gè)細(xì)胞表面標(biāo)記，各年齡組細(xì)胞表面CD44、CD49d陽性表達(dá)，免疫細(xì)胞化學(xué)染色后胞膜為棕色，陽性率均在95%以上；而CD34、CD106為陰性表達(dá)，胞膜未著色(圖3)。

2.3 ADSCs生長周期的測定 各年齡組周期細(xì)胞所占比例見表1。老年組與成年組、幼年組相比，G0/G1期由78.77%增至88.30%；S期比例由15.23%降至8.17%，幼年組S期比例明顯高于其他組，與成年組之間的差異有顯著性意義(F0.05(1，27)=4.21

2.4 ADSCs的生長曲線 各年齡組的細(xì)胞生長曲線呈S型。接種后1～2d為滯留期，第3天左右達(dá)對數(shù)生長期，第6～7天達(dá)到最高峰，此后出現(xiàn)生長抑制狀態(tài)，進(jìn)入平臺期，數(shù)目不再增長。年齡越小細(xì)胞增殖速度越快，幼年組高峰值明顯大于其他組，但與老年組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖4)。圖4 不同年齡段ADSCs的生長曲線

3 討

論

組織工程中種子細(xì)胞的選擇至關(guān)重要。目前，主要的種子細(xì)胞有以下幾種：胚胎干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、臍血間充質(zhì)干細(xì)胞等。胚胎干細(xì)胞雖然可以定向誘導(dǎo)分化為各種組織細(xì)胞，但是存在倫理問題，限制了其實(shí)際應(yīng)用[5]。一般認(rèn)為BMSCs是組織工程理想的種子細(xì)胞之一，但即使在骨髓中，MSCs的含量也很低，每105～106個(gè)單核細(xì)胞中大約含一個(gè)MSCs，并且隨著增齡，MSCs含量逐漸減少[6]，并且骨髓穿刺給患者造成較大的創(chuàng)傷和痛苦，而且采集量有限，每個(gè)成人只能抽取10～20mL骨髓，因此不利于臨床大規(guī)模的培養(yǎng)與應(yīng)用。臍血間充質(zhì)干細(xì)胞來源有限且分離困難，臨床應(yīng)用潛力較小。ADSCs證實(shí)其具有分化為多種中胚層來源細(xì)胞的潛能[7]，由于人體脂肪量較多約占體重的13%，所以ADSCs的來源十分豐富，并且自體移植可以避免排斥反應(yīng)以及許多倫理問題。

本實(shí)驗(yàn)中各年齡階段SD大鼠均能培養(yǎng)出ADSCs，各組細(xì)胞均呈梭形或不規(guī)則形。幼年組和成年組細(xì)胞胞體較小、集落形成較密集、形態(tài)規(guī)則、細(xì)胞密度大；老年組細(xì)胞較大并且稀疏、呈散在分布、供體形成集落小、少，幼年組以及成年組細(xì)胞提取數(shù)量明顯高于老年組。

本研究中ADSCs表面表達(dá)CD44、CD49d陽性；而CD34、CD106為陰性表達(dá)。CD34作為造血干細(xì)胞標(biāo)志性免疫表型，CD34陰性說明ADSCs并非來源于血液循環(huán)中的干細(xì)胞，同時(shí)說明ADSCs未受到脂肪組織中微血管內(nèi)皮細(xì)胞的污染。有研究顯示ADSCs與BMSCs都可表達(dá)CD44[8]。CD49d在ADSCs中為陽性表達(dá)，在BMSCs中則為陰性表達(dá)；而與CD106相反；本實(shí)驗(yàn)CD106陰性表達(dá)，已經(jīng)排除BMSCs污染的可能。以上結(jié)論說明已經(jīng)得到純度較高的ADSCs。CD49d是調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞定居歸巢到骨髓的表面分子，CD106是調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞從骨髓中向外遷移的表面分子，CD49d與CD106是ADSCs與BMSCs很好的區(qū)別標(biāo)記，但其本質(zhì)有待進(jìn)一步的研究。

不同年齡階段的ADSCs在細(xì)胞周期各時(shí)相中的分布趨勢為G0+G1期>S期>G2+M期，說明從幼年、成年一直到老年，大多數(shù)ADSCs處于G0+G1靜止期，各組細(xì)胞隨供體年齡增加，G0+G1靜止期百分比例不斷增加，說明衰老使機(jī)體內(nèi)處于靜止的ADSCs數(shù)量不斷增加；S期的細(xì)胞比例反映了細(xì)胞的增殖程度，幼年組細(xì)胞處于S期的百分比例大于其他組，與其他組有顯著性差異，呈現(xiàn)隨年齡增長而增殖期細(xì)胞減少的趨勢，說明隨著機(jī)體的不斷衰老，干細(xì)胞增殖能力也在不斷減弱。

體外培養(yǎng)的ADSCs經(jīng)歷生長滯緩期、對數(shù)增殖期和平臺期，生長曲線呈S形，這符合干細(xì)胞的生長特性。各組均在3d左右出現(xiàn)倍增，7d左右達(dá)到增殖高峰，7d以后由于細(xì)胞已經(jīng)基本長滿瓶底，出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，細(xì)胞生長反而相對緩慢。由生長曲線可以看出隨供體年齡的增長，細(xì)胞的增殖能力和活性相應(yīng)減弱。各年齡段ADSCs均可穩(wěn)定傳至9代，按支架接種細(xì)胞數(shù)106～107的要求[9]，經(jīng)過傳代培養(yǎng)后各年齡段的ADSCs的數(shù)量均可滿足臨床需要，但是應(yīng)充分考慮不同年齡段供體脂肪的抽取量以及種子細(xì)胞的擴(kuò)增時(shí)間與病情的需要。

綜上所述，明確了各年齡段從脂肪組織均可獲得ADSCs，并保持穩(wěn)定增殖力，不同年齡組經(jīng)過傳代能夠使ADSCs相對純化，并且擴(kuò)增數(shù)量能滿足臨床應(yīng)用的需要，但應(yīng)考慮年齡對ADSCs增殖的影響。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)ADSCs能夠成為組織工程中新的理想的種子細(xì)胞，并為ADSCs的臨床應(yīng)用提供了依據(jù)。

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篇6

【關(guān)鍵詞】 異體移植

摘 要：［目的］研究神經(jīng)長度是否影響化學(xué)去細(xì)胞神經(jīng)的質(zhì)量及化學(xué)去細(xì)胞異體神經(jīng)修復(fù)犬神經(jīng)缺損的適當(dāng)長度范圍。［方法］切取犬的坐骨神經(jīng)全長，截取直徑近似段長度12 cm，去除神經(jīng)外膜的脂肪組織及血管，在50％Triton X100和50％脫氧膽酸鈉中重復(fù)消化得到化學(xué)去細(xì)胞神經(jīng)；部分神經(jīng)用于組織學(xué)評價(jià)，將12 cm神經(jīng)按順序切割為6段，石蠟包埋制備切片，厚度5 μm。HE染色和Fastblue染色，觀察去細(xì)胞程度、神經(jīng)細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性、髓鞘染色強(qiáng)度，觀察每段神經(jīng)的差異。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，用化學(xué)去細(xì)胞異體神經(jīng)橋接犬的坐骨神經(jīng)缺損，缺損長度分別為8、10 cm組，每組各有6條成年犬，隨訪時(shí)間12個(gè)月。觀察動物肢體功能恢復(fù)、肌電圖變化及再生神經(jīng)組織學(xué)表現(xiàn)，包括HE染色、S100免疫組織化學(xué)染色、乙酰膽堿酯酶染色。［結(jié)果］去細(xì)胞神經(jīng)全長各段在去細(xì)胞程度、結(jié)構(gòu)完整性及殘余髓鞘染色綜合評價(jià)中無差異。體內(nèi)移植實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示8 cm去細(xì)胞異體神經(jīng)移植組的犬在術(shù)后12個(gè)月踝關(guān)節(jié)可直立行走，而10 cm去細(xì)胞異體神經(jīng)移植組犬12個(gè)月時(shí)踝關(guān)節(jié)不能直立行走。肌電圖檢查結(jié)果顯示，兩組動物的手術(shù)肢體均可記錄到誘發(fā)的運(yùn)動和感覺電位。肌電圖波幅、時(shí)限及運(yùn)動神經(jīng)傳導(dǎo)速度結(jié)果顯示，8 cm移植組明顯高于10 cm移植組(P

關(guān)鍵詞：去細(xì)胞神經(jīng)； 異體移植； 再生

Abstract：［Objective］The purpose of this paper is to demonstrate whether the nerve length could affect the quality of acellular nerve and investigate the properly repairable distance of nerve defects with acellular nerve allografts. ［Method］Fresh sciatic nerves were obtained from adult dogs and pided into 12 cm long segments. The nerve segments were decellularized via an improved chemical decelluarization treatment as following: Nerve segments were rinsed with cold sterile Ringer's solution and submergedin 5% Triton100 solution 12h ，and then soaked the nerve segments into 5% sodium deoxycholate for 12h. The treated nerve segments were washed in distilled water for 3h. This procedures were repeated once again. In vitro， the degrees of decellularization ， demyelination and integrity of nerve fiber tubal of chemically extracted acellular nerves were observed with microscope and assessed by a score system. In vivo，the sciatic nerve of dogs on the right was exposed.In 8 cm grafted group (n=6)，a 7 cm segment of sciatic nerve was removed from the midthigh level. In 10 cm grafted group (n=6) ， a 9 cm segment of sciatic nerve was removed at the same level. The gaps were bridged with acellular nerve allografts by 8 cm and 10　cm long segments respectively. The followup period was 12 month postoperatively. Motor functional recovery of the right hind following allografting was examined by neurobehavioral， electrophysiological， histological and immunohistochemical assessment. ［Result］There was no difference on the degrees of decellularization， demyelination and integrity of nerve fiber tubal among every fraction of the acellular nerve from the two ends to the central portion. In 8 cm grafted group ， all survival dogs(n=5) were held upright with the affected hindlimb extended so that the body's weight was supported by the distal metatarsus and toes. In 10 cm grafted group， animals were failed to held upright with the affected hindlimb. Electrophysiological studies showed that elctromyographic activity was observed in both groups.After 12 month the conduction velocity was 321+51 m/s in 8 cm grafted animals and 183+6.0m/s in 10 cm grafted group. In normal animals， the conduction velocity was 1066+164 m/s. The conduction velocity in 10 cm grafted group was lower than 8 cm grafted(P

Key words: Acellular nerve; Allograft; Regeneration

創(chuàng)傷、理化因素及腫瘤等原因可導(dǎo)致周圍神經(jīng)的損傷，造成長距離的神經(jīng)缺損。為恢復(fù)肢體的神經(jīng)支配通常需要應(yīng)用移植物橋接神經(jīng)缺損。該類移植物的功能是引導(dǎo)神經(jīng)纖維通過缺損區(qū)并長入支配的器官和組織。由于新鮮異體神經(jīng)移植的免疫學(xué)反應(yīng)，在臨床實(shí)踐中自體神經(jīng)移植一直被認(rèn)為是“金標(biāo)準(zhǔn)手術(shù)”。但是由于切取自體神經(jīng)帶來的諸多并發(fā)癥及供區(qū)所限，自體神經(jīng)替代物修復(fù)神經(jīng)缺損成為研究的重點(diǎn)。人工合成的替代物主要是由具有良好生物相容性和生物可降解材料制備，如PLA(polylacticacid)［1，2］，PLGA［poly(lacticcoglycolic)］［3］等。合成材料雖然可避免切取自體神經(jīng)的并發(fā)癥及異體神經(jīng)的免疫反應(yīng)，但在內(nèi)部結(jié)構(gòu)上不具備天然神經(jīng)細(xì)胞外基質(zhì)的三維空間結(jié)構(gòu)，而這種結(jié)構(gòu)對引導(dǎo)神經(jīng)軸突的生長至關(guān)重要。異體神經(jīng)的MHC(major histocompatibility complex)主要存在于神經(jīng)的雪旺細(xì)胞和髓鞘成份中，近期研究顯示經(jīng)化學(xué)處理的去細(xì)胞異體神經(jīng)可有效降低移植后的免疫反應(yīng)并促進(jìn)神經(jīng)軸突向遠(yuǎn)端生長［4，5］，從而修復(fù)周圍神經(jīng)的節(jié)段性缺損。因此，化學(xué)去細(xì)胞異體神經(jīng)已成為一種具有應(yīng)用前景的自體神經(jīng)替代物，并對其神經(jīng)移植物的保存方法進(jìn)行了研究［6］。然而，在實(shí)驗(yàn)研究中，對下述兩個(gè)問題尚未進(jìn)行深入研究：(1)較長節(jié)段神經(jīng)的化學(xué)去細(xì)胞處理是否會造成神經(jīng)斷端與神經(jīng)中段質(zhì)量的差異；(2)在大型動物神經(jīng)缺損修復(fù)中有效的長度范圍為多少。上述問題的研究對制備較長的去細(xì)胞神經(jīng)移植物和選擇修復(fù)神經(jīng)缺損的長度具有重要意義。

1 材料與方法

11 儀器及試劑

Medtronic Keypoint肌電圖儀(丹麥)，恒溫振蕩器(回旋式，上海)，Triton X100(Sigma，美國)，脫氧膽酸鈉(Sigma，美國) 。

12 犬化學(xué)去細(xì)胞神經(jīng)的制備

已行鈷―鉻―鉬人工假體體內(nèi)植入實(shí)驗(yàn)并準(zhǔn)備取材的實(shí)驗(yàn)犬6條，體重在24～26 kg，用速眠新100 mg肌注后全麻安樂死，取雙側(cè)全長的坐骨神經(jīng)干，每條坐骨神經(jīng)長約12 cm。將切取的全長犬坐骨神經(jīng)標(biāo)記遠(yuǎn)近端后，按下述順序進(jìn)行化學(xué)處理：(1)蒸餾水浸浴12 h；(2)50％Triton X100消化12 h;(3)蒸餾水浸浴3h；(4)50％脫氧膽酸鈉消化12 h；(5)重復(fù)前述步驟；(6)蒸餾水浸浴3 h；(7)萃取神經(jīng)在4℃、 pH 72無菌磷酸鹽緩沖液(PBS)暫時(shí)保存；(8)將處理好的去細(xì)胞神經(jīng)組織和Hank’s液一起用雙層無毒塑料袋進(jìn)行分裝，在250 KGy的γ射線下進(jìn)行輻照滅菌，放置在4℃冰箱中備用。

13 去細(xì)胞神經(jīng)的組織學(xué)評價(jià)

去細(xì)胞處理后的神經(jīng)組織，將每一神經(jīng)段按等比例分為6小段，每小段長為20 mm，石蠟包埋，做5 μm厚橫向和縱向組織學(xué)切片，進(jìn)行HE染色觀察去細(xì)胞程度及纖維管道結(jié)構(gòu)完整性、Fast blue染色觀察髓鞘成分。按照表1的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行去細(xì)胞神經(jīng)的質(zhì)量評價(jià)。每段隨機(jī)取3張切片進(jìn)行觀察，取其均值單項(xiàng)計(jì)分。

14 去細(xì)胞異體神經(jīng)移植試驗(yàn)

健康雜種犬12只，雌雄不分，體重243～266 kg，隨機(jī)分成2組，8 cm移植組和10 cm移植組，每組 6只。用25％戊巴比妥鈉(10 mg／kg體重)靜脈注射進(jìn)行麻醉。在無菌條件下右股后切口顯露坐骨神經(jīng)干。在坐骨神經(jīng)干中段分別銳性切除7、9 cm長的神經(jīng)節(jié)段，自然回縮造成8、10 cm長的神經(jīng)缺損。分別用8、10 cm長的化學(xué)去細(xì)胞同種異體神經(jīng)進(jìn)行移植橋接神經(jīng)缺損，用8-0無創(chuàng)尼龍線行神經(jīng)外膜縫合，環(huán)形縫合6針。術(shù)后分籠飼養(yǎng)，觀察期12個(gè)月。

15 體內(nèi)移植實(shí)驗(yàn)觀察

151 一般觀察 觀察移植后切口愈合及肢體功能恢復(fù)。

152 神經(jīng)電生理觀察 用丹麥產(chǎn)Medtronic Keypoint便攜式肌電圖儀進(jìn)行運(yùn)動和感覺誘發(fā)電位的檢測。隨機(jī)選取左側(cè)非手術(shù)側(cè)肢體5例作為正常值對照。在全麻下手術(shù)切開顯露待測神經(jīng)。

在進(jìn)行運(yùn)動誘發(fā)電位檢查時(shí)，將刺激電極放置在移植段神經(jīng)近側(cè)2 cm的正常神經(jīng)上，記錄電極放置在小腿三頭肌上，通過給予相同劑量的方波刺激比較兩組實(shí)驗(yàn)動物在運(yùn)動誘發(fā)電位波幅和時(shí)限上的區(qū)別。左側(cè)肢體電極放置在相應(yīng)位置，刺激參數(shù)為：10～20 mA，01 ms，10 Hz。

在進(jìn)行感覺誘發(fā)電位觀察時(shí)，刺激電極放置在踝關(guān)節(jié)部的脛神經(jīng)上，記錄電極放置在移植段近側(cè)的正常神經(jīng)上。刺激參數(shù)為50～100 mA，02 ms，19 Hz。

運(yùn)動神經(jīng)傳導(dǎo)速度檢查時(shí)，在移植側(cè)，近端刺激電極位于移植段近端吻合口近側(cè)2 cm處，遠(yuǎn)端記錄電極位于移植段遠(yuǎn)端吻合口遠(yuǎn)側(cè)2 cm處，兩實(shí)驗(yàn)組距離分別為12、14 cm。在對照側(cè)，兩點(diǎn)位于與右側(cè)相應(yīng)部位的坐骨神經(jīng)干上，間距10 cm。刺激參數(shù)為10～20 mA，02 ms，10 Hz，肌電圖儀自動記錄并計(jì)算運(yùn)動傳導(dǎo)速度。

153 再生神經(jīng)的組織學(xué)觀察 在過量麻醉藥物的作用下處死實(shí)驗(yàn)犬并即刻觀察取材。對實(shí)驗(yàn)組全部動物的移植段神經(jīng)的近側(cè)吻接口、移植段中央、遠(yuǎn)側(cè)吻接口、移植段遠(yuǎn)側(cè)神經(jīng)和神經(jīng)支配區(qū)域的靶肌肉進(jìn)行神經(jīng)再生的組織學(xué)觀察。

1531 HE染色 將切取的移植神經(jīng)及兩端各1 cm正常神經(jīng)取出后浸于4％多聚甲醛水溶液中固定24 h，經(jīng)脫水處理后分段用石蠟進(jìn)行包埋，連續(xù)組織學(xué)切片，切片厚度為5 μm，蘇木素-伊紅染色后觀察組織結(jié)構(gòu)形態(tài)，再生神經(jīng)纖維和細(xì)胞浸潤情況。

1532 S-100免疫組化染色 標(biāo)本為石蠟包埋，切片厚度5 μm。Ⅰ抗為兔抗S-100蛋白抗體，Ⅱ抗為生物素標(biāo)記的羊抗兔IgG抗體。用于觀察再生神經(jīng)中的許旺細(xì)胞的分布情況，特別是移植段神經(jīng)中許旺細(xì)胞的分布。

1533 美藍(lán)復(fù)紅染色 在移植段中央和移植段遠(yuǎn)側(cè)的神經(jīng)中各取2 mm×1 mm×1 mm大小的組織塊用05％戊二醛固定24 h，樹脂包埋后用于半薄切片美藍(lán)復(fù)紅染色，切片厚度2 μm，染色后觀察有髓神經(jīng)纖維。

1534 透射電鏡觀察 將經(jīng)05％戊二醛固定后樹脂包埋的神經(jīng)組織行超薄切片，醋酸鈾和枸櫞酸鉛雙重染色。在SEM透射電鏡下觀察再生神經(jīng)的超微結(jié)構(gòu)。

1535 靶肌肉運(yùn)動終板染色 在脛神經(jīng)進(jìn)入小腿三頭肌肌腹部位切取3 mm厚的肌肉塊，在含1％氯化鈣的 10％福爾馬林水溶液中固定24 h，取出后放置在蔗糖-凝膠溶液中，行冰凍切片，切片厚度為30 μm。用膽堿酯酶法進(jìn)行運(yùn)動終板染色，觀察靶肌肉中再生的運(yùn)動終板的形態(tài)。每張切片隨意選3個(gè)視野計(jì)數(shù)運(yùn)動終板數(shù)量，取其平均數(shù)。

16 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

用SPSS 115統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，組間對比用成對資料的t檢驗(yàn)，P

2 結(jié) 果

21 去細(xì)胞神經(jīng)各段間組織學(xué)觀察結(jié)果

神經(jīng)全長從近端到遠(yuǎn)端去細(xì)胞完全，評分均為0分；在結(jié)構(gòu)觀察中，除第2段為0分外，其余5段均為1分，存在輕度的結(jié)構(gòu)破壞：觀察髓鞘染色強(qiáng)度，神經(jīng)全長均為1分，仍殘留少部分髓鞘成分。綜合評分第1段為2分，第2段1分，第3段到第6段均為2分，神經(jīng)全長各段經(jīng)去細(xì)胞處理后綜合評分相似（見表1）。 表1 化學(xué)去細(xì)胞神經(jīng)評分標(biāo)準(zhǔn)

22 移植動物一般情況和功能觀察

8 cm組有1犬在移植后3個(gè)月并發(fā)肺部感染死亡。10 cm組有1犬在4個(gè)半月腹瀉死亡。其余動物均存活至觀察期滿。 在8 cm組實(shí)驗(yàn)犬在移植術(shù)后3個(gè)月時(shí)均有不同程度運(yùn)動功能的恢復(fù)，至6個(gè)月時(shí)恢復(fù)了較好的行走功能，但是外觀上仍有輕微的跛行，12個(gè)月時(shí)在行走過程中踝關(guān)節(jié)可以完全直立和有較好的背屈。10 cm組在6個(gè)月時(shí)也有不同程度的下肢功能恢復(fù)，但是進(jìn)展較慢，移植后12個(gè)月踝關(guān)節(jié)仍不能直立或爪背著地。

23 神經(jīng)電生理觀察

在移植段近側(cè)的正常神經(jīng)上給予電刺激時(shí)，8 cm組和10 cm組均在小腿三頭肌上記錄到誘發(fā)的運(yùn)動神經(jīng)傳導(dǎo)電位。如表2所示移植術(shù)后12個(gè)月記錄到的運(yùn)動誘發(fā)電位時(shí)限和波幅的區(qū)別，8 cm組的波幅高于10 cm組(t=3286，P

24 再生神經(jīng)組織學(xué)觀察

大體上觀察，8 cm組在局部切開檢查時(shí)，移植段神經(jīng)與周圍組織有輕微的短縮，可見移植段神經(jīng)有良好的連續(xù)性，無明顯變細(xì)變硬。神經(jīng)與周圍組織有少量的粘連，再血管化良好。近側(cè)和遠(yuǎn)側(cè)吻接口無神經(jīng)瘤形成。神經(jīng)支配區(qū)的肌肉組織有輕度萎縮。10 cm組在切開檢查時(shí)，可見移植段神經(jīng)的遠(yuǎn)側(cè)段明顯變細(xì)變硬，但是仍然保持連續(xù)性，神經(jīng)與周圍組織有粘連，神經(jīng)支配區(qū)肌肉萎縮明顯。 表2 去細(xì)胞異體神經(jīng)移植術(shù)后12個(gè)月肌電圖結(jié)果光鏡下，在兩組移植段神經(jīng)內(nèi)均有S-100表達(dá)陽性的雪旺細(xì)胞，沿神經(jīng)纖維方向呈帶狀排列(圖1)，8 cm組的數(shù)量多于10 cm組。移植段以遠(yuǎn)的神經(jīng)內(nèi)亦可見到雪旺細(xì)胞增殖成帶，神經(jīng)橫切面顯示有再生的神經(jīng)纖維，8 cm組優(yōu)于10 cm組，在10 cm組可見較多神經(jīng)束呈脫髓鞘改變。

運(yùn)動終板染色顯示在神經(jīng)支配區(qū)的小腿三頭肌中可以見到重新形成的運(yùn)動終板結(jié)構(gòu)，兩組實(shí)驗(yàn)犬在運(yùn)動終板數(shù)量上有較明顯的差別，8 cm組再生的運(yùn)動終板數(shù)量多于10 cm組，終板的形態(tài)也優(yōu)于10 cm組(圖2)。每個(gè)高倍視野下的運(yùn)動終板的數(shù)量在8 cm組明顯多于10 cm組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P10 cm組。但是兩組終板和正常的終板結(jié)構(gòu)相比不管是在終板的數(shù)量還是在終板的縱橫徑上均有差別(P

電鏡下8 cm組移植段神經(jīng)內(nèi)可見由雪旺細(xì)胞形成的髓鞘和有髓神經(jīng)纖維，同時(shí)可見大量的無髓神經(jīng)纖維呈束狀分布(圖3)；10 cm組移植段神經(jīng)內(nèi)也有少量有髓神經(jīng)纖維形成。表3 去細(xì)胞異體神經(jīng)移植術(shù)后小腿三頭肌運(yùn)動終板測量

3 討 論

在異體神經(jīng)移植的研究中，雖然經(jīng)凍融處理、放射處理和化學(xué)處理后的異體神經(jīng)均具有促進(jìn)神經(jīng)再生的功能，但由于凍融處理及放射處理的神經(jīng)細(xì)胞碎片仍殘存在神經(jīng)的基底板層管內(nèi)，妨礙神經(jīng)軸突向遠(yuǎn)端的延伸，因此修復(fù)神經(jīng)缺損的距離一般較短。而化學(xué)處理后的異體神經(jīng)在降低免疫原性的同時(shí)，保留了神經(jīng)纖維管道的結(jié)構(gòu)完整性，其內(nèi)部細(xì)胞碎片已被清除，去除了軸突生長的障礙，因此可用于修復(fù)較長距離的神經(jīng)缺損。但在化學(xué)去細(xì)胞處理過程中，當(dāng)為修復(fù)較長距離的神經(jīng)缺損而處理較長神經(jīng)段時(shí)，神經(jīng)的兩端與中央部位是否存在質(zhì)量差異，對修復(fù)神經(jīng)缺損有較大的影響?；瘜W(xué)浸提液是從神經(jīng)的兩端還是透過神經(jīng)外膜對神經(jīng)進(jìn)行去細(xì)胞處理存在爭議。實(shí)驗(yàn)中從去細(xì)胞程度、髓鞘提取的程度及神經(jīng)纖維管道的完整程度進(jìn)行評價(jià)。結(jié)果顯示在長12 cm的神經(jīng)段中，經(jīng)化學(xué)去細(xì)胞處理后，神經(jīng)的中央部分與兩端的各段間在上述三個(gè)方面的綜合評價(jià)中無差異，說明對同等粗細(xì)的神經(jīng)其長度并不影響其神經(jīng)移植物的質(zhì)量，由此可以推斷化學(xué)浸提液并非從神經(jīng)的兩端而是從神經(jīng)的外膜開始進(jìn)行去細(xì)胞處理。故在用相同的浸提液及處理程序進(jìn)行去細(xì)胞處理時(shí)，神經(jīng)的長度對神經(jīng)移植物質(zhì)量無影響。

雖然在理論上可以應(yīng)用化學(xué)去細(xì)胞的方法處理任意長度的神經(jīng)，但在實(shí)驗(yàn)及臨床應(yīng)用中移植長度仍然影響肢體功能康復(fù)的結(jié)果。在早期的研究中應(yīng)用化學(xué)去細(xì)胞異體神經(jīng)較滿意修復(fù)了犬5 cm長的坐骨神經(jīng)缺損［7］。在應(yīng)用相同方法處理的犬的化學(xué)去細(xì)胞異體神經(jīng)移植實(shí)驗(yàn)中，對犬的8、10 cm 長的坐骨神經(jīng)缺損用化學(xué)去細(xì)胞同種異體神經(jīng)進(jìn)行移植修復(fù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在8 cm長的坐骨神經(jīng)缺損修復(fù)組，無論是肢體功能的大體觀察還是電生理的觀察，均恢復(fù)較好。運(yùn)動神經(jīng)的波幅已達(dá)正常神經(jīng)的50％，神經(jīng)傳導(dǎo)速度達(dá)到正常神經(jīng)的30％；而在10 cm長的神經(jīng)移植組，功能恢復(fù)較差，肌電圖波幅及運(yùn)動神經(jīng)傳導(dǎo)速度均未達(dá)到正常神經(jīng)的20％。再生神經(jīng)的組織學(xué)觀察顯示8 cm長的去細(xì)胞神經(jīng)移植組在雪旺細(xì)胞、有髓神經(jīng)纖維的分布及運(yùn)動終板的數(shù)量和形態(tài)方面均明顯優(yōu)于10 cm移植組。

在8、10 cm神經(jīng)移植組，其移植物本身的質(zhì)量無差異，但最終結(jié)果具有明顯的差異。產(chǎn)生這種差異的原因不在移植物本身，而與神經(jīng)缺損的距離有關(guān)。Haase等［8］用去細(xì)胞異體神經(jīng)橋接大鼠腓神經(jīng)缺損，研究顯示去細(xì)胞異體神經(jīng)可以修復(fù)2 cm的周圍神經(jīng)缺損，當(dāng)缺損>4 cm時(shí)未出現(xiàn)功能恢復(fù)，并認(rèn)為生長因子可能有助于修復(fù)較長的神經(jīng)缺損。但在隨后的實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用血管內(nèi)皮生長因子與去細(xì)胞異體神經(jīng)復(fù)合后移植修復(fù)神經(jīng)缺損，僅表現(xiàn)出促進(jìn)近端吻合口軸突的生長，并未顯出促使神經(jīng)軸突延長的作用［9］。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因可能是生長因子雖有促神經(jīng)再生的作用，但在修復(fù)區(qū)內(nèi)未能呈現(xiàn)生理環(huán)境下的濃度梯度變化，故軸突的生長方向受到干擾。在周圍神經(jīng)損傷后，靶器官通過神經(jīng)遠(yuǎn)端釋放不同的生物因子，發(fā)揮化學(xué)趨化作用，促使神經(jīng)軸突向遠(yuǎn)端生長。生物因子的濃度呈現(xiàn)明顯的梯度改變趨勢，隨距離的增加，生物因子的濃度發(fā)生明顯的變化，從而影響神經(jīng)的再生速度及肢體功能康復(fù)。因此，在使用生長因子促使神經(jīng)向遠(yuǎn)端生長時(shí)應(yīng)考慮其作用環(huán)節(jié)及濃度梯度變化。

本研究證實(shí)神經(jīng)的長度并不影響化學(xué)去細(xì)胞神經(jīng)制備的質(zhì)量，在應(yīng)用去細(xì)胞異體神經(jīng)修復(fù)周圍神經(jīng)缺損中，8 cm或許是目前單獨(dú)使用化學(xué)去細(xì)胞異體神經(jīng)移植取得較好結(jié)果的最大范圍。為修復(fù)更大范圍的神經(jīng)缺損，應(yīng)探討神經(jīng)遠(yuǎn)端的生物因子表達(dá)分布規(guī)律，利用化學(xué)趨化原理促進(jìn)神經(jīng)的快速生長。

參考文獻(xiàn)

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篇7

1課前認(rèn)真?zhèn)湔n，課后加強(qiáng)復(fù)習(xí) 

在教學(xué)過程中，任課教師對備課高度重視，認(rèn)真鉆研教材。鑒于細(xì)胞生物學(xué)理論與技術(shù)的不斷發(fā)展，為了使學(xué)生能夠掌握細(xì)胞生物學(xué)最新的研究成果，通過查閱細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)的最新文獻(xiàn)資料，并將新的研究成果融入到教學(xué)內(nèi)容中去，使學(xué)生對細(xì)胞生物學(xué)的新理論和新方法有一定的了解，及時(shí)掌握學(xué)科發(fā)展的最新動向。 

另外，為了鞏固前期講授的內(nèi)容，在開始新的教學(xué)內(nèi)容之前都會與學(xué)生一起回顧上一節(jié)課的授課內(nèi)容，鞏固并加強(qiáng)學(xué)生對已講授內(nèi)容的掌握情況。在講授新內(nèi)容的同時(shí)，適時(shí)回顧前期已講授的與本節(jié)課內(nèi)容相關(guān)的知識點(diǎn)，促進(jìn)學(xué)生對知識的綜合掌握，提高了教學(xué)效果。 

2提升教師教學(xué)水平 

近年來，隨著高校教師隊(duì)伍的不斷發(fā)展，青年教師逐漸成為高校師資隊(duì)伍的重要組成部分。青年教師由于教學(xué)經(jīng)驗(yàn)不足、教學(xué)方法與技巧不夠熟練，教學(xué)之初駕馭課堂的能力不足，因而需要通過多種途徑提高教學(xué)基本功。青海大學(xué)通過對新進(jìn)青年教師進(jìn)行崗前培訓(xùn)，開展提升教學(xué)水平的相關(guān)講座，組織多媒體課件制作競賽以及青年教學(xué)競賽等多種方式，著力提升青年教師教學(xué)能力，對青年教師教學(xué)質(zhì)量的提升起到了很大的推動作用。 

3組建細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)團(tuán)隊(duì) 

目前，青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院動物醫(yī)學(xué)系細(xì)胞生物學(xué)課程有任課教師1人，未形成有效的教學(xué)團(tuán)隊(duì)。因此，為了能更好地提升細(xì)胞生物學(xué)課程的教學(xué)效果，在今后的教學(xué)過程中需組建一支年齡、職稱以及知識層次結(jié)構(gòu)合理的細(xì)胞生物學(xué)課程教學(xué)團(tuán)隊(duì)，并通過團(tuán)隊(duì)成員的團(tuán)結(jié)協(xié)作、教學(xué)研討和經(jīng)驗(yàn)交流，推進(jìn)細(xì)胞生物學(xué)課程的良性發(fā)展。 

教學(xué)團(tuán)隊(duì)在具體實(shí)施過程中，可將細(xì)胞生物學(xué)課程分成幾個(gè)教學(xué)模塊，每人講解幾章，這樣不僅可以充分發(fā)揮每個(gè)人的專業(yè)優(yōu)勢，提升整個(gè)課程的教學(xué)效果，同時(shí)也可為年輕教師的迅速成長提供良好的環(huán)境，有效防止教學(xué)人員梯隊(duì)的斷層。 

4構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)化課程體系 

構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)化課程體系可以對細(xì)胞生物學(xué)課程的良性發(fā)展起到很好的支撐作用，通過構(gòu)建細(xì)胞生物學(xué)在線網(wǎng)站，制備在線教程，全面介紹細(xì)胞生物學(xué)課程的教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)進(jìn)程、教學(xué)大綱、教學(xué)課件、教學(xué)錄像，對每個(gè)教學(xué)環(huán)節(jié)制備鏈接。通過細(xì)胞生物學(xué)課程網(wǎng)絡(luò)資源的共享，使教學(xué)目的更清晰明了。此外，在教學(xué)網(wǎng)站設(shè)置教學(xué)論壇，積極注冊成為教學(xué)論壇的會員，積極參與教學(xué)內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)方法、熱點(diǎn)問題等的討論，充分利用網(wǎng)絡(luò)教學(xué)的優(yōu)勢和作用促進(jìn)教學(xué)效果的不斷提升。 

5加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)教學(xué) 

青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院動物醫(yī)學(xué)系細(xì)胞生物學(xué)課程開設(shè)于2009年。在開課之初，課程體系中沒有包含實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容。而細(xì)胞生物學(xué)是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科，為了更好地提高教學(xué)質(zhì)量，必須將理論教學(xué)和實(shí)踐教學(xué)進(jìn)行緊密結(jié)合，因此對細(xì)胞生物學(xué)課程進(jìn)行了教學(xué)結(jié)構(gòu)調(diào)整，增加了實(shí)驗(yàn)教學(xué)的內(nèi)容，通過實(shí)驗(yàn)教學(xué)提升學(xué)生對理論知識的理解與掌握。 

在實(shí)驗(yàn)過程中，任課教師將學(xué)生分為若干個(gè)小組，鼓勵(lì)學(xué)生要積極動手并敢于動手，要求學(xué)生培養(yǎng)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)操作以及團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力，加深對實(shí)驗(yàn)理論與方法的理解。對于部分學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過程中不敢自己親自進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作的心理，任課教師要鼓勵(lì)學(xué)生樹立信心，積極大膽地做實(shí)驗(yàn)。出現(xiàn)問題時(shí)，首先自己想想有無可行的辦法。也可通過小組的討論分析能否找到可行的辦法。如果無法解決問題，最后再由任課教師引導(dǎo)學(xué)生解決實(shí)驗(yàn)過程中存在的問題，這樣學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作的積極性有了較大的提升，教學(xué)效果也得到改善。 

另外，利用實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的儀器設(shè)備條件，爭取開設(shè)一些與細(xì)胞生物學(xué)課程相關(guān)的前沿實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，如細(xì)胞凋亡的檢測、動物細(xì)胞的原代培養(yǎng)與觀察、細(xì)胞周期檢測等，培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣與積極性，提升細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的效果。 

6將細(xì)胞生物學(xué)知識融入到學(xué)生畢業(yè)設(shè)計(jì)中 

篇8

【關(guān)鍵詞】教學(xué)；細(xì)胞生物學(xué)；教學(xué)方法；多媒體技術(shù)

作為生物專業(yè)和生命科學(xué)的重要課程，細(xì)胞生物學(xué)一直都是相關(guān)領(lǐng)域的必修課程。將細(xì)胞生物學(xué)這門學(xué)科給教好，對于提高學(xué)生的專業(yè)素質(zhì)、提升學(xué)生走向社會之后在職業(yè)生涯中的競爭力都是大有裨益的。然而鑒于細(xì)胞生物學(xué)這門課程本身的特征，即細(xì)胞生物學(xué)的研究對象是細(xì)胞，而細(xì)胞本身就是需要借助顯微鏡才可見的，因而也一直找不到能夠適應(yīng)這門學(xué)科的傳統(tǒng)教學(xué)方法。隨著現(xiàn)代教育的逐漸發(fā)展，多媒體技術(shù)[1]也越來越被廣泛地應(yīng)用于教學(xué)當(dāng)中。利用多媒體技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)的教學(xué)，可以使學(xué)生更加全方位地了解微觀世界的生物細(xì)胞，進(jìn)而大大提高教學(xué)質(zhì)量。

一、細(xì)胞生物學(xué)概述

所謂“細(xì)胞生物學(xué)”，是指是在分子水平、亞顯微水平和顯微水平這三個(gè)層次上，研究細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，以及各種生命規(guī)律的一門學(xué)科。細(xì)胞生物學(xué)通過使用近代物理學(xué)與化學(xué)的科技成果以及分子生物學(xué)的概念、方法，基于細(xì)胞水平來對生命活動進(jìn)行研究，細(xì)胞生物學(xué)所研究的核心問題就是遺傳及發(fā)育的問題。但是因?yàn)榧?xì)胞生物學(xué)是對微觀世界的探究，因此若要對其進(jìn)行研究，就必須運(yùn)用到顯微鏡。

正是由于細(xì)胞生物學(xué)的上述特征，使得在用傳統(tǒng)方式進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)的教學(xué)時(shí)，會出現(xiàn)很多的弊端；而在用多媒體技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)時(shí)，則會顯現(xiàn)出很多的優(yōu)勢。

二、傳統(tǒng)細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)方法中存在的問題

傳統(tǒng)的教學(xué)方法就是書本加黑板，即老師在講臺上通過板書的形式，向坐在講臺下面的學(xué)生們傳授書本中的知識。而一直以來，這種傳統(tǒng)的教學(xué)方式也一直存在，并且在現(xiàn)今教學(xué)方式中仍然占據(jù)很重要的地位。這種傳統(tǒng)的教學(xué)方法固然能夠讓學(xué)生們理解書中的某些知識，但是它還是存在很多的弊端的，尤其是當(dāng)這種傳統(tǒng)教學(xué)方式應(yīng)用于像細(xì)胞生物學(xué)這種抽象的學(xué)科時(shí)，它所呈現(xiàn)的不足則更加明顯了：

（1）細(xì)胞生物學(xué)是一門很抽象的學(xué)科，僅僅通過老師的板書和口授是達(dá)不到很明顯的教學(xué)效果的，畢竟這門學(xué)科的研究對象是微觀的細(xì)胞，是人的肉眼所不能看見的東西。如果教學(xué)方式僅僅停留在傳統(tǒng)方式上，老師們只能通過口授或者是在黑板上以簡單地圖表來向?qū)W生們闡述細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，因此學(xué)生們是很難想象細(xì)胞的構(gòu)造的，因而學(xué)生們不能夠?qū)?xì)胞的功能有更為深刻的理解，這對于學(xué)生對相關(guān)知識的吸收是很不利的，因而教學(xué)質(zhì)量也不會很理想。

（2）在授課過程中，老師們可能需要向?qū)W生們講解細(xì)胞的具體構(gòu)造，以便學(xué)生們對細(xì)胞各部分的功能會有一個(gè)詳細(xì)的了解。為了使講解能夠更加生動和具體，老師可能需要在黑板上畫出細(xì)胞結(jié)構(gòu)的簡略圖，一方面由于黑板上所畫的圖都是二維的，沒有立體感；另一方面，老師們畫圖的水平畢竟有限，不可能在黑板上畫出比較清晰明了的細(xì)胞圖，因此傳統(tǒng)教學(xué)方式的教學(xué)效果不顯著。

（3）一節(jié)課的時(shí)間是有限的，如果老師花過多的時(shí)間在板書的書寫和畫圖上，就會浪費(fèi)寶貴的上課時(shí)間，那么在原本就有限的時(shí)間內(nèi)所能講述的知識就更加的少了。既然時(shí)間利用率不高，那么自然教學(xué)質(zhì)量也不會很理想了。

綜上所述，若用傳統(tǒng)的教學(xué)方法對細(xì)胞生物學(xué)這門學(xué)科進(jìn)行授課，教學(xué)質(zhì)量是不會很好的。這個(gè)時(shí)候，多媒體教學(xué)就顯得有優(yōu)勢多了。因此，需要通過利用多媒體技術(shù)來進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)課程的講解。

三、利用多媒體技術(shù)進(jìn)行教學(xué)的優(yōu)點(diǎn)

科技的進(jìn)步也推動了現(xiàn)代教育的發(fā)展，如今大部分學(xué)校都配備了多媒體教室，在多媒體教室老師可以通過多媒體技術(shù)向?qū)W生們授課。所謂多媒體教學(xué)方式，就是指將授課方式與計(jì)算機(jī)技術(shù)結(jié)合起來。通過多媒體技術(shù)，可以將原本抽象的知識形象化。在授課過程中，通過向同學(xué)們展示豐富多彩的、吸引眼球的圖片、音頻、視頻等，充分調(diào)動了學(xué)生們在上課時(shí)的感官，使得原本枯燥的、抽象的知識變得生動、具體，增加同學(xué)們上課的興趣，進(jìn)而可以改善教學(xué)質(zhì)量。

尤其是像細(xì)胞生物學(xué)這樣抽象的學(xué)科，所研究的對象又是人的肉眼不可見的細(xì)胞，傳統(tǒng)的教學(xué)方法不能夠形象地向?qū)W生們展示細(xì)胞的內(nèi)部構(gòu)造以及細(xì)胞的變化等。因而，通過多媒體技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)的教學(xué)，是有很多優(yōu)勢的：

（1）通過多媒體進(jìn)行教學(xué)時(shí)，可向同學(xué)們展示相關(guān)的圖片、視頻和音頻，充分調(diào)動同學(xué)們的感官，增大同學(xué)們可獲取的信息量，讓同學(xué)們了解更多關(guān)于細(xì)胞結(jié)構(gòu)的知識。例如老師若要向同學(xué)們展示細(xì)胞有絲分裂的整個(gè)過程，在傳統(tǒng)教學(xué)方法中，老師們可能需要在黑板上畫出細(xì)胞有絲分裂各個(gè)階段的圖，以便向同學(xué)們解釋各個(gè)階段細(xì)胞的變化，這樣做一方面浪費(fèi)時(shí)間，另一方面如果老師在黑板上的圖由于失誤而畫錯(cuò)了的話，還會誤導(dǎo)學(xué)生。但是利用多媒體課件，并用形象的圖片和適當(dāng)?shù)膭赢嬙O(shè)置加以輔助，就可以形象生動地向?qū)W生們展示細(xì)胞有絲分裂時(shí)的整個(gè)過程，這樣同學(xué)們對相關(guān)知識的記憶也會更加深刻。

（2）以前“填鴨式”的教學(xué)氣氛，即老師在講臺上講課，同學(xué)們在下面瘋狂地記筆記，使得教學(xué)質(zhì)量很不理想。然而通過多媒體技術(shù)，使得教學(xué)方式不再呆板，相反，會使得課堂氣氛活躍，因而可以顯著的改善教學(xué)效果。

（3）俗話說，“興趣是最好的老師”。通過多媒體技術(shù)，將原本枯燥的細(xì)胞生物學(xué)這門科目變得生動和有趣，因而可以大大增加同學(xué)們對這門科目的興趣，提高同學(xué)們對這門科目的記憶。同學(xué)們的興趣提上去了，那么同學(xué)們學(xué)習(xí)這門科目的能力也就提上去了，教學(xué)質(zhì)量也就會有相應(yīng)的提升了。

（4）可以省去很多老師板書的時(shí)間，因而可以增加課堂的時(shí)間利用率，老師們也就可以有更多的時(shí)間去講解更多的知識了，同學(xué)們所學(xué)習(xí)的也就多了。

（5）在傳統(tǒng)的教學(xué)方式中，學(xué)生們在課堂上會由于忙于記筆記而沒有很在意老師所講的某些重要的知識點(diǎn)，這是得不償失的。但是在多媒體教學(xué)方式中，老師們的授課都是有相應(yīng)的課件的，學(xué)生們大可在課堂上認(rèn)真聽講，只是適當(dāng)?shù)刈龉P記，不要忽略老師所講的任何一個(gè)知識點(diǎn)，課后再向老師拷貝課件就可以了。

（5）在多媒體教學(xué)方式中，由于老師不再是在講臺上“瘋狂”地板書，學(xué)生們也不再是在下面“瘋狂”地做筆記，使得老師和同學(xué)們在課堂上有更多的時(shí)間進(jìn)行互動和交流，學(xué)生們哪里沒有理解得透就可以當(dāng)場提出來，老師當(dāng)場進(jìn)行解惑，對于改善教學(xué)質(zhì)量也是大有裨益的。因而，利用多媒體技術(shù)進(jìn)行教學(xué)，會使得整個(gè)課堂的互動性更強(qiáng)。

四、將多媒體技術(shù)應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)中的具體做法

前已所述，將多媒體技術(shù)應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)這門學(xué)科的教學(xué)中，是有很多的優(yōu)勢的。那么如何將多媒體技術(shù)應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)的教學(xué)中呢？可從如下幾個(gè)方面來說明：

（1）老師們要精心的制作多媒體課件，課件就相當(dāng)于傳統(tǒng)教學(xué)中的板書，老師是要根據(jù)課件進(jìn)行課程的講解的，因而課件的質(zhì)量將直接影響整節(jié)課的質(zhì)量。課件并不是文字和圖片的簡單羅列，相反，課件應(yīng)當(dāng)是老師在對本節(jié)課進(jìn)行備課時(shí)，對知識進(jìn)行梳理后，想好了怎樣對知識進(jìn)行編排有利于學(xué)生們的理解，再進(jìn)行課件的制作。課件不宜做得太過花哨，否則會分散學(xué)生們在課堂上的注意力，反而不太好；但同時(shí)課件也不應(yīng)該只是文字的堆積，否則這樣的課件也就只是傳統(tǒng)板書的電子版，也就達(dá)不到提高學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性的目的了。因而課件制作，應(yīng)當(dāng)分清主次，并且有一定的邏輯。

（2）即使是利用多媒體進(jìn)行授課，也要將多媒體技術(shù)與傳統(tǒng)教學(xué)方式相結(jié)合，才能達(dá)到更好的效果。雖然傳統(tǒng)的教學(xué)方式存在很多弊端和不足之處，但是卻不能對這種傳統(tǒng)教學(xué)方式進(jìn)行全盤否認(rèn)。例如在進(jìn)行多媒體教學(xué)時(shí)，雖然通過圖片和視頻等會使同學(xué)們對知識的接受能力更強(qiáng)，但是有時(shí)候同學(xué)們還是會對某些知識點(diǎn)比較晦澀，這時(shí)候傳統(tǒng)的板書就應(yīng)當(dāng)充當(dāng)一個(gè)輔助作用了。畢竟老師對每個(gè)知識點(diǎn)的理解程度都會比學(xué)生更為深刻，通過板書和老師在黑板上做進(jìn)一步的演示，學(xué)生們對某些知識點(diǎn)的理解才會更加的深刻。

（3）教學(xué)內(nèi)容應(yīng)當(dāng)及時(shí)地更新，以便能夠跟得上時(shí)代的步伐。由于學(xué)校的課本一般都是好幾年前就已經(jīng)出版了的，因而書本上很多的知識點(diǎn)或是描述得不夠全面或是跟不上時(shí)代的步伐。尤其是像細(xì)胞生物學(xué)這樣的學(xué)科，更新的頻率是很快的。老師在進(jìn)行備課時(shí)，應(yīng)當(dāng)將已經(jīng)更新了的知識體現(xiàn)在所制作的課件中。在授課的過程中，就應(yīng)當(dāng)將這些書本中沒有的新知識向?qū)W生們講解。通過向?qū)W生們傳授相關(guān)領(lǐng)域的比較新的知識和比較前沿的研究，可以讓學(xué)生們掌握最新的知識，開闊學(xué)生們的眼界，打開學(xué)生們的思維，這對于學(xué)生們以后的職業(yè)生涯是有莫大的幫助的。

（4）國外對細(xì)胞生物學(xué)這一領(lǐng)域的研究是比國內(nèi)做得要多的，所取得的成就也是優(yōu)于我國的，因而在進(jìn)行授課時(shí)，不應(yīng)當(dāng)僅僅局限于國內(nèi)的研究成果，不能坐井觀天，相反，應(yīng)當(dāng)放眼全世界，積極地吸收國外先進(jìn)的研究成果，那樣才會有進(jìn)步。老師應(yīng)當(dāng)多看看國外的書籍，多了解國外對這門課程是如何講解的，向外國人多借鑒和學(xué)習(xí)，同時(shí)也要鼓勵(lì)學(xué)生們多看看國外的書籍。通過多媒體技術(shù)，利用圖片、視頻等，可以更好地向?qū)W生們展示國外相關(guān)領(lǐng)域的研究成果。

（5）在教學(xué)中要注意將多媒體教學(xué)和啟發(fā)式教學(xué)相結(jié)合。多媒體授課的顯著特征就是在授課過程中是需要用到課件的，而課件是可以設(shè)置各種動畫效果的。因此為了充分調(diào)動學(xué)生們在課堂上的積極性，可以通過對動畫效果做相應(yīng)的設(shè)置而起到引導(dǎo)學(xué)生積極思考的效果。通過課件的啟發(fā)，可使得學(xué)生們積極進(jìn)行思考，會讓教學(xué)效果事半功倍。

五、對于將多媒體技術(shù)應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)的展望

多媒體技術(shù)為現(xiàn)代教育的教學(xué)方式開辟了一條全新的道路，通過多媒體教學(xué)中所用到的形象的圖片、音頻及視頻等，可以使抽象知識具體化、枯燥的課堂生動化、靜態(tài)的學(xué)習(xí)動態(tài)化，因而可以使得教學(xué)質(zhì)量有意想不到的提升。

前文已經(jīng)詳細(xì)地說明了利用多媒體技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)這門課程的教學(xué)的優(yōu)勢以及具體做法，其實(shí)多媒體教學(xué)可以應(yīng)用于任何一門課程的教學(xué)，只要能夠以適當(dāng)方式使用多媒體技術(shù)，并輔助以傳統(tǒng)教學(xué)方法，就一定會取得更好的教學(xué)質(zhì)量效果。

六、結(jié)論

細(xì)胞生物學(xué)是一門特殊的學(xué)科，它所研究的對象是人的肉眼所不能看見的細(xì)胞，這種特殊性也使得通過傳統(tǒng)的教學(xué)方式進(jìn)行教學(xué)是不能取到很好的效果的。隨著科技的發(fā)展，現(xiàn)代教育也逐漸與計(jì)算機(jī)接軌，通過對媒體技術(shù)，可對該課程進(jìn)行生動的講解，即化抽象為具體、化枯燥為生動，從而提高同學(xué)們對細(xì)胞生物學(xué)這一學(xué)科的興趣，進(jìn)而可以提高教學(xué)質(zhì)量。因而將多媒體應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)這門學(xué)科是有很多的益處的。

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篇9

細(xì)胞生物學(xué)立體化教學(xué)應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)作為現(xiàn)代四大前沿生命學(xué)科之一，自20世紀(jì)創(chuàng)建以來，在國家大力支持和幫扶下，得到快速發(fā)展。經(jīng)典細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)是研究細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能，現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)在經(jīng)典教學(xué)的基礎(chǔ)上，向生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)、農(nóng)業(yè)科技、公共衛(wèi)生等各個(gè)領(lǐng)域延伸。因此，對細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)進(jìn)行改革勢在必行。

立體化教學(xué)模式，就是利用新技術(shù)、新理念、新方法，對資源進(jìn)行有效整合，把教與學(xué)結(jié)合，教學(xué)理論聯(lián)系實(shí)際，教學(xué)和考核結(jié)合，構(gòu)建一個(gè)科學(xué)的、全面的、互動的、有效的系統(tǒng)教學(xué)模式。

一、課堂教學(xué)立體化

1.教學(xué)內(nèi)容立體化

細(xì)胞生物學(xué)具有典型的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，專業(yè)性和理論性強(qiáng)。老師在進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)時(shí)，很容易照搬課本知識，對學(xué)生照本宣科，內(nèi)容枯燥無趣，教學(xué)方法死板，難以引起學(xué)生興趣，自然教學(xué)質(zhì)量不高。立體化教學(xué)要求老師首先在教材準(zhǔn)備階段，通過研究和熟悉教材，整體把握課本，疏通脈絡(luò)，進(jìn)行知識整合，形成科學(xué)系統(tǒng)的動態(tài)立體化體系。然后利用多媒體技術(shù)，把講課內(nèi)容用PPT的形式有重點(diǎn)、有層次的羅列出來，結(jié)合相關(guān)圖片、視頻等把細(xì)胞生物學(xué)知識直觀的展現(xiàn)在學(xué)生眼前，引起學(xué)生興趣，激發(fā)其學(xué)習(xí)欲望。同時(shí)要關(guān)注最新科研成果和消息，拓寬學(xué)生的知識面，提高學(xué)生綜合素養(yǎng)。

2.教學(xué)方式立體化

（1）多媒體教學(xué)

隨著科技的發(fā)展，多媒體教學(xué)已廣泛運(yùn)用到教學(xué)中。在進(jìn)行細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)時(shí)，要運(yùn)用多媒體技術(shù)，把教學(xué)內(nèi)容用PPT、Word等展示出來，在上面可以放置圖片、音頻、視頻、動畫等，使細(xì)胞生物學(xué)由抽象向具體、靜態(tài)向動態(tài)、微觀向宏觀轉(zhuǎn)變，教學(xué)內(nèi)容多樣，生動有趣，讓學(xué)生的眼、耳、腦全方位地動起來。同時(shí)可以建立專業(yè)網(wǎng)站，通過銜接的方式查看國內(nèi)外相關(guān)網(wǎng)站，在線做題目和交流等，促進(jìn)教學(xué)質(zhì)量的提高。

（2）因人施教

學(xué)生因?yàn)榧彝ケ尘安煌?、學(xué)習(xí)能力不同、溝通能力不同，在學(xué)習(xí)細(xì)胞生物學(xué)時(shí)也就各有差異。老師不能顧此失彼，要平等的對待每一個(gè)學(xué)生。所以老師在教學(xué)時(shí)要因人施教。可以把學(xué)生分為ABC三類，A屬于優(yōu)秀的學(xué)生，基礎(chǔ)較好，在對這類學(xué)生進(jìn)行一兩次基礎(chǔ)訓(xùn)練之后，對其進(jìn)行知識拓展訓(xùn)練，促進(jìn)其思維發(fā)散和創(chuàng)新能力的提升；B屬于中等，通過幾次基礎(chǔ)培訓(xùn)后進(jìn)行拓展訓(xùn)練；C屬于基礎(chǔ)差的學(xué)生，著重訓(xùn)練其基礎(chǔ)，在打好基礎(chǔ)后再進(jìn)行拓展學(xué)習(xí)。總之，老師要應(yīng)材施教，讓學(xué)生發(fā)揮各自優(yōu)勢，促進(jìn)學(xué)生個(gè)性化發(fā)展。

（3）教與學(xué)相結(jié)合

老師要轉(zhuǎn)變以“教”為主的教學(xué)觀念，要使學(xué)生成為課堂的主體，把教與學(xué)結(jié)合起來。在進(jìn)行教學(xué)時(shí)，老師可以通過學(xué)生演講、參與講解、課堂討論、學(xué)生提問、課外互動等方式加強(qiáng)與學(xué)生的溝通交流，激發(fā)學(xué)生的積極性，促進(jìn)學(xué)生自主學(xué)習(xí)，培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新能力，促進(jìn)學(xué)生全面發(fā)展。

二、實(shí)驗(yàn)教學(xué)立體化

1.通過驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)操作技能

實(shí)踐是檢驗(yàn)真理的唯一標(biāo)準(zhǔn)，細(xì)胞生物學(xué)理論性強(qiáng)，比較抽象，只有通過實(shí)驗(yàn)才能讓學(xué)生有切身的體會，才能更好的理解消化知識。教學(xué)中，要適當(dāng)?shù)拈_放實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)教學(xué)。比如講細(xì)胞的形態(tài)時(shí)，要讓學(xué)生在顯微鏡下進(jìn)行觀察，并做好記錄、寫成報(bào)告。比如對小動物進(jìn)行活取細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)，不但讓學(xué)生學(xué)會操作方法，更能加強(qiáng)學(xué)生心理素質(zhì)建設(shè)，為以后搞科研做準(zhǔn)備。

2.通過探究實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)創(chuàng)新能力

現(xiàn)代社會需要創(chuàng)新人才，細(xì)胞生物學(xué)研究更是如此。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，老師可以安排一些設(shè)計(jì)性強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)讓學(xué)生進(jìn)行操作，鼓勵(lì)學(xué)生自主創(chuàng)新，大膽提出問題、分析問題、驗(yàn)證問題、得出結(jié)論。在這個(gè)過程中發(fā)散思維，提出創(chuàng)造性的見解，和老師一起討論研究。同時(shí)，也可以讓學(xué)生根據(jù)興趣自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，比如抗衰老化妝品的開發(fā)、預(yù)防老年斑等，通過自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，開拓學(xué)生思維，激發(fā)學(xué)生的潛能，培養(yǎng)其創(chuàng)新能力。

三、教學(xué)評價(jià)立體化

隨著科技的發(fā)展，現(xiàn)代社會大量需要創(chuàng)新型、復(fù)合型人才，對于細(xì)胞生物學(xué)研究來說也不例外。因此，細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)的最后環(huán)節(jié)――教學(xué)評價(jià)就顯得尤其重要。在對學(xué)生進(jìn)行教學(xué)評價(jià)時(shí)，要根據(jù)不同的學(xué)生、不同的內(nèi)容進(jìn)行立體化評價(jià)。

1.理論課和實(shí)驗(yàn)課分離

近年來，細(xì)胞生物學(xué)進(jìn)行了改革，把實(shí)驗(yàn)課單獨(dú)設(shè)置學(xué)分、列為專門課程。以小班分組的方式讓學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，提高其動手能力。在對學(xué)生進(jìn)行評價(jià)時(shí)，要實(shí)行對半分制，甚至偏向?qū)嶒?yàn)課。對動手能力強(qiáng)的學(xué)生給以表揚(yáng)，并讓實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?qiáng)的學(xué)生帶引相對較差的學(xué)生進(jìn)行合作探討，促進(jìn)共同進(jìn)步。

2.綜合能力的考察

在對學(xué)生進(jìn)行評分時(shí)，要采用“課堂表現(xiàn)+期中考試+期末考試”的方式，其中課堂表現(xiàn)一般占30%～40%，期中成績占25%～30%，期末成績占30%～45%。課堂表現(xiàn)可分為平時(shí)作業(yè)、上課回答問題、課外知識延展性等，主要考察學(xué)生的學(xué)習(xí)態(tài)度和參與性。期中考試試卷出題目，要以基礎(chǔ)為重，適當(dāng)?shù)难诱怪R，考察學(xué)生的學(xué)習(xí)效果和對最新國內(nèi)外細(xì)胞生物學(xué)的關(guān)注。在期末考試時(shí)，可以讓學(xué)生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)課程，考察學(xué)生的創(chuàng)新能力。

總之，對學(xué)生的評價(jià)不能單純的從成績出發(fā)，要綜合基礎(chǔ)知識和實(shí)踐能力、要看學(xué)生平時(shí)表現(xiàn)、要看學(xué)生的創(chuàng)新潛能等，全方位的對學(xué)生進(jìn)行客觀公正的評價(jià)。

四、結(jié)束語

在細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)中運(yùn)用立體化教學(xué)，可以有效整合利用資源，理論聯(lián)系實(shí)際，引起學(xué)生興趣，激發(fā)學(xué)習(xí)欲望，提高教學(xué)質(zhì)量，促進(jìn)學(xué)生個(gè)體化發(fā)展和綜合素質(zhì)的提高。同時(shí)，學(xué)校和老師要與時(shí)俱進(jìn)，根據(jù)學(xué)生實(shí)際情況，不斷更新教學(xué)模式，完善細(xì)胞生物學(xué)立體化教學(xué)體系，為社會源源不斷地輸入科研人才。

參考文獻(xiàn)：

篇10

1 當(dāng)代大學(xué)生的生物科學(xué)素養(yǎng)現(xiàn)狀及其存在問題

生物相關(guān)專業(yè)的學(xué)生對生物科學(xué)技術(shù)具有濃厚的興趣,生物科學(xué)技術(shù)基礎(chǔ)知識扎實(shí),對生物技術(shù)發(fā)展持積極的肯定態(tài)度,具備良好的科技強(qiáng)國的信念。但是,他們對高新生物科學(xué)技術(shù)知識和先進(jìn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)了解較少,生物科學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)踐技能較差,對生物科學(xué)科研精神的理解和研究方法的掌握不足。有調(diào)查表明,當(dāng)代大學(xué)生對于當(dāng)前的一些生物熱點(diǎn)問題有一定的了解,但是對于高新技術(shù)的應(yīng)用和新的科學(xué)研究領(lǐng)域的認(rèn)識不足。在理性上,有43%的學(xué)生是盲目的懷疑,或者是盲從專家和他人的觀點(diǎn),對事物較少有自己的看法;在探索求知精神上,“科學(xué)功利主義”對學(xué)生的影響最大,使得學(xué)生視野狹窄、目光短淺;在實(shí)證精神上,有62%的學(xué)生缺乏實(shí)驗(yàn)實(shí)證精神,偏重抽象思維,缺乏科學(xué)實(shí)驗(yàn)的精神和價(jià)值眼光。②此外,許多高校只注重生物專業(yè)課的常規(guī)教學(xué),很少舉辦專門的科研活動,且科學(xué)技能培養(yǎng)與鍛煉的途徑缺乏,這使得大學(xué)缺乏濃郁的科學(xué)素養(yǎng)氛圍,學(xué)生較難形成一定的科學(xué)技能,由此科學(xué)實(shí)踐能力也較差。

2 細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)中培養(yǎng)科學(xué)素養(yǎng)的意義

細(xì)胞生物學(xué)是生物學(xué)類及農(nóng)林醫(yī)藥類本科生一門必修的專業(yè)基礎(chǔ)課,是現(xiàn)代生命科學(xué)的前沿分支學(xué)科之一,它是以細(xì)胞為研究對象,從細(xì)胞的整體水平、亞顯微水平、分子水平等三個(gè)層研究細(xì)胞和細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)和功能、細(xì)胞的生活史和各種生命活動規(guī)律的學(xué)科。細(xì)胞生物學(xué)是一門承上啟下的學(xué)科,和分子生物學(xué)一起同是現(xiàn)代生命科學(xué)的基礎(chǔ),并廣泛滲透到遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、生殖生物學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)和免疫生物學(xué)等的研究中,和農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)、生物高新技術(shù)的發(fā)展有密切的關(guān)系,是生命科學(xué)的重要支柱之一,在解決人類面臨的重大問題、促進(jìn)經(jīng)濟(jì)和社會發(fā)展中發(fā)揮重要的基礎(chǔ)作用。同時(shí),細(xì)胞生物學(xué)又是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科,重要理論與實(shí)踐密切地聯(lián)系著。隨著生命科學(xué)自身和生物產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展,對生命科學(xué)相關(guān)領(lǐng)域創(chuàng)新型人才的需求也在不斷增加。由此可見,細(xì)胞生物學(xué)課程中科學(xué)素養(yǎng)的培養(yǎng)對于建立與其專業(yè)層次、研究方向相符合的細(xì)胞生物學(xué)知識構(gòu)架體系,培養(yǎng)和鍛煉學(xué)生的科學(xué)思維能力具有非常重要的作用。

3 細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)中如何培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)素養(yǎng)

細(xì)胞生物學(xué)作為生物學(xué)類及農(nóng)林醫(yī)藥類的一門專業(yè)基礎(chǔ)課程,在培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)素養(yǎng)方面,具有舉足輕的重要作用。然而,科學(xué)素養(yǎng)的提高不是一朝一夕之功,教師應(yīng)始終將其貫穿于自己的教學(xué)之中。如何在細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)中培養(yǎng)和提高學(xué)生的科學(xué)素養(yǎng),以下是筆者的一些想法和體會。

3.1 加強(qiáng)課堂教學(xué)中的“生活化”融合

? 細(xì)胞生物學(xué)的知識理論性強(qiáng),內(nèi)容抽象深奧、難于理解,教師可以試將抽象的內(nèi)容與日常生活相聯(lián)系,使學(xué)生有此聯(lián)想起有趣的、熟悉的生活場景或事物,這不僅使抽象的內(nèi)容具體化和動態(tài)化,使其容易理解,而且激發(fā)了學(xué)生的探究欲望和學(xué)習(xí)興趣。例如講解“蛋白質(zhì)的分選”時(shí),引導(dǎo)學(xué)生由細(xì)胞社會聯(lián)想到人類社會。細(xì)胞中的各種蛋白質(zhì)發(fā)揮結(jié)構(gòu)或功能作用的部位幾乎遍布細(xì)胞的各種膜區(qū)和組分,只有當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)各就各位并組裝成結(jié)構(gòu)和功能復(fù)合體,才能參與細(xì)胞的各種生命活動。這就好比在人類社會中,各專業(yè)的畢業(yè)生只有找到適合其自身特點(diǎn)的工作崗位才能發(fā)揮所長?？傊?運(yùn)用發(fā)散性思維,盡可能地將細(xì)胞生物學(xué)抽象的理論知識與生活實(shí)際聯(lián)系起來,并配合以多媒體輔助手段,使抽象的內(nèi)容變得形象生動,易于理解掌握。

3.2 側(cè)重教學(xué)內(nèi)容的前沿性和新穎性

細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展極為迅速,隨著科學(xué)家們研究成果的不斷涌現(xiàn),其內(nèi)容處在不斷更新的動態(tài)過程中。因此,教師在教學(xué)過程中,要注重聯(lián)系學(xué)科的前沿和熱點(diǎn),講述較先進(jìn)的科學(xué)結(jié)論,跟蹤國際上最新進(jìn)展。此外,教師在注重教學(xué)的同時(shí),宜以科研并舉,以科研引導(dǎo)和促進(jìn)教學(xué);教學(xué)與培養(yǎng)科學(xué)研究型人才緊密結(jié)合;教學(xué)內(nèi)容與最新科研進(jìn)展同步,使學(xué)生在正確掌握細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)上學(xué)會解決與之相關(guān)的科學(xué)研究問題。如將教師的主要科研成果與基礎(chǔ)理論教學(xué)有機(jī)結(jié)合,結(jié)合教學(xué)內(nèi)容介紹自己的科研成果,這樣既生動又貼切,學(xué)生又很熟悉,使學(xué)生獲得學(xué)習(xí)的興趣和動力,亦可以啟發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新思維能力,培養(yǎng)學(xué)生的科研鉆研精神。

3.3 增加細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)綜合性和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的比例

綜合性實(shí)驗(yàn)注重知識的綜合運(yùn)用,實(shí)驗(yàn)原理和方法步驟較為復(fù)雜,可以使學(xué)生更好地理解實(shí)驗(yàn)原理,正確使用儀器設(shè)備,鍛煉學(xué)生綜合分析問題的能力;設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)是指學(xué)生根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)

目,自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案,自主準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料,自主配制實(shí)驗(yàn)所需試劑,根據(jù)自己的時(shí)間自主安排實(shí)驗(yàn)進(jìn)程,設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)可以充分調(diào)動學(xué)生的實(shí)驗(yàn)積極性,培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新思維和勇于探索的精神。由此可見,綜合性和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)可以鍛煉學(xué)生綜合分析問題和解決問題的能力。③然而目前許多高校由于實(shí)驗(yàn)條件和課時(shí)安排的限制,細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)主要以基本操作和驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)為主,綜合性和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)較少甚至沒有,這在一定程度上限制了學(xué)生綜合素質(zhì)和創(chuàng)新思維的培養(yǎng)。④因此,教師應(yīng)根據(jù)科學(xué)性、可行性和實(shí)用性原則增大綜合性和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的比例。如我們精選了真核生物基因組的提取、純化、鑒定、擴(kuò)增、酶切、重組、轉(zhuǎn)化、篩選的大實(shí)驗(yàn),膜蛋白的分離與鑒定等綜合設(shè)計(jì)型大實(shí)驗(yàn),這些實(shí)驗(yàn)中的每個(gè)實(shí)驗(yàn)都構(gòu)成了一個(gè)綜合性整體,同時(shí),在實(shí)驗(yàn)材料的選擇上盡量做到由學(xué)生自主選擇。通過每一次的綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),使學(xué)生進(jìn)一步鞏固了已學(xué)習(xí)的知識和已掌握的技術(shù),并能夠?qū)?shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行合理的正確的資料采集、整理、分析和歸納,有效地培養(yǎng)了學(xué)生的科學(xué)素質(zhì)、科學(xué)精神、創(chuàng)新思維及分析問題和解決問題的能力。 3.4 組織各種“科學(xué)小組”,布置學(xué)科發(fā)展前沿的討論,與全程科研訓(xùn)練對接,以培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神