導(dǎo)語(yǔ)：如何才能寫好一篇基因編輯，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公文云整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

現(xiàn)在研究人員已經(jīng)能用CRISPR基因剪刀來(lái)編輯豬、魚(yú)、猴子、羊、兔子、老鼠、蝴蝶等動(dòng)物的基因。下面可以梳理一下CRISPR基因剪刀編輯動(dòng)物基因產(chǎn)生了哪些對(duì)人類有益的典型動(dòng)物。

治療杜興氏肌萎縮小鼠

杜興氏肌肉營(yíng)養(yǎng)不良癥（又稱杜興氏肌萎縮，DMD）是遺傳性肌肉萎縮疾病。該病的致病基因存在于X性染色體中（Xp21），是通過(guò)性連鎖隱性遺傳而致病。該病由表達(dá)肌萎縮蛋白的基因受損引發(fā)。肌萎縮蛋白能夠增強(qiáng)與保護(hù)肌纖維，當(dāng)肌萎縮蛋白缺失時(shí)，骨骼肌與心肌將會(huì)發(fā)生退化。

男性只有一個(gè)X性染色體，因此該病患者大多為男性，患者經(jīng)常需要坐輪椅，利用呼吸機(jī)輔助呼吸，壽命一般在25歲左右。若女性的一對(duì)X性染色體中的一個(gè)攜帶有變異的杜興氏肌萎縮基因，便成為一個(gè)杜興氏肌萎縮的攜帶者，其兒子有二分之一的機(jī)會(huì)成為患者，其女兒則有二分之一機(jī)會(huì)成為杜興氏肌萎縮基因攜帶者。

目前，對(duì)于這種疾病還沒(méi)有有效的治療方法，CRISPR基因剪刀的出現(xiàn)為根治這種疾病帶來(lái)了希望。CRISPR基因剪刀需要與Cas9配合操作，后者是一種由核糖核酸（RNA）指導(dǎo)的細(xì)菌核酸內(nèi)切酶家族，被CRISPR系統(tǒng)用來(lái)在特異性的基因序列位點(diǎn)上識(shí)別和切割雙鏈DNA，因此通常稱為CRISPR- Cas9基因剪刀。

CRISPR-Cas9基因剪刀當(dāng)然不能先在人身上使用來(lái)治療疾病，而是要進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)?，F(xiàn)在，研究人員利用CRISPR-Cas9基因剪刀對(duì)患杜興氏肌萎縮的小鼠進(jìn)行試驗(yàn)，獲得了較好的效果。

對(duì)小鼠治療杜興氏肌萎縮的原理是，CRISPR-Cas9基因剪刀可通過(guò)一節(jié)RNA將Cas9酶移動(dòng)到基因組中導(dǎo)致該病的致病基因位置，然后該酶能夠?qū)⑻囟ǖ闹虏N段切除，隨后細(xì)胞通過(guò)損傷修復(fù)機(jī)制將斷裂的DNA鏈連接，或者利用DNA模板創(chuàng)造新的序列。

現(xiàn)在，美國(guó)西南醫(yī)學(xué)中心的研究人員利用腺病毒將CRISPR-Cas9基因剪刀導(dǎo)入杜興氏肌萎縮小鼠胚胎中，以切除有缺陷的編碼肌萎縮蛋白的基因片段，結(jié)果使得出生后的小鼠能夠產(chǎn)生新的肌萎縮蛋白，改善了小鼠杜興氏肌萎縮的癥狀。

另外，美國(guó)杜克大學(xué)的另一個(gè)研究小組也利用CRISPR-Cas9基因剪刀，直接對(duì)成年小鼠的腿部肌肉進(jìn)行治療，結(jié)果讓小鼠的肌肉產(chǎn)生了正常的肌萎縮蛋白，力量得到增強(qiáng)，而且還改善了小鼠心臟等其他部位的肌肉力量。

這些研究結(jié)果也意味著，CRISPR-Cas9基因剪刀可以用來(lái)治療人的杜興氏肌萎縮，但是，還需要先進(jìn)行人體試驗(yàn)，并且需要得到倫理批準(zhǔn)。

人血白蛋白（HSA）是人血漿中的蛋白質(zhì)，其作用既廣泛又重要，因?yàn)樗鼈冊(cè)隗w液內(nèi)可以運(yùn)輸脂肪酸、膽色素、氨基酸等，同時(shí)能維持血液正常的滲透壓。人血白蛋白還可用于治療休克與燒傷，用于補(bǔ)充因手術(shù)、意外事故或大出血所致的血液丟失，也可以作為血漿增容劑。

但是，如果人血白蛋白只從人體獲取，如從獻(xiàn)血者的血液中提取，不僅數(shù)量有限，而且價(jià)格昂貴。因此，研究人員一直希望利用基因工程改造動(dòng)物，如豬或羊來(lái)生產(chǎn)人血白蛋白?，F(xiàn)在的CRISPR-Cas9基因剪刀為實(shí)現(xiàn)這一想法提供了理想的工具，因?yàn)橥ㄟ^(guò)基因編輯動(dòng)物，如編輯豬，可以讓豬生產(chǎn)人血白蛋白。

但是，基因編輯豬也會(huì)有兩種結(jié)果，既產(chǎn)生豬血白蛋白，也可產(chǎn)生人血白蛋白，要解決這個(gè)問(wèn)題，就只能是在編輯豬的基因時(shí)，把敲入的人類基因放在位于豬血白蛋白產(chǎn)生基因的下游。北京蛋白質(zhì)組研究中心的研究人員通過(guò)使用CRISPR-Cas9基因剪刀，將人血白蛋白的基因敲入到豬血白蛋白基因位點(diǎn)下游起始密碼子，希望人血白蛋白基因能在豬內(nèi)源性白蛋白基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控下表達(dá)，同時(shí)阻止豬內(nèi)源性白蛋白基因的表達(dá)。

研究人員在10只巴馬母豬體內(nèi)植入了300個(gè)改造過(guò)的受精卵，之后有5只豬成功懷孕，產(chǎn)下了16只巴馬豬仔。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這16只豬仔都帶有預(yù)期敲入的生產(chǎn)人血白蛋白的基因，在它們的血液中也能檢測(cè)到人血白蛋白。不過(guò)，各只幼豬體內(nèi)的人血白蛋白含量有所不同。因此，這只是一個(gè)初步的成功。

更重要的是，要在未來(lái)的繁殖試驗(yàn)中查驗(yàn)敲入的人血白蛋白基因是否能在這些豬的后代中遺傳下去。如果能穩(wěn)定遺傳下去，或許未來(lái)能讓這些基因編輯的豬生產(chǎn)人們所需要的人血白蛋白。

人體器官供不應(yīng)求制約了器官移植治療疾病和挽救人的生命，因此，一直以來(lái)，研究人員在想方設(shè)法采用動(dòng)物的器官供給病人移植，豬的器官就被視為是一個(gè)很好的人類器官的代用品。

但是，采用豬的器官要解決兩大問(wèn)題：一是豬的器官可能引發(fā)器官受者的免疫排異反應(yīng)，二是豬身上的一些隱藏的病毒和微生物可能對(duì)人有害。

豬的器官對(duì)于人是異種器官，異種器官移植面臨的免疫學(xué)排異反應(yīng)表現(xiàn)為超急性排斥反應(yīng)（HAR）、急性血管排斥反應(yīng)（AVR）、細(xì)胞介導(dǎo)的排斥反應(yīng)和慢性排斥反應(yīng)。1993年，美國(guó)匹茲堡大學(xué)的外科醫(yī)生庫(kù)珀等人發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)人類免疫反應(yīng)的肇事者就是源自豬血管內(nèi)皮細(xì)胞上的抗原，稱為α-1，3-半乳糖，這是一種糖分子，能在幾分鐘內(nèi)引發(fā)器官排異。但是，一種名為α-1，3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶的物質(zhì)對(duì)于產(chǎn)生這種糖是必需的，將產(chǎn)生這種酶的基因敲除，就有可能緩和免疫排異反應(yīng)，從而讓豬器官供人類移植。

另一個(gè)問(wèn)題是，豬體內(nèi)有多達(dá)幾十種潛藏的或休眠的逆轉(zhuǎn)錄病毒（PERV）。盡管對(duì)豬的這些逆轉(zhuǎn)錄病毒是否對(duì)人類有害存在爭(zhēng)議，但較為普遍的看法是，如果使用豬的器官，就應(yīng)當(dāng)消除這些隱患，以免移植豬器官后引發(fā)其他疾病。因此，如果要使用豬的器官，就必須敲除豬體內(nèi)這些逆轉(zhuǎn)錄病毒的基因，以確保萬(wàn)無(wú)一失。

于是，去除或修改豬的α-1，3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶和其他幾十種逆轉(zhuǎn)錄病毒基因就歷史地落到CRISPR-Cas9基因剪刀的肩上。美國(guó)哈佛大學(xué)的丘奇教授領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)在2015年10月宣布，他們的兩個(gè)研究小組已經(jīng)能完成去除或修改豬的α-1，3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶基因和其他幾十種逆轉(zhuǎn)錄病毒基因的任務(wù)。

一個(gè)研究小組利用CRISPR-Cas9基因剪刀對(duì)一組豬胚胎進(jìn)行了20多個(gè)基因的改造，其中就包括編碼豬的α-1，3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶的基因，從而阻止了豬細(xì)胞表面的α-1，3-半乳糖產(chǎn)生，也就消除了豬器官上面的抗原，可以避免豬器官移植到人體時(shí)觸發(fā)免疫反應(yīng)。

另一個(gè)研究小組利用CRISPR-Cas9基因剪 刀編輯豬胚胎中的62個(gè)豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒基因，讓這些病毒失活。這項(xiàng)工作非常重要，因?yàn)檫@些病毒嵌入在所有豬的基因組中，無(wú)法進(jìn)行處理或是被中和。由于擔(dān)心它們有可能給人類患者帶來(lái)疾病，豬器官遲遲不敢用于人類。

現(xiàn)在，由于解決了這兩個(gè)問(wèn)題，即消除了引發(fā)免疫反應(yīng)的α-1，3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶基因和豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒基因，下一步將有可能把豬的器官移植給人。不過(guò)，在對(duì)人進(jìn)行移植前，還要通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證，例如，對(duì)狒狒和猴子移植經(jīng)過(guò)CRISPR-Cas9基因剪刀編輯的豬的器官，如肺、心臟和肝臟。

美國(guó)馬里蘭大學(xué)醫(yī)學(xué)院的外科醫(yī)生已經(jīng)在做這種動(dòng)物試驗(yàn)。他們從一頭經(jīng)過(guò)CRISPR-Cas9基因剪刀編輯的成年豬身上摘下肺，移植給一只6歲的狒狒。未來(lái)，這一研究結(jié)果將會(huì)公布，以此論證，豬的器官是否可以移植給人。

大力士和天狗

除了豬與人的生理和代謝相似、器官大小差不多之外，狗與人的生理也比較接近，因此，研究人員一直希望建立狗的動(dòng)物試驗(yàn)?zāi)Ｊ剑瑸槿祟惙?wù)?，F(xiàn)在，CRISPR-Cas9基因剪刀的出現(xiàn)讓中國(guó)研究人員創(chuàng)造了一種特殊的狗，一只稱為大力士，一只稱為天狗。

中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院的賴良學(xué)團(tuán)隊(duì)利用CRISPR-Cas9基因剪刀敲除狗的肌肉生長(zhǎng)抑制素基因，以增強(qiáng)狗的肌肉能力，因?yàn)樵摶驅(qū)趋兰∩L(zhǎng)具有抑制作用，被敲除后，肌肉生長(zhǎng)發(fā)育能力就會(huì)增強(qiáng)。

研究人員最初利用CRISPR-Cas9基因剪刀對(duì)60多個(gè)狗胚胎進(jìn)行編輯，然后把胚胎植入母狗體內(nèi)孕育，誕生了27只小狗，但只有2只（一公一母）小狗的肌肉生長(zhǎng)抑制素基因被敲除。肌肉生長(zhǎng)抑制素基因被敲除的狗的肌肉在4月齡時(shí)就顯得比普通狗更為發(fā)達(dá)，研究組將兩只狗分別命名為大力士（公）和天狗（母）。

預(yù)計(jì)這種基因敲除狗在成年后將具有更強(qiáng)的運(yùn)動(dòng)能力，適合狩獵以及軍事應(yīng)用。由于狗與人的代謝、生理以及解剖特征相似，這類由CRISPR-Cas9基因剪刀編輯的狗會(huì)被用于治療人類的一些遺傳病，如帕金森病、重癥肌無(wú)力、肌萎縮側(cè)索硬化癥（ALS，漸凍人癥）的試驗(yàn)。

篇2

農(nóng)業(yè)時(shí)代的開(kāi)啟

“遺傳”，聽(tīng)起來(lái)是個(gè)人人都能理解的名詞。中國(guó)人說(shuō)“種瓜得瓜，種豆得豆”，英美人說(shuō)“l(fā)ike father like son”。這些俗語(yǔ)里反映的生物代際之間的相似性，就是遺傳。先人們大概早就發(fā)現(xiàn)，不管是動(dòng)物還是植物，不管是生物的外形、行為，還是性格，這些性狀都能在一代代的繁衍中頑強(qiáng)地延續(xù)和保留下來(lái)。

實(shí)際上，早在人類文明開(kāi)始之前，人類就已經(jīng)充分―盡管也許是下意識(shí)―觀察到了遺傳現(xiàn)象的存在，甚至已經(jīng)開(kāi)始利用遺傳規(guī)律改善自己的生活了。

現(xiàn)代人類的祖先可以追本溯源到數(shù)百萬(wàn)年前的非洲大陸。在兩百多萬(wàn)年的無(wú)盡歲月里，先祖?zhèn)冊(cè)诜侵薮箨懮喜杉参锕麑?shí)、捕獲動(dòng)物，過(guò)著靠天吃飯、隨遇而安的日子。人類文明的曙光出現(xiàn)在距今十幾二十萬(wàn)年前。那時(shí)，現(xiàn)代人的直系祖先―人屬智人種―出現(xiàn)在非洲大陸，并且很快一批批地走出非洲，在全世界的各個(gè)大陸和主要島嶼上開(kāi)枝散葉，也把采集和狩獵的固有天性帶到了世界各地。在那個(gè)時(shí)候，還壓根看不出我們這些身材矮小、面相平凡的先祖會(huì)在日后成為整個(gè)地球的主宰。

然而，就像突然擁有了某種未知的魔力一般，差不多從一萬(wàn)年前開(kāi)始，在世界各地快樂(lè)采集和狩獵的智人先祖?zhèn)儯瑤缀踉谝徽Ｑ坶g就改變了賴以生存的生活方式。這些變化開(kāi)啟了農(nóng)業(yè)時(shí)代，也最終催生了今天建立在發(fā)電機(jī)、汽車、互聯(lián)網(wǎng)和生物技術(shù)基礎(chǔ)上的全新人類社會(huì)。而這一切變化的開(kāi)端，就是祖先們對(duì)于遺傳規(guī)律的利用。

在賈雷德?戴蒙德的名著《槍炮、病菌與鋼鐵》中對(duì)此有著生動(dòng)詳盡的討論。就在人類先祖走出非洲的必經(jīng)之路上，地中海東岸生長(zhǎng)著繁茂的野生小麥，它們的種子富含蛋白質(zhì)和淀粉。不難想象，當(dāng)生活在中東新月沃地的人類先祖?zhèn)冊(cè)谂既婚g發(fā)現(xiàn)這種植物后，一定會(huì)如獲至寶地將它們作為日常采集和儲(chǔ)藏的對(duì)象。對(duì)于先祖?zhèn)儊?lái)說(shuō)，這和他們數(shù)百萬(wàn)年來(lái)在非洲大陸的日常采集工作并無(wú)分別。

但是如果先祖?zhèn)兿胍堰@些野生小麥挖出來(lái)，為他們提供穩(wěn)定的食物來(lái)源，就會(huì)遇到一些棘手的問(wèn)題。野生小麥的麥穗會(huì)在成熟后自動(dòng)從麥稈上脫落，將種子盡力播撒到周圍的泥土里。這是這些禾本科植物賴以生存繁衍的性狀之一，但這也使得人類先祖想要大規(guī)模收獲小麥種子變得非常困難。后來(lái)，在某個(gè)不知名的具體年代，生活在中東地區(qū)的遠(yuǎn)古居民們無(wú)意間發(fā)現(xiàn)了一些遺傳變異小麥。這些小麥的麥穗即便成熟以后，也不會(huì)自動(dòng)脫落。

泛生子的概念

從理性高度思考遺傳本質(zhì)

很容易想象，如果這些變異小麥出現(xiàn)在野外，我們只有死路一條。因?yàn)樗鼈兺耆珶o(wú)法通過(guò)脫落的麥穗散播自己的后代。但這些變異植株對(duì)于我們的先祖?zhèn)儊?lái)說(shuō)卻無(wú)比珍貴，因?yàn)檫@樣的遺傳突變小麥會(huì)大大方便他們?cè)诠潭〞r(shí)間大批收割麥穗、儲(chǔ)存麥粒！更要緊的是，先祖?zhèn)円欢ㄒ苍跓o(wú)意間發(fā)現(xiàn)了遺傳的秘密―種瓜得瓜，種豆得豆，因此這些仿佛是上天賜予般的神奇的小麥種子，也將會(huì)頑強(qiáng)地保留這種對(duì)人類先祖而言―而不是對(duì)小麥自身，極其有利的性狀。所以我們可以想象，先祖?zhèn)兛赡軙?huì)將這些奇怪的植物小心移植到村莊周圍，用心呵護(hù)，直到收獲第一批成熟的種子。這些種子將成為下一年擴(kuò)大種植的基礎(chǔ)。就這樣，伴隨著一代代人類先祖?zhèn)兊募?xì)心發(fā)現(xiàn)、栽培和收獲，符合人類需要的優(yōu)良性狀被保留了下來(lái)，一直保留到今天。這些無(wú)意間發(fā)現(xiàn)的遺傳突變小麥，可能標(biāo)志著人類農(nóng)業(yè)社會(huì)的開(kāi)端。

最早從理性高度思考遺傳本質(zhì)的，是同樣生活在地中海邊的古希臘人。在古希臘哲學(xué)家德謨克利特和希波克拉底看來(lái)，遺傳現(xiàn)象必然有著現(xiàn)實(shí)的物質(zhì)基礎(chǔ)，不需要用虛無(wú)縹緲的神來(lái)解釋。在他們的想象里，遺傳的本質(zhì)是一種叫作“泛生子”的微小顆粒。這種肉眼不可見(jiàn)的顆粒，在先輩的體內(nèi)無(wú)處不在，忠實(shí)記錄了先輩從形態(tài)到性格的各種性狀，并且會(huì)在過(guò)程中進(jìn)入后者體內(nèi)。以泛生子顆粒承載的信息為藍(lán)圖，子代得以表現(xiàn)出對(duì)先輩們的忠實(shí)模仿。

必須承認(rèn)，泛生子的概念本身，其實(shí)并沒(méi)有解決任何實(shí)際問(wèn)題?；蛘呖瘫↑c(diǎn)說(shuō)，這只是把人們習(xí)以為常的遺傳現(xiàn)象用一個(gè)聽(tīng)起來(lái)晦澀難懂的名詞概括了出來(lái)而已。但是這個(gè)從現(xiàn)象到概念絕非毫無(wú)用處。至少，借用這個(gè)概念，人們可以把許多看起來(lái)很不一樣的現(xiàn)象聯(lián)系起來(lái)。

例如，無(wú)性生殖―微小的細(xì)菌和酵母能夠一分為二產(chǎn)生兩個(gè)后代；有性生殖―雌雄家畜后會(huì)產(chǎn)生出一群嗷嗷待哺的小崽兒；甚至還包括果樹(shù)的嫁接―為什么果樹(shù)嫁接后的果實(shí)會(huì)帶有接穗和砧木的共同特征，不就是因?yàn)榉荷宇w粒能夠從砧木毫無(wú)障礙地流動(dòng)到接穗里面去，和接穗的泛生子合二為一嘛。

因此，這個(gè)生命力頑強(qiáng)的概念從古希臘時(shí)期一直流傳到了近代。甚至在19世紀(jì)中期，在達(dá)爾文創(chuàng)立進(jìn)化論，為地球生命和人類的起源找到科學(xué)解釋的時(shí)候，他仍然借用泛生子的概念作為自然選擇理論的遺傳基礎(chǔ)。

進(jìn)化論遭到的批評(píng)

宗教人士的攻擊與嚴(yán)肅的科學(xué)批評(píng)

在達(dá)爾文看來(lái)，一個(gè)生物個(gè)體的所有器官、組織乃至細(xì)胞，都磧兇約鶴ㄊ艫姆荷子顆粒。手的泛生子記錄著每個(gè)動(dòng)物的手掌大小、寬窄、掌紋乃至毛發(fā)的生長(zhǎng)位置，眼睛的泛生子當(dāng)然少不了記錄眼睛的大小、虹膜的顏色等。在的過(guò)程中，來(lái)自父母雙方的泛生子融合在一起，共同決定了后代們五花八門的遺傳性狀。

更要緊的是，泛生子攜帶的生命藍(lán)圖一旦出錯(cuò)，就會(huì)導(dǎo)致后代遺傳性狀的“突變”，而這些突變，就是達(dá)爾文進(jìn)化論中自然選擇和適者生存的物質(zhì)基礎(chǔ)。正是因?yàn)橛型蛔?，一代代生物個(gè)體才會(huì)具有微小但能夠穩(wěn)定遺傳的差異，而這些遺傳差異影響著生物個(gè)體在環(huán)境中生存和繁衍的能力，并最終導(dǎo)致適者生存。

達(dá)爾文的進(jìn)化論在誕生后遭到了猛烈攻擊，特別是在宗教界人士和虔誠(chéng)的信徒們看來(lái)，達(dá)爾文的學(xué)說(shuō)褻瀆了人類萬(wàn)物之靈的神圣性，也把傳說(shuō)中按照自己的模樣造人的上帝置于可有可無(wú)的尷尬地位。但很少有人知道的是，進(jìn)化論同樣遭遇了嚴(yán)肅的科學(xué)批評(píng)。熱力學(xué)創(chuàng)始人之一、物理學(xué)家開(kāi)爾文勛爵當(dāng)時(shí)估算出地球的年齡至多不會(huì)超過(guò)一億年，而這點(diǎn)時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠積累出達(dá)爾文進(jìn)化所需要的五花八門的遺傳突變（當(dāng)然，后來(lái)人們意識(shí)到地球的年齡遠(yuǎn)大于此）。

古生物學(xué)家們對(duì)此發(fā)出了詰難，按照進(jìn)化論，地球上必然存在許許多多物種之間的中間形態(tài)，但是它們的化石又在哪里呢？有一個(gè)批評(píng)可能是最致命的，因?yàn)樗暦Q發(fā)現(xiàn)了進(jìn)化論和遺傳融合理論的深刻矛盾，換句話說(shuō)就是，達(dá)爾文辛辛苦苦為進(jìn)化論找到的遺傳基礎(chǔ)，可能根本不支持進(jìn)化論的聲明！這一批評(píng)來(lái)自蘇格蘭工程師、愛(ài)丁堡大學(xué)教授亨利?弗萊明?詹金。他評(píng)論說(shuō)，按照達(dá)爾文的進(jìn)化論，生物的遺傳物質(zhì)需要經(jīng)歷漫長(zhǎng)、微小的突變過(guò)程，才能產(chǎn)生足夠顯著的形狀變化，最終造就地球上千萬(wàn)種五花八門的物種。

新書(shū)速遞

冷暴力

作者：[法國(guó)]瑪麗-弗朗斯?伊里戈揚(yáng)

出版社：后浪丨北京聯(lián)合出版公司

出版日期：2017年6月

定價(jià)：38.00元

本書(shū)首次提出了“精神虐待”這一概念，它廣泛發(fā)生在婚姻、家庭和職場(chǎng)中，施虐者通過(guò)拒言語(yǔ)歪曲、諷刺、嘲笑、輕蔑、否定人格等常用手段來(lái)欺凌、控制受虐者，使這種關(guān)系持續(xù)下去，讓受虐者無(wú)法逃脫。

日本新中產(chǎn)階級(jí)

作者：[美國(guó)]傅高義

出版社：上海譯文出版社

出版日期：2017年5月

定價(jià)：60.00元

傅高義在學(xué)術(shù)生涯之初被斥為“鄉(xiāng)下人”后，意識(shí)到一個(gè)社會(huì)學(xué)家如果從未在另一種文化中生活過(guò)，何談理解本國(guó)社會(huì)？1958年至1960年，他來(lái)到東京市郊展開(kāi)田野研究，描寫日本社會(huì)快速變遷之際的“新中產(chǎn)階級(jí)”―工薪族和他們的家庭。此書(shū)是他的成名作。

外婆的道歉信

作者：[瑞典]弗雷德里克?巴克曼

出版社：天津人民出版社

出版日期：2017年5月

篇3

“隊(duì)長(zhǎng)，那些病毒體已經(jīng)沖上來(lái)了。”

“什么？那些東西竟然突破了我們的五道防線？”

“是的，他們擁有尖利的爪子和極快的奔跑速度，而且那些大的病毒體還有能發(fā)出一種毒氣！”。

“你去讓01號(hào)小隊(duì)帶一些重武器和彈藥，我們只帶了輕武器和少量的子彈，對(duì)付那些病毒體還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。”

“是，隊(duì)長(zhǎng)。”

“隊(duì)長(zhǎng)，那些病毒體已經(jīng)快突破到我們這里了，根本出不去啊！”

“那我們只好搏一搏了，告訴隊(duì)員們，讓他們放近了病毒體再打，不要浪費(fèi)子彈，我們的子彈不多了。“

“隊(duì)長(zhǎng)！“

“哦，原來(lái)是K博士啊，有什么事嗎？”

“隊(duì)長(zhǎng)，我知道這棟樓里有隱形通道，離我們這里不遠(yuǎn)，可以出去。”

“那好，你先帶隊(duì)員們出去，我和02小隊(duì)留下掩護(hù)你們”

“不行隊(duì)長(zhǎng)，你得先出去，要不然我們誰(shuí)能安下心?。?rdquo;

“你們快出去！我一會(huì)就出去。”

“砰！”

“隊(duì)長(zhǎng)，那些病毒體已經(jīng)沖破了我們的最后一道防線，你快走??！”

“啊…………”

“不好了，隊(duì)長(zhǎng)被感染了，大家快走啊！”

第二章

“怎么辦，隊(duì)長(zhǎng)被那些東西感染了，我們一定要為隊(duì)長(zhǎng)報(bào)仇?。?rdquo;

“我們還是先問(wèn)問(wèn)K博士這到底是怎么回事吧，一會(huì)還要與那些病毒體戰(zhàn)斗呢。”

“嗯。”

“K博士！”

“哦，原來(lái)是隊(duì)長(zhǎng)手下的兩位得力干將啊，有什么事嗎？”

“我們是想問(wèn)問(wèn)這些病毒體是怎么回事？”

“哦，是這個(gè)問(wèn)題啊，我也一直在研究這些病毒體，在剛才與那些病毒體戰(zhàn)斗時(shí)，我發(fā)現(xiàn)從病毒體內(nèi)飛濺出的液體不是血液，而是含有X成分的混合液體，這種液體一旦沾附在人的皮膚上，會(huì)被感染成與母體相同的傀儡，這些傀儡與其它病毒體不一樣的一點(diǎn)在于被感染成傀儡后20個(gè)小時(shí)就會(huì)蒸發(fā)成有Z成分的蒸氣。據(jù)說(shuō)是一種叫SLX的病毒氣體被人吸入體內(nèi)后，會(huì)改變?nèi)梭w的基因，僅僅幾秒鐘就會(huì)變成病毒體。”

“那我們?cè)鯓硬拍軐⑦@些病毒體的基因改變成人的基因呢？”

“要改變這些病毒體的基因只能把一種叫FK的液體與X成分混合，才能將病毒體的基因改變，而這兩種東西只有地表20000米以下的地方才有，想拿到這兩種東西跟本就是妄想。”

“如果我們一直與病毒體戰(zhàn)斗，我們必定失敗，使地球陷入終極黑暗?。?rdquo;

“還是用最后的辦法，G計(jì)劃，雖然能讓那些病毒體全部死亡，但是我們也會(huì)死亡。”

“那就是舍小家保大家。”

兩個(gè)人回到隊(duì)中了，把這個(gè)計(jì)劃與隊(duì)友們講了，沒(méi)有一個(gè)人反對(duì)。

尾聲

K博士把G計(jì)劃完成了。

病毒體、隊(duì)員們和他們親愛(ài)的隊(duì)長(zhǎng)在一時(shí)間內(nèi)都化為了烏有。

G計(jì)劃是什么呢？

就是投擲一顆F-SX型中子彈……

篇4

人類在追求美的過(guò)程中，創(chuàng)造了許多美的載體，琴棋書(shū)畫，無(wú)一例外。所謂“琴棋書(shū)劍詩(shī)酒花”，“琴”首當(dāng)其沖，古琴之聲近于天籟，琴是極清幽高潔之物，彈奏時(shí)須靜，環(huán)境靜和人心靜，“獨(dú)坐幽篁里，彈琴?gòu)?fù)長(zhǎng)嘯”，琴韻是古今文人墨客不可或缺的精神生活的重要組成部分。陳源在《聽(tīng)琴》里幽默地說(shuō)：（英國(guó)人）不愛(ài)莎士比亞你就是傻子，（中國(guó)人）不愛(ài)古琴你逃不了做牛。

葉靈鳳《憔悴的弦聲》，卻傳遞了這樣奇特的信息：兩個(gè)互不相識(shí)的人，可以通過(guò)琴聲成為知音，產(chǎn)生“同是天涯淪落人”的共鳴。讓人聯(lián)想到俞伯牙與鐘子期的傳說(shuō)，聯(lián)想到潯陽(yáng)江邊江州司馬的故事。

對(duì)比琴的莊重與繁文縟節(jié)，“葉笛”這一小巧的樂(lè)器則顯得親切隨意。中國(guó)人口眾多，歷史悠久，音樂(lè)形式自然也是多樣的，拈一枚葉子，吹出動(dòng)聽(tīng)的音樂(lè)，或許更貼近自然，更貼近我們回歸自然的夢(mèng)想?？姵缛旱摹度~笛》超越了笛聲的空靈，深化的主題，使文章厚重起來(lái)。

對(duì)比這些輕靈的或是沉重的聲音，“安塞腰鼓”則是“生命的贊歌、力量的贊歌?！蔽恼潞凸穆?，同樣氣勢(shì)磅礴，同樣酣暢淋漓。使人為之振奮，讓人感受到來(lái)自黃土高原的純樸而年輕的力量，一種讓人激動(dòng)不已的崇高感。

音樂(lè)源于什么？我想，音樂(lè)一是源于人們對(duì)美的追求，對(duì)自然的改造；二是源于自然本身。大自然賜于我們?cè)S多無(wú)價(jià)的財(cái)富，天籟就是其一，天籟給我們創(chuàng)作音樂(lè)的靈感，因?yàn)橹挥羞@種聲音，才堪稱“天然去雕飾”，我們才能層層剝?nèi)ジ≡甑默F(xiàn)實(shí)世界的外衣，尋找到“真”。周同賓的《天籟》不止寫聲音，還寫人。寫天籟的自然優(yōu)美，寫人的純樸善良。

篇5

按照銀監(jiān)會(huì)2014年12月向商業(yè)銀行下發(fā)的《商業(yè)銀行理財(cái)業(yè)務(wù)監(jiān)督管理辦法（征求意見(jiàn)稿）》（下稱“《征求意見(jiàn)稿》”）的意見(jiàn)，理財(cái)資金服務(wù)實(shí)體經(jīng)濟(jì)是國(guó)家支持實(shí)體經(jīng)濟(jì)的一大基調(diào)，在這一精神要求下，銀監(jiān)會(huì)鼓勵(lì)商業(yè)銀行設(shè)立直接融資工具，對(duì)接企業(yè)融資需求。目前商業(yè)銀行理財(cái)資金投資于實(shí)體經(jīng)濟(jì)主要通過(guò)以下直接或間接方式：債券、非標(biāo)準(zhǔn)化債權(quán)類資產(chǎn)、部分權(quán)益類資產(chǎn)、理財(cái)直接融資工具、信貸資產(chǎn)流轉(zhuǎn)項(xiàng)目、商品類以及部分其他資產(chǎn)。數(shù)據(jù)顯示，目前理財(cái)資金投資商業(yè)、金融等服務(wù)業(yè)較多。

監(jiān)管新規(guī)打破剛性兌付

目前，監(jiān)管層對(duì)商業(yè)銀行理財(cái)資金入市持謹(jǐn)慎態(tài)度，并不斷要求銀行理財(cái)資金服務(wù)實(shí)體經(jīng)濟(jì)?！墩髑笠庖?jiàn)稿》對(duì)銀行資金入市有如下規(guī)定：理財(cái)資金投資不得有以下行為：第一，投資于境內(nèi)二級(jí)市場(chǎng)公開(kāi)交易的股票或與其相關(guān)的證券投資基金;第二，投資于未上市企業(yè)股權(quán)和上市公司非公開(kāi)發(fā)行或交易的股份;第三，對(duì)于具有相關(guān)投資經(jīng)驗(yàn)，風(fēng)險(xiǎn)承受能力較強(qiáng)的高資產(chǎn)凈值客戶、私人銀行客戶及機(jī)構(gòu)客戶的產(chǎn)品，不受本條控制。

另外，考慮到銀行資金通過(guò)券商、信托等通道入市的可能性。《征求意見(jiàn)稿》規(guī)定，理財(cái)資金運(yùn)用應(yīng)以直接投資為主，確實(shí)需要利用通道投資的，原則上僅可嵌套一級(jí)通道業(yè)務(wù)，杜絕多重嵌套多重投資模式，進(jìn)一步約束銀行理財(cái)資金入市。

當(dāng)前情況下，銀行理財(cái)資金入市主要通過(guò)三種曲線渠道：券商兩融受益權(quán)、傘形結(jié)構(gòu)信托和股票結(jié)構(gòu)化投資產(chǎn)品。

券商兩融受益權(quán)一般都有高質(zhì)量資產(chǎn)作保證，風(fēng)險(xiǎn)較低，收益率較高，是銀行、基金、資管青睞的投資品種。但是目前監(jiān)管條例規(guī)定不允許銀行使用表內(nèi)資金投資券商兩融受益權(quán)，但是表外資產(chǎn)不受約束。據(jù)估計(jì)，銀行理財(cái)資金投資兩融受益權(quán)規(guī)模為3000億元，在近期股市行情持續(xù)走強(qiáng)的情況下，券商融資需求也在增加，未來(lái)銀行理財(cái)資金投資于兩融受益權(quán)的規(guī)模將隨著股市的走強(qiáng)而擴(kuò)大，需要警惕的是，監(jiān)管層對(duì)于股市高杠桿的嚴(yán)格控制。

投資傘形結(jié)構(gòu)信托，即由銀行發(fā)行理財(cái)產(chǎn)品認(rèn)購(gòu)信托計(jì)劃優(yōu)先級(jí)收益權(quán)，獲取優(yōu)先固定收益，融資客戶認(rèn)購(gòu)劣后收益權(quán)，根據(jù)證券投資信托投資的表現(xiàn)，獲取剩余部分收益。優(yōu)先級(jí)買入方主要為銀行，劣后級(jí)投資者主要為私募和高凈值股票投資者，傘型結(jié)構(gòu)信托杠桿最低為1：2，最高為1：5。數(shù)據(jù)顯示，目前傘形結(jié)構(gòu)信托規(guī)模為1500億元，因此，粗略估計(jì)銀行理財(cái)資金通過(guò)傘型結(jié)構(gòu)信托入市規(guī)模約為750億元到1250億元，整體規(guī)模不大，但是發(fā)展速度很快，近期部分地區(qū)證監(jiān)局開(kāi)始叫停新增傘型信托，表明監(jiān)管層對(duì)于股市杠桿的擔(dān)憂。

二級(jí)市場(chǎng)股票結(jié)構(gòu)化投資產(chǎn)品是指銀行籌資資金作為優(yōu)先級(jí)，財(cái)務(wù)投資者作為劣后者，二者形成資產(chǎn)管理計(jì)劃，進(jìn)行二級(jí)市場(chǎng)買賣。這一產(chǎn)品和傘形結(jié)構(gòu)信托類似。

此次《征求意見(jiàn)稿》的出臺(tái)，市場(chǎng)主要關(guān)注點(diǎn)包括“打破剛性兌付”和“允許商業(yè)銀行以理財(cái)產(chǎn)品的名義開(kāi)立資金賬戶和證券賬戶等相關(guān)賬戶，鼓勵(lì)資產(chǎn)產(chǎn)品開(kāi)展直接投資”。而且，2015年《商業(yè)銀行法》的修改也有可能對(duì)這些方面進(jìn)行重新立法，這將為銀行理財(cái)業(yè)務(wù)的發(fā)展帶來(lái)新的機(jī)遇。

當(dāng)前，中國(guó)商業(yè)銀行理財(cái)產(chǎn)品仍以封閉式非凈值型為主，截至2014年6月30日，其占比已經(jīng)達(dá)到了77.08%，這種封閉式非凈值型理財(cái)產(chǎn)品經(jīng)常存在剛性兌付。一方面投資者缺乏相應(yīng)的投資知識(shí)，傳統(tǒng)的思想使得投資者在購(gòu)買銀行理財(cái)產(chǎn)品時(shí)，對(duì)理財(cái)產(chǎn)品的購(gòu)買條款理解不足，誤以為銀行理財(cái)產(chǎn)品預(yù)期收益率就是保證收益率，在收益率不及預(yù)期甚至出現(xiàn)本金虧損的情況下，就會(huì)出現(xiàn)投資者與銀行的糾紛;另一方面，銀行在開(kāi)展理財(cái)業(yè)務(wù)時(shí)也存在不盡職的情況，投資者教育不到位，在理財(cái)產(chǎn)品投資收益率不及預(yù)期甚至出現(xiàn)本金虧損的情況下，銀行為避免糾紛也多做出兜底等剛性兌付行為，投資者也會(huì)不再關(guān)注理財(cái)產(chǎn)品的風(fēng)險(xiǎn)，將其當(dāng)作存款一樣進(jìn)行投資。此外，中國(guó)利率管制和高利率也為銀行理財(cái)資金提供了較好的投資收益保障，一旦利率市場(chǎng)化加速導(dǎo)致利率降低，銀行理財(cái)產(chǎn)品當(dāng)前的高收益也會(huì)面臨挑戰(zhàn)。

打破銀行理財(cái)產(chǎn)品剛性兌付的重要措施之一是實(shí)現(xiàn)理財(cái)產(chǎn)品凈值化。數(shù)據(jù)顯示，截至2014年6月30日，銀行理財(cái)產(chǎn)品中非凈值化產(chǎn)品占比為94.87%，凈值化產(chǎn)品占比為5.13%。凈值化產(chǎn)品有利于提高理財(cái)資金投資的透明度，有利于投資者理解理財(cái)產(chǎn)品的風(fēng)險(xiǎn)。目前，理財(cái)產(chǎn)品凈值化受到諸如投資品種的限制。數(shù)據(jù)顯示，截至2014年6月30日，理財(cái)產(chǎn)品資產(chǎn)約有68.49%投資于債券及貨幣市場(chǎng)、現(xiàn)金及銀行存款，非標(biāo)債權(quán)約占22.77%，協(xié)議存款和非標(biāo)債權(quán)由于缺乏良好的流通市場(chǎng)，其風(fēng)險(xiǎn)定價(jià)不夠成熟，未來(lái)改革的方向是資產(chǎn)證券化，為其提供資產(chǎn)定價(jià)和交易的平臺(tái)，促進(jìn)理財(cái)產(chǎn)品的凈值化。

2013年10月，部分商業(yè)銀行開(kāi)始試點(diǎn)債權(quán)直接融資工具和銀行發(fā)行資產(chǎn)管理計(jì)劃。通過(guò)與理財(cái)產(chǎn)品的對(duì)比可以看出，銀行資產(chǎn)管理計(jì)劃主要特點(diǎn)有：定期公布凈值、客戶承擔(dān)風(fēng)險(xiǎn)、透明度高。這也是《征求意見(jiàn)稿》要求的體現(xiàn)，實(shí)現(xiàn)理財(cái)業(yè)務(wù)真正回歸到代客理財(cái)，達(dá)到“賣者有責(zé)，買者自負(fù)”的效果。在試點(diǎn)過(guò)程中仍然有一些問(wèn)題，諸如，預(yù)期收益率仍然繼續(xù)誤導(dǎo)投資者，信息披露不完善。

結(jié)構(gòu)型理財(cái)產(chǎn)品是將存款、零息債券等固定收益產(chǎn)品與各類金融衍生品組合在一起而形成的新型金融產(chǎn)品。結(jié)構(gòu)性理財(cái)產(chǎn)品越來(lái)越受到銀行的重視，主要有以下三點(diǎn)原因：第一，結(jié)構(gòu)性產(chǎn)品的固定收益投資部分在會(huì)計(jì)核算上可計(jì)入結(jié)構(gòu)性存款，有利于增加銀行存款規(guī)模;第二，結(jié)構(gòu)性理財(cái)產(chǎn)品有助于打破銀行剛性兌付，受到銀行歡迎;第三，結(jié)構(gòu)性理財(cái)產(chǎn)品從原理上是把高風(fēng)險(xiǎn)和低風(fēng)險(xiǎn)的金融產(chǎn)品組合在一起，滿足了中等風(fēng)險(xiǎn)偏好投資者的喜愛(ài)。

銀行理財(cái)業(yè)務(wù)困境

中國(guó)目前的理財(cái)人群以中小投資者為主，中短期理財(cái)產(chǎn)品受歡迎程度較高。在這種情況下，商業(yè)銀行把一般類的理財(cái)業(yè)務(wù)放到個(gè)人金融業(yè)務(wù)板塊，以充分發(fā)揮商業(yè)銀行大零售的優(yōu)勢(shì)，主要提供標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品;同時(shí)針對(duì)富裕階層，商業(yè)銀行一般設(shè)有理財(cái)中心，提供半標(biāo)準(zhǔn)化、半個(gè)性化的理財(cái)產(chǎn)品;對(duì)于超高端客戶，商業(yè)銀行一般設(shè)立私人銀行或者財(cái)富中心，突出其私密性、專業(yè)性和專屬性，全面提供個(gè)性化、定制化產(chǎn)品，目前，中國(guó)商業(yè)銀行私人銀行業(yè)務(wù)剛剛起步，方興未艾。同時(shí)，商業(yè)銀行針對(duì)不同群體，根據(jù)客戶分層，結(jié)合其他業(yè)務(wù)部門，推出不同的卡服務(wù)和套餐。

從總體情況看，中國(guó)商業(yè)銀行大零售理財(cái)發(fā)展快速，而且這部分理財(cái)需求占到全部理財(cái)業(yè)務(wù)的絕對(duì)多數(shù)，各大商業(yè)銀行也爭(zhēng)相布局大零售，拓展理財(cái)業(yè)務(wù)。但是針對(duì)富裕階層和高端凈值客戶的服務(wù)還有待發(fā)展，這塊業(yè)務(wù)主要受到以下因素的制約：首先，專業(yè)人才缺失，盡管高端理財(cái)服務(wù)前景很好，但是受傳統(tǒng)觀念影響，優(yōu)秀人才從事此項(xiàng)業(yè)務(wù)的積極性不高，而且當(dāng)前，私人定制化服務(wù)不到位，仍然以銷售理財(cái)產(chǎn)品為主，這無(wú)法體現(xiàn)和發(fā)揮優(yōu)秀人才的價(jià)值;其次，由于國(guó)外私人銀行等高端理財(cái)服務(wù)主要通過(guò)全權(quán)委托，但是中國(guó)商業(yè)銀行才剛剛試水，短期內(nèi)難以取得客戶信任;第三，當(dāng)前商業(yè)銀行收入以利息收入為主，中間業(yè)務(wù)收入由于利潤(rùn)占比較低，在全行業(yè)務(wù)板塊中不受重視;最后客戶分層不明晰，大部分大型、中型商業(yè)銀行只有零售理財(cái)和私人銀行兩個(gè)部門，對(duì)于中間富裕階層沒(méi)有分層。

中國(guó)商業(yè)銀行理財(cái)資管業(yè)務(wù)一般包括財(cái)富管理部門、資產(chǎn)管理部門、資產(chǎn)托管部門以及私人銀行部。一般情況下，商業(yè)銀行財(cái)富管理的組織模式分為三種：掛靠模式、平行模式和獨(dú)立模式，目前中國(guó)商業(yè)銀行財(cái)富管理處于剛起步階段，財(cái)富管理多數(shù)掛靠于零售部門或者個(gè)人金融業(yè)務(wù)板塊下，未來(lái)發(fā)展方向是專業(yè)化，品牌化。

一般而言，掛靠在零售部門的財(cái)富管理業(yè)務(wù)屬于二級(jí)部門，國(guó)內(nèi)多數(shù)商業(yè)銀行屬于這種情況，鮮有商業(yè)銀行把財(cái)富管理與私人銀行作為一級(jí)部門或者大事業(yè)部。美國(guó)商業(yè)銀行經(jīng)歷較多的重組和并購(gòu)，業(yè)務(wù)整合明顯，因此將業(yè)務(wù)設(shè)置成大板塊模式，類似于大事業(yè)部制，大中型銀行把全球財(cái)富管理與私人銀行作為一大業(yè)務(wù)板塊，與商業(yè)銀行、零售業(yè)務(wù)等平行。

私人銀行起源于歐洲，已經(jīng)歷百年歷史，中國(guó)私人銀行業(yè)務(wù)才剛剛開(kāi)始，但是發(fā)展很快，截至2014年6月30日，16家上市銀行已經(jīng)有13家開(kāi)通私人銀行業(yè)務(wù)，私人銀行所在地多為上海和廣州。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，目前國(guó)內(nèi)商業(yè)銀行的私人銀行管理的資產(chǎn)達(dá)到4.5萬(wàn)億元，私人銀行客戶數(shù)量也達(dá)到35萬(wàn)人，人均管理資產(chǎn)規(guī)模超過(guò)1000萬(wàn)元。

目前，16家上市商業(yè)銀行中有13家開(kāi)設(shè)私人銀行部，南京銀行鑫梅花理財(cái)中心類似于私人銀行，未來(lái)估計(jì)會(huì)有其他中小股份制銀行推出私人銀行。私人銀行門檻規(guī)模為600萬(wàn)元或800萬(wàn)元，部分大行達(dá)到1000萬(wàn)元。從網(wǎng)點(diǎn)數(shù)量來(lái)看，截至2014年6月30日，中國(guó)銀行設(shè)立33個(gè)私人網(wǎng)點(diǎn)，農(nóng)業(yè)銀行設(shè)立23個(gè)，建設(shè)銀行10個(gè)，招商銀行34個(gè)，平安銀行12個(gè);建設(shè)銀行設(shè)立財(cái)富中心338個(gè)，中國(guó)銀行設(shè)立財(cái)富中心273個(gè)，招商銀行設(shè)立財(cái)富中心55個(gè)。

中國(guó)商業(yè)銀行私人銀行發(fā)展時(shí)間較短，目前處在起步階段，業(yè)務(wù)不夠成熟，由于受到監(jiān)管制度的束縛、管理經(jīng)驗(yàn)不足、缺乏業(yè)務(wù)人才等原因，中國(guó)商業(yè)銀行私人銀行業(yè)務(wù)下一步發(fā)展面臨較大挑戰(zhàn)。在經(jīng)歷了幾年快速擴(kuò)張之后，目前私人銀行業(yè)務(wù)已經(jīng)滑落到私人銀行關(guān)注度的第六名，而排在前三名的分別是個(gè)人消費(fèi)貸款、財(cái)富管理和個(gè)人經(jīng)營(yíng)性貸款。但是在西方，私人銀行業(yè)務(wù)一般排在一級(jí)或者二級(jí)，地位足夠重要，比如匯豐銀行的全球私人銀行就作為四大業(yè)務(wù)板塊之一在全球開(kāi)展業(yè)務(wù)。

2013年，國(guó)內(nèi)商業(yè)銀行私人銀行規(guī)模大幅增長(zhǎng)，中行私人銀行業(yè)務(wù)收入增長(zhǎng)超過(guò)70%，民生銀行私人銀行業(yè)務(wù)手續(xù)費(fèi)和傭金凈收入增長(zhǎng)122.97%，并沒(méi)有形成良好的業(yè)績(jī)?cè)鲩L(zhǎng)點(diǎn)。資產(chǎn)管理業(yè)務(wù)發(fā)展較好的招商銀行披露，其私人銀行業(yè)務(wù)在2010年實(shí)現(xiàn)凈利潤(rùn)4億元，占當(dāng)年凈利潤(rùn)的1.6%。

近兩年成立的私人銀行虧損不斷，在跑馬圈地的背景下，面臨“福礦不富”的困局。目前私人銀行的富豪客戶主要是創(chuàng)一代、富一代，多為企業(yè)主，留住這些客戶，就將給銀行帶來(lái)更多的公司業(yè)務(wù)資源，而且有利于降低銀行和企業(yè)之間的信息不對(duì)稱，這對(duì)于商業(yè)銀行更加重要。

總體上看，中國(guó)私人銀行還沒(méi)有發(fā)生質(zhì)變，如何突破傳統(tǒng)的理財(cái)銷售模式是當(dāng)前私人銀行發(fā)展的關(guān)鍵，而突破的關(guān)鍵又在于銀行經(jīng)營(yíng)全面化，即擁有全牌照的銀行將具有優(yōu)先發(fā)展的條件，國(guó)內(nèi)目前平安銀行、中信銀行依托背后金融控股集團(tuán)，可以為私人銀行客戶跨越銀行、資管、保險(xiǎn)、信托、稅務(wù)等全方位服務(wù)，真正做到專屬性和專業(yè)性。招商銀行的理財(cái)業(yè)務(wù)發(fā)展最為可觀，其私銀客戶遠(yuǎn)超其他中小股份制銀行，并與國(guó)有大行齊頭并進(jìn)，而且其創(chuàng)新基因更強(qiáng)。

當(dāng)前中國(guó)私人銀行的發(fā)展情況與銀行業(yè)發(fā)展階段密不可分，在利率市場(chǎng)化不斷推進(jìn)和金融自由化趨勢(shì)的引導(dǎo)下，銀行業(yè)越來(lái)越重視中間業(yè)務(wù)收入，比如投資銀行、理財(cái)資管等。目前私人銀行業(yè)務(wù)仍然處于掛靠于零售部門，部分商業(yè)銀行抱有不落后的態(tài)度開(kāi)展私人銀行業(yè)務(wù)，并沒(méi)有形成良好的利潤(rùn)增長(zhǎng)點(diǎn)，相反它卻成為了非私人銀行業(yè)務(wù)收入增長(zhǎng)的保障。

銀行理財(cái)轉(zhuǎn)向資管

從2004年光大銀行推出首款理財(cái)產(chǎn)品算起，商業(yè)銀行理財(cái)業(yè)務(wù)已經(jīng)走過(guò)了10年歷程，理財(cái)業(yè)務(wù)規(guī)模不斷擴(kuò)大，滿足了不同層次投資者的需求，實(shí)現(xiàn)了居民財(cái)富的保值增值。2013年以來(lái)，互聯(lián)網(wǎng)金融的崛起，吸納了部分居民儲(chǔ)蓄和理財(cái)資金，給商業(yè)銀行理財(cái)業(yè)務(wù)帶來(lái)競(jìng)爭(zhēng)壓力，2014年數(shù)據(jù)顯示，商業(yè)銀行儲(chǔ)蓄存款和理財(cái)資金規(guī)模同時(shí)下降。在降息通道已經(jīng)打開(kāi)的情況下，商業(yè)銀行理財(cái)產(chǎn)品的預(yù)期收益率出現(xiàn)微降，發(fā)行數(shù)量也有小幅減少。單純依靠投資債券和貨幣市場(chǎng)，很難再為投資者取得滿意的投資回報(bào)。此外，在利率市場(chǎng)化和民營(yíng)銀行的沖擊下，國(guó)有銀行和股份制商業(yè)銀行也在積極拓展中間業(yè)務(wù)收入，理財(cái)資管業(yè)務(wù)是其中重要一項(xiàng)。

銀行業(yè)開(kāi)展理財(cái)資管業(yè)務(wù)最大的優(yōu)勢(shì)在于產(chǎn)品銷售和客戶數(shù)量，最大的劣勢(shì)在于資產(chǎn)管理能力?；鸷腿虛碛邢鄬?duì)完善的投研體系，經(jīng)營(yíng)比較成熟，但是銀行的銷售渠道對(duì)基金而言不可或缺。未來(lái)中國(guó)商業(yè)銀行理財(cái)資管業(yè)務(wù)的發(fā)展方向主要是著力發(fā)展個(gè)人理財(cái)業(yè)務(wù)。

《征求意見(jiàn)稿》對(duì)商業(yè)銀行開(kāi)展理財(cái)業(yè)務(wù)做了進(jìn)一步規(guī)定，鼓勵(lì)商業(yè)銀行直接投資，最多使用一層通道，避免層層嵌套，降低投資和交易成本，減少杠桿。據(jù)初步估計(jì)，券商托管的通道類業(yè)務(wù)高達(dá)8萬(wàn)億元，銀行理財(cái)資金是主要的來(lái)源。去除通道、轉(zhuǎn)向直接投資對(duì)商業(yè)銀行提出了更高的要求，尤其體現(xiàn)在投資和研究能力。

研究分析、投資和交易能力是銀行理財(cái)業(yè)務(wù)轉(zhuǎn)型資管業(yè)務(wù)不可或缺的能力，較強(qiáng)的研究能力為投資和交易提供了基礎(chǔ)保障，這也是投資者非?？粗氐囊幻?。與基金、券商相比，銀行業(yè)由于長(zhǎng)期受到嚴(yán)格監(jiān)管，對(duì)資產(chǎn)管理涉足深度無(wú)法與基金、券商相比，這也是制約銀行業(yè)資管業(yè)務(wù)的重要因素。當(dāng)前理財(cái)資金主要投資債券和貨幣市場(chǎng)，權(quán)益類投資較少，而且商業(yè)銀行多借助通道進(jìn)行多元化投資，而資管業(yè)務(wù)投資方向幾乎覆蓋所有市場(chǎng)投資品種，商業(yè)銀行需要在投研方面提前布局，不斷提升代客理財(cái)?shù)哪芰Α？梢钥紤]的一種形式是，銀行資管投研可以模仿基金公司，在建立自身投資和研究部門的基礎(chǔ)上，依托券商研發(fā)部門，等于壯大了買方力量。

目前，商業(yè)銀行開(kāi)展理財(cái)資管業(yè)務(wù)與券商、基金和信托等專業(yè)性資管機(jī)構(gòu)相比，有明顯的劣勢(shì)，首先是監(jiān)管層的限制很嚴(yán)，尤其是對(duì)權(quán)益類投資品種的限制，這極大限制了商業(yè)銀行對(duì)產(chǎn)品線的豐富。從金融自由化趨勢(shì)來(lái)看，商業(yè)銀行理財(cái)資金投資股票、金融衍生品等權(quán)益類資產(chǎn)的限制將會(huì)打破。目前，按照監(jiān)管允許的原則，商業(yè)銀行可以在開(kāi)放式凈值型理財(cái)產(chǎn)品和結(jié)構(gòu)化理財(cái)產(chǎn)品方面發(fā)力，一方面可以打破剛性兌付，減輕商業(yè)銀行兌付壓力;另一方面迎合投資者需求。商業(yè)銀行在自身投研基礎(chǔ)上，開(kāi)發(fā)針對(duì)高凈值人群的理財(cái)產(chǎn)品，比如招商銀行針對(duì)金葵花客戶推出的“金葵花”焦點(diǎn)聯(lián)動(dòng)系列產(chǎn)品，產(chǎn)品覆蓋股票、債券、存款、黃金等品種。在多樣化產(chǎn)品的基礎(chǔ)上，為客戶提供全面的服務(wù)，囊括財(cái)富管理、養(yǎng)老、旅游娛樂(lè)等多重領(lǐng)域。

理財(cái)直接融資工具是一種新型的創(chuàng)新金融工具，2013年銀監(jiān)會(huì)開(kāi)始組織部分商業(yè)銀行試點(diǎn)理財(cái)直接融資工具業(yè)務(wù)，2014年，試點(diǎn)范圍進(jìn)一步擴(kuò)大，已有20多家商業(yè)銀行參與試點(diǎn)。中國(guó)銀行新推出理財(cái)直接融資工具對(duì)接中鐵二十三局，以期支持實(shí)體經(jīng)濟(jì)發(fā)展?！墩髑笠庖?jiàn)稿》第三十七條對(duì)商業(yè)銀行開(kāi)展理財(cái)直接融資工具提出要求，商業(yè)銀行發(fā)起設(shè)立理財(cái)直接融資工具，應(yīng)堅(jiān)持投資資金與企業(yè)融資需求的直接對(duì)接，單獨(dú)建賬管理和風(fēng)險(xiǎn)隔離，資金投向明確，直接服務(wù)實(shí)體經(jīng)濟(jì)。由于理財(cái)直接融資工具對(duì)于銀行貸款具有替代功能，監(jiān)管層樂(lè)于看到理財(cái)資金投向?qū)嶓w經(jīng)濟(jì)，這也是政策性金融的體現(xiàn)。但是商業(yè)銀行在從事理財(cái)直接融資工具時(shí)，會(huì)考慮利潤(rùn)因素。

中國(guó)商業(yè)銀行理財(cái)資管部門多隸屬于零售或者個(gè)人金融板塊，獨(dú)立性和重要性地位不高。理財(cái)業(yè)務(wù)部門改革應(yīng)伴隨著商業(yè)銀行業(yè)務(wù)變革而進(jìn)行，在非利息收入不斷受到重視的條件下，理財(cái)業(yè)務(wù)部門，包括資管部門和私人銀行部門應(yīng)該獲得更多的獨(dú)立地位。因此，在部門設(shè)置上把大資管部門作為一個(gè)整體作為一級(jí)部門，按照客戶分層的原則，個(gè)人理財(cái)業(yè)務(wù)可以放在個(gè)人金融或者零售金融板塊，為個(gè)人客戶提供標(biāo)準(zhǔn)化金融產(chǎn)品;為私人銀行部門配備專業(yè)私人銀行家，并提供業(yè)務(wù)后臺(tái)支持，以保證私人銀行的私密性和專屬性;資產(chǎn)管理部門可以更好的發(fā)揮與其它業(yè)務(wù)部門的聯(lián)動(dòng)效應(yīng)，包括產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和銷售，為該類客戶提供半標(biāo)準(zhǔn)化、半定制化的服務(wù)。

另外一個(gè)重要的改革思路是子公司制度，實(shí)現(xiàn)法人獨(dú)立運(yùn)營(yíng)。目前監(jiān)管層對(duì)于理財(cái)業(yè)務(wù)、私人銀行部門的子公司制改革已經(jīng)取得一致意見(jiàn)，未來(lái)將主要進(jìn)行試點(diǎn)。2013年底，交通銀行資產(chǎn)管理部宣布探索事業(yè)部制改革，2014年7月，銀監(jiān)會(huì)下發(fā)《關(guān)于完善銀行理財(cái)業(yè)務(wù)組織管理體系有關(guān)事項(xiàng)的通知》，銀行理財(cái)實(shí)業(yè)部制改革開(kāi)始全面推動(dòng)。數(shù)據(jù)顯示，目前，已經(jīng)有450多家銀行完成理財(cái)業(yè)務(wù)事業(yè)部改制。

事業(yè)部制改革對(duì)銀行理財(cái)業(yè)務(wù)部門的單獨(dú)核算、風(fēng)險(xiǎn)隔離、行為規(guī)范、歸口管理等方面提出了新的要求，明確了理財(cái)業(yè)務(wù)部門經(jīng)營(yíng)決策權(quán)和一定程度的人、財(cái)、物支配權(quán)。從實(shí)際效果看，改革之后，銀行理財(cái)部門仍然為銀行內(nèi)部，沒(méi)能實(shí)現(xiàn)真正的風(fēng)險(xiǎn)隔離和獨(dú)立經(jīng)營(yíng)決策，內(nèi)部考核和薪酬激勵(lì)機(jī)制仍受制于銀行業(yè)平均水平，這使得銀行理財(cái)資管無(wú)法與資管同業(yè)展開(kāi)更好競(jìng)爭(zhēng)。

銀行理財(cái)業(yè)務(wù)部門和私人銀行部門下一步將從事業(yè)部制過(guò)渡到子公司制。目前中信銀行等銀行擁有資管子公司，子公司制改革帶來(lái)的好處主要有以下幾點(diǎn)： 第一，獨(dú)立經(jīng)營(yíng)決策，子公司制具有更好的風(fēng)險(xiǎn)控制的效果，可以將破產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)控制在銀行外部;另外更高的獨(dú)立性也有利于理財(cái)資管業(yè)務(wù)真正回歸“代客理財(cái)”，消除投資者心目中的銀行保本的影子，打破“剛性兌付”。

第二，回歸本源，強(qiáng)化激勵(lì)。銀行理財(cái)資管業(yè)務(wù)作為非傳統(tǒng)銀行業(yè)務(wù)，通過(guò)子公司制獨(dú)立運(yùn)營(yíng)，有利于理財(cái)資管業(yè)務(wù)回歸本源，以往銀行為了存款而沖時(shí)點(diǎn)，手段之一就是通過(guò)理財(cái)業(yè)務(wù)。理財(cái)業(yè)務(wù)的回歸有利于同業(yè)競(jìng)爭(zhēng)和分業(yè)監(jiān)管，銀行理財(cái)業(yè)務(wù)獨(dú)立法人經(jīng)營(yíng)，有利于理財(cái)資管與券商、基金等資管公司展開(kāi)公平競(jìng)爭(zhēng)，同時(shí)也有利于分業(yè)監(jiān)管。此外，作為理財(cái)資管公司，其薪酬考核也將更多按照同業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，這將對(duì)從業(yè)人員薪酬待遇有所提升，同時(shí)對(duì)從業(yè)人員的要求也會(huì)更高。

過(guò)去十年，銀行理財(cái)實(shí)現(xiàn)了從小到大的變化，2014年理財(cái)規(guī)模已經(jīng)達(dá)到了約18萬(wàn)億元。受政策套利和監(jiān)管影響，銀行理財(cái)呈現(xiàn)出畸形的發(fā)展路徑，未來(lái)十年，理財(cái)產(chǎn)品低風(fēng)險(xiǎn)、高收益的情況一去不復(fù)返，銀行理財(cái)業(yè)務(wù)回歸代客理財(cái)、轉(zhuǎn)型資產(chǎn)管理業(yè)務(wù)已經(jīng)成為業(yè)內(nèi)和監(jiān)管層的一致共識(shí)，這既是一種回歸正路，也是向更高層次的邁進(jìn)。

在新的局面下，大銀行和中小銀行以及城商行開(kāi)展理財(cái)資管業(yè)務(wù)應(yīng)區(qū)別對(duì)待，未來(lái)十年，大銀行在市場(chǎng)中仍將占主導(dǎo)地位，主要以開(kāi)放式、凈值型和結(jié)構(gòu)類為主，其客戶優(yōu)勢(shì)更加顯現(xiàn)，信譽(yù)優(yōu)勢(shì)也將對(duì)客戶產(chǎn)生吸引作用，傳統(tǒng)渠道優(yōu)勢(shì)在客戶服務(wù)方面會(huì)有新的作用，但同時(shí)，產(chǎn)品凈值化以后，管理規(guī)模大也將是大行資產(chǎn)管理的一大難題，規(guī)模太大，勢(shì)必會(huì)影響產(chǎn)品收益率;相反，小行具有更好的靈活性，資產(chǎn)管理規(guī)模小，而且未來(lái)資產(chǎn)管理業(yè)務(wù)拼的是管理能力和投資能力，規(guī)模并不是最主要的，小行的劣勢(shì)主要是客戶渠道和信譽(yù)無(wú)法與大行相比，以及產(chǎn)品工具偏少，因此，小銀行更需要努力提升投資和研究能力。

小銀行做資產(chǎn)管理需要突出差異化特色。第一，做強(qiáng)固定收益率資產(chǎn)，向凈值型產(chǎn)品轉(zhuǎn)變。固定收益率產(chǎn)品具有較高安全性，通過(guò)凈值化，又可以提高產(chǎn)品流動(dòng)性，形成安全性和流動(dòng)性兼?zhèn)涞牟町惢厣诹糇‖F(xiàn)有客戶的基礎(chǔ)上，吸引新的客戶。第二，跨界合作，拓展銷售渠道，豐富產(chǎn)品線，通過(guò)券商、信托等渠道，拓展投資品種，彌補(bǔ)工具不足的缺陷，同時(shí)通過(guò)其他商業(yè)銀行，拓展銷售渠道。大銀行具有強(qiáng)大的國(guó)家信譽(yù)以及客戶優(yōu)勢(shì)，擁有廣泛的銷售渠道和產(chǎn)品線，良好的信用風(fēng)險(xiǎn)控制。國(guó)內(nèi)大行一般都會(huì)有下屬子公司，包括信托、基金、保險(xiǎn)、券商、資產(chǎn)管理公司等，這也是大行開(kāi)展理財(cái)資管業(yè)務(wù)的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。

篇6

【關(guān)鍵詞】 小瞼裂綜合征； FOXL2； 卵巢功能早衰； 突變

FOXL2基因是一個(gè)2.7 kb的單外顯子基因，編碼376個(gè)氨基酸，預(yù)期的蛋白質(zhì)屬于翼狀螺旋/叉頭型轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)家族，包含一個(gè)特有的101個(gè)氨基酸的forkhead DNA結(jié)構(gòu)域和一個(gè)與此分離但功能尚未闡明的多聚丙氨酸肽段。小瞼裂綜合征（BPES）是表現(xiàn)為瞼裂狹小、上瞼下垂和倒轉(zhuǎn)型內(nèi)眥贅皮等一系列癥狀的常染色體顯性遺傳病。臨床上分為兩型：Ⅰ型：女性患者不育，原發(fā)閉經(jīng)或提前絕經(jīng)、小子宮和卵巢功能早衰；Ⅱ型：男女患者均可生育。目前研究證實(shí)FOXL2基因與BPES的發(fā)病密切相關(guān)，是首選致病基因。

1 材料與方法

1.1 材料 參考The human FOXL2 mutation database（http：//medgen.ugent.be/foxl2/）[1]，搜集所有報(bào)道過(guò)的突變，共發(fā)現(xiàn)有144個(gè)變異位點(diǎn)，其中包括15個(gè)單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)。對(duì)這些突變進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理并分類，同時(shí)進(jìn)行蛋白表達(dá)譜分析，各功能區(qū)分析，以及患者的臨床特征與突變相關(guān)性分析。

1.2 突變位點(diǎn)的研究方法 （1）直接測(cè)序；（2）多重性連接依賴的探針擴(kuò)增法；（3）微衛(wèi)星位點(diǎn)分析和單核苷酸多態(tài)性分析；（4）熒光原位雜交技術(shù)分析。

1.3 前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析 筆者對(duì)一期收集到的29例BPES患者血樣進(jìn)行FOXL2基因突變研究，并將前期實(shí)驗(yàn)中所得的突變結(jié)果進(jìn)行分析歸類[2-3]。

2 結(jié)果

2.1 FOXL2的功能區(qū) FOXL2的功能區(qū)包括forkhead DNA結(jié)合域（第52～152殘基區(qū)域）、功能尚未闡明的多聚丙氨酸肽段（221～234位氨基酸殘基區(qū)）以及轉(zhuǎn)錄激活區(qū)（第280～320殘基區(qū)域）。

2.2 分類結(jié)果 突變譜共分10型，具體分型如下：A：蛋白截短，無(wú)forkhead DNA結(jié)合域及其后的所有氨基酸；B：蛋白截短，包含部分forkhead DNA結(jié)合域；C：蛋白截短，包含完整forkhead DNA結(jié)合域，無(wú)多聚丙氨酸肽段及轉(zhuǎn)錄激活區(qū)；D：蛋白截短，包含完整forkhead DNA結(jié)合域和完整的多聚丙氨酸肽段，無(wú)轉(zhuǎn)錄激活區(qū)；E：轉(zhuǎn)錄激活區(qū)域突變，蛋白截短或延長(zhǎng)，包含完整forkhead DNA結(jié)合域和完整的多聚丙氨酸肽段；F：轉(zhuǎn)錄激活區(qū)后的突變，蛋白截短或延長(zhǎng)，包含完整forkhead DNA結(jié)合域、多聚丙氨酸肽段及轉(zhuǎn)錄激活區(qū)；G：多聚丙氨酸肽段框架內(nèi)移碼突變，蛋白延長(zhǎng)或截短；H：只有錯(cuò)義突變，單個(gè)堿基的替換或顛換；I：包括微缺失及FOXL2基因與其他基因的染色體重排；J：其他突變，包括5′-UTR和3′-UTR區(qū)域變異。

2.3 患者的臨床特征與突變相關(guān)性分析結(jié)果 所有發(fā)現(xiàn)突變的患者均為典型的BPES，兩型BPES存在著基因型和表現(xiàn)型的相互關(guān)聯(lián)。同一個(gè)突變可導(dǎo)致明顯的家系內(nèi)和家系間的表型多樣性，即表現(xiàn)型和基因型的多樣性。

A組突變由于forkhead區(qū)域的破壞致DNA結(jié)合能力的下降，從而導(dǎo)致FOXL2的單型缺陷；由于缺乏相關(guān)的信息，對(duì)B組不能作出相關(guān)性判斷；C組，蛋白截短，無(wú)多聚丙氨酸肽段及多聚脯氨酸肽段，發(fā)生POF幾率非常高，多為BPESⅠ型；D組，具有完整的forkhead和聚丙氨酸區(qū)域，蛋白截短，家系內(nèi)存在表現(xiàn)型的多樣性；E組，具有完整的forkhead和聚丙氨酸區(qū)域，移碼突變導(dǎo)致蛋白延長(zhǎng)，導(dǎo)致Ⅰ型和Ⅱ型BPES；F組的基因型與表現(xiàn)型亦不能作出相關(guān)性判斷；G組的多聚丙氨酸肽段突變框架移碼突變，導(dǎo)致聚丙氨酸擴(kuò)增，發(fā)生在Ⅱ型BPES家系和類型不明確的家系中。多聚丙氨酸肽段延長(zhǎng)，導(dǎo)致聚丙氨酸擴(kuò)增，多發(fā)生在Ⅱ型BPES家系；H組錯(cuò)義突變，由于病例數(shù)量少及缺乏相關(guān)的信息，不能作出判斷；I組發(fā)生在散發(fā)的患者和家族性BPES，多伴發(fā)智力低下；J組未引起任何蛋白變異，由于病例數(shù)量少及缺乏相關(guān)的信息，不能作出相關(guān)性判斷。

單純的卵巢功能早衰（POF）患者中發(fā)現(xiàn)的FOXL2的變異均為單核苷酸多態(tài)性（SNP），筆者對(duì)30例單純性上瞼下垂患者的FOXL2基因進(jìn)行突變分析時(shí)未發(fā)現(xiàn)此基因的突變。

2.4 前期實(shí)驗(yàn)中的突變的分析及歸類 筆者對(duì)一期收集到的29例BPES患者及100例眼瞼發(fā)育正常的人的血樣提取FOXL2基因進(jìn)行突變研究，發(fā)現(xiàn)的3個(gè)突變位點(diǎn)分別為892C>T、951～953delC及901～930dup30。

892C>T為無(wú)義突變，蛋白截短，包含完整forkhead DNA結(jié)合域，但無(wú)多聚丙氨酸肽段及多聚脯氨酸肽段，屬于C組；951～953delC為缺失突變后引起移碼突變，蛋白截短，包含完整forkhead DNA結(jié)合域和多聚丙氨酸肽段，無(wú)多聚脯氨酸肽段，屬于D組；901～930dup30為重復(fù)突變，多聚丙氨酸肽段框架內(nèi)移位突變，蛋白延長(zhǎng)，屬于G組。

另外，據(jù)報(bào)道的中國(guó)人BPES患者中FOXL2基因的突變共有24種，除去筆者報(bào)道的3種[2-3]，其余21種分組情況如下：475dupC屬于B組；704delG及804dupC屬于D組；1091 delC屬于E組；1041～1042 insC屬于F組；909～938 dup30及933～965dup33屬于G組；H組突變比較多，分別為425 T>C；773C>G；655C>T；370 A>G；340A>G；384G>A；241T>C；650C>G；50CTA及2293-2294insT屬于J組；其中672～701dup30；663～692dup30以及858～874dup17不屬于以上突變分型的任何分組，提示在這些突變區(qū)域可能存在其他功能部位[4-13]。

3 討論

轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄激活區(qū)分為3類：酸性激活區(qū)、谷氨酰胺富含區(qū)和脯氨酸富含區(qū)。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)FOXL2功能區(qū)的研究只提出其forkhead DNA結(jié)合區(qū)和一個(gè)與此分離的多聚丙氨酸區(qū)域，并未提及轉(zhuǎn)錄激活區(qū)。通過(guò)對(duì)FOXL2功能域的分析，未發(fā)現(xiàn)明顯的酸性區(qū)及谷氨酰胺富含區(qū)，只有一個(gè)脯氨酸富含區(qū)，即280～320區(qū)域，此區(qū)內(nèi)脯氨酸含量高達(dá)45%，因此，筆者認(rèn)為此區(qū)為FOXL2的轉(zhuǎn)錄激活區(qū)。另外，突變譜的結(jié)果亦顯示此區(qū)域?yàn)橥蛔兏甙l(fā)區(qū)，認(rèn)為是由于轉(zhuǎn)錄激活區(qū)的突變使轉(zhuǎn)錄因子失去轉(zhuǎn)錄功能而導(dǎo)致其作用蛋白的功能異常，從而導(dǎo)致疾病的發(fā)生。

突變類型的分組與De Baere等[14]的分組略有不同，筆者主要是根據(jù)FOXL2功能區(qū)進(jìn)行突變類型的分組，如此可以更好的了解FOXL2突變與功能的關(guān)系，從而為明確FOXL2的確切致病機(jī)理提供依據(jù)。De Baere等[14]在對(duì)多例BPES家系研究后提出由同一個(gè)突變可導(dǎo)致明顯的家系內(nèi)和家系間的表型多樣性，即表現(xiàn)型和基因型的多樣性，筆者認(rèn)為主要是由于基因背景不同和基因的相互作用造成的。

FOXL2控制瞼裂發(fā)育的目標(biāo)基因尚不清楚。據(jù)推測(cè)，F(xiàn)OXL2很可能是控制某些基因，如TGF-α、EGFr、Inhbb、控制睜眼及瞼裂的基因位點(diǎn)，而這些基因與其他與眼前節(jié)發(fā)育有關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子共同影響瞼裂的發(fā)育，如Pax6、Bmp4、Bmp7等[15-16]。另外，有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)OXL2的一個(gè)同源基因FOXO對(duì)某些調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的抗凋亡或促凋亡基因有調(diào)節(jié)作用。FOXL2可能參與了對(duì)胚胎早期眼瞼及眼周肌肉發(fā)育過(guò)程中某些調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的抗凋亡或促凋亡基因的調(diào)節(jié)，其具體的作用機(jī)制，還有待于進(jìn)一步地研究證實(shí)。

綜上所述，F(xiàn)OXL2的突變與BPES發(fā)病密切相關(guān)，任何區(qū)域的突變都可以導(dǎo)致其功能異常，從而導(dǎo)致BPES。多聚丙氨酸區(qū)域的喪失與Ⅰ型BPES密切相關(guān)。FOXL2的突變與單純性POF及上瞼下垂的發(fā)病關(guān)系并不密切。

參考文獻(xiàn)

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篇7

北師大版普通高中課程標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)教科書(shū)生物《必修2》第5章第1節(jié)。

2 教材分析

2.1 教材分析

基因突變是高中生物學(xué)課程內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)是北師大版必修2“遺傳與進(jìn)化”模塊第5章“遺傳信息的改變”第1節(jié)內(nèi)容。本節(jié)內(nèi)容介紹了變異的類型、基因突變的概念、特點(diǎn)、意義、基因突變發(fā)生的原因及人工誘變?cè)谟N上的應(yīng)用。教材鐮刀型細(xì)胞貧血癥為實(shí)例實(shí)例引出基因突變現(xiàn)象，既便于學(xué)生理解，又從不同的角度分析了基因突變的概念、原因及基因突變的特點(diǎn)。

重點(diǎn)：基因突變的概念、產(chǎn)生原因、結(jié)果和基因突變的特點(diǎn)。

難點(diǎn)：歸納總結(jié)基因突變的概念和原因；基因突變與性狀的關(guān)系；變異的不定向性與總是突變?yōu)樵虻牡任换虻年P(guān)系。

前后知識(shí)的聯(lián)系：與前面DNA的結(jié)構(gòu)和堿基對(duì)的排列順序代表了遺傳信息，基因的概念和表達(dá)相聯(lián)系。與生物進(jìn)化和育種聯(lián)系。

2.2 學(xué)情分析

學(xué)生通過(guò)有絲分裂、減數(shù)分裂、遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)、基因的表達(dá)和遺傳的基本規(guī)律的學(xué)習(xí)，對(duì)生物的遺傳有了較深入的理解，對(duì)于生物的變異現(xiàn)象在生活中也有一定了解，但是對(duì)為什么會(huì)發(fā)生變化？怎樣變化？發(fā)生的變化對(duì)生物會(huì)產(chǎn)生什么影響？，還不知道。因此，根據(jù)班級(jí)學(xué)生的實(shí)際情況，在教學(xué)過(guò)程中需要聯(lián)系生活經(jīng)驗(yàn)，前面已有知識(shí)基礎(chǔ)，適時(shí)啟發(fā)，及時(shí)設(shè)疑，經(jīng)分析、歸納總結(jié)，力爭(zhēng)讓學(xué)生自己得出結(jié)論并理解。

3 設(shè)計(jì)思想

教學(xué)活動(dòng)圍繞著對(duì)基因突變的實(shí)例展開(kāi)，理解基因突變的內(nèi)涵，把握基因突變的外延、特點(diǎn)以及與生物變異和進(jìn)化的關(guān)系；強(qiáng)化核心概念的教學(xué)，注重知識(shí)與生活、實(shí)踐應(yīng)用的聯(lián)系。

4 教學(xué)目標(biāo)設(shè)計(jì)

知識(shí)目標(biāo)

4.1 概述基因突變的概念、產(chǎn)生原因和結(jié)果；

4.2 舉例說(shuō)明基因突變可以自發(fā)產(chǎn)生，也可以誘發(fā)產(chǎn)生；

4.3 舉例說(shuō)明基因突變有普遍性、隨機(jī)性、不定向性、自然突變頻率低和多害少利等特點(diǎn)。

能力目標(biāo)

4.3.1 自我收集資料并探究和討論，實(shí)現(xiàn)自主學(xué)習(xí)和合作學(xué)習(xí)的能力。

4.3.2 收集有關(guān)人工誘變育種、太空育種等事例，進(jìn)一步理解基因突變的特點(diǎn)，了解人工誘變?cè)谟N上的應(yīng)用。

情感態(tài)度與價(jià)值觀目標(biāo)

（1）探討生物遺傳病的發(fā)生是誘發(fā)基因突變的結(jié)果，預(yù)防遺傳病的發(fā)生。

（2）收集我國(guó)有關(guān)人工誘變的事例，培養(yǎng)學(xué)生的探究、創(chuàng)新精神和愛(ài)國(guó)情懷。

5 學(xué)法指導(dǎo)

從實(shí)例分析入手，按照認(rèn)知的規(guī)律從現(xiàn)象到概念，從宏觀到微觀來(lái)歸納總結(jié)出基因突變的概念和特點(diǎn)；利用繪圖、前后聯(lián)系以及跨學(xué)科類比等方法引導(dǎo)學(xué)生不斷地探究、思考、分析和討論，幫助學(xué)生理解基因突變概念、結(jié)果以及與性狀的關(guān)系。最后通過(guò)概念圖的形式將所學(xué)內(nèi)容進(jìn)行整合。

6 教學(xué)過(guò)程

導(dǎo)入：

設(shè)疑：自然界生物多種多樣，子代性狀與親代相似的叫遺傳，同時(shí)又有子代性狀與親代不同的。這種現(xiàn)象在遺傳學(xué)上稱為什么呢？

（學(xué)生思考）――變異

提問(wèn)：在生活中既有父母單眼皮而生了個(gè)是雙眼皮的女兒，也有武漢一愛(ài)美的女性通過(guò)手術(shù)整形將自己變成了美女，這是否變異？這種性狀的改變能否傳遞給后代呢？

（學(xué)生思考）――是，前者能，后者不能

（教師展示圖片，聯(lián)系前面生物表現(xiàn)型與基因型、環(huán)境的關(guān)系）學(xué)生活動(dòng)：學(xué)生觀察圖片并分析討論。

教師總結(jié)并板書(shū)：變異分為不可遺傳的變異（僅由環(huán)境因素引起的性狀改變）和可遺傳的變異，包括基因突變、基因重組和染色體變異。

這節(jié)課我們來(lái)探討學(xué)習(xí)可遺傳變異中的基因突變。

板書(shū)：第5章 遺傳信息的改變

第1節(jié) 基因突變

教師介紹鐮刀型細(xì)胞貧血癥的發(fā)現(xiàn)過(guò)程，聯(lián)系到細(xì)胞呼吸探討貧血的原因，再展示正常紅細(xì)胞與鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的紅細(xì)胞圖片，證實(shí)鐮刀型紅細(xì)胞攜帶氧氣的能力不足，聯(lián)系血紅蛋白的作用進(jìn)一步推測(cè)血紅蛋白結(jié)構(gòu)可能不同。

1956年，英格拉姆等人分析，發(fā)現(xiàn)正常的血紅蛋白和鐮刀型細(xì)胞的血紅蛋白有一個(gè)肽段的位置不同。幻燈展示正常和異常血紅蛋白分子的部分氨基酸順序。

正?！i氨酸―組氨酸―亮氨酸―蘇氨酸―脯氨酸―谷氨酸―谷氨酸―賴氨酸―

異常……纈氨酸―組氨酸―亮氨酸―蘇氨酸―脯氨酸―纈氨酸―谷氨酸―賴氨酸―

設(shè)疑：

1、哪個(gè)氨基酸發(fā)生了改變？氨基酸的種類和排列順序由什么來(lái)決定？

2、密碼子的堿基排列順序又由什么決定？

3、鐮刀型細(xì)胞貧血癥的直接原因是？根本原因是？

教師總結(jié)：鐮刀型細(xì)胞貧血癥直接原因是血紅蛋白的一個(gè)氨基酸發(fā)生了替換，根本原因是基因中一個(gè)堿基對(duì)的替換導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)的改變。

設(shè)疑： 聯(lián)系DNA的結(jié)構(gòu)思考除了堿基對(duì)的替換外，還有哪些變化會(huì)引起基因結(jié)構(gòu)的改變？基因結(jié)構(gòu)改變一定會(huì)導(dǎo)致性狀改變嗎？

（學(xué)生思考討論并回答）――堿基對(duì)的增添或缺失

類比理解：遺傳物質(zhì)DNA一樣不同的堿基（A G C T）排列順序代表不同的信息。與英文句子由一個(gè)個(gè)字母組成，如有這樣一個(gè)英文句子“The cat sat on the mat”。隨機(jī)叫一小組的同學(xué)抄下來(lái)，每位同學(xué)可隨意的替換或增添或減少字母，最后讓學(xué)生看變后的意思是否改變，又是否一樣，體會(huì)基因突變的方式和根本原因。

練習(xí)：就下面已經(jīng)給出正常的DNA分子的堿基序列，分析當(dāng)堿基分別發(fā)生如下變化時(shí)，翻譯成的氨基酸序列將如何變化？ （1）第1個(gè)位點(diǎn)上的堿基A被堿基G或堿基C所替代；（2）第5個(gè)位點(diǎn)上的T發(fā)生了缺失；第5、6兩個(gè)堿基發(fā)生缺失；第4、5、6三個(gè)堿基都發(fā)生缺失；（3）第5個(gè)位點(diǎn)和第6個(gè)位點(diǎn)之間插入一個(gè)堿基A；插入兩個(gè)堿基A、C；插入三個(gè)堿基A、C、G。

問(wèn)題：從中你能得出哪些結(jié)論？

（1）DNA分子中發(fā)生堿基對(duì)的替換、增添或缺失，都能引起基因結(jié)構(gòu)的改變。

（2）堿基對(duì)的替換不一定會(huì)引起氨基酸排列順序的改變。

（3）缺失或增加1個(gè)堿基或2個(gè)堿基比缺失3個(gè)堿基的影響大。

1、概念

由于DNA分子中堿基對(duì)的增添、缺失或改變都會(huì)引起基因結(jié)構(gòu)改變。因此，基因突變的實(shí)質(zhì)就是基因結(jié)構(gòu)的改變。

引入下一知識(shí)內(nèi)容：DNA的結(jié)構(gòu)具有穩(wěn)定性，復(fù)制會(huì)解旋為單鏈，那么什么時(shí)候容易發(fā)生基因突變呢？

2、時(shí)期：有絲分裂間期和減數(shù)第一次分裂間期

癌癥就是原癌基因與抑癌基因的發(fā)生突變逐漸的結(jié)果，在生活中有什么因素容易引發(fā)發(fā)生基因突變呢？

物理因素：在強(qiáng)日光照射下容易得皮膚癌；在醫(yī)院放射室工作的醫(yī)生容易得癌癥等；

化學(xué)因素：咸菜等腌制食品必須檢測(cè)亞硝酸鹽的含量，亞硝酸鹽含量過(guò)多可能會(huì)致癌等）

教師總結(jié)誘發(fā)基因突變的因素：

3、引起基因突變的因素

1、外因：

（1）物理因素：紫外線、X射線、中子流、激光等；

（2）化學(xué)因素：亞硝酸鹽、堿基類似物等；

（3）生物因素：某些病毒、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物等。

2、內(nèi)因： DNA復(fù)制過(guò)程中出錯(cuò)。

4、基因突變的結(jié)果：

（1）產(chǎn)生新基因，是變異的根本來(lái)源。

（2）總是突變?yōu)樵虻牡任换颍ㄔ谌旧w上的位置和控制對(duì)象沒(méi)變）。

（3）基因突變生物性狀不一定改變（密碼子的簡(jiǎn)并性）。

5、基因突變的特點(diǎn)：

自然界中，肝炎病毒會(huì)突變；動(dòng)物、植物、真核、原核等都能突變。說(shuō)明基因突變?cè)谏锝缰惺菑V泛存在的。

（1）：普遍性

資料：幾種生物不同基因的自然突變率

生物名稱 突變類型 突變頻率 單 位

大腸桿菌 組氨酸缺陷型 2×10 ―6 每個(gè)配子的突變頻率

玉米 皺縮種子 1×10 ―6 每個(gè)配子的突變頻率

果蠅 白眼 4×10 ― 5 每個(gè)配子的突變頻率

學(xué)生分析：各種生物的突變頻率的數(shù)量級(jí)別在10―5到10―6，說(shuō)明突變頻率極低。

（2）基因突變的低頻性――DNA具有穩(wěn)定性

展示4個(gè)幻燈片，引導(dǎo)探究：殘翅果蠅、短腿安康羊、玉米白化苗、圖片。

（3）：基因突變的隨機(jī)性

基因突變可以發(fā)生在生物個(gè)體發(fā)育的任何時(shí)期；可以發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)不同的DNA分子上；同一DNA分子的不同部位。

（4）：基因突變的不定向性和可逆性。

以基因A為例，它不但可以突變成為a1，而且還可能突變?yōu)閍2、a3等一系列的等位基因。如：控制果蠅野生型紅眼的基因（w+）可以突變成白眼（w），也可以突變成杏色眼（wa）、淺黃色眼（wb）、櫻紅色眼（wc）。

（5）基因突變多害少利性――可能破壞與環(huán)境協(xié)調(diào)

引導(dǎo)學(xué)生思考分析：生物發(fā)生的基因突變一般是利少害多不是絕對(duì)的，取決于環(huán)境。

教師說(shuō)明：一個(gè)物種在漫長(zhǎng)的進(jìn)化歷程中，由許多個(gè)體構(gòu)成物種，生物發(fā)生的基因突變是不少的，其中也有不少的有利變異，所以可以促進(jìn)生物的進(jìn)化是很有意義的。

6、基因突變的意義和應(yīng)用

基因突變是新基因產(chǎn)生的途徑，是生物變異的根本來(lái)源，是生物進(jìn)化的原始材料。

應(yīng)用一：在培育農(nóng)作物新品種方面的應(yīng)用。

舉例：我國(guó)培育的太空椒、“黑農(nóng)五號(hào)”大豆等。

學(xué)生思考：（1）為什么選擇萌發(fā)的種子或幼苗（分裂旺盛）

（2）太空遨游后的種子是否都發(fā)生了突變？是否都變得更好了？是否按人們希望的方向在變？已變好的又是否會(huì)變回去呢？

歸納總結(jié)：應(yīng)用二：在為生物育種方面的應(yīng)用。

篇8

[關(guān)鍵詞] DNA甲基化；MGMT基因；qPCR；DNA探針；鋸齒狀病變

[中圖分類號(hào)] R735.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2014）01（b）-0011-06

Expression and significance of MGMT gene methylation status in colorectal serrated lesions

XU Chunwei WANG Luping GE Chang

Department of Pathology， the Military General Hospital of Beijing PLA， Beijing 100700， China

[Abstract] Objective To discuss patients with serrated lesions tissues MGMT gene methylation status and MGMT protein expression and cancer pathways and the role and clinical significance of MGMT gene in different age paragraph methylation level. Methods From 2007 to 2013 in the Military General Hospital of Beijing PLA， 225 cases of serrated lesions [96 cases of hyperplastic polyp （HP）， 61 cases of sessile serrated adenoma/polyp （SSA/P） and 68 cases of traditional serrated adenoma （TSA）]， 54 cases of tubular adenoma （TA）， 69 cases of colorectal cancer （CRC） and 42 cases of normal colorectal mucosa tissues were selected； MGMT gene methylation status of CpG island was detected by qPCR applications Taqman probe （MethyLight） methods， methylation state of amplification target fragment was verified by by sequencing method， at the same time， MGMT protein expression in 116 cases of serrated lesions （including 52 cases of HP， 41 cases of SSA/P， 23 cases of TSA）， 20 cases of TA， 24 cases of CRC， 24 cases of normal colorectal mucosa tissue was detected by immunohistochemical method. Results The differences of MGMT gene promoter methylation state and degree of abnormal MGMT protein positive degree in the serrated lesions and the control group were statistically significant （P < 0.05）， the negative correlation was found； the positive correlation was found between frequency of MGMT gene promoter methylation and different age paragraph， but the difference was not statistically significant （P > 0.05）. Conclusion Organization MGMT gene methylation may induce the protein expression in the main reason for the downgrade， it plays an important role in serrated canceration pathway of hyperplastic polyps-serrated adenoma-carcinoma.

[Key words] DNA methylation； MGMT gene； qPCR； DNA probe； Serrated lesions

鋸齒狀病變是一組具有鋸齒狀（波浪狀或星狀）結(jié)構(gòu)的異質(zhì)性上皮病變，包括增生肉（hyperplastic polyp，HP）、廣基（無(wú)蒂）鋸齒狀腺瘤/息肉（sessile serrated adenoma/polyp，SSA/P）、傳統(tǒng)型鋸齒狀腺瘤（traditional serrated adenoma，TSA）。新近統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）中60%的來(lái)自普通腺瘤，35%來(lái)自“增生肉-鋸齒狀腺瘤-癌”這條鋸齒狀通路[1]，特別是鋸齒狀病變的CpG島甲基化表型（CpG island methylator phenotyp，CIMP）。鋸齒狀通路涉及一系列異常的表觀遺傳學(xué)修飾[2]。這些異常修飾中以DNA甲基化最常見(jiàn)。DNA異常甲基化分為A型和C型，前者與年齡因素有關(guān)，年齡越大，甲基化頻率越高，后者與腫瘤相關(guān)，通過(guò)引起相關(guān)基因表達(dá)下調(diào)或沉默，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展[3]。

MGMT為DNA損傷修復(fù)基因，定位于人類染色體10q26，全長(zhǎng)170 kb，由5個(gè)外顯子，4個(gè)內(nèi)含子組成。啟動(dòng)子富含GC堿基，順式作用元件有CpG島中的6個(gè)Spl位點(diǎn)、2個(gè)糖皮質(zhì)激素反應(yīng)元件（GRE），AP-I元件等。cDNA長(zhǎng)約769 bp，編碼207個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)。MGMT序列具有相對(duì)穩(wěn)定性，從結(jié)腸桿菌到哺乳動(dòng)物均含有結(jié)構(gòu)一致的“-異亮氨酸-脯氨酸-半胱氨酸-組氨酸-精氨酸-纈氨酸-”（IPCHRV）活性基序列，活性位點(diǎn)在145位半胱氨酸殘基上[4]。本研究通過(guò)MethyLight方法，一方面分析鋸齒狀病變中MGMT基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島甲基化狀態(tài)和免疫組化中MGMT蛋白的表達(dá)情況，在基因?qū)用婧偷鞍讓用鎸?duì)MGMT進(jìn)行初步探究，另一方面分析鋸齒狀病變中MGMT基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島甲基化狀態(tài)和年齡相關(guān)因素情況，在甲基化和年齡上對(duì)MGMT進(jìn)行初步探究。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本 收集總醫(yī)院2007～2013年病理診斷為各類結(jié)直腸息肉和腺瘤切片4810例，從中篩選出腺體具有鋸齒狀特征的息肉及腺瘤，進(jìn)行組織學(xué)診斷及分類。由3名病理醫(yī)師按WHO（2010）消化系統(tǒng)腫瘤分類及文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)[5-9]4～5輪回顧性閱片。從中篩選出225例鋸齒狀病變（96例HP、61例SSA/P和68例TSA）作為實(shí)驗(yàn)組，并以54例管狀腺瘤（tubular adenoma，TA）、42例正常結(jié)直腸黏膜組織和69例CRC作為對(duì)照。

1.1.2 主要試劑和儀器 DNA提取試劑盒購(gòu)自德國(guó)QIAGEN公司，甲基化修飾試劑盒為美國(guó)ZYMO公司產(chǎn)品，核酸蛋白質(zhì)濃度測(cè)量?jī)xB-500購(gòu)自上海創(chuàng)萌生物科技有限公司，甲基化陽(yáng)性/陰性對(duì)照為美國(guó)ZYMO公司產(chǎn)品，qPCR反應(yīng)試劑ROX購(gòu)自TaKaRa公司，Mix購(gòu)自上海輝睿生物科技有限公司，MGMT抗體購(gòu)自中杉金橋公司（1∶500稀釋），內(nèi)參基因β-肌動(dòng)蛋白（β-actin）引物和探針參照文獻(xiàn)[10]設(shè)計(jì)，甲基化引物和探針由上海輝睿生物科技有限公司合成。Mx3000P定量PCR擴(kuò)增儀為美國(guó)Stratagene公司產(chǎn)品。

1.2方法

1.2.1 甲基化引物和探針設(shè)計(jì) MGMT基因序列參照GenBank（http：//ncbi.nlm.nih.gov），GenBank Accession：NC_000010。甲基化引物和探針由Beacon Designer7.9軟件設(shè)計(jì)，設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)：引物擴(kuò)增片段大小在80～150 bp范圍，引物長(zhǎng)度17～25 bp，GC含量在40%～70%，兩條引物的Tm值盡量接近。避免引物內(nèi)部或之間形成3 bp以上的互補(bǔ)序列。探針長(zhǎng)度20～30 bp，探針的Tm值比引物高5～10℃，探針內(nèi)標(biāo)或探針與引物之間避免形成3 bp以上的互補(bǔ)序列，對(duì)其進(jìn)行BLAST檢查，引物和探針?lè)弦螅⒂缮虾］x睿生物科技有限公司合成。見(jiàn)表1。

1.2.2 DNA提取 采用QIAamp DNA FFPE Tissue Kit試劑盒提取組織DNA，將含有DNA組織的蠟塊連切5張10 μm的厚蠟?zāi)?，?yán)格按照試劑盒說(shuō)明步驟進(jìn)行操作。并測(cè)定其純度和濃度備用。

1.2.3 甲基化修飾 采用EZ DNA Methylation-GoldTM Kit（D5005）試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明步驟進(jìn)行操作。經(jīng)此步后，DNA序列中未甲基化的胞嘧啶（C）轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏ぃ║）。

1.2.4 MethyLight PCR反應(yīng)體系（20 μL）：2×Taq PCR Master Mix 10 μL；修飾后的DNA模板2 μL；上、下游引物各1 μL（10 pmol）；探針FAM 0.4 μL（10 pmol）；ROX 0.3 μL。反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性5 min；94℃ 30 s，56℃ 45 s，72℃ 45 s，共50個(gè)循環(huán)；72℃延伸5 min，4℃冷卻5 min。每例標(biāo)本設(shè)兩個(gè)復(fù)孔，經(jīng)亞硫酸氫鹽修飾的Human Methylated & Non-methylated DNA Set作為陽(yáng)性、陰性對(duì)照，水為空白對(duì)照。

1.2.5 測(cè)序法驗(yàn)證擴(kuò)增序列 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送北京金唯智生物科技有限公司測(cè)序，由于擴(kuò)增序列（94 bp）過(guò)小，連接到質(zhì)粒作為載體后，用通用引物的方法測(cè)序，結(jié)果如圖1所示，測(cè)序目的片段和Beacon Designer 7.9軟件設(shè)計(jì)序列吻合。

甲基化片段中CpG二核苷酸的胞嘧啶保持不變

圖1 MGMT基因擴(kuò)增片段部分測(cè)序圖

1.2.6 免疫組織化學(xué)染色 所有標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片，60℃溫箱烘烤90 min。采用EnVision二步法，實(shí)驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，高溫高壓抗原修復(fù)，DAB顯色，磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗為陰性對(duì)照，已知陽(yáng)性的結(jié)腸腺體組織為陽(yáng)性對(duì)照。

1.2.7 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) MethyLight結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)[11]：同時(shí)擴(kuò)增目的基因（MGMT）和內(nèi)參基因（β-actin），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到兩者的原始拷貝數(shù)，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)甲基化指數(shù)（normalized index of methylation，NIM）其定義為：NIM=[（MGMT sample/MGMT positive）β-actin sample/β-actin positive）]×100，其中MGMT sample指樣本中甲基化MGMT基因的拷貝數(shù)，MGMT positive指陽(yáng)性對(duì)照中甲基化MGMT基因的拷貝數(shù)，β-actin sample和β-actin positve與上述相同。NIM≥4為甲基化，NIM25%～50%為2分，Ⅲ級(jí)>50%～75%為3分，Ⅳ級(jí)>75%～100%為4分。染色強(qiáng)度計(jì)分：Ⅰ級(jí)淡黃色為1分，Ⅱ級(jí)棕黃色為2分，Ⅲ級(jí)棕褐色為3分。每張切片兩種評(píng)分之乘積為該切片最后的表達(dá)強(qiáng)度：0分為（-），1～3分為（+），4～6分為（++），≥7分為（+++）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，正態(tài)分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。甲基化結(jié)果運(yùn)用χ2及Fisher確切概率法，免疫組化結(jié)果使用多組有序秩和檢驗(yàn)，兩組間比較運(yùn)用Bonferroni檢驗(yàn)，甲基化和蛋白表達(dá)相關(guān)性及甲基化和年齡相關(guān)性運(yùn)用Pearson相關(guān)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床資料特征

225例鋸齒狀病變中HP 96例、SSA/P 61例、TSA 68例，分別占鋸齒狀病變的42.67%、27.11%和30.22%，96例HP中，男63例，女33例，男性多見(jiàn)，年齡31～88歲，平均（56.052±12.448）歲；61例SSA/P中，男43例，女18例，男性多見(jiàn)，年齡23～84歲，平均（56.665±14.976）歲；68例TSA中，男46例，女22例，男性多見(jiàn)，年齡30～85歲，平均（59.470±12.506）歲。

2.2 MGMT基因標(biāo)準(zhǔn)曲線分析

將陽(yáng)性對(duì)照按10的倍數(shù)稀釋成1～1×10-6 7個(gè)濃度梯度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（其拷貝數(shù)為103～109/mL），各濃度梯度反應(yīng)均做復(fù)孔。MethyLight的線性范圍為104～108拷貝/mL，R2為0.942。

2.3 MGMT基因啟動(dòng)子CpG島甲基化狀態(tài)

MGMT基因啟動(dòng)子CpG島甲基化陽(yáng)性表達(dá)率在正常組、TA組、HP組、SSA/P組、TSA組和CRC組分別為0.00%（0/42）、46.30%（25/54）、26.04%（25/96）、60.66%（37/61）、76.47%（52/68）和68.12%（47/69），各組差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 = 112.790，P = 0.000）。正常組與SSA/P、TSA、TA、CRC組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），HP組與SSA/P、TSA、CRC組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），其余各組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見(jiàn)表2、圖2（見(jiàn)封三）。

表2 MGMT基因CpG島甲基化陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)結(jié)果[n（%）]

注：與正常組比較，P < 0.05；與HP組比較，P < 0.05；HP：增生肉；TA：管狀腺瘤；SSA/P：廣基（無(wú)蒂）鋸齒狀腺瘤/息肉；TSA：傳統(tǒng)型鋸齒狀腺瘤；CRC：結(jié)直腸癌

2.4 MGMT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率

MGMT蛋白陽(yáng)性表達(dá)率在正常組、TA組、HP組、SSA/P組、TSA組和CRC組分別為100.00%（24/24）、80.00%（16/20）、98.08%（51/52）、78.05%（32/41）、69.57%（16/23）和70.83%（17/24），差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 = 26.641，P = 0.000）。正常組與HP、SSA/P、TSA、TA、CRC組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），HP組與SSA/P組、TSA組、TA組和CRC組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），其余各組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見(jiàn)表3、圖3。

2.5 MGMT基因甲基化與MGMT蛋白相關(guān)性分析

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，TA、SSA/P、TSA、CRC三組中MGMT甲基化與MGMT蛋白表達(dá)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），且相關(guān)性為負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為r = -0.500、-0.361、-0.437、-0.412；HP中MGMT甲基化與MGMT蛋白表達(dá)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），但相關(guān)性為負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為r = -0.220。見(jiàn)表4。

2.6 MGMT基因甲基化與年齡相關(guān)性分析

經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，TA、HP、SSA/P、TSA四組中MGMT基因甲基化與年齡差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。MGMT基因甲基化與年齡相關(guān)性為正相關(guān)，與TA、HP、SSA/P、TSA相關(guān)系數(shù)分別為0.042、0.009、0.087、0.138。見(jiàn)表5。

3 討論

CRC是最常見(jiàn)的惡性消化道腫瘤之一，全球CRC每年新發(fā)病例數(shù)達(dá)123萬(wàn)，死亡約為發(fā)病率的1/2。近年研究表明，CRC發(fā)病率目前仍呈持續(xù)增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)，其原因之一就是對(duì)結(jié)直腸鋸齒狀病變認(rèn)識(shí)不足[2，13]。2010年WHO消化系統(tǒng)腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)分類中對(duì)鋸齒狀病變的分類比以往更為詳細(xì)[9]，HP在鋸齒狀病變中最常見(jiàn)，占所有病變的75%以上，根據(jù)組織學(xué)上的微小差別分為微泡性增生肉（microvesicular hyperplastic polyp，MVHP）、富于杯狀細(xì)胞的增生肉（goblet-cell rich hyperplastic polyp，GCHP）、寡黏液型增生肉（mucin-poor type，MPHP）[14]。SSA/P占鋸齒狀病變的15%～25%，根據(jù)細(xì)胞異型性分為伴/不伴有細(xì)胞異性增生型[14-16]。TSA不常見(jiàn)占鋸齒狀病變的1%左右，特征為具有整體復(fù)雜結(jié)構(gòu)域纖維狀生長(zhǎng)方式，常顯示細(xì)胞異型特點(diǎn)，與TA及伴細(xì)胞異型的SSA不同[14，17]。TSA一般與高M(jìn)SI癌無(wú)關(guān)，可能與低MSI有關(guān)[6]。近年來(lái)從分子遺傳學(xué)角度對(duì)鋸齒狀病變進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸鋸齒狀病變通路是一個(gè)多因素、多階段、多基因連續(xù)累積發(fā)生的過(guò)程，在此演變過(guò)程中有眾多CRC相關(guān)基因參與。鋸齒狀通路分為：①無(wú)蒂（廣基）鋸齒通路：以SSA/P和MVHP為代表，癌變機(jī)制為BRAF突變，引起錯(cuò)配修復(fù)基因h-MLH-1甲基化和高水平CpG島甲基化現(xiàn)象，導(dǎo)致腺體不同程度異型性增生直至癌變。②傳統(tǒng)鋸齒狀通路：包括TSA和GCHP，癌變機(jī)制為K-RAS基因突變，引起DNA修復(fù)基因MGMT甲基化和低高水平CpG島甲基化現(xiàn)象等。MGMT基因甲基化后，引起一些基因沉默，導(dǎo)致腺體異型性增加，進(jìn)一步發(fā)展為癌。鋸齒狀通路中有眾多異?；蚣谆?，若能深入研究并加以利用，不僅可以用于CRC的早期診斷、高危人群的監(jiān)測(cè)、癌變風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估等，還可為CRC靶向治療藥物提供理論依據(jù)支持[1，18]。

在本實(shí)驗(yàn)基因?qū)用嫜芯恐邪l(fā)現(xiàn)正常黏膜組織、TA、HP、SSA/P和TSA中均有MGMT基因啟動(dòng)子CpG島甲基化，實(shí)驗(yàn)組鋸齒狀病變HP、SSA/P和TSA甲基化率為26.04%（25/96）、60.66%（37/61）和76.47%（52/68），對(duì)照組正常黏膜組織、TA和CRC的甲基化率為0.00%（0/42）、46.30%（25/54）和68.12%（47/69）。Dhir等[18]在18例TA中檢測(cè)到甲基化率為47.1%，29例不伴異型性的SSA/P中檢測(cè)到甲基化率為29.63%，19例伴有異型性的SSA/P中檢測(cè)到甲基化率為52.63%，在9例HP中檢測(cè)到甲基化率為14.29%，本研究中對(duì)照組的TA和實(shí)驗(yàn)組的SSA/P的甲基化率與以上研究結(jié)果基本符合，但實(shí)驗(yàn)組HP的甲基化率明顯高于Dhir等[18]研究，這可能與樣本量、樣本來(lái)源、引物在CpG島的位置不同等因素引起系統(tǒng)誤差有關(guān)。本研究對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組組間比較過(guò)程中，對(duì)照組正常黏膜組織與實(shí)驗(yàn)組SSA/P（P = 0.000）和TSA（P = 0.000）有顯著性差異，與實(shí)驗(yàn)組HP（P = 0.230）差異性不顯著；對(duì)照組CRC與實(shí)驗(yàn)組HP（P = 0.000），與實(shí)驗(yàn)組SSA/P（P = 0.375）和TSA（P = 0.275）差異性不顯著；對(duì)照組TA與實(shí)驗(yàn)組HP（P = 0.012）和TSA（P = 0.001）有顯著性差異，與實(shí)驗(yàn)組SSA/P（P = 0.123）差異性不顯著；實(shí)驗(yàn)組組組間比較過(guò)程中，HP和SSA/P（P = 0.000），HP和TSA（P = 0.000）組間有顯著性差異， SSA/P和TSA（P = 0.053）組間差異性不顯著。在本實(shí)驗(yàn)蛋白層面運(yùn)用免疫組化方法研究中發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組HP、SSA/P和TSA蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為98.08%（51/52）、78.05%（32/41）和69.57%（16/23），對(duì)照組正常黏膜組織、TA和CRC中蛋白表達(dá)陽(yáng)性率為100%（24/24）、80.00%（16/20）和70.83%（17/24）。與Sawyer等[19]對(duì)39例SA運(yùn)用免疫組化方法發(fā)現(xiàn)MGMT陽(yáng)性表達(dá)率為18%（7/39）相比，在本實(shí)驗(yàn)中，SSA/P蛋白陽(yáng)性表達(dá)率[78.05%（32/41）]和TSA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率[69.57%（16/23）]明顯高于Sawyer等[9]研究，具體原因可能與甲基化引物設(shè)計(jì)、樣本來(lái)源、樣本量大小等因素有關(guān)。本研究對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組組間比較過(guò)程中，對(duì)照組正常黏膜組織與實(shí)驗(yàn)組HP（P = 0.001）、SSA/P（P = 0.000）和TSA（P = 0.000）有顯著性差異；對(duì)照組CRC與實(shí)驗(yàn)組HP（P = 0.001）有顯著性差異，但SSA/P（P = 0.515）和TSA（P = 1.000）差異性不顯著；對(duì)照組TA與實(shí)驗(yàn)組HP（P = 0.029）有顯著性差異，但與實(shí)驗(yàn)組SSA/P（P = 1.000）和TSA（P = 0.434）差異性均不顯著；實(shí)驗(yàn)組與實(shí)驗(yàn)組組間比較過(guò)程中，HP和TSA（P = 0.001），HP和SSA/P（P = 0.006）中組間有顯著性差異，但在SSA/P和TSA（P = 0.452）中組間差異性均不顯著。在本實(shí)驗(yàn)MGMT基因甲基化與蛋白表達(dá)相關(guān)性研究中，發(fā)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)組HP、SSA/P和TSA中分別呈弱相關(guān)（P = 0.117，r = -0.220）、弱相關(guān)（P = 0.020，r = -0.361）及中等程度相關(guān)（P = 0.037，r = -0.437），對(duì)照組正常黏膜組織、TA和CRC中，正常黏膜組織運(yùn)用Pearson法無(wú)法計(jì)算相關(guān)性，TA中呈中等程度相關(guān)（P = 0.025，r = -0.500），CRC中呈中等程度相關(guān)（P = 0.046，r = -0.412）。通過(guò)數(shù)據(jù)可以看出，在實(shí)驗(yàn)組中HP、SSA/P和TSA基因甲基化和蛋白表達(dá)有顯著性差異，相關(guān)性分別為弱相關(guān)、弱相關(guān)和中等程度相關(guān)；在對(duì)照組中TA和CRC基因甲基化和蛋白表達(dá)有顯著性差異，相關(guān)性都為中等程度相關(guān)。通過(guò)基因?qū)用婧偷鞍讓用婕皟烧呦嚓P(guān)性的探究，推測(cè)在鋸齒狀病變通路中MGMT基因啟動(dòng)子甲基化有誘導(dǎo)MGMT蛋白表達(dá)下調(diào)，在鋸齒狀通路的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。在年齡相關(guān)性甲基化研究方面，在基因目的序列（-107～-200）這部分的位點(diǎn)上實(shí)驗(yàn)組HP（P = 0.931，r = 0.009）、SSA/P（P = 0.763，r = 0.042）和TSA（P = 0.263，r = 0.138）及對(duì)照組TA（P = 0.763，r = 0.042）中差異性均不顯著（P > 0.05），且相關(guān)性為弱正相關(guān)。

綜上所述，MGMT基因啟動(dòng)子CpG島甲基化可能導(dǎo)致MGMT蛋白表達(dá)下調(diào)，與鋸齒狀病變的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，在無(wú)蒂（廣基）鋸齒通路和傳統(tǒng)鋸齒狀通路中起重要推動(dòng)作用，是CRC發(fā)生重要的分子事件。

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篇9

2、耳筒有零件壞了,貌似修理?yè)Q零件也找不到配件吧。

3、解鎖打開(kāi)iphone，進(jìn)入主屏幕HOME，找到設(shè)置應(yīng)用，觸摸點(diǎn)擊設(shè)置。

4、打開(kāi)設(shè)置后，下拉，找到通用設(shè)置，打開(kāi)通用。

5、打開(kāi)后下拉滑動(dòng)，找到聽(tīng)覺(jué)這欄，如下圖所示，看到有左——控制鈕——右，我們可以滑動(dòng)這個(gè)控制按鈕向左或者向右，到最左時(shí)候就是做左耳機(jī)聲音最大，右耳機(jī)沒(méi)有聲音，反向同理相反?？刂瓢粹o在中間控制線處聲音是均衡的！

篇10

圖一，圖二

所謂烏銅是銅與金的合金，表面烏黑而富有光澤。烏銅走銀法則是將銀屑嵌入烏銅器表面已鏨刻好的花紋內(nèi)，再加熱將銀屑熔化，使銀與銅成半合金狀態(tài)，稍待冷卻，用手急擦，使汗汁浸漬到走銀處，使銅、銀結(jié)合處更加穩(wěn)定和富有光澤。而一般“金銀錯(cuò)”工藝是將金、銀屑或絲嵌入銅器表面鏤刻的紋路內(nèi)，再用錯(cuò)石將其打磨光滑即可。烏銅走銀法來(lái)源于“金銀錯(cuò)”，但工藝更為精湛，所嵌銀絲更細(xì)，圖案更為生動(dòng)傳神，較同時(shí)期福建銅嵌銀絲器質(zhì)量更優(yōu)，在中國(guó)近代銅制品中，堪稱一絕。

烏銅走銀技術(shù)起源于清末云南石屏縣。據(jù)傳石屏一岳姓銅匠在冶煉紫銅時(shí)，不慎將所戴金戒指落入所煉銅中，后來(lái)發(fā)現(xiàn)其所鑄銅器表面烏黑如煤，遂在銅器表面鏨刻花紋，嵌入銀屑，制成了最早的烏銅走銀器。由于所嵌銀屑與烏銅背景形成鮮明的黑白對(duì)比，風(fēng)格獨(dú)特，有較高的藝術(shù)價(jià)值。

圖1橢圓形烏銅走銀墨盒，長(zhǎng)12.7厘米，寬9.2厘米，高5.6厘米。底銘“岳恒”二字。盒面為雙鳳紋，盒周為高士松下對(duì)弈圖，所嵌銀絲極細(xì)，構(gòu)圖飽滿，是早期烏銅走銀器中精品。由于烏銅器中含金，生產(chǎn)成本非常高，后來(lái)的烏銅走銀器則以紫銅為胎，僅將其表面處理為烏銅，成本大為降低。盡管如此，烏銅走銀器價(jià)格在當(dāng)時(shí)仍十分昂貴，非一般人所能問(wèn)津。烏銅走銀技術(shù)在民國(guó)年間得到了極大發(fā)展，聲名遠(yuǎn)播。

圖2為方形烏銅走銀墨盒，邊長(zhǎng)9.6厘米，高2.2厘米，底銘“云南岳應(yīng)”四字。盒面用極細(xì)銀絲鑲嵌出一幅江南山水圖，畫面構(gòu)圖飽滿、細(xì)膩，錯(cuò)落有致，景物自然和諧。盒四周飾以梅花、竹葉及蝙蝠紋，工藝精湛，是晚期烏銅走銀器精品。

圖三，圖五

烏銅走銀技術(shù)岳家秘不外傳，民國(guó)后期岳家絕后，烏銅走銀技術(shù)隨之失傳。當(dāng)時(shí)也有依照生產(chǎn)者，質(zhì)量稍次。圖3為方形烏銅走銀墨盒，邊長(zhǎng)5.8厘米，高2.6厘米，底銘“陳貞”二字。盒面為行草詩(shī)一首：“著書(shū)懸日月，筮《易》洽風(fēng)雷。一旦迷津悟，千秋寶鏡開(kāi)。古句。丁巳季夏書(shū)?！弊至鲿?、瀟灑，盒周飾以松、竹、梅、蘭圖，工藝細(xì)致，雖非岳家所制，亦不遜色。

圖四

解放后云南老藝人楊用賓反復(fù)研究，使烏銅走銀工藝得以恢復(fù)，但產(chǎn)品質(zhì)量遠(yuǎn)不如岳家所制。北京人民大會(huì)堂云南廳里，巨型屏風(fēng)“五百里滇池”和“大觀樓長(zhǎng)聯(lián)”就是這一時(shí)期的名作。由于烏銅走銀器成本高，技術(shù)復(fù)雜，現(xiàn)早已停止生產(chǎn)，真品難覓。

烏銅走銀器以墨盒及煙膏盒居多，亦有花瓶、碗、盤、杯、壺、筆筒等，但存量已十分稀少。圖4為烏銅走銀碗，口徑10.7厘米，高5.9厘米。底銘“岳炳”二字。碗周飾以松樹(shù)、仙鶴，隱喻松鶴延年。圖5為烏銅走銀勺，長(zhǎng)12.7厘米，寬4.3厘米，器表面為蝙蝠、梅花及竹葉圖，器形雖小，但工藝精湛，與圖4碗配套，極為難得。

烏銅走銀器數(shù)量稀少，精品更為難得，目前市場(chǎng)贗品居多，收藏時(shí)一定要慎重?，F(xiàn)將一些鑒別要點(diǎn)簡(jiǎn)述如下：1.真品表面包漿自然、沉著，烏銅黑如煤色；而贗品包漿浮淺，有“賊光”，表面黑色淺而薄，極不自然；2.真品所嵌銀絲極細(xì)，圖案及文字傳神、生動(dòng)；而贗品線條較粗，圖案及文字呆板，構(gòu)圖比例失調(diào)；3.真品擦洗后表面呈淡紅色，把玩后器表面很快變黑如初，這是由于手中汗?jié)n含有油脂和鹽分，能和烏銅反應(yīng)使其變黑；贗品表層并非烏銅，故不能變黑。這是鑒定烏銅走銀器真?zhèn)蔚年P(guān)鍵。但應(yīng)提醒收藏者不可過(guò)度擦洗，否則可能損傷器表面之烏銅層，使品相破壞。