打擊傳銷范文

時間:2023-04-06 00:25:04

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篇1

訊:星辰在線—長沙新聞網(wǎng)8月17日訊(瀟湘晨報記者夏雨實習生李文)打著“資本運作”、“特許經營”、“高科技”等名義利用互聯(lián)網(wǎng)從事傳銷活動,將成為重點打擊對象。昨日,記者從省工商局獲悉,從8月10日起在全省范圍內開展為期三個月的打擊傳銷專項行動,并將建立和完善打傳長效機制。

本次打擊傳銷專項行動從8月10日起至11月10日,以婁底、邵陽、懷化被國家工商總局確定的打擊傳銷重點整治地區(qū),以永州、衡陽、岳陽等傳銷活動相對集中的區(qū)域為重點地區(qū),在全省范圍內開展專項行動,將集中力量查處一批涉及地區(qū)廣、涉案人員多、涉案金額大、社會危害嚴重的大要案件,重點打擊以“高科技”、“資本運作”、“連鎖銷售”等名義及利用互聯(lián)網(wǎng)從事傳銷活動,加大對誘騙少數(shù)民族群眾、在校學生參與傳銷活動的查處力度。

打擊傳銷專項行動工作重點為嚴厲打擊傳銷領導者、組織者和骨干分子,屢教不改、多次參與傳銷的涉案人員;重點打擊以“資本運作”等名義及利用互聯(lián)網(wǎng)從事的傳銷活動違法行為及以“拉人頭”、團隊計酬、交納或變相交納入門費等方式,假借直銷、電子商務、特許經營等名義進行的傳銷活動;堅決懲處以介紹工作、從事經營活動等名義,欺騙他人離開居所地非法聚集并限制其人身自由的行為;打著職業(yè)介紹、招聘兼職等幌子,誘騙在校學生、下崗職工、返鄉(xiāng)農民工等參加傳銷的行為;為傳銷活動提供住宿和培訓場所等條件的行為。

目前,據(jù)工商查處、網(wǎng)友反饋與媒體曝光,正調查獲悉的涉嫌網(wǎng)絡傳銷的企業(yè)組織有:“北京金興信投資顧問有限公司”、“英國TVI旅游快車”、“E網(wǎng)商務”、“廣東康力醫(yī)藥”、“成都麥酷電子商務有限公司”、“杭州太竹衛(wèi)生用品有限公司”、“麥羅國際”(香港MESUN(麥森)電子商務公司)、“南京鎧鼎商貿有限公司”、“湖北林楓商貿集團有限公司(簡稱林楓公司)”、“美國全球教育網(wǎng)”、“亞洲生活網(wǎng)”、“MDG體驗中心”……

此外,將建立和完善打傳長效機制,加強對打擊傳銷工作的組織領導,動員社會各方力量,齊抓共管,群防群控。結合創(chuàng)建“五無監(jiān)管區(qū)”的要求,突出重點,扎實開展專項整治行動;繼續(xù)深入開展創(chuàng)建“無傳銷社區(qū)(村)”活動。進一步規(guī)范直銷行為,加強對在湘直銷企業(yè)及其分支機構、直銷人員的經營資格和經營活動的監(jiān)督檢查,查處違規(guī)招募、違規(guī)培訓、違法計酬等行為,堅決取締打著直銷旗號從事傳銷、直銷企業(yè)從事傳銷的行為以及個別企業(yè)假借工商部門名義從事相關活動的行為。(來源:《瀟湘晨報》文/夏雨)

篇2

這次打擊傳銷工作聯(lián)席(擴大)會議,是市政府調整全市打擊傳銷工作聯(lián)席會議成員之后,召開的第一次聯(lián)席(擴大)會議。主要是通報今年以來打擊傳銷工作,分析當前打擊傳銷工作面臨的形勢,安排部署下一階段的工作任務,進一步統(tǒng)一思想,提高認識,突出重點,強化措施,確保完成打擊傳銷工作各項任務。剛才,市公安局張輝同志宣讀了《市打擊傳銷違法犯罪聯(lián)合執(zhí)法行動實施方案》;同志宣讀了《市人民政府關于調整市打擊傳銷工作聯(lián)席會議成員的通知》;和劍光同志通報了今年以來全市打擊傳銷工作情況,對下一階段的打擊傳銷工作做了具體安排。可以說成效是顯著的,措施是得力的,請各縣(市、區(qū))結合已經積累的打傳經驗,在今后的打傳工作中認真抓好落實。下面,我再講三點意見:

一、認清形勢,提高認識,切實增強打擊傳銷工作的緊迫感和責任感

今年以來,在市委、市政府的領導下,各縣(市、區(qū))、各有關部門認真落實國家和省、市關于打擊傳銷的各項工作部署,深入宣傳教育,加大打擊力度,強化基礎工作,全市打擊傳銷工作取得明顯成效,有效遏止了傳銷蔓延的勢頭。前9個月,我市共開展打擊傳銷集中專項打擊行動20余次,檢查社區(qū)、村莊1130個、公共場所1187個;發(fā)放宣傳材料2萬多份、聯(lián)系卡5000余張;清除傳銷窩點34個,遣散傳銷人員320人,解救被騙群眾17人。全市沒有出現(xiàn)因傳銷引發(fā)的影響社會穩(wěn)定的事件。打擊傳銷活動的開展,為維護正常的市場經濟秩序,促進社會的和諧穩(wěn)定,推動全市經濟快速健康發(fā)展發(fā)揮了積極作用。這些成績的取得,是各縣(市、區(qū))、聯(lián)席會各成員單位高度重視、齊心協(xié)力、扎實工作的結果。在此,我代表市委、市政府向大家,也通過你們向在打擊傳銷工作一線的同志們,表示慰問和感謝!

在肯定成績的同時,我們也要清醒地認識當前打擊傳銷工作面臨的新形勢、新挑戰(zhàn)。從全國情況看,傳銷活動在一些地方愈演愈烈。8月份開始,央視新聞頻道連續(xù)報道了來賓傳銷活動猖獗的現(xiàn)象,在社會上引起了強烈反響。事實上,新型非法傳銷已蔓延到全國多個省份。這種新型非法傳銷,組織更加嚴密、活動更為隱蔽、手段更為狡猾、發(fā)展更加迅猛,從“傳商品”變?yōu)椤袄祟^”式傳銷犯罪,大都采取精神和暴力控制手段,對經濟社會的危害呈加劇趨勢,已轉變?yōu)閷嵸|性的刑事犯罪活動,嚴重損害了人民群眾的生命財產安全,對社會和諧穩(wěn)定構成了重大威脅。為更加有效地打擊傳銷違法犯罪行為,目前,公安部、國家工商總局正在全國范圍內開展打擊傳銷聯(lián)合執(zhí)法行動。從全省情況看,地處中原,承東啟西,人口眾多,更易受到傳銷活動的沖擊、滲透,一直是傳銷活動的重發(fā)區(qū)之一。我們省內就有務工人員被騙到寧夏、參加傳銷,如曾被社會廣泛關注的趙作海就在寧夏陷入傳銷泥潭,今年8月份才被有關部門解救回來。目前,我省仍然是國家有關部門重點關注的地區(qū),打擊傳銷活動的壓力大、責任重。省委、省政府對打擊傳銷工作非常重視,強調要站在“四個重在”的高度,嚴厲打擊傳銷違法犯罪活動。10月份后,省綜治委將組織對各省轄市打擊傳銷社會治安綜合治理工作進行考評。從我市情況看,雖然傳銷活動總體上得到遏止,但傳銷活動在一些地方時有發(fā)生。近期,隨著等地打擊傳銷力度的加大,已發(fā)現(xiàn)有傳銷人員流竄我市。從8月份110中心受理傳銷舉報的情況看,傳銷活動數(shù)量在一些區(qū)域有增加之勢,形勢不容樂觀。

各縣(市、區(qū))政府、各有關部門要站在保護群眾切身利益、維護全市和諧穩(wěn)定的高度,牢固樹立“責任重于泰山”和“打持久戰(zhàn)”思想,切實把打擊傳銷作為社會治安綜合治理的一項長期任務,采取更加有力的措施,繼續(xù)保持打擊傳銷活動的高壓態(tài)勢,堅決遏止傳銷活動的發(fā)展蔓延,維護全市的和諧穩(wěn)定。

二、突出重點,強化措施,推動打擊傳銷工作深入開展

各縣(市、區(qū))、各有關部門要按照省委提出的“重在持續(xù)、重在提升、重在統(tǒng)籌、重在為民”的要求,全面落實打擊傳銷各項工作任務,突出重點,攻堅克難,不斷把打擊和防范傳銷工作推向深入。

一是加大打擊力度。今年以來,市110中心接轉的160余起傳銷舉報,沒有一起是傳銷商品的,大都是打著“招工招聘、聊天交友、參觀旅游”等旗號,誘騙外地人來洛,爾后實施限制人身自由、勒索、詐騙、搶劫、人身傷害等犯罪行為。各縣(市、區(qū))政府一定要切實肩負起打擊傳銷第一責任的角色,迅速組織公安、工商、民政等部門,發(fā)動社區(qū)、村組等基層力量,開展好打擊傳銷聯(lián)合執(zhí)法行動。市公安局要依據(jù)有關法律法規(guī),盡快研究制定我市打擊“拉人頭”式傳銷犯罪的具體措施,10月31日前報市政府打擊傳銷辦公室。對傳銷違法犯罪首要分子、組織領導者,對傳銷活動中詐騙錢財、限制人身自由、甚至暴力抗法、破壞穩(wěn)定的違法犯罪分子,要依法嚴厲打擊,該拘留的拘留,該勞教的勞教,該判刑的判刑。

二是強化重點治理。從市110中心的舉報情況看,目前,我市傳銷活動主要集中在洛龍區(qū)的關林、安樂和古城鎮(zhèn),西工區(qū)的洛北鄉(xiāng),瀍河區(qū)的瀍河回族鄉(xiāng)、老城區(qū)邙山鄉(xiāng)等區(qū)域。城中村、老居民區(qū)、城鄉(xiāng)結合部小區(qū)、新區(qū)農民安置小區(qū)等出租房集中區(qū)是傳銷活動易發(fā)、高發(fā)區(qū)域,也是我們開展打擊傳銷行動、源頭治理傳銷的重點區(qū)域。要借助全市正在開展的流動人口、出租房屋專項整治,充分發(fā)揮社區(qū)、居委會、村委會等基層組織和相關方面的作用,通過完善日常打、防、控、管等措施,鏟除傳銷活動的條件。要進一步加強對出租房屋、勞務市場、人才中介以及酒店、賓館、招待所等重點場所的管理,常查、清查,不留死角。對為傳銷提供便利條件的,堅決依法予以懲處。對傳銷人員大量聚集、問題突出的地方,要通過督辦、領導分包等形式,限期治理到位。對外出從事傳銷活動人員較多的地方,要通過綜治考核以及其他手段進行責任追究。

三是夯實工作基礎。要建全基層打擊傳銷聯(lián)動機制。今年是創(chuàng)建“無傳銷社區(qū)(村莊)”第三個年頭,省、市兩級年底將組織驗收。各縣(市、區(qū))、有關部門要切實按照市聯(lián)席會議的要求,深入開展“無傳銷社區(qū)、無傳銷村莊”創(chuàng)建和“防止傳銷進校園”活動,特別是傳銷多發(fā)的地區(qū),更要充分發(fā)揮基層組織和群眾力量,加大創(chuàng)建工作力度,力爭年底完成創(chuàng)建任務,努力實現(xiàn)打擊傳銷群防群治群管。要進一步健全完善出租服務和流動人口管理機制。規(guī)范房屋出租行為,切實加強對流動人口和出租房屋的管理,壓縮傳銷分子活動空間。要著力構建打擊傳銷長效監(jiān)管機制。以街道辦事處、鄉(xiāng)鎮(zhèn)牽頭,居委會、村委會為主,工商、公安、綜治部門組織配合,按照職責分工,做好市110聯(lián)動中心傳銷舉報處理、傳銷線索排查和上報工作,努力形成情況互通、信息共享的打擊、預防、監(jiān)控和管理網(wǎng)絡,筑牢打擊傳銷的基層防線。

四是加強宣傳教育。各縣(市、區(qū))、有關部門要繼續(xù)把宣傳教育活動作為打擊傳銷工作的重點措施進行部署、落實和檢查,通過廣播電視、公益廣告、發(fā)送手機短信等方式,加強對常住人口、外來人口、出租房主的宣傳教育,使廣大群眾識別傳銷、防范傳銷,自覺抵制傳銷,主動舉報傳銷。同時,有針對性地做好外出務工人員的教育工作,防止誤入傳銷陷阱。

五是維護社會穩(wěn)定。要堅持預防為主,防范在前,發(fā)現(xiàn)和研究因傳銷引發(fā)影響社會穩(wěn)定的苗頭和動向,制定專門的預警防范和應急處置預案,及時妥善地處置遇到的矛盾和問題。在打擊傳銷工作中,對教唆、煽動、組織傳銷人員聚眾滋事的骨干分子要依法堅決予以查處;對既是受騙者也是騙人者的傳銷人員,要實行批評教育與懲治處罰寬嚴相濟的政策;對上當受騙且沒有欺騙他人參加的,要注意做好教育、說服和思想轉化工作,防止因工作不力、查處措施不當,引發(fā)。

三、加強領導,嚴格考評,確保打擊傳銷各項任務圓滿完成

離年底只有兩個多月的時間了,完成全年的打擊傳銷工作時間緊、任務重。各縣(市、區(qū))、各有關部門要按照統(tǒng)一領導、政府負責、部門協(xié)調、各方聯(lián)動的總體要求,進一步加強領導,強化綜治考核,努力把打擊傳銷各項工作落到實處。

(一)加強組織領導。各縣(市、區(qū))政府要高度重視打擊傳銷工作,切實加強對打擊傳銷工作的組織領導,把打擊傳銷工作列入重要的議事日程,切實擔負起組織、指揮、協(xié)調的責任。各級工商、公安部門要充分發(fā)揮打擊傳銷主力軍作用,在日常清查、案件查處、開展行動等方面相互配合,通力合作,形成執(zhí)法合力。聯(lián)席會其他成員單位要根據(jù)自身的職責,研究落實本部門本系統(tǒng)打擊傳銷工作的具體措施,密切配合工商、公安部門開展工作。聯(lián)席會會議辦公室要加強與各成員單位的聯(lián)系,及時溝通情況,協(xié)調各成員單位的行動。

(二)落實工作責任。要繼續(xù)落實政府打擊傳銷第一責任人制度,堅持屬地管理原則,做到守土有責、守土盡責。要進一步建立和完善打擊傳銷工作責任制,各縣(市、區(qū))、各有關部門要制定本單位打擊傳銷工作考評辦法和標準,確保工作有目標、任務有分工、考評有辦法、獎懲有措施,充分調動各方面參與打擊傳銷積極性。要落實工作問責機制,對領導重視不夠、處置不力,出現(xiàn)影響穩(wěn)定的傳銷事件的,要嚴肅追究責任。

(三)強化綜治考核。要充分發(fā)揮打擊傳銷社會治安綜合治理工作作用,積極構建長效機制,進一步推動打擊傳銷各項工作深入開展。11月份,省綜治委、省打傳辦將采取現(xiàn)場檢查、實地驗收的方式,對我市打擊傳銷社會治安綜合治理和創(chuàng)建“無傳銷社區(qū)”情況進行考核驗收。為此,我市已制定了《市年打擊傳銷社會治安綜合治理考核評比辦法及標準》,今天已印發(fā)給大家。在省考核驗收前,市綜治辦、市聯(lián)席辦公室將組織聯(lián)合檢查組,對各縣(市、區(qū))進行檢查、抽查。各縣(市、區(qū))政府、相關部門要在市聯(lián)席辦公室的協(xié)調下,組織好綜治考評工作。對考評工作中敷衍了事、弄虛作假、工作不落實,影響全市綜治考評結果的,按照有關規(guī)定予以問責。

(四)提供工作保障。打擊傳銷工作量大,任務艱巨,需要投入大量的人力、物力和財力。各縣(市、區(qū))政府、各有關部門要為打擊傳銷工作創(chuàng)造條件,在人力、物力、財力上給予必要的支持,確保打擊傳銷工作有效開展。關于市打擊傳銷工作聯(lián)席會議辦公室的工作經費,請市財政給予必要支持,并協(xié)調解決打擊傳銷舉報獎勵辦法所需經費。

篇3

一、組織領導

為強化對打擊傳銷工作的領導,決定建立以工商行政管理部門、*機關為主的打擊傳銷工作聯(lián)席會議制度,組織協(xié)調各相關部門開展專項整治工作,督辦重大案件,總結推廣工作經驗。聯(lián)席會議由市政府法制辦牽頭,市工商局、市*局、市商務局、市教育局、市民政局、市財政局、市勞動保障局、市國稅局、市地稅局、天長街道辦事處等相關部門和單位共同組成;市法制辦主要負責人為召集人,各單位分管負責人為聯(lián)席會議成員,聯(lián)席會議辦公室設在市工商局。

二、目標任務

通過此次專項行動,使我市傳銷活動得到有效控制,傳銷活動數(shù)量明顯減少,經常性、規(guī)?;膫麂N活動基本杜絕,反復勢頭得到有效遏制;群眾識別、防范傳銷的能力進一步增強,被騙往異地參與傳銷的人員明顯減少;防范和打擊傳銷活動的長效機制初步建立。主要工作任務:

(一)集中力量查處涉及地域廣、參與人員多,以及通過互聯(lián)網(wǎng)傳銷、利用傳銷非法集資等社會危害嚴重的重點案件,嚴懲從事傳銷活動的單位、組織者和骨干分子,摧毀傳銷網(wǎng)絡。嚴厲打擊暴力抗法以及傳銷引發(fā)的盜竊、搶劫、非法拘禁、殺人等惡性刑事案件。

(二)強化對互聯(lián)網(wǎng)的相關監(jiān)管工作,完善有關規(guī)定,堅決取締為傳銷提供互聯(lián)網(wǎng)信息服務的行為。

(三)加強學校防范傳銷工作,嚴防傳銷活動進入校園。切實加強對學生的教育和管理,使廣大學生認清傳銷的違法犯罪性質、欺詐本質和危害,自覺抵制傳銷。對受騙參與傳銷的學生要及時做好解救工作。

(四)加強房屋出租的管理,嚴禁任何單位或個人為傳銷行為提供經營場所、培訓場所、倉儲和人員住宿等條件,加大對違法出租行為的處罰力度。

(五)依法規(guī)范直銷行為,查處違規(guī)招募、違規(guī)培訓、違法計酬等行為,堅決取締打著直銷旗號從事傳銷以及直銷企業(yè)從事傳銷的行為,嚴格執(zhí)行直銷企業(yè)市場退出制度。

(六)進一步完善打擊傳銷的聯(lián)合執(zhí)法機制,加快打擊傳銷信息系統(tǒng)建設,逐步建立傳銷組織者、策劃者及骨干分子檔案,探索建立社會查詢制度,健全群眾投訴、舉報及獎勵制度。

(七)強化宣傳工作,通過喜聞樂見的形式,以宣傳《禁止傳銷條例》和《直銷管理條例》為重點,著重抓好對進城務工人員、在校學生、下崗失業(yè)人員等重點群眾的宣傳教育,提高全社會防范傳銷的意識和能力。

三、實施步驟

此次專項行動分三個階段進行:

1.動員部署階段(20*年4月底前)。各地、各部門要按照方案要求做好專項行動的宣傳動員和準備工作。

2.組織實施階段(20*年5月至7月)。各地、各部門要按照專項行動方案積極開展工作。市打擊傳銷工作聯(lián)席會議組織相關部門對各地、各部門開展打擊傳銷活動進行重點檢查。

3.總結階段(20*年8月)。市打擊傳銷工作聯(lián)席會議辦公室將有關專項行動情況匯總上報市政府,市政府對打擊傳銷專項行動工作進行通報并報*市人民政府。

四、工作要求

1、統(tǒng)一認識,狠抓落實。打擊傳銷是貫徹“三個代表”重要思想、落實科學發(fā)展觀、構建社會主義和諧社會的具體體現(xiàn),是整頓和規(guī)范市場經濟秩序的重點工作和長期任務,必須堅持不懈地抓好。各地、各部門要在市政府的統(tǒng)一領導下,堅持標本兼治、著力治本的方針,針對傳銷活動的新特點和突出問題,進行全面部署,逐級分解落實具體任務和工作目標,確保專項行動取得成效。

篇4

為貫徹落實__市人民政府辦公室《關于印發(fā)__市打擊傳銷專項行為實施方案的通知》(寧政辦[20__]213號)及__縣人民政府辦公室《__縣人民政府辦公室關于印發(fā)__縣打擊傳銷專項行動方案的通知》(古政辦[20__]85號)精神,進一步防范和打擊傳銷行為,維護市場經濟秩序和社會安定穩(wěn)定,為社會主義新農村建設營造良好環(huán)境,現(xiàn)結合我鎮(zhèn)實際,制定本實施方案。

一、工作重點與工作目標

(一)嚴厲打擊、堅持取締以“拉人頭”、團隊計酬、收取入門費等方式以及通過互聯(lián)網(wǎng)、假借直銷名義進行的傳銷活動。

(二)重點懲處以介紹工作、從事經營活動等名義,欺騙他人離開居所地非法聚集,并限制人身自由的行為;為傳銷提供條件的行為。

(三)以__、玉源、玉庫、新舫等4個行政村為重點地區(qū),在全鎮(zhèn)范圍內進一步防范和打擊傳銷活動。

(四)通過專項行動,使重點地區(qū)傳銷活動明顯減少;其他地區(qū)傳銷活動得到有效控制,經常性、規(guī)?;膫麂N活動基本杜絕;群眾識別、防范傳銷的能力進一步增強,被騙往異地參與傳銷的人員明顯減少;防范和打擊傳銷活動的長效機制初步建立。

二、主要任務與工作措施

(一)集中力量通過調查、走訪,查處涉及地域廣、參與人員多,以及通過互聯(lián)網(wǎng)傳銷、利用傳銷非法集資等社會危害嚴重的重點案件,嚴懲從事傳銷活動的單位、組織者和骨干分子,摧毀傳銷網(wǎng)絡。嚴厲打擊暴力抗法以及傳銷引發(fā)的盜竊、[找材料到文秘站 -ˇ文秘站 網(wǎng)上服務最好的文秘資料站點!注:]搶劫、非法拘禁、殺人等惡性刑事案件。

(二)強化對互聯(lián)網(wǎng)的相關監(jiān)管工作,完善有關規(guī)定,堅決取締為傳銷提供互聯(lián)網(wǎng)信息服務的行為。

(三)加強學校防范傳銷工作,嚴防傳銷活動進入校園。切實加強對學生的教育和管理,使廣大學生認清傳銷的違法犯罪性質、欺詐本質和危害,自學抵制傳銷。對受騙參與傳銷的學生要及時做好解救工作。

(四)加強房屋出租的管理,加大對違法出租行為的處罰力度,嚴禁任何單位和個人為傳銷行為提供經營場所、培訓場所、倉儲和人員住宿等條件。

(五)依法規(guī)范直銷行為,查處違規(guī)招募、違規(guī)培訓、違法計酬等行為,堅決取締打著直銷旗號從事傳銷以及直銷企業(yè)從事傳銷的行為,嚴格執(zhí)行直銷企業(yè)市場退出制度。

(六)進一步完善打擊傳銷的聯(lián)合執(zhí)法機制,加快打擊傳銷信息系統(tǒng)建設,逐步建立傳銷組織者、策劃者及骨干分子檔案,探索建立社會查詢制度,健全群眾投訴、舉報及舉報獎勵制度。以宣傳《禁止傳銷條例》和《直銷管理條例》為重點,重點抓好對農民工、在校學生、下崗失業(yè)人員等重點群體的宣傳教育,提高全社會防范傳銷的意識和能力。

三、工作要求與保障措施

(一)打擊傳銷是貫徹“三個代表”重要思想、落實科學發(fā)展觀、構建社會主義和諧社會的具體體現(xiàn),要作為整頓和規(guī)范市場經濟秩序的重點工作和長期任務堅持不懈地抓好。要在國家有關部門的統(tǒng)一部署下,堅持“地方政府負責、部門統(tǒng)一協(xié)調,各方聯(lián)合行動”工作格局和“標本兼治,著力治本”的方針,進一步強化地方政府及各相關部門的責任,嚴格實行工作責任制和責任追究制。要針對傳銷活動的新特點和突出問題,對專項行動進行全面部署,逐級分解落實具體任務和工作目標,確保抓住成效。

(二)這次專項行動以__工商所、__派出所為主,鎮(zhèn)有關部門要依據(jù)各自職責和有關法律、行政法規(guī)規(guī)定密切配合。__工商所要充分發(fā)揮職能作用,在鎮(zhèn)政府的統(tǒng)一領導下,加大傳銷違法行為的查處力度并加強對專項行動的指導和督查。__派出所要加大對傳銷犯罪的打擊力度,加快偵破大案要案。__電信站等通信管理部門要配合有關部門加大利用互聯(lián)網(wǎng)傳銷和為傳銷提供互聯(lián)網(wǎng)信息服務 行為的監(jiān)控和查處力度。農行__營業(yè)所、__郵政儲蓄所、__信用社等金融機構要依法協(xié)助做好對傳銷組織者或經營者賬戶查詢、資金凍結的協(xié)調工作,打擊利用傳銷非法集資行為。各中、小學校要采取有效措施,嚴防傳銷活動進入校園。鎮(zhèn)監(jiān)管部門要依法加強監(jiān)督,對傳銷屢禁不止、頻發(fā)的地區(qū)和單位,嚴肅追究有關領導和人員的責任。要及時向縣委宣傳部、縣廣電局、《今日__》報投遞相關宣傳素材,營造良好的輿論環(huán)境。同時,在這次專項行動中要注重充分發(fā)揮各村委會以及社會中介組織的作用。

(三)要嚴格執(zhí)法責任制,強化責任意識,落實工作責任制和責任追究制,進一步規(guī)范執(zhí)法行為。對領導不力、實行地方保護、消極應付甚至失職瀆職的,要依法依紀追究其領導責任;對監(jiān)督管理不力,敷衍推諉、有法不依、執(zhí)法不嚴,甚至包庇、縱容、支持和參與傳銷的,要依法依紀追究相關人員責任。

(四)各村和有關單位要結合本地實際情況,進一步完善和細化專項行動工作方案。要加強對執(zhí)法人員的培訓,提高執(zhí)法水平,提高打擊成效。

四、工作步驟和時間安排

這次專項行動分三個階段進行:

(一)動員部署階段(20__年11月25日前)。各村和有關單位根據(jù)本實施方案做好動員布署工作。

篇5

寧夏回族自治區(qū)高級人民法院刑二庭負責人今天告訴《法制日報》記者,這起案件只是寧夏全區(qū)近3年來查辦的大量非法集資案件中的一起。

數(shù)據(jù)顯示,僅2007年至2009年,寧夏全區(qū)法院共判處非法集資犯罪案件10件23人。除2008年至2009年審理的1件6人為集資詐騙犯罪外,其余9件17人為非法吸收公眾存款罪。

受害人變成犯罪者

“像劉某這樣從受害人變?yōu)榉缸锶?,是非法集資案件的一個新特點?!睂幭母咴貉芯渴蚁嚓P負責人說。

據(jù)介紹,很多非法傳銷案件,是通過網(wǎng)絡等高科技媒介進行的。犯罪分子利用網(wǎng)絡建立網(wǎng)站發(fā)展下線吸引投資,根據(jù)發(fā)展下線的人數(shù)按比例提取酬勞來層層詐騙和層層控制犯罪組織。主要策化者居于幕后,或者在外地遙控指揮。一些先期投入者本為受害者,但在獲利的情況下又去發(fā)展更多的人加入,由此構成其他犯罪,而這些被發(fā)展加入的人往往是他們的親朋好友,使得犯罪更具有智能性、隱蔽性、嚴密的組織性和傳導性。

高息還本誘人上當

2009年寧夏高院終審的吳松偉等人非法吸收公眾存款一案,吳松偉、張寧兩被告人許諾支付的月息為2%至28%,遠遠高于銀行的同期年利率。如此低風險,高回報,明顯有違投資規(guī)律,簡直就是天上掉餡餅,但依舊有人相信這是一條“旱澇保收”的致富捷徑。兩人向253家單位及個人許以高利,吸納資金,但案發(fā)后申報債權的只有80人。

“高息還本是寧夏非法集資者拋出的最誘人的餌料,也是大多數(shù)受害者趨之若鶩、受騙上當?shù)闹匾??!睂幭母咴貉芯渴邑撠熑私榻B說。

據(jù)介紹,非法集資者為支付先加入投資者的高額回報,便不斷地發(fā)展下線,通過利誘、勸說、親情、人脈等方式吸引越來越多的投資者參與,用后加入者的資金支付先加入者的高額利息。如此循環(huán)往復,直至資金鏈斷裂,由此導致的結果往往是,先加入的投資者僅利息的收入就遠遠超出了本金,因此案發(fā)后申報債權的人數(shù)遠遠小于實際投資者人數(shù)。

時間久人數(shù)多數(shù)額大

寧夏高院刑二庭相關負責人告訴記者,非法集資作為一種面向社會公眾的吸納資金行為,決定了受害者必須達到一定規(guī)模,方能有效維系所需的現(xiàn)金流。因此時間久、人數(shù)多、數(shù)額巨大,犯罪數(shù)額往往數(shù)百、數(shù)千萬甚至上億元之巨,覆蓋面廣、受害人損失慘重,嚴重影響社會穩(wěn)定。

從已有案例看,參與者不乏政府官員及金融從業(yè)人員,更多的當然是風險承受能力較低的普通大眾,甚至包括不少下崗、失業(yè)人員及退休人員。

受騙人數(shù)多,受騙數(shù)額巨大又決定了其社會影響遠遠超過一般詐騙案件,對公眾財產利益危害較大。如發(fā)生在寧夏區(qū)內的蘇志強等人非法吸收公眾存款一案,時間跨度從2001年至2007年10月,受害人達200多人;吳松偉一案也是自1999年5月至2007年6月長達8年。這兩起案件在當?shù)卦斐闪藧毫拥纳鐣绊懀鹆瞬恍〉恼饎印?/p>

有效預防打擊需合力

篇6

1材料與方法

1.1實驗材料DNAMarker、BL21(DE3)感受態(tài)細胞購自TIANGEN、限制性內切酶BamHⅠ和HindⅢ、T4DNAligase購自TaKaRa,IPTG購自Solarbio,標準蛋白分子Marker購自Fermentas,溶菌酶、透析袋購自上海生工,尿素購自BioBasicInc.,咪唑購自Sigma-Alorich,HisTrapHP層析柱購自GEHealthcareLifeScience。

1.2基礎載體pET-TAT的構建根據(jù)NCBI,TAT序列(GenBank:AF525447)為tacggtcgtaaaaaacgtcgtcagcgtcgtcgt,人工合成后插入pET-32a(+)酶切位點SalI和XhoI之間。把pET-32a(+)質粒改造為pET-TAT基礎表達載體,由金思特科技(南京)有限公司完成。

1.3原核表達載體pET-EGFP的構建用限制性內切酶BamHⅠ和HindⅢ進行雙酶切重組質粒pMD18-T-EGFP和載體pET-32a(+),膠回收目的片段EGFP,T4連接到線性pET-32a(+),構建成表達載體pET-EGFP。

1.4原核表達載體pET-NLS-EGFP-TAT的構建根據(jù)EGFP序列,使用Oligo6.0設計N端加有核定位NLS序列的引物,上游引物:5′-CGCGGATCCCCGAAAAAGAAACGTAAAGTTACCATGGCTATGGTGAGCAAGGGCGAGGAG-3′,下游引物:5′-CCCAAGCTTCTTGTACAGCTCGTCCATGCC-3′,(其中下劃線-部分分別為BamHⅠ和HindⅢ的酶切位點,下劃線波浪線部分為核定位NLS序列)。以pMD18-T-EGFP重組體為模板進行PCR擴增得到NLS-EGFP,然后進行TA克隆、酶切、連接到pET-TAT基礎表達載體上,構建成原核表達載體pET-NLS-EGFP-TAT。

1.5蛋白EGFP和NLS-EGFP-TAT的誘導表達將原核表達載體pET-EGFP和pET-NLS-EGFP-TAT分別轉化大腸桿菌BL21(DE3),當菌液濃度生長到OD值在0.6~0.8之后,添加IPTG終濃度為0.2mmol/L,37℃、220r/min搖床誘導4h,取樣進行SDS-PAGE分析。然后對陽性菌液進行大搖,離心收集菌液沉淀,再用溶菌酶消化、超聲波破碎菌體,得到粗制包涵體,再用含有1mol/L尿素的包涵體洗滌液超聲洗滌包涵體。

1.6融合蛋白的純化與復性洗滌后的包涵體,加入結合緩沖液,冰上充分冷卻,再4℃離心,收集上清液再用0.22μm濾膜過濾得到蛋白上柱樣品,然后將上柱樣品通過HisTrapHP層析柱,再用結合緩沖液洗去未結合上柱的蛋白及雜質,然后用復性緩沖液在層析柱上復性融合蛋白,含有咪唑的洗脫緩沖液洗脫融合蛋白,得到純化蛋白溶液。將純化蛋白溶液放入透析袋中,用MilliQ水中4℃透析,除去咪唑等,然后再在透析袋表面撒上PVP進行濃縮蛋白。

1.7細胞培養(yǎng)驗證穿膜功能水牛成纖維細胞接種培養(yǎng)24h后,更換培養(yǎng)液,然后在新的培養(yǎng)液中分別添加純化的EGFP蛋白(100μg/mL)和NLS-EGFP-TAT(100μg/mL)蛋白,繼續(xù)培養(yǎng)5~8h,在添加NLS-EGFP-TAT純化蛋白時,為了加強TAT的穿膜效果,同時在培養(yǎng)液中添加HA2-TAT蛋白。培養(yǎng)規(guī)定時間后,再用PBS充分洗滌細胞,然后在激光共聚焦顯微鏡下觀察EGFP蛋白分布狀態(tài)。

2結果

2.1原核表達載體的構建與鑒定雙酶切質粒pMD18-T-EGFP和載體pET-32a(+),得到EGFP片段,T4連接到線性pET-32a(+)上,構建為原核表達載體pET-EGFP,經酶切和PCR鑒定,結果與實驗設計相符,(見圖1和圖2)。通過引物帶入方式,PCR擴增得到NLS-EGFP片段,再經過TA克隆、酶切、連接到pET-TAT基礎表達載體上,構建為表達載體pET-NLS-EGFP-TAT,經酶切和PCR鑒定,結果與實驗設計相符(圖3和圖4)。

2.2融合蛋白的誘導表達由圖5可知,含有pET-EGFP和pET-NLS-EGFP-TAT的陽性BL21(DE3)菌液,經IPTG誘導后,分別在47.3ku和50.1ku處有特異性條帶,與預期相符。

2.3融合蛋白穿膜功能的初步檢測水牛成纖維細胞在添加EGFP蛋白共培養(yǎng)后,細胞的生長狀態(tài)并無影響,EGFP蛋白仍然散落在細胞培養(yǎng)液中;充分洗滌細胞后,并未觀察到細胞表面和細胞內有綠色熒光(圖6)。水牛成纖維細胞在添加了NLS-EGFP-TAT蛋白和HA2-TAT蛋白共培養(yǎng)后,可以觀察到NLS-EGFP-TAT蛋白很快吸附在細胞表面,在培養(yǎng)5~8h后,用PBS充分洗滌細胞3次,除去培養(yǎng)中多余的未穿膜蛋白,然后在激光共聚焦下可以觀察到細胞內均勻散布有熒光,說明NLS-EGFP-TAT蛋白已內化入細胞(圖7)。

3討論

Yamanaka等利用逆轉錄病毒載體在小鼠成纖維細胞中導入了4個因子(Oct4、Sox2、cMyc、Klf4),并用多能性標志分子Fbx15進行篩選,得到了iPS細胞,在這短短的幾年時間里,iPS細胞技術得到了迅速發(fā)展。但是這些iPS細胞的誘導方法大多數(shù)都是采用病毒載體、轉座子等,這些方法主要是采用了基因操作的原理來啟動細胞的重編程,可能導致基因插入突變,具有潛在的不安全性。隨后產生了更為安全可靠的方法,包括質粒轉導、小分子化合物誘導、蛋白誘導等等。其中蛋白誘導的方法充分利用了中心法則,采用干細胞轉錄因子的重組蛋白,利用細胞穿膜肽的作用將蛋白分子載入細胞內,從而啟動細胞重編程,獲得了安全性很高的iPS細胞。而采用蛋白誘導的方法想得到iPS細胞,關鍵是如何順利的將大分子物質(蛋白質)導入細胞內,并且定位于細胞核內作用于細胞DNA,充分的發(fā)揮其功能。因此本試驗重在引入細胞穿膜肽,將其與干細胞轉錄因子進行融合表達,從而獲得具有自主穿膜功能的重組蛋白。

Frankel等發(fā)現(xiàn),從HIV-1(humanimmunodeficiencyvirus1)中純化出來的含有86個氨基酸殘基的反式活化因子蛋白—TAT蛋白(trans-activatorprotein,tat-86)能夠快速地順利穿過細胞膜。Vives等的研究表明,在TAT蛋白86個氨基酸殘基中,只需要其中的11個氨基酸殘基(tat:47-57),組成為YGRKKRRQRRR,即具有穿膜能力;并且推測其內化過程并不是依賴傳統(tǒng)的胞吞模式,以及非溫度依賴性。在對自然界存在的幾種穿膜肽(TAT、ANTP和VP22)的研究中,富含Arg、Lys等堿性氨基酸殘基,帶有大量正電荷,以及具有α-螺旋結構,而這些Arg和Lys就是影響其穿膜功能的必須氨基酸殘基。穿膜肽TAT的穿膜機制,目前還沒有一個公認的模式,但是基于CPPs的分子結構以及諸多的實驗驗證表明,CPPs首先是通過其α-螺旋表面的正電荷與細胞膜表面的負電荷物質(比如肝素、硫酸乙酰肝素、蛋白聚糖等等)發(fā)生靜電吸附,大量積聚在細胞表面,隨后由于某種機理而啟動的巨胞飲(macropinocytosis)通過不同的內化路徑(internalizationpathways)進入細胞。

采用蛋白誘導的方法順利得到水牛iPS細胞,另一個關鍵技術是如何將進入細胞內的干細胞轉錄因子活化蛋白定位于細胞核內。但是,對于穿膜肽TAT是否能將攜帶的外源蛋白進行亞細胞定位,在眾多的文獻報道中也各執(zhí)一詞。對于大分子蛋白質要進出細胞核,現(xiàn)論認為其必須通過載體蛋白才能順利穿過核孔復合物(nuclearporecomlex,NPC)進入核內,而NLS(nuclearlocalizationsignal)序列則可以幫助大分子蛋白質與載體蛋白質結合成為聚合物,并提高其穿核效率。不同蛋白質轉運所依賴的NLS有所差異,并且其作用機制也不盡相同。根據(jù)Yoshikawa等的研究結果,融合表達NLS序列(氨基酸殘基序列為PKKKRKVTMA),可以準確地將目的蛋白(VENUS-TAT)定位于細胞核內。本實驗借鑒其方式,在引物中合成NLS序列,將其與EGFP-TAT蛋白融合表達,期望能夠使融合蛋白穿膜后因此具有細胞核內定位功能。從本實驗結果中,可以清楚地觀察到單獨添加EGFP蛋白只是分散在培養(yǎng)液中,并未發(fā)生細胞吸附現(xiàn)象,也未能在胞內檢測到熒光。而在細胞培養(yǎng)液中添加的NLS-EGFP-TAT蛋白,很快吸附在細胞表面,同時在培養(yǎng)液中添加了HA2-TAT蛋白,可以幫助NLS-EGFP-TAT蛋白在完成細胞內化后,能夠順利地從內含體中逃逸出來,避免被溶酶體降解掉,因此在細胞內可以檢測到熒光。但是NLS序列的引入,在試驗結果中并未有明顯的體現(xiàn)出來。由于蛋白質在復性折疊時,各組成結構相互影響的原理比較復雜,可能會直接造成蛋白質分子在構象修飾過程中,掩蓋了NLS結構,從而未能發(fā)揮出其較強的核定位功能。

4結論

篇7

 

廣告語流行于19世紀中期,邦納為了避開報紙廣告中禁止登炫耀廣告的限制,重復使用簡短的警句。很多人效仿邦納的這種風格,使它流行起來。很快,廣告語制作就發(fā)展成一種專業(yè)。有些短句很快就寫出來,有些人則是從早期廣告中摘錄下來的,還有一些則是費了九牛二虎之力才琢磨出來的。受人歡迎的流行廣告語也提出了一些模式:它應該簡潔適當、質樸、難忘、朗朗上口,而且還應該包容一個有關被宣傳產品的主題和中心思想。

 

一、廣告語的意義與地位

 

廣告語在某種意義上來說,就像企業(yè)的商標一樣,是企業(yè)在整合品牌傳播中的一個重要標志。一個企業(yè)長期使用一個廣告語,有助于消費者識別企業(yè)和產品。因此,有人把廣告語稱為廣告主題或企業(yè)經營理念的“語言標志”和“文字商標”,并把它視為與企業(yè)商標一樣重要。有些企業(yè)還把廣告語進行識別設計,專有的顏色、字體、固定擺放的位置。如美的空調的系列廣告。

 

企業(yè)在傳播活動中,使經營理念和形象讓消費者接收。作為概括企業(yè)形象和理念的廣告語必須長期重復使用。對消費者來說,廣告語必須具有:簡潔、明確、貼切、獨到、有趣味、有號召力、易于記憶、嵌入牌名等特點。這樣才能讓消費者記憶品牌,使其聯(lián)想到企業(yè)和產品。

 

廣告語是品牌形象的文字商標。成為企業(yè)品牌形象的核心價值之一。品牌形象一般來自于三個方面:企業(yè)主體形象、產品品質形象和使用者形象。這樣,廣告語也就有三種類型,一是企業(yè)形象廣告語,如海爾集團“真誠到永遠”。二是產品的廣告語,如美的空調的“原來生活可以更美的”。三是使用者廣告語(促銷廣告語),如萬寶路香煙的“男人的世界”。其中企業(yè)形象廣告語在傳播中影響力最大。

 

在今天,企業(yè)在進行傳播活動中,越來越重視與消費者的關系。過去在大眾傳播模式中,“請消費者注意”的單一溝通模式,正逐漸被“請注意消費者”的雙向溝通模式代替。整合品牌傳播成為營銷傳播的主流。所以,企業(yè)必須向消費者表明企業(yè)經營理念,社會存在價值和對消費者的承諾。這許許多多的傳播概念必須匯集在一點上,那就是廣告語的任務。廣告語在整合品牌傳播活動中就起到連貫的、統(tǒng)一的、重復的、有號召力的功能。

 

世界在飛速變化,每個企業(yè)都在追求極大化增長,并夢求成為長壽公司。樹立企業(yè)形象,和消費者有效溝通就成為前提。另一方面,企業(yè)為了分散經營風險開始多元化經營。從統(tǒng)一的企業(yè)形象來看,所有的企業(yè)多元化經營活動必須統(tǒng)一在一個鮮明的形象上,除商標識別外,企業(yè)形象廣告語就能發(fā)輝最大功效。

 

為了適應市場的發(fā)展,企業(yè)在經營活動中,尋求新的驚爆點。也逐漸用“1:1營銷”代替“大眾營銷”,用“顧客占有率”代替“市場占有率”,用“整合品牌傳播”代替“大眾傳播”。廣告語就為整合品牌傳播提供連貫性、一致性和持續(xù)性的作用。整合品牌傳播已經成為全球性的概念,普受全球各個市場及廣告主的重視。整合品牌傳播就是在一段時間內,發(fā)展并執(zhí)行針對消費者的各項說服傳播策略的過程。目前國際上有關整合品牌傳播理論有三種不同觀念。

 

近年來,整合品牌傳播已經成為一明顯趨勢,甚至是上世紀90年代最重要的營銷發(fā)展。過去,企業(yè)通常會將各項傳播要素,如廣告、促銷、POP展示等,視為分別活動來對待。然而,目前“整合”已成為成功之不二法則。實際上,這也就是“整合品牌傳播資源,共同發(fā)揮”,符合消費者在品牌接觸中各階段不同需求。

 

整合品牌傳播另一種觀念就是把傳統(tǒng)各自分立的行銷傳播手段加以整合,使公共關系、廣告、促銷、直效營銷……等各種傳播活動的優(yōu)劣勢能加以妥善規(guī)劃、整合、合理調配,發(fā)揮大兵團作戰(zhàn)實力。還有一種觀念就是把所有傳播工具力量整合,使其口徑一致,用“一個聲音說話”。

 

二、廣告語在整合品牌傳播中所起的作用

 

1.廣告語使整合品牌傳播“口徑一致”。

 

整合品牌傳播就是將所有行銷傳播狀態(tài)和工具加以緊密結合,以維持新式傳達清楚、單一共享的形象、定位、主題等。

 

廣告語在整合品牌傳播活動中,承擔傳播信息單一、共享的功能。廣告語的基本特點就是簡潔、明確和信息單一。如東芝的廣告語“為了人類和地球的明天”,明確告知消費者企業(yè)的經營理念。

 

2.廣告語使整合品牌傳播中的所有接觸點進行統(tǒng)一認別。

 

整合品牌傳播會使用所有可能傳達企業(yè)或品牌訊息的渠道。這些接觸消費者的渠道可能包括電視廣告、雜志廣告、報紙廣告、網(wǎng)絡廣告、POP或其他任何有可能的信息渠道。

 

在這些渠道運用中,廣告語是和企業(yè)商標共同出現(xiàn),也就是說,只要能看到企業(yè)商標就可以看到企業(yè)廣告語,只要消費者接觸的渠道就能接觸到廣告語。是企業(yè)視覺,聽覺識別的“文字標志”。如美的空調廣告語“原來生活可以更美的”在傳播活動中,出現(xiàn)在電視廣告、報紙廣告、雜志廣告、路牌廣告、POP與所有出現(xiàn)的傳播渠道中,使消費者對品牌有深刻的印象。有些廣告語用音樂來表達。

 

3.廣告語是整合品牌傳播中貫穿消費者導向的營銷全過程的主線。

 

整合品牌傳播的過程是起源自消費者,然后才以消費者的資訊,決定適當有效的方法和傳播渠道,來發(fā)展傳達說服訊息的策略。并且了解營銷通路,共享的消費者資料庫。因為通路是面對消費者的第一線。

 

按消費者的消費行為,首先有需求才會去注意信息收集,信息的收集第一個接觸點就是品牌名稱和廣告語,在消費者沒和企業(yè)、產品正面打交道之前,廣告語先闖進消費者腦袋,廣告語是否能讓消費者記住,就會直接影響消費者購買產品的動機。所以廣告語是吸引注意的重要因素。如耐克的“just do it”廣告語。也明確告訴消費者在生活中可以為所欲為,該廣告語還暗示耐克產品有助他們成功實現(xiàn)自己的愿望。

 

4.廣告語可使整合品牌傳播達到綜合效果,單一品牌形象的傳達。

 

整合品牌傳播的重要目標之一是希望能夠達到綜合整體效果,也就是各項傳播工具必須有單一品牌形象的訊息傳達。如果這些傳播工具無法緊密協(xié)調的話,可能會造成傳達分散的品牌信息給消費者。

 

品牌形象傳播的主要特征就是單一性、持續(xù)性和獨特性。我們在整合品牌傳播中采用的媒體是多樣的,時間跨度是長期的,如何使品牌形象單一傳達給消費者,非廣告語莫屬。廣告語可以使一個品牌形象的概念和屬性單一自始自終,不可輕易改變。還應該有獨特字體、顏色,加強品牌形象傳達,如豐田和盛世共同開發(fā)了“每一天”的廣告語的標準字體。這樣,不僅僅是為了提高豐田車的審美的品位,而且傳達了豐田單一品牌形象。

 

5.廣告語有助于影響消費者的行為

 

整合品牌傳播的目的是為了要影響消費者的行為,也就是其目的不只是讓消費者對品牌產生好感,成功的整合品牌傳播活動希望能激發(fā)消費者的行動。

 

大衛(wèi)·奧格威講“一切為了銷售,否則,我們不做廣告”。李奧貝納:“有趣卻毫無銷售力的廣告,只是在原地踏步”。廣告語提供了品牌形象,向我們保證了質量,并提供了全面解決方案。廣告語超越了具體的產品要素,將產品作為一個整體來考慮。使消費者產生對產品利益聯(lián)想,促使他們行動,如娃哈哈廣告語“媽媽我要喝” 樂百氏廣告語:“今天你喝了沒有”,都是很好的案例。

 

6.廣告語可使企業(yè)利用整合品牌傳播與消費者建立長久關系。

 

成功的行銷傳播是需要在企業(yè)(品牌)與消費之間建立長久的關系。因為廣告語可使關系的建立通過易于記憶,有趣味,簡單的標語來聯(lián)結??煽诳蓸返摹耙凶约骸弊屓藷o法抗拒可口可樂與消費者的關系。

 

總的來講,廣告語兩個基本功能:①為整合品牌傳播各種手段提供連貫性。②將整合品牌傳播的戰(zhàn)略信息壓縮成精練的,便于重復、便于記憶的定位承諾。至此,我們可以看出廣告語的特點是相對穩(wěn)定、易記易傳、訴求單一。單純的廣告最有力,因此,企業(yè)在制定自己的廣告語時必須慎重選擇,廣告語是消費者了解一個企業(yè),一個商品最直接的渠道,也是一個企業(yè)走向成功的名片。

篇8

【關鍵詞】 哮喘 氣道重塑 喘復康大鼠

Abstract:ObjectiveTry to observe the effect and possible mechanism of ChuanFuKang mixture on airway remodell of rat models of asthma.MethodsAn animal model of asthma was established by OVA (ovalbumin) sensitizing-challenging SD rat. Water extract of ChuanFuKang were given to rats(ig). Immunohistochemical technology was used to estimate the change of CD44 in the rat lung tissues of each group, the thickness of bronchial wall and the area of collagen deposition was detected by computer image analyse system and by method of Masson trichrome staining.ResultsThe content of CD44 of lung tissue of asthma group was significantly higher than that of control group (P<0.05), the four-week group was more obvious than the three-week group. The content of CD44 of low dose and high dose group was obviously lower than that of asthma group(P<0.05). The results of the image analysis showed that the thickness of bronchial smooth muscle and the area of collagen deposition obviously increased, the four-week group was more evident than the three-week group, there was significant difference compared with control group(P<0.05). These changes of hormone group and ChuanFuKang group were not evident, there was no significant difference compared with control group(P>0.05).ConclusionChuanFuKang mixture can inhibite the airway remodeling by reducing the produce and the expression of CD44 in asthmatic rat lung tissue.

Key words:Asthma; Airway remodeling; ChuanFuKang Rats

支氣管哮喘(簡稱哮喘)是嚴重影響人體健康的慢性呼吸道炎癥性疾病。近年來,人們針對哮喘病的慢性進行性和難以根治性,對于哮喘氣道壁重塑的研究日益受到重視。氣道重塑主要表現(xiàn)為氣道平滑肌肥大、增生、基底膜增厚和玻璃樣變,由此可致氣道的不可逆阻塞和持續(xù)的氣道高反應性,是頑固性哮喘的重要病理基礎[1]。許多因素如炎癥介質、細胞因子及原癌基因都參與了這一過程。本研究觀察不同時段哮喘大鼠模型肺組織中CD44的表達及藥物對其表達的影響,旨在進一步闡明CD44在哮喘氣道重構中的作用和藥物的干預機制,為進一步的實驗研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 雞卵清白蛋白(OVA),美國Sigma公司;地塞米松磷酸鈉注射液,湖北天藥藥業(yè);兔抗鼠CD44多克隆抗體、即用型SABC免疫組化染色試劑盒,武漢博士德生物工程有限公司;SP免疫組織化學、DAB顯色試劑盒,北京中衫金橋生物技術有限公司。

1.2 儀器 402T型超聲霧化器,上海四菱醫(yī)療器械廠;自制大鼠霧化吸入箱;DC200圖象采集系統(tǒng)、IM50型圖像采集軟件、Image-Proplus真彩色醫(yī)學圖象分析軟件,德國Leica公司產品等。

1.3 動物及分組 健康雄性SD大鼠80只,體重180~200 g,由華中科技大學同濟醫(yī)學院實驗動物中心提供。實驗前動物于正常溫控、光照和自由攝取食物、水的條件下飼養(yǎng)1周后,被隨機分成5組:正常對照組、哮喘組、地塞米松處理組及喘復康低劑量和高劑量處理組。各組又分成誘喘3周、4周兩個時間段。

1.4 大鼠哮喘模型的建立 采用卵白蛋白(OVA)致敏法制備[2]。第1天,哮喘組及各給藥組大鼠用1ml混懸液腹腔注射〔OVA 10 mg;Al(OH)3干粉100 mg〕致敏,第15天開始誘喘,哮喘組大鼠超聲霧化1%OVA激發(fā),約30 min/次,觀察并記錄大鼠呼吸及全身情況,以出現(xiàn)呼吸加快、口周發(fā)紺及腹肌痙攣、點頭呼吸為激發(fā)成功,共21~28 d。分別于第35天,第42天處死大鼠。地塞米松組于每次誘喘前1h給予腹腔注射地塞米松1.0 mg/kg。對照組在相同的時間腹腔注射、霧化吸入0.9%生理鹽水,其余同哮喘組。

喘復康處方藥物由醫(yī)學院中醫(yī)內科提供,其主要成分為麻黃、杏仁、丹參、僵蠶、地龍、蘇子、白芥子、魚腥草、黃藤、甘草等。所有藥物經浸泡、煎熬、過濾及濃縮成濃度為4 g生藥/ml的藥汁,將濃縮后的藥汁裝入已消毒的容器中,密封后再高溫滅菌,置于4℃冰箱保存用。于霧化攻擊前給予灌胃給藥,低高劑量組分別以50,100 g生藥/(kg·d) 灌胃。

1.5 肺組織病理學觀察 末次激發(fā)結束后24 h內處死,取右肺中葉組織,修塊,10%甲醛溶液固定,常規(guī)石蠟包埋切片。行HE染色及Masson三色法染色。

1.6 計算機圖象分析氣道壁厚度及膠原厚度 采用計算機圖像分析系統(tǒng),每張切片在顯微鏡下(400×),確定完整的支氣管橫截面,分別選取6個完整的細支氣管截面,分別測取支氣管基底膜周徑(Pbm)、總管壁面積(WAt)、內壁面積(WAi)以及平滑肌面積(WAm),并用Pbm將測量值標化,分別以Wat/ Pbm、Wai/ Pbm及Wam/ Pbm代表相應管壁層的厚度,并計算其平均值。Masson三色染色法使膠原纖維呈綠色,IMG-Q500圖像采集系統(tǒng)采集圖像,找到完整的支氣管橫截面,圖像分析膠原厚度。

1.7 免疫組織化學染色 CD44免疫組化染色采用SABC法。切片脫臘、水化后3%H2O2室溫下反應10 min以滅活內源性過氧化物酶,微波修復抗原,滴加正常牛血清封閉液,室溫10 min。滴加適當稀釋(1∶100)的一抗免抗鼠CD44多克隆抗體,4℃下過夜,PBS充分沖洗后滴加生物素化山羊抗兔IgG,37℃下反應20 min,滴加試劑SABC, 37℃下反應20 min后DAB顯色,鏡下控制反應時間,蒸餾水充分洗滌。蘇木精輕度復染,脫水、透明、封片觀察。計算機圖象半定量分析系統(tǒng)測取管壁陽性染色的灰度值作相對含量,隨機選取6個支氣管,圖像分析各支氣管細胞染色的灰度值。

1.8 統(tǒng)計學處理 各組間數(shù)據(jù)均以(±s)表示,采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析,各組間比較首先采用方差齊性檢驗,組間差別采用單因素方差分析及q檢驗,相關性檢驗采用直線相關分析,P

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2 結果

2.1 病理組織學改變 各組肺組織石蠟切片常規(guī)HE染色,光學顯微鏡下發(fā)現(xiàn),哮喘3周組,支氣黏膜皺襞增多,上皮脫落,氣道平滑肌的厚度明顯增加,黏膜下、管壁及肺泡間質均見有大量嗜酸性粒細胞浸潤,管腔狹窄;4周組上述改變更加明顯。激素組和喘復康合劑組僅有輕度的炎癥反應,支氣管及肺泡炎性細胞浸潤明顯輕于哮喘組。Masson三色法染色法結果顯示,哮喘組支氣管黏膜及上皮下膠原纖維呈綠色,其分布明顯增多,4周組較3周組更為明顯;激素組和喘復康合劑組上皮下基底膜膠原沉積不明顯,與正常對照組相比無顯著性差異。見圖1~10。

圖1 CD44免疫組化染色空白對照(×20)(略)

圖2 正常組CD44免疫組化染色(×20)(略)

圖3 哮喘3周組CD44 免疫組化染色(×20)(略)

圖4 哮喘4周組CD44免疫組化染色(×20) (略)

圖5 地米3周組CD44免疫組化染色(×20)(略)

圖6 地米4周組CD44免疫組化染色(×20) (略)

圖7 低劑量3周組CD44免疫組化染色(×20)(略)

圖8 低劑量4周組CD44免疫組化染色(×20) (略)

圖9 高劑量3周組CD44免疫組化染色(×20)(略)

圖10 高劑量4周組CD44免疫組化染色(×20)(略)

2.2 各組平滑肌面積及厚度、膠原厚度比較 用支氣管基底膜周徑標化總管壁面積、內壁面積和平滑肌面積為WAt/ Pbm,WAi/ Pbm及WAm/ Pbm,代表相應管壁層的厚度。哮喘模型組支氣管平滑肌明顯增厚,膠原沉積增加,4周組比3周組更為明顯,與正常對照組及各給藥組比較有顯著性差異。激素組及喘復康大劑量組平滑肌增厚不明顯,與正常對照組相比無顯著性差異。見表1。

表1 各組不同時期平滑肌和膠原厚度比較(略)

與正常對照組比較,﹡P

2.3 氣道壁CD44免疫組織化學表達改變 氣道壁CD44主要表達在氣道黏膜上皮細胞胞膜,炎性細胞、肺血管內皮細胞、基底膜、支氣管平滑肌未見表達。圖像分析結果顯示,CD44在正常對照組氣道壁弱陽性表達,激發(fā)3周時,在哮喘模型組氣道黏膜上皮穩(wěn)定陽性表達,4周時表達更為明顯。在喘復康小劑量3周干預組其表達低于哮喘模型組但無顯著性差異(P>0.05),與正常對照組、喘復康大劑量干預組、激素干預組比較均偏高(P>0.05);激素干預組及喘復康大劑量組CD44表達明顯較哮喘模型組低(P

2.4 相關性分析 經直線相關分析得知,氣道壁CD44含量與平滑肌厚度呈顯著正相關(r=0.741,P

表2 各組不同時期肺組織CD44免疫組化學定量分析結果(略)

與正常對照組比較,﹡P

3 討論

研究發(fā)現(xiàn),細胞黏附分子中糖蛋白及其黏附機制可能是介導哮喘時炎性細胞浸潤、增殖乃至纖維化形成的分子基礎。CD44是一種細胞表面跨膜糖蛋白分子,屬于未分類的黏附分子,通過介導細胞與細胞、細胞與基質之間的特異性黏連,刺激多種細胞增殖和細胞外基質的合成,而具有增高氣道反應性、促使氣道重塑發(fā)生的作用,與哮喘的發(fā)病密切相關[3]。Katoh等[4]通過在體實驗發(fā)現(xiàn)CD44單克隆抗體(KM201或IM7)可以顯著減少嗜酸性粒細胞和淋巴細胞在肺內的聚集,提示白細胞特別是嗜酸粒細胞和淋巴細胞向肺部炎癥組織趨化浸潤有賴于CD44分子參與,并且通過炎癥細胞的破壞和分解導致局部損傷,進而引起上皮和基底的破壞和萎縮,直至重塑形成。Ohkawara等[5]報道致敏哮喘大鼠BALF中的嗜酸粒細胞明顯增加,可能是通過CD44-HA途經實現(xiàn)的。

轉化生長因子-β1(TGF-β1)是哮喘氣道重塑的主要調控因子,其具有促膠原產生、增加細胞外基質沉積、誘導上皮細胞凋亡等重要作用[6]。CD44可通過介導炎性細胞分泌產生大量TGF-β1,喘復康合劑可能通過減少氣道壁TGF-β1的表達而抑制氣道重塑。

本實驗通過建立大鼠OVA致敏的哮喘模型,測定了致敏不同時段肺組織中CD44表達量的變化,觀察哮喘不同時段支氣管肺組織的組織學改變及基底膜膠原沉積情況,并觀察比較應用中藥合劑喘復康以及激素治療對于氣道重塑的影響。喘復康由我校中醫(yī)內科提供,是根據(jù)臨床經驗總結和改良的治療哮喘的方劑。支氣管哮喘屬中醫(yī)學中“哮證”范疇,哮病的病因多以肺虛、脾虛、腎虛為本,以風、寒、濕、痰、熱、淤為標。方中甘草、麻黃具有松弛支氣管平滑肌作用;地龍通過抗組織胺作用而擴張支氣管;杏仁、蘇子、白芥子、僵蠶等具有祛痰降氣作用,減輕肺氣壅塞,使呼吸較通暢而有助于止喘、降低氣道反應性。諸藥合用補益肺、脾、腎,調理臟腑氣機,恢復升降功能,共同達到扶正、化痰、平喘的功效。但其解痙平喘的有效成分和分子機理還有待進一步研究。同時,喘復康合劑可通過減少哮喘時肺組織中CD44的表達,抑制或減輕氣道平滑肌的增厚及膠原的沉積,從而防止氣道重塑。但其具體作用于CD44表達的哪個環(huán)節(jié)及其如何發(fā)揮抑制它們表達的作用還有待進一步研究。

【參考文獻】

[1] 趙順英.哮喘發(fā)病機制研究進展[J].實用兒科臨床雜志,2003,18(10):768.

[2] 呂國平,崔得健,郭英江,等.介紹一種建立大鼠哮喘模型的實驗方法[J].中華結核病和呼吸雜志,1995,18(6):372.

[3] Marc ER. CD44-a sticky target for asthma[J].Clin Invest,2003,111(10):1460.

[4] Katoh S, Matsumoto N, Kawakita K,et al. A role for CD44 in an antigen-induced murine model of pulmonary eosinophilia[J].Clin Invest, 2003,111(10):1563.

[5] Ohkawara Y. Activation and transforming growth factor-βproduction in eosinophils by hyaluronan[J].Am J Respir Cell Mol Biol, 2000,23(4):444.

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3、中國美術學院:是最早實施設計學的高等學府,是中國最早的藝術革命團體發(fā)祥地,中國唯一一個美術學國家重點學科所在地,是首批國家“雙一流”世界一流學科建設高校和首批教育部來華留學示范基地建設高校。

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