導(dǎo)語(yǔ)：如何才能寫(xiě)好一篇生物檢測(cè)技術(shù)，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公文云整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

人體測(cè)量技術(shù)在機(jī)場(chǎng)的主要應(yīng)用是控制人員進(jìn)入“專(zhuān)用區(qū)”。機(jī)場(chǎng)的這部分一般人不能進(jìn)入的區(qū)域主要包括停機(jī)坪，在安全方面自然是很“敏感”的。人體測(cè)量技術(shù)的作用在于準(zhǔn)確地辨別獲準(zhǔn)進(jìn)入其中的人員。

指紋辨別技術(shù)將會(huì)得到最快發(fā)展。這種方法要求先將指紋登記在案。將手指放在一臺(tái)閱讀器上，指紋就會(huì)被輸入到一個(gè)形象處理軟件。該軟件會(huì)標(biāo)明指紋的末端、分叉、曲線，等等，這些都是指紋的特征點(diǎn)。所有這些特征點(diǎn)(30―80個(gè))就組成了微型指紋，這些資料再被用代碼表示。但該領(lǐng)域的專(zhuān)業(yè)公司――Zalix生物統(tǒng)計(jì)公司的總經(jīng)理阿蘭?舒克龍肯定地說(shuō)：“擾頻很?chē)?yán)重，有時(shí)甚至?xí)?dǎo)致無(wú)法破譯某人的信息，有時(shí)則出現(xiàn)一些只對(duì)能夠比較兩個(gè)微型指紋的算法才有意義的數(shù)字?！?/p>

微型指紋被記錄之后，就會(huì)存儲(chǔ)在一張磁卡里。當(dāng)你需要辨別身份時(shí)，系統(tǒng)就會(huì)將磁卡中保存的微型指紋與你放在閱讀器上的指紋進(jìn)行比較。如果按規(guī)定最小數(shù)目的特征點(diǎn)是一致的(具體數(shù)值由特征點(diǎn)比較算法決定），系統(tǒng)就會(huì)確認(rèn)你的身份。之所以不要求特征點(diǎn)百分之百地吻合，那是為了給手臟等情況留有余地。可以根據(jù)要求的安全程度來(lái)提高吻合的百分比。

為什么微型指紋要存儲(chǔ)在個(gè)人磁卡里而不是中央卡片柜里呢？已經(jīng)提出了這方面要求的國(guó)家信息與自由委員會(huì)的有關(guān)人士解釋說(shuō)： “這是為了避免指紋檔案的重復(fù)?！弊罱撐瘑T會(huì)就好幾個(gè)使用生物統(tǒng)計(jì)技術(shù)的事例給出了建議。必須注意的是，考慮到需要保護(hù)的利益，生物統(tǒng)計(jì)技術(shù)不能過(guò)度使用。國(guó)家信息與自由委員會(huì)指出：“我們絕不可能允許學(xué)校食堂使用指紋辨別技術(shù)?！敝讣y辨認(rèn)被認(rèn)為是一種“非常具有入侵性質(zhì)”的手段，因?yàn)檫@種方法非常可靠，我們當(dāng)中的每個(gè)人的指紋幾乎都可以說(shuō)是獨(dú)一無(wú)二的。

視網(wǎng)膜辨認(rèn)的原理與指紋辨認(rèn)原理相似，只不過(guò)放在掃描儀前的是眼睛，為了證實(shí)你沒(méi)有試圖用一只玻璃假眼來(lái)欺騙系統(tǒng)，一個(gè)二極管會(huì)發(fā)射一股微弱的光信號(hào)，真正的眼睛會(huì)對(duì)此產(chǎn)生反應(yīng)，而系統(tǒng)能夠檢測(cè)出這種反應(yīng)。視網(wǎng)膜上的特征點(diǎn)有250個(gè)左右。

視網(wǎng)膜辨認(rèn)技術(shù)已經(jīng)在倫敦的希羅機(jī)場(chǎng)得到應(yīng)用。這種技術(shù)被認(rèn)為是最保險(xiǎn)的辨認(rèn)技術(shù)，也是目前最尖端的人體測(cè)量技術(shù)，出錯(cuò)率為10-8。而指紋辨別和手掌辨認(rèn)技術(shù)的出錯(cuò)率都約為10-7。

人的手如同一把鑰匙。手掌辨認(rèn)原理同前兩種方法的原理大致相同，但比較的不是特征點(diǎn)，而是由掃描儀仔細(xì)檢查每個(gè)手指的長(zhǎng)度，手掌的寬度、厚度，皺紋部分的面積……不到1秒鐘的時(shí)間里要進(jìn)行90項(xiàng)檢查。紅外線掃描儀能夠辨別出放在上面的是只真手還是塑料假手。這項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)在美國(guó)的好幾個(gè)機(jī)場(chǎng)得到應(yīng)用。

最后，還有一個(gè)部位可以用于辨別身份：人的面部。在澳大利亞，澳洲航空公司的機(jī)組人員是這種光學(xué)辨別系統(tǒng)的首批使用者。該系統(tǒng)的功能是確認(rèn)站在前面的人與身份證件照片上的是同一人。此外，專(zhuān)家們認(rèn)為聲音辨認(rèn)技術(shù)還沒(méi)有“完全調(diào)試成功”。

（選摘自《參考消息?科學(xué)技術(shù)》）

閱讀提示

為了防止混進(jìn)機(jī)場(chǎng)，進(jìn)行恐怖襲擊，“機(jī)場(chǎng)使用了一些新方法來(lái)應(yīng)對(duì)恐怖威脅”。這種新方法就是“通過(guò)識(shí)別指紋、手掌和視網(wǎng)膜來(lái)辨認(rèn)身份將能提高安全度”。這篇科技說(shuō)明文，通過(guò)深入淺出的語(yǔ)言陳述，把這種生物檢測(cè)技術(shù)，從科幻電影引入到人們的實(shí)際生活，每一位乘飛機(jī)旅行的人，特別是機(jī)場(chǎng)工作人員都將與這種技術(shù)發(fā)生關(guān)聯(lián)。也就是說(shuō)，凡要進(jìn)機(jī)場(chǎng)乘坐飛機(jī)的人，就要走進(jìn)機(jī)場(chǎng)專(zhuān)用區(qū)，要將指紋、視網(wǎng)膜和手掌等“交給”閱讀器，閱讀器會(huì)根據(jù)這些信息辨認(rèn)來(lái)者身份。此文頗具實(shí)用性和時(shí)效性，它教給讀者安檢方面的知識(shí)，使我們?nèi)绻跈C(jī)場(chǎng)遇到比較復(fù)雜的手續(xù)時(shí)，至少不會(huì)嫌麻煩。

探究練習(xí)

1.本文開(kāi)篇說(shuō)的應(yīng)對(duì)恐怖威脅的一些新方法，主要指的是什么？本文這種直截了當(dāng)?shù)拈_(kāi)頭有什么作用？

2.本文第二自然段中有兩處使用了“引號(hào)”，使用引號(hào)的作用是什么？

3.本文重點(diǎn)說(shuō)明的是什么內(nèi)容？在重點(diǎn)說(shuō)明這項(xiàng)技術(shù)的原理和作用時(shí)，指出其現(xiàn)在還存在的是什么問(wèn)題？

4.文中在說(shuō)明“視網(wǎng)膜”和“手掌”辨認(rèn)技術(shù)的原理和作用時(shí)，在表達(dá)上與“指紋”辨認(rèn)技術(shù)的說(shuō)明有什么不同？

5.從哪些地方可以看出本文“說(shuō)明有序”，條分縷析的特點(diǎn)？

解答提要

1.本文開(kāi)篇直接入題，介紹機(jī)場(chǎng)生物檢測(cè)技術(shù)的一些新方法，并開(kāi)門(mén)見(jiàn)山地指出新方法主要指的是“通過(guò)識(shí)別指紋、手掌和視網(wǎng)膜等來(lái)辨認(rèn)身份將能提高安全度”。這種直截了當(dāng)?shù)拈_(kāi)宗明義，可以一下子把讀者的思維引向正題，循著文章的結(jié)構(gòu)和脈理去探究引人關(guān)注的這一科學(xué)技術(shù)問(wèn)題。

2.文中第二自然段中的“專(zhuān)用區(qū)”和“敏感”二詞都加了引號(hào)，這是因?yàn)橛袝r(shí)候在某一詞語(yǔ)前加引號(hào)，并不表示這是成語(yǔ)和熟語(yǔ)，而只是因?yàn)樗莻€(gè)專(zhuān)門(mén)術(shù)語(yǔ)，或是因?yàn)槠渌碛梢x者特別注意，或是借譬以示強(qiáng)調(diào)?！皩?zhuān)用區(qū)”“敏感”均屬上述情況，所以加了引號(hào)。

3.本文重點(diǎn)說(shuō)明的是“指紋辨別技術(shù)”，一是因?yàn)樗鼘?huì)得到最快的發(fā)展，二是它的研究比較深入，所以本文作了較詳細(xì)的說(shuō)明。但是這項(xiàng)技術(shù)也還存在問(wèn)題，那就是“擾頻很?chē)?yán)重”，導(dǎo)致無(wú)法破譯某人的信息，“有時(shí)則出現(xiàn)一些只對(duì)能夠比較兩個(gè)微型指紋的算法才有意義的數(shù)字?！睘榱俗屓藗兘邮苓@一技術(shù)，以之配合，文章對(duì)指紋辨認(rèn)的原理及其過(guò)程作了說(shuō)明，而且指出它是“非常具有入侵性質(zhì)”的手段，因此不能任意進(jìn)行使用。

4.正因?yàn)椤耙暰W(wǎng)膜”辨認(rèn)和“手掌”辨認(rèn)的原理和方法與“指紋”辨認(rèn)原理和方法大致相同，所以在較詳細(xì)地介紹了“指紋”辨認(rèn)技術(shù)的原理、方法以后，“視網(wǎng)膜”和“手掌”的辨認(rèn)，說(shuō)明從簡(jiǎn)，只需要指出其不同的地方就行了。

篇2

【關(guān)鍵詞】快速檢測(cè)方法 食品 微生物 應(yīng)用

食品是人們能夠在社會(huì)上生存和發(fā)展一個(gè)重要前提，食品的質(zhì)量問(wèn)題直接關(guān)系到人們的生存質(zhì)量和水平。微生物在食品中最為常見(jiàn)，是一種難以避免的客觀存在，同時(shí)也是影響食品安全和食用人身體健康的一個(gè)重大因素。通常情況下，評(píng)價(jià)一種食品是否安全可以通過(guò)檢測(cè)食品中微生物的種類(lèi)和數(shù)量判定。目前，負(fù)責(zé)進(jìn)行食品微生物檢測(cè)的快速檢測(cè)技術(shù)主要有顯微鏡鏡檢法、瓊脂平板培養(yǎng)法（這兩種為傳統(tǒng)快速檢測(cè)技術(shù)），氣相色譜法、免疫學(xué)檢測(cè)法、傳感器檢測(cè)法、分子生物學(xué)檢測(cè)法、抗阻測(cè)定法以及自動(dòng)檢測(cè)法（這五種為現(xiàn)代快速檢測(cè)技術(shù)）等多種快速檢測(cè)技術(shù)。為了更加詳細(xì)的探討快速檢測(cè)技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用概況，本研究以免疫學(xué)檢測(cè)法中的酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）應(yīng)用概況為例探討快速檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用概況，具體內(nèi)容如下分析。

一、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）

（一）作用原理

該檢測(cè)方法的原理是在確保不損壞抗原或者抗體免疫活性的前提下將其放入固相載體中，然后對(duì)包含待測(cè)的抗原或者抗體的受檢樣品按照規(guī)范步驟與原先放入固相載體中的抗原或者抗體結(jié)合，兩者反應(yīng)后產(chǎn)生復(fù)合物，這種復(fù)合物與仍待檢測(cè)的抗原或者抗體總量之間形成一定比例。最后對(duì)這個(gè)反應(yīng)液中其他不需要的物質(zhì)進(jìn)行洗滌排出后放入酶反應(yīng)底物，反應(yīng)后底物會(huì)逐漸生成有色產(chǎn)物，然后對(duì)這些有色產(chǎn)物進(jìn)行定量和定性分析就能夠得出測(cè)試物的具體微生物含量。

（二）檢測(cè)方法

酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）具體測(cè)定時(shí)一般有直接和間接兩種方法。其中，所謂的直接法就是指標(biāo)記抗體與固定抗原直接作用并放入底物后直接得出有色產(chǎn)物的方式。而所謂的間接法指的是待測(cè)樣本抗體首先與已知抗原進(jìn)行作用后再放入酶標(biāo)記物，酶標(biāo)記物與免疫復(fù)合物作用后才放入底物產(chǎn)生有色物質(zhì)。另外，該檢測(cè)方法還有多種改良方法，比如雙抗體、雙抗體夾心以及競(jìng)爭(zhēng)法等。雙抗體方法一般是在醫(yī)學(xué)檢測(cè)中應(yīng)用比較多，而競(jìng)爭(zhēng)法則在食品微生檢測(cè)中應(yīng)用較多。

（三）影響免疫法結(jié)果的因素

酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定時(shí)一般主要涉及到酶底物、抗原、酶、交聯(lián)劑等多種物質(zhì)，所以也就意味著這些物質(zhì)性質(zhì)和質(zhì)量對(duì)整個(gè)檢測(cè)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生直接或間接的影響。通常情況下，抗原對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響主要在于其包被質(zhì)量上，所謂的抗原包被就是在聚苯乙烯微量反應(yīng)板中固定上抗原的物質(zhì)，其質(zhì)量與檢測(cè)結(jié)果有很大關(guān)系；酶底物在免疫檢測(cè)中的作用是穩(wěn)定反應(yīng)呈色，防止有色物質(zhì)變色。所以，也就是說(shuō)若酶底物的穩(wěn)定能力不足，那么將直接影響反應(yīng)有色物質(zhì)的呈色時(shí)間，影響檢測(cè)結(jié)果。當(dāng)前選擇的酶底物在HRP和AKP中選擇不同，前者多選鄰苯二胺，后者多選硝基苯磷酸鹽；酶一般是使用HRP較多，而實(shí)際最主要的有HRP、ARP以及GO和半乳糖苷酶幾種。

二、食品微生物檢測(cè)中應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）的概況

酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）在食品微生物檢測(cè)中應(yīng)用時(shí)主要是檢測(cè)食物中的真菌毒素、細(xì)菌以及介導(dǎo)病毒三個(gè)主要內(nèi)容進(jìn)行檢測(cè)，具體檢測(cè)步驟如下分析：

（一）測(cè)定真菌毒素方法

食品真菌毒素測(cè)定主要是指黃曲霉毒素B1的測(cè)定，測(cè)定的具體方法有反向直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附法、間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附法、直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附法以及生物素親和素酶聯(lián)免疫吸附法法等多種方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，直接和間接酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)食品中的黃曲霉素度B1的測(cè)定靈敏度高，具有更為簡(jiǎn)便、更加廉價(jià)和安全的特點(diǎn)，非常適合在一些經(jīng)濟(jì)水平較差的基層地區(qū)中使用。1996年陸戈等研究人員使用了單克隆抗體（專(zhuān)門(mén)用于抗黃曲霉毒素B1）對(duì)常見(jiàn)食品（比如食用油、大米以及玉米等）中的黃曲霉毒素B1進(jìn)行間接競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定，并確定了專(zhuān)門(mén)的間接競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定法。實(shí)際測(cè)定結(jié)果顯示，改方法測(cè)定是最低檢出濃度達(dá)0.01lng/g，精密度高達(dá)2.0～24.3%，對(duì)某一地區(qū)的1620食品樣品檢測(cè)結(jié)果中，其檢出率高達(dá)97%，而一些靈敏度比較低的方法根本無(wú)法檢測(cè)出黃曲霉素度B1。所以也就意味著，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)食品中的真菌毒素效果非常顯著，且價(jià)格便宜，可以在多個(gè)地區(qū)應(yīng)用。

（二）測(cè)定細(xì)菌方法

食品中對(duì)人體健康影響最大的一種細(xì)菌為沙門(mén)氏菌，1996年文其藝等多位研究者使用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)460分食品進(jìn)行檢測(cè)顯示，沙門(mén)氏菌的陽(yáng)性率非常高的，甚至比國(guó)際上的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法陽(yáng)性率還要高?？梢?jiàn)，酶聯(lián)免疫吸附法在測(cè)定食物細(xì)菌上結(jié)果非?？煽俊?990年Cryan等研究者使用DNA探針技術(shù)和酶聯(lián)免疫設(shè)法兩種反法對(duì)大腸埃希氏桿菌內(nèi)毒素進(jìn)行檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，酶聯(lián)免疫吸附法的靈敏性和檢出率以及檢出時(shí)間均明顯優(yōu)于DNA探針技術(shù)。而在1986年R.M.Lister等研究者使用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)番茄醬中的霉菌進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，酶聯(lián)免疫吸附法的靈敏性要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于化學(xué)檢測(cè)法的靈敏性另外，還有研究者對(duì)魚(yú)蝦、蛋品等產(chǎn)品的霉菌進(jìn)行檢測(cè)也發(fā)現(xiàn)酶聯(lián)免疫吸附法的檢出率非常高。總言之，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)食品細(xì)菌檢出率非常高，值得作為一種有效方法進(jìn)行推廣。

（三）測(cè)定介導(dǎo)病毒方法

介導(dǎo)病毒測(cè)定主要是對(duì)一些食品從業(yè)人員進(jìn)行測(cè)定后分析食品微生物病毒感染性質(zhì)的方法。一直以來(lái)，酶聯(lián)免疫吸附法都在食品相關(guān)人員的乙肝病毒感染監(jiān)測(cè)中得以應(yīng)用。且除了在這些最常見(jiàn)的病毒感染可疑人員進(jìn)行測(cè)定之外，該方法還應(yīng)用在克山病疾病的血清監(jiān)測(cè)中，主要是監(jiān)測(cè)這類(lèi)疾病患者血清中是否存在柯薩奇B組病毒，從而了解該病毒在克山病患者中的存在情況，有助于醫(yī)護(hù)人員根據(jù)這些測(cè)定結(jié)果采取針對(duì)性消滅病毒，治愈疾病的方法。

總而言之，食品微生物快速檢測(cè)方法非常多，在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)應(yīng)該選擇效果更為明顯且操作簡(jiǎn)便和價(jià)格便宜的方法，比如酶聯(lián)免疫吸附法，真正提高食品微生物檢出率，保障食品安全。

參考文獻(xiàn)：

篇3

【關(guān)鍵詞】 食品；微生物；檢測(cè)技術(shù)；研究；進(jìn)展

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.11.842 文章編號(hào)：1004-7484（2013）-11-6815-02

食品在生產(chǎn)加工、儲(chǔ)備保存、運(yùn)輸銷(xiāo)售等過(guò)程中，容易產(chǎn)生大量的微生物，導(dǎo)致食品變質(zhì)，并引發(fā)食源性中毒或者感染，尤其是在環(huán)境污染不斷加重情況下，微生物繁殖速度不斷加快，食品安全問(wèn)題越來(lái)越嚴(yán)重了。隨著微生物檢測(cè)技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的推廣和應(yīng)用，簡(jiǎn)化了食品檢測(cè)程序，縮短檢測(cè)時(shí)間，提高檢測(cè)質(zhì)量，為食品衛(wèi)生安全提供了重要的技術(shù)保障。

1 食品微生物檢測(cè)技術(shù)

1.1 遺傳學(xué)檢測(cè)技術(shù)

1.1.1 PCR檢測(cè)技術(shù) PCR檢測(cè)技術(shù)，即聚合酶鏈反應(yīng)，是一種體外擴(kuò)增DNA的檢測(cè)方法，能夠在短時(shí)間內(nèi)，讓某個(gè)微量DN斷特異性快速擴(kuò)增，最多可超過(guò)百萬(wàn)倍。PCR檢測(cè)技術(shù)，把模板DNA、Taq酶、鎂離子、引物等物質(zhì)進(jìn)行有效的混合，并放入到PCR微型管內(nèi)，在PCR編程調(diào)控儀作用下完成檢測(cè)，其具有操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)迅速、特異性高等應(yīng)用優(yōu)勢(shì)，可通過(guò)擴(kuò)增DNA，以判斷是否存在某類(lèi)微生物[1]。同時(shí)PCR檢測(cè)技術(shù)能夠?qū)ε囵B(yǎng)難度較大微生物進(jìn)行檢測(cè)，使得微生物檢測(cè)效率大大增加。現(xiàn)階段，PCR檢測(cè)技術(shù)在大腸埃希氏菌、李斯特菌及沙門(mén)氏菌等檢測(cè)中已得到成功應(yīng)用，但是在假陽(yáng)性、陰性、定量檢測(cè)上還存在不足。

1.1.2 基因芯片檢測(cè)技術(shù) 基因芯片檢測(cè)技術(shù)主要通過(guò)纖維打印或者原位合成的形式進(jìn)行檢測(cè)，能夠?qū)?shù)萬(wàn)個(gè)DNA探針置于支持物體表層，并獲取相應(yīng)的DNA探針序列，再和標(biāo)記樣品雜交，以雜交信號(hào)對(duì)樣品進(jìn)行快速的檢測(cè)和判斷。在食品致病菌檢測(cè)中，基因芯片檢測(cè)技術(shù)能夠通過(guò)并行或者通量形式進(jìn)行檢測(cè)，僅一次實(shí)驗(yàn)，即可獲取完成檢測(cè)數(shù)據(jù)，操作簡(jiǎn)便、速度較快，可在短時(shí)間內(nèi)獲取檢測(cè)結(jié)果，而且其特異性較強(qiáng)、靈敏性較高。但是檢測(cè)設(shè)備、材料昂貴，檢測(cè)操作要求高。

1.2 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)

1.2.1 ELISA檢測(cè)技術(shù) ELISA檢測(cè)技術(shù)，即酶聯(lián)免疫吸附，又可稱為熒光酶標(biāo)免疫檢測(cè)技術(shù)，其主要將抗體吸附或者抗原吸附到固相載體中，并在固相載體上對(duì)免疫酶進(jìn)行染色，當(dāng)?shù)孜镲@色之后，通過(guò)定量或者定性形式，對(duì)有色產(chǎn)物量進(jìn)行分析，可明確樣品待檢測(cè)物的含量[2]。ELISA檢測(cè)技術(shù)集合了放射免疫與免疫熒光兩種檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，具有操作簡(jiǎn)便、靈敏性高、適用范圍廣、檢測(cè)迅速、成本低等應(yīng)用優(yōu)勢(shì)，能夠同時(shí)對(duì)數(shù)千份樣品進(jìn)行檢測(cè)和分析。隨著ELISA檢測(cè)技術(shù)不斷發(fā)展和優(yōu)化，其在食品衛(wèi)生安全中得到廣泛應(yīng)用，能夠?qū)瘘S色葡萄球菌、大腸埃希氏菌及沙門(mén)氏菌等進(jìn)行有效檢測(cè)。

1.2.2 MS檢測(cè)技術(shù) MS檢測(cè)技術(shù)，即免疫磁性微球檢測(cè)。由于很多食品樣品多以固液混合形式存在，常規(guī)檢測(cè)方法無(wú)法分離出食品中部分微生物，必須在免疫磁性微球分離作用下，才能快速將微生物分離出來(lái)。免疫磁性微球分離檢測(cè)技術(shù)主要是將特異性較強(qiáng)抗體偶聯(lián)于免疫磁性顆粒的表層，與實(shí)驗(yàn)樣板被檢測(cè)微生物特異性進(jìn)行有效結(jié)合，載有微生物免疫磁性顆粒能夠在外部磁場(chǎng)反應(yīng)條件下，慢慢聚集到磁極方向，將檢測(cè)樣板混合液去除，不僅能夠達(dá)到分離微生物作用，同時(shí)掌握微生物的密集程度。免疫磁性微球檢測(cè)分離技術(shù)能夠在大量混雜致病菌中，選擇性將被檢測(cè)微生物分離出來(lái)，使得微生物分離效果大大提高，檢測(cè)時(shí)間也有所縮短，在食品衛(wèi)生安全檢測(cè)中具有良好的應(yīng)用效果。

1.3 培養(yǎng)學(xué)檢測(cè)技術(shù)

1.3.1 干片檢測(cè)技術(shù) 干片檢測(cè)技術(shù)，即快速檢測(cè)試片，主要是將膠片、紙片或者紙膜作為微生物培養(yǎng)基的載體，把特定顯色物質(zhì)、培養(yǎng)基放置到載體上，通過(guò)對(duì)微生物生長(zhǎng)特性或者顯色反應(yīng)，以對(duì)食品中存在致病微生物進(jìn)行測(cè)定[3]。Forg研究者，采用快速紙片檢測(cè)方法，對(duì)大腸菌群進(jìn)行快速檢測(cè)，將原有檢測(cè)時(shí)間從72小時(shí)縮短至15小時(shí)，檢測(cè)程序得到簡(jiǎn)化，檢測(cè)成本也大大降低，對(duì)高分子、微生物及化學(xué)等集于一體檢測(cè)技術(shù)研究和發(fā)展起到有效的促進(jìn)作用。近幾年來(lái)，Petrifilm研究者，以濾紙作為載體檢測(cè)試片在食品微生物檢測(cè)中得到廣泛應(yīng)用，能夠?qū)φ婢?、大腸菌群及大腸桿菌等微生物進(jìn)行有效檢測(cè)[4]。

1.3.2 全自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù) 全自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù)主要是在電阻抗原基礎(chǔ)上，對(duì)微生物進(jìn)行有效的檢測(cè)及計(jì)數(shù)的一個(gè)系統(tǒng)。在培養(yǎng)微生物過(guò)程中，能夠把培養(yǎng)基內(nèi)大分子（如碳酸化合物或蛋白質(zhì)等）電惰性物質(zhì)轉(zhuǎn)變成為小分子（乳酸或氨基酸等）活性物質(zhì)，以降低培養(yǎng)微生物阻抗，使培養(yǎng)基內(nèi)電導(dǎo)性發(fā)生變化，并通過(guò)定量形式獲取微生物量[5]。全自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù)，能夠依據(jù)不同檢測(cè)需求，選擇不同培養(yǎng)基，以對(duì)樣品致病菌落總數(shù)進(jìn)行有效檢測(cè)，如酵母菌、乳酸菌及大腸菌群等，檢測(cè)時(shí)間不超過(guò)24小時(shí)，樣品勻液無(wú)需稀釋?zhuān)沂称肥艿轿⑸镂廴境潭仍礁撸瑱z測(cè)速度越快[6]。

1.3.3 ATP檢測(cè)技術(shù) ATP檢測(cè)技術(shù)在活性生物檢測(cè)中得到廣泛應(yīng)用，當(dāng)生物死亡之后，ATP將在兩個(gè)小時(shí)內(nèi)被分解[7]。所以，通過(guò)對(duì)樣品ATP濃度進(jìn)行測(cè)定，即可獲取活性菌群數(shù)量。熒光素酶能夠在ATP輔助下對(duì)D-熒光素產(chǎn)生氧化反應(yīng)，并形成熒光，熒光強(qiáng)度和ATP濃度在特定范圍內(nèi)，能夠形成一定的線性關(guān)系，然后使用發(fā)光光度計(jì)情況下，能夠?qū)Ρ粶y(cè)液體ATP量進(jìn)行檢測(cè)，若活性生物ATP量較為穩(wěn)定，熒光定量能夠清楚呈現(xiàn)出系統(tǒng)代謝活性細(xì)胞情況。熒光反應(yīng)檢測(cè)技術(shù)在HACCP關(guān)鍵控制點(diǎn)管理中具有重要作用，大大提高了控制點(diǎn)的檢測(cè)速度和效率，而且便攜式熒光光度計(jì)在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)中較為適用，不僅能夠極微量致病微生物水平進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)可以對(duì)食品生產(chǎn)加工條件進(jìn)行有效評(píng)估，對(duì)食品衛(wèi)生安全監(jiān)測(cè)具有重要意義。

1.4 傳感器檢測(cè)技術(shù)

1.4.1 光學(xué)檢測(cè)傳感器 光學(xué)檢測(cè)傳感器主要是將被檢測(cè)細(xì)胞放置在傳感器的表層，在厚度變化、光折射情況下，能夠?qū)ξ⑸镂⑿∽兓M(jìn)行測(cè)定[8]。現(xiàn)階段，光纖波導(dǎo)、共振鏡、及干擾儀等光學(xué)檢測(cè)傳感器在食品致病微生物檢測(cè)中已經(jīng)得到成功應(yīng)用。Watts等研究者，利用共振鏡對(duì)食品中的金黃色葡萄球菌進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定限能夠達(dá)到8×106cells/ml，檢測(cè)時(shí)間僅需5分鐘。Schneider等研究者，利用全內(nèi)反射測(cè)量方法，對(duì)沙門(mén)氏菌進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)靈敏性能夠達(dá)到5×108cfu/ml，檢測(cè)時(shí)間較短，為5分鐘。大量研究表明，光學(xué)檢測(cè)傳感器具有操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)速度快、檢測(cè)時(shí)間段、成本低等優(yōu)點(diǎn)，但是只能對(duì)存在熒光素微生物進(jìn)行檢測(cè)，靈敏性有待提高。

1.4.2 壓電免疫檢測(cè)傳感器 壓電免疫檢測(cè)傳感器主要是在金或者銀晶體的電極表層上設(shè)置一層固定抗原或者抗體活性物，當(dāng)液相在免疫反應(yīng)作用下，固定抗原或者抗體分子能夠樣品存在抗體或抗原進(jìn)行識(shí)別，然后與特異性進(jìn)行有效結(jié)合，可產(chǎn)生免疫混合物，在電極表明上沉積，使得電極表層負(fù)載發(fā)生變化[9]。在免疫反應(yīng)過(guò)程可作為被檢測(cè)晶體的振動(dòng)頻率變化量，通過(guò)變化量可獲取被測(cè)樣品含量。Koenig等研究者，利用免疫檢測(cè)傳感器對(duì)沙門(mén)氏菌進(jìn)行檢測(cè)，獲取線性范圍的達(dá)到了106至108cell/ml，檢測(cè)時(shí)間共需45分鐘。近年來(lái)，免疫檢測(cè)傳感器在活性生物檢測(cè)中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用，并成為了食品微生物檢測(cè)研究重點(diǎn)。

1.4.3 生物發(fā)光檢測(cè)傳感器 通過(guò)對(duì)熒光素酶轉(zhuǎn)入噬菌體進(jìn)行深入研究，生物發(fā)光檢測(cè)傳感器在微生物檢測(cè)中得到廣泛應(yīng)用。Folley-Thomas等研究者，利用TM4抗菌素對(duì)結(jié)核桿菌進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)靈敏性達(dá)到104cells/ml，檢測(cè)時(shí)間為兩個(gè)小時(shí)。Blasco等研究者，通過(guò)構(gòu)建靈敏性高生物傳感檢測(cè)系統(tǒng)，能夠?qū)Υ竽c桿菌、沙門(mén)氏菌等微生物進(jìn)行檢測(cè)，在整個(gè)檢測(cè)反應(yīng)中，噬菌體能夠?qū)⑽⑸锼拗鬟M(jìn)行分解，并通過(guò)生物發(fā)光傳感器，對(duì)檢測(cè)樣品釋放產(chǎn)生細(xì)胞容物內(nèi)ATP進(jìn)行測(cè)定，并依據(jù)菌體數(shù)量和ATP間形成的先行關(guān)系，可獲取微生物總數(shù)。生物發(fā)光檢測(cè)傳感器具有良好的特異性，能夠?qū)钚晕⑸锖退劳鑫⑸镞M(jìn)行鑒別，但是檢測(cè)時(shí)間性相對(duì)較長(zhǎng)，靈敏性相對(duì)較低[10]。

2 結(jié) 語(yǔ)

現(xiàn)階段，食品微生物檢測(cè)技術(shù)得到有效提高，并向著檢測(cè)程序簡(jiǎn)便、檢測(cè)精確度高、檢測(cè)效率高、自動(dòng)化檢測(cè)等方向發(fā)展，為食品安全檢測(cè)和管理提供重要技術(shù)支持。食品微生物檢測(cè)方法較多，各有各的優(yōu)勢(shì)，檢測(cè)人員應(yīng)該依據(jù)食品微生物檢測(cè)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)和要求選擇適宜檢測(cè)技術(shù)，或者將各種檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行有效的結(jié)合，以提高食品微生物檢測(cè)精確度，以保證食品衛(wèi)生安全管理有效性。

參考文獻(xiàn)

[1] 謝修志.生物技術(shù)在食品檢測(cè)方面的應(yīng)用[J].生物技術(shù)通報(bào)，2010，7（01）：87-88.

[2] 孫顯，李玉峰.食品微生物檢測(cè)技術(shù)[J].生命科學(xué)儀器，2009，5（05）：54-56.

[3] 林文輝.淺談食品微生物檢測(cè)方法的進(jìn)展[J].才智，2009，2（20）：34-35.

[4] 陳鵬云.淺談食品微生物檢測(cè)技術(shù)和方法[J].價(jià)值工程，2010，8（35）：90-92.

[5] 何建仁.試論食品微生物檢測(cè)技術(shù)新發(fā)展[J].科技資訊，2011，6（20）：78-79.

[6] 許子剛.淺談食品微生物檢驗(yàn)內(nèi)容與檢測(cè)技術(shù)分析[J].科技與企業(yè)，2012，4（07）：54-56.

[7] 楊全鳳.基因芯片技術(shù)在微生物檢測(cè)中的應(yīng)用研究[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，12（02）：43-44.

[8] 葉思霞，蔡美平，羅燕娜.食品微生物檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)（上半月刊），2009，3（19）：56-57.

篇4

關(guān)鍵詞：食品、微生物檢測(cè)、快速檢測(cè)技術(shù)

食品病原微生物檢測(cè)是保障食品安全的重要組成部分，依靠采用培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)、分離、生化鑒定及革蘭染色鏡檢等傳統(tǒng)檢測(cè)方法，對(duì)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員的專(zhuān)業(yè)技術(shù)、操作技能以及工作經(jīng)驗(yàn)要求極高，操作步驟復(fù)雜繁瑣，檢測(cè)周期長(zhǎng)，靈敏度低，準(zhǔn)確性差，容易出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果。近年來(lái)，微生物快速檢測(cè)技術(shù)發(fā)展迅速，運(yùn)用分子生物學(xué)、電子技術(shù)、生物化學(xué)、免疫學(xué)等技術(shù)對(duì)微生物進(jìn)行分離、鑒定和計(jì)數(shù)，與傳統(tǒng)檢測(cè)方法相比，更快、更方便、更靈敏、更準(zhǔn)確。

一、主要食品微生物快速檢測(cè)技術(shù)

1 分子生物學(xué)技術(shù)

（1）PCR技術(shù)

通過(guò)大量復(fù)制目的菌的高度保守的一段或幾段特異性DNA并確認(rèn)這些DN段的大小來(lái)完成檢測(cè)，如果樣品中存在目的菌，就能復(fù)制出有關(guān)特異性DN段，而復(fù)制特異性DN段靠聚合酶鏈反應(yīng)―PCR技術(shù)。

該技術(shù)已大量運(yùn)用到食品微生物檢測(cè)領(lǐng)域，并形成標(biāo)準(zhǔn)化，如SN/T 1632.2-2005《奶粉中阪崎腸桿菌檢驗(yàn)方法 第3部分:熒光PCR方法》、DIN 10135:1999《沙門(mén)氏菌聚合酶連鎖反應(yīng)（PCR）檢驗(yàn)方法、ISO 20837:2006《食品和動(dòng)物飼料微生物學(xué)―聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測(cè)食源病原體―定性檢測(cè)用樣品的制備》

目前利用PCR技術(shù)檢測(cè)病原菌的商品化儀器有被AOAC、USDA-FSIS、Health Canada、AFNOR等權(quán)威機(jī)構(gòu)認(rèn)可的BAX@全自動(dòng)病原菌檢測(cè)系統(tǒng)，可檢測(cè)沙門(mén)氏菌、大腸桿菌O157、單增李斯特菌等致病菌，此外還有RiboPrinter@微生物鑒定系統(tǒng)，可鑒定沙門(mén)氏菌、大腸桿菌O157、單增李斯特菌和阪崎腸桿菌等致病菌在內(nèi)的1400多種細(xì)菌。

在1996年由美國(guó)AB公司推出的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀，與常規(guī)PCR儀相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR產(chǎn)物污染、自動(dòng)化程度高，同時(shí)能對(duì)起始模板進(jìn)行準(zhǔn)確定量等特點(diǎn)。

（2）核酸探針技術(shù)

核酸探針是指帶有標(biāo)記的特異DN段。根據(jù)堿基互補(bǔ)原則，核酸探針能特異性地與目的DNA雜交，最后用特定的方法測(cè)定標(biāo)記物。探針標(biāo)記方式為放射性標(biāo)記、非放射性標(biāo)記，具有直觀、準(zhǔn)確等特點(diǎn)，基于核酸探針雜交的基因芯片技術(shù)，雖然其靈敏度與PCR技術(shù)相當(dāng)，但其具有高通量、多參數(shù)、高精確度和快速分析等特征，所以備受青睞。我國(guó)已將此技術(shù)引入到行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中來(lái)，如SN/T 1543-2005《食源性致病菌基因芯片鑒定方法》。

2 免疫學(xué)技術(shù)

（1）熒光抗體法

用熒光物質(zhì)標(biāo)記抗血清的抗體，即抗抗體。使用熒光顯微鏡觀察樣品中的目的菌-熒光標(biāo)記抗體結(jié)合物或目的菌-抗體-熒光標(biāo)記抗抗體結(jié)合物來(lái)判斷結(jié)果。在食品微生物檢測(cè)領(lǐng)域內(nèi)，國(guó)內(nèi)使用的較多是mini-VIDAS全自動(dòng)熒光酶標(biāo)免疫測(cè)試系統(tǒng)，該系統(tǒng)已被AOAC、AFNOR等權(quán)威機(jī)構(gòu)認(rèn)可，可檢驗(yàn)沙門(mén)氏菌、單增李斯特氏菌、大腸桿菌O157、葡萄球菌腸毒素等。

（2）免疫酶技術(shù)

以酶標(biāo)記抗體或抗抗體，抗原與酶標(biāo)記抗體，或抗原-抗抗結(jié)合物與酶標(biāo)記抗抗體特異性結(jié)合。根據(jù)酶反應(yīng)有色反應(yīng)的有無(wú)及其濃度，即可間接推測(cè)被檢抗原或抗體是否存在及其數(shù)量。常用酶技術(shù)分為固相免疫酶測(cè)定技術(shù)、免疫酶定位技術(shù)和免疫酶沉淀技術(shù)。在食品微生物檢驗(yàn)領(lǐng)域內(nèi)，國(guó)內(nèi)使用比較多的有Reveal@大腸桿菌O157：H7檢測(cè)系統(tǒng)、Reveal@沙門(mén)氏菌檢測(cè)系統(tǒng)及GeneQuence@李斯特氏菌檢測(cè)試劑盒、金黃色葡萄球菌乳膠凝集試劑盒等。

（3）免疫磁珠技術(shù)

用連接抗體的磁珠捕捉增菌液中的目的菌，然后將捕捉到的抗原即目的菌劃線于選擇性平板，觀察菌落。或用熒光或酶標(biāo)記的抗抗體進(jìn)行檢測(cè)?；蛴镁酆厦告?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)。此技術(shù)在ISO 166654:2001《食品和動(dòng)物飼料微生物學(xué)―大腸桿菌O157基準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》上得到了應(yīng)用。目前可利用該技術(shù)對(duì)沙門(mén)氏菌、大腸桿菌0157、大腸桿菌0145、大腸桿菌O111等進(jìn)行測(cè)試。

（4）免疫層析技術(shù)

該技術(shù)是一種膜固相免疫測(cè)定技術(shù)。滴加在膜一端的樣品溶液受膜的毛細(xì)管作用向另一端移動(dòng)，猶如層析一般。移動(dòng)過(guò)程中被分析物與固定于膜上某一區(qū)域的抗原或抗體結(jié)合而被固相化，無(wú)關(guān)物質(zhì)則越過(guò)該區(qū)域而被分離，然后通過(guò)標(biāo)記物的顯色來(lái)判定實(shí)驗(yàn)結(jié)果。以膠體金為標(biāo)記物的實(shí)驗(yàn)稱為膠體金免疫層析技術(shù)，該技術(shù)具有簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確和無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，可對(duì)食品中大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、布氏桿菌、霍亂弧菌等進(jìn)行檢測(cè)。

（5）其它免疫技術(shù)

細(xì)菌直接計(jì)數(shù)法主要包括流式細(xì)胞儀(flow cytometry，F(xiàn)CM)和固相細(xì)胞計(jì)數(shù)(solid phasecytometry，SPC)法。FCM通常以激光作為發(fā)光源，經(jīng)過(guò)聚焦整形后的光束垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。光散射信號(hào)基本上反映了細(xì)胞體積的大小；熒光信號(hào)的強(qiáng)度則代表了所測(cè)細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度，由此可通過(guò)儀器檢測(cè)散射光信號(hào)和熒光信號(hào)來(lái)估計(jì)微生物的大小、形狀和數(shù)量。流式細(xì)胞計(jì)數(shù)具有高度的敏感性，可同時(shí)對(duì)目的菌進(jìn)行定性和定量鑒定。目前已經(jīng)建立了細(xì)菌總數(shù)、致病性沙門(mén)氏菌、大腸埃希氏菌等的FCM檢驗(yàn)方法。

3.其它技術(shù)

即用型紙片法

3M公司的perrifilmTMPlate@系列微生物測(cè)試片，可分別檢測(cè)菌落總數(shù)、大腸菌群計(jì)數(shù)、霉菌和酵母計(jì)數(shù)。由RCP Scientific Inc公司開(kāi)發(fā)上市的Regdigel@系列，除上述項(xiàng)目外還有檢測(cè)乳桿菌、沙門(mén)氏菌、葡萄球菌的產(chǎn)品。3M公司生產(chǎn)的PF(Petrifilm)試紙還加入了染色劑、顯色劑，增強(qiáng)了菌落的目視效果，而且避免了熱瓊脂法不適宜受損細(xì)菌恢復(fù)的缺陷。霉菌快速檢驗(yàn)紙片，應(yīng)用于食品檢驗(yàn)中的霉菌具有操作簡(jiǎn)便，僅需36℃培養(yǎng)，不需要低溫設(shè)備；快速，僅需2d就可觀察結(jié)果，比現(xiàn)在的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法縮短3～5d，大大提高了工作效率。紙片法與國(guó)標(biāo)法在霉菌檢出率上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且菌落典型，易判定。

二、食品微生物快速檢測(cè)技術(shù)的局限性

快速檢測(cè)技術(shù)的評(píng)估結(jié)果表明，其對(duì)于某類(lèi)食品的性能優(yōu)于其他食品，很大程度上是由于食品成分干擾所致，有些食品成分對(duì)于快速檢測(cè)方法中所應(yīng)用的技術(shù)是比較麻煩的。例如在采用PCR技術(shù)時(shí)，食物中的高蛋白、高脂肪對(duì)Taq酶具有抑制作用，可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果假陰性。同時(shí)PCR操作過(guò)程要求嚴(yán)格，微量的外源性DNA進(jìn)入PCR后可以引起無(wú)限放大產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。

三、結(jié)束語(yǔ)

隨著某一快速檢測(cè)技術(shù)更加頻繁的使用，其好處與局限性同時(shí)變得更加明顯，使用者在選擇這些快速檢測(cè)技術(shù)時(shí)，應(yīng)考慮此技術(shù)的準(zhǔn)確性、特異性、實(shí)用性、穩(wěn)定性、靈敏度以及采用此技術(shù)的供應(yīng)價(jià)格、認(rèn)可程度和售后服務(wù)等因素，綜合判別后進(jìn)行選擇。

參考文獻(xiàn)：

[1]雷質(zhì)文，等.食品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理手冊(cè)[M].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2006.

[2]李志明，等.食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)學(xué)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2008.

[3]熊?chē)?guó)華，等.實(shí)時(shí)熒光PCR定量檢測(cè)食品中的單增李斯特菌［J］．中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2007,19（3）：248-250.

篇5

【關(guān)鍵詞】食品；微生物檢驗(yàn)；檢驗(yàn)內(nèi)容；檢測(cè)技術(shù)

一、食品微生物檢驗(yàn)的要求

1、操作人員和操作細(xì)節(jié)

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)聘請(qǐng)具有一定微生物學(xué)資質(zhì)的人來(lái)操作，并且要經(jīng)過(guò)考核合格后方能上崗。要求其具有較熟練的操作技能，強(qiáng)烈的質(zhì)量意識(shí)，并且嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，減少人為因素帶來(lái)的困擾。

操作要求：操作人員牢記無(wú)菌觀念，整個(gè)過(guò)程要求無(wú)菌操作，嚴(yán)格按照GB／T4789食品微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作。用無(wú)菌工具無(wú)菌操作取樣。按照 GB／T4789標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，得出實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2、檢測(cè)環(huán)境和設(shè)施設(shè)備

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)具有適宜微生物檢驗(yàn)進(jìn)行的設(shè)施設(shè)備條件，包括檢測(cè)設(shè)施及輔助設(shè)施，并且要特別注意特殊的設(shè)備要在特殊的環(huán)境下放置和操作。無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)應(yīng)符合GB19489的規(guī)定，符合無(wú)回路的原則。設(shè)有人流和物流通道。在時(shí)問(wèn)和空間上有效隔離各種檢測(cè)活動(dòng)。為保證檢測(cè)樣品的完整性，操作時(shí)應(yīng)按照規(guī)定的程序并采取預(yù)處理措施。

(1)紫外線消毒：在室溫下，220V，30W紫外燈下方垂直位置lm處的253.7nm紫外線輻射強(qiáng)度應(yīng)≥70μW／cm2，低于此值時(shí)應(yīng)更換，適當(dāng)數(shù)量紫外燈，確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。

(2)臭氧消毒：封閉無(wú)菌室內(nèi)，無(wú)人條件下，采用20mg／m3濃度的臭氧作用時(shí)間應(yīng)≥30min，消毒后室內(nèi)臭氧濃度≤0.2mg／m2時(shí)方可人內(nèi)作業(yè)。

(3)無(wú)菌室空氣滅菌效果驗(yàn)證方法(沉降法)：一般情況下無(wú)菌室面積≤30m2時(shí)從所設(shè)定的一條對(duì)角線上選取3點(diǎn)，即中心l點(diǎn)、兩端各距墻1米處各取一點(diǎn)；無(wú)菌室面積≥30m2時(shí)選取東、南、西、北、中點(diǎn)均距墻lm各取一點(diǎn)。

3、檢測(cè)設(shè)備和檢測(cè)藥品

(1)培養(yǎng)箱、水浴鍋、于熱滅菌箱和高壓滅菌鍋的安裝要求：在首次安裝時(shí)要校對(duì)溫度的穩(wěn)定性和一致性。記錄以上設(shè)施其溫度穩(wěn)定性達(dá)到平衡時(shí)所需要的時(shí)間。要求定期對(duì)以上設(shè)備進(jìn)行清潔和消毒。最好是使用感應(yīng)器來(lái)對(duì)運(yùn)轉(zhuǎn)循環(huán)情況進(jìn)行控制和監(jiān)控。

(2)藥品配置：培養(yǎng)基采用高壓濕熱滅菌法，121℃滅菌15分鐘。部分培養(yǎng)基如膽硫乳培養(yǎng)基則需采用煮沸滅菌法。對(duì)于熱敏感的培養(yǎng)基采用膜過(guò)濾法。

4、樣品的采集、運(yùn)輸和保存

采集具有代表性的樣品，并且樣品采集必須在無(wú)菌操作下進(jìn)行，以防止樣品受到外源性污染和細(xì)菌的生長(zhǎng)。采樣用具及包裝物必須是滅菌的。在樣品的運(yùn)輸和保存過(guò)程中應(yīng)避免日光照射，防止外來(lái)物的污染。采樣后，應(yīng)將樣品在接近原有貯存溫度條件下盡快送往實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。運(yùn)輸時(shí)應(yīng)保持樣品完整。一般不應(yīng)超過(guò)3小時(shí)。如不能及時(shí)運(yùn)送，應(yīng)在接近原有貯存溫度條件下貯存。

二、食品微生物檢驗(yàn)內(nèi)容和技術(shù)

食品微生物檢驗(yàn)的內(nèi)容

1、對(duì)食品污染程度指示菌的檢驗(yàn)。細(xì)菌總數(shù)又被稱為菌落總數(shù)，指食品及生活飲用水檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，所得1g或1mc檢樣中所含細(xì)菌菌落個(gè)數(shù)，是判斷食品及生活飲用水被污染程度的重要指標(biāo)。大腸菌群系指一群在37℃培養(yǎng)24h后能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)配、產(chǎn)氣、需氧或兼性厭氧的革蘭氏染色陰性無(wú)芽孢桿菌。其主要來(lái)源于人和牲畜的糞便，所以研究中經(jīng)常采用糞便污染指標(biāo)菌來(lái)評(píng)價(jià)生活飲用水及食品的衛(wèi)生質(zhì)量。

2、對(duì)食品中致病菌的檢測(cè)。在GB4789食品微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中，已明確規(guī)定某些微生物的數(shù)量，所以我們除要檢測(cè)食品污染程度指示菌，如菌落總數(shù)、大腸菌群(MPN)的測(cè)定外，還有致病菌如金黃色葡萄球菌、沙門(mén)氏菌和志賀氏菌等。

食品微生物檢驗(yàn)的技術(shù)

多年以來(lái)，對(duì)食品微生物的檢測(cè)，通常采用瓊脂平板培養(yǎng)法，共需2―3d才能完成。近幾年各國(guó)的許多機(jī)構(gòu)和學(xué)者都致力于快速檢測(cè)技術(shù)和方法的研究，已改進(jìn)和開(kāi)發(fā)了一些快速的檢測(cè)技術(shù)和方法，提高了食品微生物檢驗(yàn)的高效性、準(zhǔn)確性和可靠性，其中新方法有以下幾種。

1、采用電阻抗法。其原理是細(xì)菌在培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程中，將會(huì)使培養(yǎng)基中的火分電惰性物質(zhì)如碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂類(lèi)等，代謝為具有電活性的小分子物質(zhì)，其能增加培養(yǎng)基的導(dǎo)電性，從而使阻抗發(fā)生變化，所以我們可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基的電阻抗變化情況來(lái)判定細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)繁殖特性，即可檢測(cè)出相應(yīng)的細(xì)菌。該法已用于霉菌、大腸桿菌等細(xì)菌的檢測(cè)。

2、采用快速酶觸反應(yīng)及代謝產(chǎn)物的檢測(cè)。細(xì)菌在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中可合成和釋放某些特異性的酶，所以根據(jù)其特性來(lái)選用相對(duì)應(yīng)的底物和指示劑，并記錄反應(yīng)的結(jié)果。如美國(guó)3MPetiffilmTM微生物測(cè)試片可分別快速測(cè)定細(xì)菌總數(shù)、金黃色葡萄球菌等。

3、采用分子生物學(xué)技術(shù)。其又包括兩種技術(shù)：(1)核酸探針技術(shù)。根據(jù)堿基互補(bǔ)的原則，用特定的方法測(cè)定標(biāo)記物。(2)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)。其原理為通過(guò)加熱使雙鏈DNA經(jīng)裂解成兩條單鏈，成為引物和DNA聚合酶的模板；然后降低溫度，使寡聚核苷酸引物與DNA分子上的互補(bǔ)序列退火。一般情況下退火溫度越高，擴(kuò)增特異性越好。

4、采用免疫學(xué)方法檢測(cè)細(xì)菌抗原和抗體的技術(shù)。其有三種技術(shù)：(1)熒光抗體檢測(cè)技術(shù)(IFA)，包括直接法和間接法。直接熒光抗體檢測(cè)法是在檢樣上直接滴加已知特異性熒光標(biāo)記的抗血清，經(jīng)洗滌后在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。間接法是在檢樣上滴加已知細(xì)菌特異性抗血清，待作用后經(jīng)洗滌，再加入熒光標(biāo)記的抗體后在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。(2)免疫酶技術(shù)(EIA)，其是將抗原、抗體特異性反應(yīng)和酶的高效催化作用原理結(jié)合，是一種新穎且實(shí)用的免疫學(xué)分析技術(shù)。通過(guò)共價(jià)結(jié)合將酶與抗原或抗體結(jié)合，形成酶標(biāo)抗原或抗體，或通過(guò)免疫方法使酶與抗酶抗體結(jié)合，形成酶抗體復(fù)合物。(3)免疫磁珠分離法 (IMS)，即應(yīng)用抗體包被的免疫磁珠，用一個(gè)磁場(chǎng)裝置收集鐵珠。

5、采用儀器法。(1)微型全自動(dòng)熒光酶標(biāo)分析儀(Mini―VIDAS)，其主要采用具有優(yōu)異的敏感性和特異性的酶聯(lián)熒光技術(shù)(ELFA)，所測(cè)的熒光與抗體中抗原的含量成正比。(2)全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng) (Vietk―AMS)。其可以同時(shí)對(duì)60-~480個(gè)樣品進(jìn)行分析，并且鑒定時(shí)間只需2～3h，這是效率非常高的一個(gè)檢驗(yàn)系統(tǒng)，并且也是今后食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)發(fā)展的一個(gè)方向。

結(jié)束語(yǔ)

近年來(lái),食物中毒事件逐年增多，隨著科技發(fā)展和人們生活水平的提高，食品安全和衛(wèi)生已經(jīng)成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。國(guó)際衛(wèi)生組織非常關(guān)注食品微生物污染問(wèn)題，食品微生物檢驗(yàn)成為了食品質(zhì)量安全控制方面的重要技術(shù)之一，對(duì)控制微生物引起的食源性疾病具有重要作用，因而加強(qiáng)食品的安全檢測(cè)就顯得更加重要。

參考文獻(xiàn)

篇6

關(guān)鍵詞：肉類(lèi)食品 微生物 安全現(xiàn)狀 控制檢測(cè)技術(shù)

肉類(lèi)食品安全問(wèn)題關(guān)系到千家萬(wàn)戶老百姓的切身利益，已日益成為人民群眾普遍關(guān)注的社會(huì)焦點(diǎn)問(wèn)題。然而，近年來(lái)，社會(huì)上由致病性微生物導(dǎo)致的肉類(lèi)食品安全事件頻繁發(fā)生，造成人們對(duì)食品安全的憂慮與恐懼，嚴(yán)重威脅著人民群眾的生命健康安全。

1、肉類(lèi)食品安全

肉類(lèi)食品安全是指剔除不可接受的損害風(fēng)險(xiǎn)的情況，在規(guī)范條件下，施以科學(xué)合理的生產(chǎn)方式生產(chǎn)出來(lái)的優(yōu)質(zhì)、安全的肉類(lèi)食品。所謂“損害風(fēng)險(xiǎn)”指的是肉類(lèi)食品對(duì)人類(lèi)自身及社會(huì) “潛在的傷害”，這里主要包括不安全的肉類(lèi)食品可能導(dǎo)致人類(lèi)出現(xiàn)中毒、致病、致殘甚至致命等等嚴(yán)重情形。肉類(lèi)食品存在諸多的不安全因素，主要來(lái)自微生物性污染（包括沙門(mén)氏菌、葡萄球菌、大腸桿菌、肉毒梭菌等等）、化學(xué)性污染（包括農(nóng)藥殘留、食品添加劑等等）、食品新技術(shù)及非法生產(chǎn)等等，其中微生物性污染是導(dǎo)致我國(guó)肉類(lèi)食品不安全的重要因素。

2、我國(guó)肉類(lèi)食品微生物安全現(xiàn)狀及其影響因素

我國(guó)是肉類(lèi)食品的生產(chǎn)、加工、消費(fèi)大國(guó)，肉類(lèi)食品已經(jīng)成為人民群眾餐飲中不可或缺的美味產(chǎn)品，消費(fèi)者對(duì)于肉類(lèi)食品需求意愿的逐步加強(qiáng)，帶動(dòng)了肉類(lèi)食品行業(yè)的相關(guān)產(chǎn)品的發(fā)展，使得我國(guó)的肉類(lèi)食品企業(yè)行業(yè)規(guī)模不斷發(fā)展壯大。但是，我們同時(shí)也要注意和發(fā)現(xiàn)其中存在的一些問(wèn)題：從事肉類(lèi)食品加工的企業(yè)規(guī)模大小不一、生產(chǎn)技術(shù)水平高低不齊、質(zhì)量的管理控制能力優(yōu)劣參半等等原因都時(shí)刻要求肉類(lèi)食品企業(yè)在關(guān)注產(chǎn)品銷(xiāo)量的同時(shí)，更要注重產(chǎn)品的質(zhì)量安全，以確保取得消費(fèi)者對(duì)本企業(yè)產(chǎn)品的認(rèn)同，保證企業(yè)的健康穩(wěn)步的發(fā)展。近年來(lái)，我國(guó)發(fā)生的豬鏈球菌中毒事件、高致病性H5N1型禽流感、瘦肉精事件、生蛆門(mén)事件、亞硝酸鹽嚴(yán)重超標(biāo)、引起食源性疾病的微生物感染等肉類(lèi)食品安全事件，致使肉類(lèi)食品安全問(wèn)題成為了群眾普遍關(guān)注的焦點(diǎn)問(wèn)題。

污染我國(guó)肉類(lèi)食品源頭的不安全因素很多，但在肉制品中食源性致病菌和各種病毒造成的微生物性污染最為嚴(yán)重。其中需要嚴(yán)格防控的微生物病原體主要包括沙門(mén)氏菌、李斯特氏菌、出血性大腸桿菌O157：H7、豬鏈球菌以及其他腸道致病菌。雖然，目前全世界范圍內(nèi)對(duì)肉類(lèi)食品安全的微生物性污染控制有了很大的發(fā)展，但其中一些病原體的變異等可能出現(xiàn)的狀況仍需要高度關(guān)注。長(zhǎng)期以來(lái)，我國(guó)的食品衛(wèi)生質(zhì)量監(jiān)督部門(mén)對(duì)肉類(lèi)食品的檢查監(jiān)督非常嚴(yán)格，但由于肉類(lèi)食品的營(yíng)養(yǎng)豐富，十分適合致病微生物的繁衍，加上微生物污染的傳播途徑很多且不容易被察覺(jué)發(fā)現(xiàn)，從而導(dǎo)致了肉類(lèi)食品微生物安全事件的發(fā)生較為頻繁。概括來(lái)講，導(dǎo)致我國(guó)肉類(lèi)食品微生物安全的影響因素主要有以下幾個(gè)方面：畜禽屠宰環(huán)節(jié)存在多次感染微生物的機(jī)會(huì)，微生物可通過(guò)多種途徑和傳播媒介對(duì)肉類(lèi)表層造成污染。肉類(lèi)食品的加工過(guò)程中常常會(huì)發(fā)生微生物交叉感染，導(dǎo)致肉制品中的菌群數(shù)量超標(biāo)，容易滋生出病原菌，加速肉類(lèi)食品的腐爛變質(zhì)。肉類(lèi)食品在流通環(huán)節(jié)中如果沒(méi)有完整的冷鏈體系和健全的檢測(cè)體系，就會(huì)造成微生物的二次污染，從而影響到肉類(lèi)食品的安全。為了保證肉類(lèi)食品的微生物安全，必須加強(qiáng)對(duì)微生物變異及未知病原體的觀察和研究，提高檢測(cè)和控制技術(shù)以應(yīng)對(duì)有可能突發(fā)的肉類(lèi)食品安全危害。

3、引起我國(guó)肉類(lèi)食品安全事件的常見(jiàn)微生物

3.1 大腸桿菌

大腸桿菌，學(xué)名 “大腸埃希菌”， 屬腸道桿菌大類(lèi)中的一種，經(jīng)常存在于人和動(dòng)物的腸道中，數(shù)量非常多，主要寄生于大腸內(nèi)，是一種兩端鈍圓、能運(yùn)動(dòng)、無(wú)芽孢的革蘭氏陰性短桿菌。它是和我們的日常生活關(guān)系結(jié)合得比較密切的一類(lèi)細(xì)菌，結(jié)構(gòu)比較簡(jiǎn)單、易于培養(yǎng)，也是生物學(xué)上十分重要的實(shí)驗(yàn)材料之一。在正常情況下，大多數(shù)大腸桿菌是比較安分守己的，不會(huì)對(duì)人類(lèi)的身體健康造成任何傷害，反之還能夠抵御其他致病菌的襲擊，幫助合成維生素B和K。只有當(dāng)身體出現(xiàn)免疫力下降，腸道長(zhǎng)期缺乏刺激等特殊情況時(shí)，這些大腸桿菌才會(huì)侵入人類(lèi)體內(nèi)一些部位，比如膽囊、尿道、膀胱等處，極易引起感染，導(dǎo)致出現(xiàn)胃痛、嘔吐、腹瀉和發(fā)熱等不適癥狀。因此，大部分大腸桿菌通常被看作機(jī)會(huì)型致病菌，可以經(jīng)過(guò)帶菌人的手、食物和日常生活用品進(jìn)行廣泛傳播，還可以經(jīng)過(guò)空氣或者水源進(jìn)行傳播，帶菌肉類(lèi)食品也會(huì)由于生熟交叉污染、熟后污染或者加熱不夠徹底等引起一系列的中毒安全事件。

3.2 李斯特氏菌

李斯特氏菌是一種能夠促使人畜共同患病的病原菌，廣泛存在于自然環(huán)境中，屬于革蘭氏陽(yáng)性菌類(lèi)球型桿菌，能夠引起敗血癥、腦膜炎、心內(nèi)膜炎、流產(chǎn)等病癥，對(duì)人類(lèi)生命健康安全具有嚴(yán)重的威脅性。然而，通過(guò)加熱能夠消滅李斯特氏菌，高溫肉制品不會(huì)產(chǎn)生李斯特氏菌，不需加熱的即食類(lèi)低溫肉制品必須控制李斯特氏菌的產(chǎn)生。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，肉類(lèi)、蛋類(lèi)、禽類(lèi)、海產(chǎn)品、乳制品、蔬菜等等都是李斯特氏菌的感染源。在自然環(huán)境中時(shí)時(shí)處處都存在著李斯特氏菌，而且在大多數(shù)食品中也都能找到李斯特氏菌的蹤跡。因此，在肉類(lèi)食品衛(wèi)生安全微生物檢驗(yàn)中，必須加以引起足夠重視。

3.3 沙門(mén)氏菌

沙門(mén)氏菌屬于腸桿菌科，是革蘭氏陰性腸道桿菌的一種。它天然存在于鳥(niǎo)類(lèi)、哺乳類(lèi)、爬行類(lèi)和兩棲類(lèi)動(dòng)物的腸道內(nèi)，帶菌率較高，是引起食物中毒的常見(jiàn)病原菌。沙門(mén)氏菌的主要傳播媒介是肉類(lèi)產(chǎn)品、家禽和蛋奶類(lèi)制品，感染主要是由這種病菌的血清型和食用者的身體狀況決定的，小孩、老人及免疫力低下的人群是受威脅最嚴(yán)重的。沙門(mén)氏菌感染食物的原因主要有：生熟食品未進(jìn)行詳細(xì)分類(lèi)而造成交叉性感染；病畜或者病禽的糞便污染了食物；帶菌者在生產(chǎn)食物的過(guò)程中污染了食物等等，都會(huì)導(dǎo)致發(fā)生不同程度的食物中毒安全事故。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在全世界各國(guó)的細(xì)菌性食物中毒中，沙門(mén)氏菌引起的食物中毒往往名列榜首。

3.4 金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌是葡萄球菌屬中的一種典型病原菌，廣泛存在于空氣、水、灰塵以及人和動(dòng)物的排泄物中，可致使許多食品受到感染，其引起的食物中毒感染幾率僅次于大腸桿菌。人畜化膿感染部位常常成為金黃色葡萄球菌的污染源，可造成局部化膿感染，甚至引發(fā)肺炎、心包炎、敗血癥、和膿毒癥等傳染疾病。金黃色葡萄球菌自身產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶是決定其致病力強(qiáng)弱的主要因素，它可通過(guò)以下途徑污染食品：食品加工人員或銷(xiāo)售人員帶菌可造成食品污染；食品在加工前本身帶菌或在加工過(guò)程中受到了污染，產(chǎn)生了腸毒素，引起食物中毒；奶牛患化膿性乳腺炎或禽畜局部化膿時(shí)，對(duì)肉體其他部位的污染。

3.5 志賀氏菌

志賀氏菌和大腸桿菌都屬于腸桿菌科，其形態(tài)與一般腸道桿菌無(wú)明顯區(qū)別，為革蘭氏陰性桿菌，能分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。志賀氏菌在外界環(huán)境中的生存力比較差，一般在潮濕土壤中僅能存活34天，對(duì)高溫和化學(xué)消毒劑很敏感，很容易產(chǎn)生耐藥性。志賀氏菌在人員大量集中擁擠的地方和不衛(wèi)生條件下能迅速傳播，常為食物爆發(fā)型或經(jīng)水傳播病。它主要通過(guò)消化道途徑進(jìn)行傳播，是引起細(xì)菌性痢疾的主要病原菌。

3.6 肉毒梭菌

肉毒梭菌屬于厭氧性梭狀芽胞桿菌屬，在厭氧情況下生長(zhǎng)，在正常加熱溫度下存活，容易形成芽胞，芽胞比繁殖體寬，呈梭狀，新鮮培養(yǎng)基的革蘭氏染色為陽(yáng)性，產(chǎn)生劇烈細(xì)菌外毒素，即肉毒毒素。這些肉毒霉素容易引起人和動(dòng)物的肉類(lèi)中毒，導(dǎo)致肉毒梭菌的致病性。肉毒梭菌廣泛存在于自然界中，是從土壤、水、蔬菜、肉奶制品、海洋沉積物、魚(yú)類(lèi)腸道、蟹和貝類(lèi)的腮和內(nèi)臟中分離出來(lái)的，極易被人和動(dòng)物所感染，引起腹瀉、嘔吐、頭腦眩暈、呼吸和吞咽困難等等癥狀，是致死性最高的病原體之一。肉毒梭菌常見(jiàn)于真空包裝的罐裝食品或半加工的食品中，一般通過(guò)高溫加熱殺死芽胞或者改變?nèi)忸?lèi)食品的狀況抑制其產(chǎn)生肉毒毒素等來(lái)控制肉毒梭菌的擴(kuò)散。

4、我國(guó)肉類(lèi)食品中致病性微生物的檢測(cè)技術(shù)

4.1 食源性致病微生物的傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)

食源性致病菌的傳統(tǒng)檢測(cè)方法包括微生物形態(tài)和培養(yǎng)特性評(píng)價(jià)，根據(jù)不同微生物在形態(tài)結(jié)構(gòu)上的不同從而對(duì)微生物進(jìn)行區(qū)別和鑒定，由于不同微生物在同種培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖形成的菌落特征差異很大，而同種細(xì)菌的培養(yǎng)特征在同等條件下具有一定的穩(wěn)定性，可以利用此點(diǎn)不同之處對(duì)不同微生物進(jìn)行區(qū)別鑒定，微生物培養(yǎng)特性的觀察也是微生物檢驗(yàn)鑒別中的重要組成內(nèi)容。傳統(tǒng)檢測(cè)方法包括前制作標(biāo)本、選擇性增菌、挑選單個(gè)可疑菌落、鏡檢以及血清學(xué)試驗(yàn)等步驟，具有操作繁瑣、檢測(cè)周期長(zhǎng)、工作量很大且得到的結(jié)果準(zhǔn)確性較低等缺點(diǎn)。目前，人們?cè)谌忸?lèi)食品微生物安全快速檢測(cè)技術(shù)上投入了大量的精力，主要有以下幾種方法進(jìn)行對(duì)肉類(lèi)食品中的致病性微生物進(jìn)行檢測(cè)。

4.2 生物傳感技術(shù)

隨著生物工程及各種科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展、彼此間相互滲透、進(jìn)而形成了生物傳感技術(shù)。目前， 主要用于食品毒素檢測(cè)的生物傳感是通過(guò)以表面等離子激元共振生物傳感技術(shù)應(yīng)用為主的光學(xué)生物傳感器對(duì)肉類(lèi)食品中的各種毒素進(jìn)行檢測(cè)。表面等離子激元共振生物傳感器把受體固定在金屬膜上，利用信號(hào)識(shí)別顆粒譜峰對(duì)金屬膜表面上的電解質(zhì)變化較為敏感的特性產(chǎn)生的表面等離子激元共振現(xiàn)象來(lái)檢測(cè)受體和液相配體之間特異性結(jié)合的情況。信號(hào)識(shí)別顆粒檢測(cè)存在有一些缺陷，如對(duì)特異的靶物質(zhì)和金屬膜芯片表面其他樣本的非特異交叉反應(yīng)物無(wú)法進(jìn)行區(qū)分辨別；同時(shí)分析物質(zhì)的種類(lèi)個(gè)數(shù)少于四種；還有在受體發(fā)生點(diǎn)突變、功能活性變化或者是化學(xué)改變的時(shí)候，SRP無(wú)法將其與完整的分析物區(qū)分開(kāi)來(lái)。雖然SRP檢測(cè)方法存在諸多缺陷，但它作為一種使用簡(jiǎn)單、快速和行之有效的檢測(cè)技術(shù)方法在食品安全領(lǐng)域仍然得到了廣泛的推廣和使用。

4.3 基因芯片技術(shù)

基因芯片技術(shù)作為一項(xiàng)新型的生物技術(shù)誕生于二十世紀(jì)末，它的基本原理就是將各種基因寡核昔酸點(diǎn)樣于基因芯片表面，然后微生物樣品DNA經(jīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增后制備成熒光標(biāo)記探針，再通過(guò)其與芯片上的寡核昔酸點(diǎn)雜交，最后通過(guò)掃描儀定量和分析熒光分布模式來(lái)確定檢測(cè)樣品是否存在某些特異微生物。基因芯片技術(shù)理論上可以檢測(cè)各種介質(zhì)當(dāng)中的微生物，在一次實(shí)驗(yàn)中檢出所有潛在的致病菌，也可以用同一張芯片檢測(cè)某一致病原的各種遺傳學(xué)指標(biāo)，從而研究復(fù)雜微生物群落的基因表達(dá)情況?；蛐酒夹g(shù)與傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法相比，具有特異性強(qiáng)、敏感性高、操作簡(jiǎn)單便捷、一次實(shí)驗(yàn)可以得出全部結(jié)果等優(yōu)點(diǎn)，因而在致病原分析檢測(cè)方面有著良好的的未來(lái)發(fā)展前景。但是基因芯片技術(shù)也有著自身的一些缺點(diǎn)：基因芯片檢測(cè)對(duì)操作人員的專(zhuān)業(yè)技術(shù)水平要求較高，極大的限制了其普及應(yīng)用；樣品制備和標(biāo)記工作繁重、過(guò)程復(fù)雜，由于樣品放映過(guò)程中極易受到污染會(huì)影響信噪比的檢測(cè)情況；沒(méi)有統(tǒng)一的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)且需要專(zhuān)門(mén)的儀器設(shè)備，檢測(cè)費(fèi)用昂貴，造成該項(xiàng)技術(shù)在國(guó)內(nèi)很難推廣。

4.4多重PCR技術(shù)

多重PCR是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型PCR擴(kuò)增技術(shù)， 以其特異性強(qiáng)、靈敏度高和快速準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)在食品微生物檢測(cè)領(lǐng)域得以廣泛應(yīng)用。多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)其工作原理與常規(guī)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)相同，只是在同一反應(yīng)體系中加入一對(duì)以上的特異性引物，如果存在與各引物對(duì)特異性互補(bǔ)的模板，則可同時(shí)在同一反應(yīng)管中擴(kuò)增出一條以上的目前的DN段，采用這一技術(shù)可同時(shí)檢測(cè)多種病原微生物。這種方法減少了操作步驟及試劑，保留了常規(guī)PCR的特異性與敏感性，具有高效性、系統(tǒng)性和經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便性等特色，可以實(shí)現(xiàn)一次擴(kuò)增的同時(shí)檢測(cè)多種微生物的目的。但是多重PCR技術(shù)存在擴(kuò)增效率不高、敏感性偏低；出現(xiàn)引物干擾等缺點(diǎn)，有待進(jìn)一步完善該項(xiàng)技術(shù)手段，從而在肉類(lèi)食品微生物安全方面進(jìn)行推廣和應(yīng)用。

肉類(lèi)食品的安全問(wèn)題是各國(guó)政府和人民群眾關(guān)注的社會(huì)焦點(diǎn)問(wèn)題之一，解決肉類(lèi)食品安全問(wèn)題，加快致病性微生物的控制檢測(cè)技術(shù)研究可以對(duì)食源性疾病的發(fā)生和傳播進(jìn)行有效地預(yù)防與控制，還能避免全球范圍內(nèi)食源性疾病的流行，促進(jìn)世界各國(guó)在肉類(lèi)食品微生物安全方面的技術(shù)交流和科研合作。世界各國(guó)通過(guò)建立健全肉類(lèi)食品法規(guī)、加強(qiáng)肉類(lèi)食品檢驗(yàn)力度和提高肉類(lèi)食品中致病性微生物的快速檢測(cè)技術(shù)來(lái)加強(qiáng)對(duì)肉類(lèi)食品的安全監(jiān)控，確保肉類(lèi)食品的安全與出口貿(mào)易。

參考文獻(xiàn)：

[1]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn).北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004

[2]王華，塔莉，耿建暖等.從微生物指標(biāo)中看我國(guó)肉類(lèi)食品安全狀況[J].中國(guó)環(huán)境管理干部學(xué)院學(xué)報(bào)，2008（1） ：80-82

[3]張建民，楊瑞軍，金莞爾等.衢州市2007年熟肉制品微生物學(xué)檢驗(yàn)監(jiān)測(cè)分析[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008，18（8）：1593-1594

篇7

關(guān)鍵詞：現(xiàn)場(chǎng)教學(xué) 微生物 課程開(kāi)發(fā)

《微生物分析檢測(cè)技術(shù)》是包頭輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院工業(yè)分析與檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)開(kāi)設(shè)的一門(mén)專(zhuān)業(yè)課程，是從事分析化驗(yàn)工作人員所必備的專(zhuān)業(yè)知識(shí)。傳統(tǒng)的教學(xué)方法是以課堂講授為主，學(xué)生實(shí)習(xí)、實(shí)訓(xùn)為輔的教學(xué)方法，這樣就造成了學(xué)生對(duì)于學(xué)習(xí)這門(mén)課程的意義缺乏認(rèn)識(shí)，學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性不高，即使掌握了一些理論知識(shí)，也不可能對(duì)其在生產(chǎn)實(shí)踐中的作用有較深刻的理解。而現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法，可以很好的規(guī)避這些矛盾，學(xué)生不僅能較容易地學(xué)好理論知識(shí)，而且能較早的接觸和體驗(yàn)到實(shí)際工作場(chǎng)地和工作內(nèi)容。

1 《微生物分析檢測(cè)技術(shù)》課程中應(yīng)用現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法的必要性

在職業(yè)教育中，培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手和應(yīng)用能力是非常重要的，針對(duì)于《微生物分析檢測(cè)技術(shù)》這樣一門(mén)實(shí)踐性很強(qiáng)的課程，實(shí)施現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法無(wú)疑是最佳的選擇。第一，現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法突出教學(xué)的現(xiàn)實(shí)性，能引起學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，使學(xué)生積極主動(dòng)地融入教學(xué)過(guò)程中，教師不再直接告訴學(xué)生如何去做，而是讓學(xué)生通過(guò)已經(jīng)學(xué)過(guò)的知識(shí)，去分析問(wèn)題、解決問(wèn)題，使理論和時(shí)間有機(jī)的結(jié)合起來(lái)。第二，現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法實(shí)現(xiàn)了以學(xué)生為主體，改變傳統(tǒng)教學(xué)教學(xué)方法中始終以教師為主導(dǎo)的現(xiàn)狀，在現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)環(huán)境中，學(xué)生通過(guò)教師的引導(dǎo)分析問(wèn)題，提出解決方案，始終處于主導(dǎo)地位。第三，現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法充分調(diào)動(dòng)了教學(xué)的互動(dòng)性，整個(gè)教學(xué)過(guò)程始終處于動(dòng)態(tài)之中，改變傳統(tǒng)教學(xué)時(shí)間和空間的制約，實(shí)現(xiàn)師生的雙向互動(dòng)，提高學(xué)生的溝通和交流的能力，并且很好的學(xué)習(xí)并踐行了團(tuán)隊(duì)精神。第四，現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法完善了對(duì)學(xué)生的評(píng)價(jià)，現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)中，對(duì)學(xué)生最終成績(jī)的評(píng)定體現(xiàn)在三個(gè)方面，分別是理論考試、技能考試、平時(shí)表現(xiàn)成績(jī)?nèi)齻€(gè)部分，能對(duì)學(xué)生的綜合表現(xiàn)給予全面的評(píng)價(jià)。

2 《微生物分析檢測(cè)技術(shù)》課程中應(yīng)用現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法的條件

現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法與傳統(tǒng)的教學(xué)在實(shí)施過(guò)程中有很大的不同，因此實(shí)施現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法必須具備相應(yīng)的條件。第一，師資條件，從事現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法的教師首先要具有良好的職業(yè)操守；要具有較強(qiáng)的理論基礎(chǔ)，并且實(shí)踐動(dòng)手能力和綜合能力必須過(guò)硬，同時(shí)最好有在企業(yè)的工作經(jīng)驗(yàn)。第二，配套的教學(xué)環(huán)境，現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法打破了傳統(tǒng)的教學(xué)模式，教師不再是站在講臺(tái)上授課，學(xué)生也不是坐在教室里一味的聽(tīng)，而是教室與學(xué)生同時(shí)進(jìn)入企業(yè)或仿真實(shí)訓(xùn)基地，使學(xué)生對(duì)陌生的專(zhuān)業(yè)知識(shí)有一個(gè)感性的認(rèn)知，所以教學(xué)環(huán)境的選擇和建設(shè)是非常重要的。第三，合適的教材，現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法改變了傳統(tǒng)的章節(jié)式的教學(xué)內(nèi)容，而是以典型的工作任務(wù)為單元進(jìn)行，所以合適的教材也是必備條件之一。

3 《微生物分析檢測(cè)技術(shù)》課程中應(yīng)用現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法的實(shí)施效果

我包頭輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院工業(yè)分析與檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)于2003年開(kāi)始對(duì)《微生物分析檢驗(yàn)技術(shù)》這門(mén)課程實(shí)施教學(xué)改革，通過(guò)實(shí)踐證明，現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法直觀、生動(dòng)，與理論教學(xué)相輔相成，取得了良好的效果。第一，課堂氣氛明顯改善，學(xué)習(xí)熱情顯著增強(qiáng)，現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法實(shí)現(xiàn)了邊做邊學(xué)的教學(xué)模式，使學(xué)習(xí)環(huán)境變得靈活寬松了，學(xué)習(xí)內(nèi)容與實(shí)踐貼近，更加生動(dòng)有趣了，師生間的互動(dòng)明顯增強(qiáng)，師生關(guān)系更加融洽了。第二，學(xué)生的動(dòng)手能力明顯提高，學(xué)習(xí)成績(jī)顯著改善，通過(guò)具體的操作訓(xùn)練，提高了學(xué)生對(duì)各項(xiàng)微生物分析檢測(cè)技術(shù)的掌握程度，更好地體現(xiàn)了高職教育的培養(yǎng)目標(biāo)。第三，團(tuán)隊(duì)精神明顯增強(qiáng)，協(xié)作意識(shí)顯著提升，現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法中學(xué)生的學(xué)習(xí)與實(shí)踐均以小組形式進(jìn)行，通過(guò)無(wú)數(shù)次的討論、爭(zhēng)辯以及合作，團(tuán)隊(duì)精神和協(xié)作意識(shí)不知不覺(jué)的在學(xué)生心中生根了。

4 結(jié)語(yǔ)

經(jīng)過(guò)一年的教學(xué)實(shí)踐，雖然現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法在《微生物分析檢測(cè)技術(shù)》課程教學(xué)中的應(yīng)用取得了預(yù)期的教學(xué)效果。但在今后的教學(xué)實(shí)踐中還要進(jìn)一步加大投入，組織教師編寫(xiě)適合的教材，完善教學(xué)現(xiàn)場(chǎng)所需的各種儀器設(shè)備，創(chuàng)造更好的現(xiàn)場(chǎng)條件以取得更好的現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)效果。

參考文獻(xiàn)：

[1]魯?shù)裸y.現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)的三大要領(lǐng)[J].教學(xué)與管理，2001（1）：51-52.

[2]浙江行政學(xué)院課題組，劉振華.現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法研究[J].天津行政學(xué)院學(xué)報(bào)，2008（05）.

[3]周永.基于校企對(duì)接的現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)法在專(zhuān)業(yè)課程教學(xué)中的應(yīng)用[J].長(zhǎng)春理工大學(xué)學(xué)報(bào)，2013（01）.

篇8

【關(guān)鍵詞】水污染；生物監(jiān)測(cè)；檢測(cè)方法

一、水污染的生物監(jiān)測(cè)原理和優(yōu)點(diǎn)

1.水污染生物監(jiān)測(cè)的原理

在某種前提條件下，水生生物群落及水的環(huán)境有著相互關(guān)聯(lián)并且有著相互制約的現(xiàn)象，保持著非常自然的、暫時(shí)性的均衡體系。水環(huán)境中注入的污染物質(zhì)，必將會(huì)作 用于生物本身和其種群或者其群落，影響到生態(tài)系統(tǒng)的固有生物種群其數(shù)量和物種組成與及其更多特點(diǎn)、固有特點(diǎn)、生產(chǎn)力和生理狀況等，使某些水生生物逐步消 失，然而在別的某些水生生物卻能夠繼續(xù)生長(zhǎng)下去，其本身和其種群的數(shù)量逐步增加。運(yùn)用水質(zhì)檢測(cè)技術(shù)儀器監(jiān)測(cè)水污程度，從這種變化的水污染生物體現(xiàn)，得出水 環(huán)境質(zhì)量的變化，這就是水污生物監(jiān)測(cè)概念和依據(jù)。

生物監(jiān)測(cè)是指利用水生生物個(gè)體、種群或群落對(duì)水體污染或變化所產(chǎn)生的反應(yīng)來(lái)判斷水體污染狀況的一種水體污染監(jiān)測(cè)方法。生物與環(huán)境相互作用，相互影響，環(huán)境 的改變能影響生物的生長(zhǎng)和生活習(xí)性，直至改變生理功能；生物的存在也能影響和改變環(huán)境，如生物的攝取能量、新陳代謝等。生物與其環(huán)境的這種統(tǒng)一性和協(xié)同進(jìn) 化是環(huán)境質(zhì)量生物監(jiān)測(cè)的生物學(xué)基礎(chǔ)。

2.水污染生物監(jiān)測(cè)的優(yōu)點(diǎn)

總的來(lái)說(shuō)，生物監(jiān)測(cè)具有敏感性、富集性、長(zhǎng)期性和綜合性等特點(diǎn)，具有一定的優(yōu)越性。水污染生物監(jiān)測(cè)有自身的特點(diǎn)：

①監(jiān)測(cè)功能多樣化。由于可以使用水污染監(jiān)測(cè)的生物種類(lèi)很多，加上每種生物對(duì)不同污染物都能產(chǎn)生反應(yīng)，并且表現(xiàn)不同的癥狀，因此監(jiān)測(cè)功能強(qiáng)大。

②監(jiān)測(cè)污染狀況客觀。發(fā)揮水污染監(jiān)測(cè)功能的生物一般生活在固定的區(qū)域，且有一個(gè)穩(wěn)定的時(shí)期，與理化監(jiān)測(cè)相比，更能把某一水域的長(zhǎng)期污染狀況客觀地反映出來(lái)。

③監(jiān)測(cè)結(jié)果可靠。某些監(jiān)測(cè)生物對(duì)一些污染物非常敏感，它們能夠?qū)δ切┻B精密儀器都無(wú)法檢測(cè)的微量污染物產(chǎn)生反應(yīng)，并表現(xiàn)出相應(yīng)的受損傷的效應(yīng)

④便于綜合評(píng)價(jià)。理化監(jiān)測(cè)只能檢測(cè)特定條件下水環(huán)境中污染的類(lèi)別和含量等，而生物監(jiān)測(cè)可以反映出多種污染物在自然條件下對(duì)生物的綜合影響，從而可以更加客觀、全面地評(píng)價(jià)水環(huán)境。

⑤監(jiān)測(cè)成本低。理化監(jiān)測(cè)使用的監(jiān)測(cè)儀器涉及維修和保養(yǎng)，而生物監(jiān)測(cè)不涉及這些工作，因此監(jiān)測(cè)成本較低。

二、水污染生物監(jiān)測(cè)技術(shù)

1.運(yùn)用指示生物在水體里出現(xiàn)或者消失及其數(shù)量有多少的辦法監(jiān)測(cè)水質(zhì)

在許木啟的實(shí)驗(yàn)里，運(yùn)用了白洋淀水體里的浮游動(dòng)物群種其變化來(lái)判斷其水體的污染程度和自凈能力。其實(shí)驗(yàn)的最終結(jié)果是府河D白洋淀的水體從上游至下游中，其 浮游動(dòng)物的耐污種類(lèi)逐步減少，而廣布型種類(lèi)逐步增多，而其下游眾多正常水體卻出現(xiàn)了浮游動(dòng)物種類(lèi)均勻分布的現(xiàn)象。同一時(shí)間，原生動(dòng)物在上游的鞭毛蟲(chóng)一直到 中游卻出現(xiàn)了纖毛蟲(chóng)。然而，下游卻發(fā)現(xiàn)眾多平常分布在潔凈型水體的種類(lèi)。這一來(lái)，表示府河D白洋淀的水體由上游一直到下游水體其污染程度在不斷減少，河流 水體擁有顯著的而且比較穩(wěn)定的自凈功能。

2.運(yùn)用水生生物群落布局的變化來(lái)監(jiān)測(cè)水質(zhì)

在蔣昭鳳的實(shí)驗(yàn)中，使用底棲動(dòng)物的變化來(lái)評(píng)估湘江水質(zhì)污染情況，最后答案發(fā)現(xiàn)湘江的支流底棲動(dòng)物有大型無(wú)脊椎動(dòng)物種及多類(lèi)性指數(shù)，其物種由上游至下游走向 呈現(xiàn)減少情況，從這個(gè)實(shí)驗(yàn)看來(lái)，毒死生物的有效毒物其作用對(duì)湘江的污染卻比較顯著。同時(shí)還可以依據(jù)湘江支流各斷面種類(lèi)數(shù)及其減少程度來(lái)判斷出各斷面其污染 地步。另外，還監(jiān)測(cè)到隨著時(shí)間的推移，在底棲大型無(wú)脊椎的動(dòng)物種類(lèi)數(shù)及多類(lèi)特點(diǎn)指數(shù)方面，也呈現(xiàn)出消少的趨勢(shì)。從這種情況看來(lái)，有毒污染仍然存在發(fā)展的趨勢(shì)。

三、水污染生物監(jiān)測(cè)和檢測(cè)的應(yīng)用

環(huán)境的污染物是人類(lèi)及其它生物最為嚴(yán)峻的危害，其難點(diǎn)就是對(duì)細(xì)胞遺傳物資組成的損害。近幾十年中環(huán)境生物的檢測(cè)技術(shù)，特別是細(xì)胞微核技術(shù)及四分體微核技 術(shù)，已經(jīng)在動(dòng)植物及人類(lèi)染色體受到外界理化因子損害等方面得到應(yīng)用。同時(shí)，對(duì)環(huán)境監(jiān)測(cè)的技術(shù)的刻苦鉆研已經(jīng)取得巨大的進(jìn)展。微核在于生物細(xì)胞內(nèi)的生成路徑 和染色體畸變的相應(yīng)特點(diǎn)早就被人們所認(rèn)識(shí)，用微核測(cè)定方法取代染色體畸變的方法來(lái)監(jiān)測(cè)環(huán)境污染物具有很多優(yōu)點(diǎn)，如對(duì)生物遺傳物質(zhì)的傷害較小、操作簡(jiǎn)便和靈 活度高等。最常用的蠶豆根尖細(xì)胞微核的試驗(yàn)技術(shù)就是以染色體傷害和紡錘絲低毒的優(yōu)點(diǎn)等使其成為測(cè)試植物微核監(jiān)測(cè)新方法。這項(xiàng)技術(shù)自發(fā)現(xiàn)以來(lái)，在環(huán)境誘變及 致癌因子檢測(cè)鉆研中，更是在水質(zhì)污染與及致突變劑的檢測(cè)研究領(lǐng)域取得廣泛運(yùn)用。

四、水污染監(jiān)測(cè)技術(shù)的發(fā)展動(dòng)向

1.水污染自動(dòng)監(jiān)測(cè)技術(shù)

水污染自動(dòng)監(jiān)測(cè)是對(duì)污染源排放的廢水（經(jīng)過(guò)處理的或未經(jīng)過(guò)處理的）以及地表水和地下水被污染的情況進(jìn)行連續(xù)自動(dòng)采樣、測(cè)定、傳輸和數(shù)據(jù)處理的定時(shí)監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)。

水污染自動(dòng)監(jiān)測(cè)技術(shù)起源于美國(guó)，美國(guó)在1958年開(kāi)始對(duì)俄亥俄河進(jìn)行水質(zhì)自動(dòng)監(jiān)測(cè)。在日本，各水域和工礦排水幾乎都設(shè)立了自動(dòng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)利用計(jì)算機(jī)來(lái)管理及處理數(shù)據(jù)川。

我國(guó)自20世紀(jì)80年代開(kāi)始，在黃浦江、天津引灤濟(jì)津段以及吉化、寶鋼、武鋼等大企業(yè)的供排水系統(tǒng)建立了水污染自動(dòng)監(jiān)測(cè)站，開(kāi)始了對(duì)自動(dòng)水質(zhì)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的研究。

2.水污染遙感監(jiān)測(cè)技術(shù)

水污染遙感指應(yīng)用地面、航空、航天等遙感平臺(tái)對(duì)河流、湖泊、水庫(kù)和海洋進(jìn)行探測(cè)，診斷水體的反射、發(fā)射、吸收特征的變化，從而實(shí)現(xiàn)快速地確定水污染的分布狀況和位置的水污染監(jiān)測(cè)方法。水污染遙感常用的儀器有紅外掃描儀、多光譜掃描儀、微波系統(tǒng)和激光雷達(dá)等。監(jiān)測(cè)對(duì)象主要是水面油污染、水中懸浮物、污水排放、赤潮藻類(lèi)的類(lèi)型和密度等。在20世紀(jì)70年代末，我國(guó)遼寧省環(huán)境科學(xué)研究所利用紅外技術(shù)對(duì)大連灣的油污染進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。1980-1983年在天津一渤海地區(qū)組織了一次航空遙感試驗(yàn)研究，對(duì)天津地區(qū)污染水體的光譜特性進(jìn)行了初步的分析研究。

綜上所述，對(duì)于水資源越來(lái)越緊缺的生態(tài)環(huán)境下，水體污染仍然不斷受到不同程度的惡化。這樣一來(lái)，即客觀條件迫使水污染監(jiān)測(cè)技術(shù)不斷改進(jìn)。水生生物監(jiān)測(cè)水體即能夠反應(yīng) 水環(huán)境質(zhì)量狀況，對(duì)毒物監(jiān)測(cè)靈敏度高，同時(shí)需要的測(cè)試儀器也比較簡(jiǎn)單。當(dāng)前，國(guó)內(nèi)的水污染生物監(jiān)測(cè)方法和監(jiān)測(cè)物還在不斷更新，監(jiān)測(cè)的靈活度越來(lái)越高。用某 些方法同樣能夠?qū)μ囟ǖ哪承┗蛘叨喾N污染物作出不同程度的監(jiān)測(cè)，污染程度高低同樣能夠明顯反映出來(lái)。但是，要完成傳統(tǒng)生物監(jiān)測(cè)方法沒(méi)法來(lái)完成的水體中種某 些污染物質(zhì)的檢測(cè)，還需要共同努力?，F(xiàn)在有一些水生生物監(jiān)測(cè)技術(shù)仍然難以確定水體中污染物的種類(lèi)和含量，所以，應(yīng)該采納多種監(jiān)測(cè)方法進(jìn)行綜合監(jiān)測(cè)，以保證 監(jiān)測(cè)最終結(jié)果的精確性和完整等特點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]許木啟.從浮游動(dòng)物群落結(jié)構(gòu)與功能的變化看府河D白洋淀水體的自凈效果[J].水生生物學(xué)報(bào)，1996，20，（3）：212-220.

篇9

關(guān)鍵詞 生物技術(shù)；食品檢測(cè)；應(yīng)用

中圖分類(lèi)號(hào)TS2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A 文章編號(hào) 1674-6708（2014）106-0127-02

近幾年，因城市工業(yè)化日漸加深，使得環(huán)境問(wèn)題越來(lái)越嚴(yán)重，人們對(duì)食品安全的關(guān)注也越來(lái)越多，食品安全已經(jīng)成為牽動(dòng)人心的焦點(diǎn)問(wèn)題。然而，對(duì)于現(xiàn)在的食品檢測(cè)，傳統(tǒng)的方法已經(jīng)與現(xiàn)代社會(huì)發(fā)展需求完全脫軌，當(dāng)前在食品檢測(cè)中廣泛應(yīng)用的是PCR技術(shù)、生物芯片、基因探針?lè)?、生物傳感器技術(shù)、免疫技術(shù)等生物技術(shù)。眼前，人們?cè)絹?lái)越關(guān)注食品安全，即是食品質(zhì)量的安全。在我國(guó)，影響并制約食品安全的因素有很多，比如法規(guī)法律尚不完善，政府監(jiān)管松懈以及科學(xué)技術(shù)上遭遇“瓶頸”等。因此，生物技術(shù)的廣泛應(yīng)用使人們實(shí)現(xiàn)了簡(jiǎn)便快捷、特異性強(qiáng)、靈敏度高的食品檢測(cè)方法。

1基因探針?lè)?/p>

基因（DNA）探針?lè)ㄓ址Q分子雜交技術(shù)，其原理是利用基因的重復(fù)性、變性和其堿基互補(bǔ)配對(duì)的精確性來(lái)探查某一DNA序列的新技術(shù)。當(dāng)前，DNA探針雜交法有兩種，分別同相雜交和異相雜交，其技術(shù)的關(guān)鍵就是構(gòu)建基因探針。近幾年，基因探針雜交技術(shù)十分廣泛的應(yīng)用于食品微生物的檢測(cè)中，如今可檢測(cè)食品中存在的大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、李斯特氏菌、葡萄球菌和志賀氏菌等。相較于傳統(tǒng)的檢測(cè)方法，DNA探針技術(shù)在克服了傳統(tǒng)檢測(cè)方法缺點(diǎn)的同時(shí)，其操作簡(jiǎn)便快捷、靈敏度高、特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)使食品檢測(cè)結(jié)果更精準(zhǔn)。但是，DNA探針技術(shù)也存在著速度慢、成本高、效率低等局限性，在今后的科學(xué)研究中還需改進(jìn)。

2 PCR 技術(shù)

PCR技術(shù)的原理是以需要擴(kuò)增的DNA分子作為模板，用分別和模板互補(bǔ)的一對(duì)寡核苷酸的片段作引物，遵從半保留復(fù)制原則，在DNA聚合酶的作用下完成擴(kuò)增，因此，又稱聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)，由變性、復(fù)性和延伸三個(gè)步驟構(gòu)成。僅需要用很少的物質(zhì)便可大量擴(kuò)增所需的基因片段，并可以定量、定性地分析檢測(cè)樣品，這是PCR技術(shù)的一大優(yōu)點(diǎn)。與此同時(shí)，由于檢測(cè)儀器昂貴，操作復(fù)雜、技術(shù)含量較高，因此對(duì)其技術(shù)人員有較高且嚴(yán)格的要求。由于現(xiàn)在分子生物學(xué)技術(shù)正在突飛猛進(jìn)的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因食品已經(jīng)隨處可見(jiàn)，由此可見(jiàn)轉(zhuǎn)基因食品逐漸進(jìn)入了人們的生活，它們?cè)谌藗兊牟妥郎铣霈F(xiàn)的同時(shí)，轉(zhuǎn)基因食品的安全性也倍受人們的關(guān)注，成為了百姓飯前茶后所談?wù)摰臒狳c(diǎn)話題。由于在傳統(tǒng)的食物中，并不存在轉(zhuǎn)基因食品中的蛋白質(zhì)和新遺傳物質(zhì)，使消費(fèi)者存在隱憂。為了讓人們的健康有一個(gè)可靠的保障，使消費(fèi)者消除顧慮，讓商品流通和國(guó)際貿(mào)易更加有利，研發(fā)一個(gè)快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的食品安全檢測(cè)技術(shù)迫在眉睫。

3 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)

免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的基本原理是抗體和抗原的結(jié)合反應(yīng)，一般可將其分為三類(lèi)：免疫沉淀反應(yīng)、免疫標(biāo)記技術(shù)和免疫凝集試驗(yàn)。目前，免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)在檢測(cè)方法中用途最為廣泛，其具有方便快捷、特異性強(qiáng)、檢測(cè)成本低、靈敏度高、分析容量大等特點(diǎn)，特別表現(xiàn)在食品檢測(cè)方面，在分析蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)中通常會(huì)用到。當(dāng)前，免疫技術(shù)中的酶聯(lián)免疫法已在食品檢測(cè)中得到普及。近幾年，在傳統(tǒng)檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上，免疫學(xué)開(kāi)發(fā)出新的檢測(cè)技術(shù)，其中包括放射免疫測(cè)定、熒光免疫測(cè)定、免疫傳感器、免疫磁性分離和酶免疫測(cè)定，比如PCR-ELISA技術(shù)，就是將酶聯(lián)免疫技術(shù)與PCR技術(shù)結(jié)合，可用于檢測(cè)大腸桿菌，效果良好。酶聯(lián)免疫技術(shù)是將酶標(biāo)記在特異的抗體上，即為酶標(biāo)抗體。它具有酶的底物催化和抗體抗原反應(yīng)的特性，它和與它對(duì)應(yīng)的抗原相結(jié)合，添加底物，便可依據(jù)底物顯色程度作出定量或定性地判斷。由于酶的催化效率高，能夠最大限度的將反映效果放大，使測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定且靈敏度高。但其也具有局限性，因此多數(shù)用于檢測(cè)鮮活組織和基因工程生物體改造的初步檢測(cè)。

4生物芯片技術(shù)

生物芯片技術(shù)的原理是按照預(yù)先的設(shè)置將大量生物分子排列并固定在載體表面，因?yàn)樯锓肿泳哂刑禺愋杂H和反應(yīng)，可利用其對(duì)生物分子的量和存在進(jìn)行分析，比如抗體抗原反應(yīng)和核酸雜交反應(yīng)等。高通量是基因芯片最為突出的優(yōu)點(diǎn)。相較于傳統(tǒng)檢測(cè)方法，生物芯片技術(shù)可克服具有系統(tǒng)誤差的缺點(diǎn)，許多基因探針雜交和標(biāo)記等只需一個(gè)過(guò)程即可完成，并且生物芯片技術(shù)自動(dòng)化程度高且其數(shù)據(jù)可靠客觀。但是由于基因芯片技術(shù)無(wú)法判斷在細(xì)胞類(lèi)型較多的組織中檢測(cè)基因的精確定位。與基因芯片相比，處于研發(fā)中的蛋白質(zhì)芯片可能將此種情況改善。

上文中論述的生物技術(shù)在食品檢測(cè)方面其運(yùn)用前景是十分廣闊的，除此以外，逐漸會(huì)有越來(lái)越多的更加先進(jìn)的生物技術(shù)在食品檢測(cè)中得以應(yīng)用，它的前景很值得期待。

由于生物技術(shù)具有高效、經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn)，廣大科學(xué)研究人員對(duì)其越來(lái)越認(rèn)可，在食品檢測(cè)中生物技術(shù)成為了重要的力量。在我國(guó)科技不斷發(fā)展科研人員不斷努力創(chuàng)新研究的背景下，在今后的食品檢測(cè)中，生物技術(shù)一定會(huì)更加成熟的應(yīng)用其中，使我國(guó)的食品質(zhì)量安全得到保障。食品安全不僅關(guān)系到人類(lèi)的健康，更與國(guó)家的經(jīng)濟(jì)、政治息息相關(guān)。近幾年，我國(guó)大力推進(jìn)食品檢測(cè)技術(shù)及食品安全的應(yīng)用及研究，并增強(qiáng)了相應(yīng)法規(guī)法律的制定。與此同時(shí)，還需大量投入資金在食品檢測(cè)的技術(shù)研究中，并對(duì)食品科學(xué)技術(shù)的專(zhuān)業(yè)隊(duì)伍加強(qiáng)建設(shè)。綜上所述，生物技術(shù)在食品檢測(cè)中已經(jīng)愈來(lái)愈顯其優(yōu)越性，但其檢測(cè)方法或多或少都存在著局限性，因此在其應(yīng)用中需要搭配和選擇使用，同時(shí)也期待生物技術(shù)的改進(jìn)、優(yōu)化以及創(chuàng)新，為食品安全提供可靠保障。

參考文獻(xiàn)

篇10

關(guān)鍵詞：鉛成分檢定;生化工藝;檢測(cè)程序;技術(shù)策略

在全部的環(huán)境毒害品類(lèi)一族中，鉛成分是一類(lèi)極為普遍的毒性元素，它不可給人體造成相當(dāng)程度的毒害后果，而且還可在很大程度上損害到各類(lèi)自然生物的身體健康和生態(tài)條件之間的平衡效果。過(guò)去的檢定手段則更是五花八門(mén)，其中涵蓋光譜測(cè)定、電泳分析法、液態(tài)色譜測(cè)試法及二硫腙比照法等多種方法，雖然以往的檢定手段是依托于精密型的測(cè)試裝置，此類(lèi)精密設(shè)備促使其檢定數(shù)據(jù)的精準(zhǔn)性很高，然而其運(yùn)作程序和檢定費(fèi)用均不可能達(dá)到多維度的鉛成分檢定目標(biāo)。所以業(yè)內(nèi)行家們持續(xù)追逐于探求更為節(jié)約、便捷、實(shí)用的檢定工藝，此種形勢(shì)下生化工程檢定工藝隨之出現(xiàn)，而且其憑借于自身豐富的特點(diǎn)，讓它在目前受到了極為有效的運(yùn)用。在這一形勢(shì)下對(duì)于鉛成分檢定中的生化分析工藝運(yùn)用展開(kāi)深入的探究，有助于給推進(jìn)本工藝研修工作的深入開(kāi)展提供相關(guān)的借鑒。

1核酸定量檢測(cè)工藝

核酸定量檢測(cè)工藝，其總稱為分子型信標(biāo)核酸定量檢定工藝，英文縮寫(xiě)FRET。此項(xiàng)工藝原理是依托熒光動(dòng)態(tài)能量的共振遷移來(lái)實(shí)施的化學(xué)組分檢定工藝，依托此手段來(lái)求取寡型核苷酸類(lèi)探針，讓其和對(duì)應(yīng)的核酸成分呈現(xiàn)互為彌補(bǔ)功能，在靶型分子混交的生物反應(yīng)效力作用下，產(chǎn)生出熒光效應(yīng)，依照熒光效應(yīng)的高低水平來(lái)給檢測(cè)過(guò)程的實(shí)施構(gòu)建出對(duì)應(yīng)的條件。在鉛離子濃度檢定過(guò)程當(dāng)中，分子型信標(biāo)核酸撿定工藝的運(yùn)用也是依托此項(xiàng)工藝原理來(lái)實(shí)施的，在通常溫度條件下，可以完成鉛離子的快捷測(cè)試，有助于減低溫度變化對(duì)探針式反應(yīng)產(chǎn)生的相關(guān)效力，而且其約束指標(biāo)的功能亦被減低[1]。大量研究表明，混合物中鉛離子的濃度高低完全決定了鉛檢定反應(yīng)的熒光能力大小，利用此方法可以檢定出的鉛離子的濃度最低值是1.69×10mol/L。再有業(yè)內(nèi)學(xué)者特別把此項(xiàng)工藝的探討構(gòu)建于脫氧型核酶的催化性水解專(zhuān)屬條件之上，且以此作為根據(jù)對(duì)其檢測(cè)工藝實(shí)施了深入化的探究，把它利用到了鉛離子的檢定過(guò)程之中，獲取了相當(dāng)驚人的效果[2]。

2免疫型檢測(cè)工藝

免疫型鉛離子檢定工藝重點(diǎn)是依托于抑制體及抑制源之間的專(zhuān)屬性反應(yīng)條件下擬定的生化檢定方法，它的特點(diǎn)在于檢測(cè)精準(zhǔn)度極高而且奇特性極強(qiáng)。立足于抑制體具備著相異的類(lèi)別，所以免疫型檢定方法也可區(qū)分成單型克隆出的抑制體及多型克隆出抑制體兩類(lèi)，現(xiàn)階段應(yīng)用比較普遍的檢定方法重點(diǎn)包括酶聯(lián)型免疫方法及熒光型偏振式免疫方法。而其中酶聯(lián)型免疫方法是應(yīng)歸為單體克隆型抑制體檢定方法，依托人工合成鉛離子抗源體來(lái)做小鼠的免疫試驗(yàn)。欲求獲取鉛離子的真正抑制體，即應(yīng)當(dāng)先求取鉛離子。依托功能的二螯合模式，求取反應(yīng)過(guò)程的原性，爾后再利用螯合制劑和載體型蛋白推進(jìn)其獲取免疫的原生性，在其小鼠身體內(nèi)注入以后再分離出抑制源，從而實(shí)施鉛成分的檢定過(guò)程。而采取熒光型的偏振式免疫方法的操作原理基本是利用分析樣品內(nèi)所含的鉛離子與超量的螯合劑之間產(chǎn)生的溶液態(tài)反應(yīng)，依托免疫型復(fù)式結(jié)構(gòu)化合物之間存在的競(jìng)爭(zhēng)狀態(tài)，求取多型克隆抑制體當(dāng)中的個(gè)異性，最終利用熒光型偏振分析儀展開(kāi)測(cè)驗(yàn)過(guò)程，將獲取的數(shù)據(jù)結(jié)論對(duì)照于基準(zhǔn)型性能曲線，即可求得二價(jià)鉛離子濃度的具體測(cè)定數(shù)值[3]。這種測(cè)試方法運(yùn)用的便捷性能已經(jīng)被大量研究結(jié)果所證明，譬如有某些的研究過(guò)程選取由螯合物反應(yīng)制得的多型克隆抑制體在熒光類(lèi)偏振測(cè)試儀當(dāng)中檢驗(yàn)出了139個(gè)土壤型樣品結(jié)構(gòu)中的二價(jià)鉛離子成分含量，熒光型偏振法的免疫功能同火焰型原子吸取光譜方法以及電感型耦合體等離子化合物所測(cè)定出的和其結(jié)果密切相關(guān)的運(yùn)算系數(shù)選值各自為0.96及0.93，由此可知其檢定的領(lǐng)域范圍極廣，而且其重合反應(yīng)比率很低，在真正實(shí)現(xiàn)可在室內(nèi)圓滿檢測(cè)的過(guò)程中，尚可進(jìn)行室外部的檢定過(guò)程,并且可獲得理想的測(cè)定結(jié)果。

3超分子Pb2+生物化學(xué)傳感檢測(cè)技術(shù)

在超分子化學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展的推動(dòng)作用下，用于檢測(cè)Pb2+的多種檢測(cè)技術(shù)已被研發(fā)生成。此方式檢測(cè)技術(shù)主要是通過(guò)超分子生物化學(xué)傳感儀來(lái)實(shí)現(xiàn)，原理是在離子誘導(dǎo)的作用下使超分子熒光信號(hào)產(chǎn)生相應(yīng)的變化[4]。已有研究采用在PVC膜上固定乙醇介質(zhì)的熒光傳感器用來(lái)檢測(cè)Pb2+，優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)表現(xiàn)為具有著極強(qiáng)的敏感性與選擇性，反應(yīng)快速而及時(shí)；另外還有研究采用一種新型熒光肽金屬離子傳感器形成新的螯合物，該傳感器的特點(diǎn)是含有酰胺與色氨酸，在與金屬離子作用后，用于檢測(cè)，能夠通過(guò)熒光的響應(yīng)來(lái)識(shí)別。

總而言之，隨著相關(guān)技術(shù)的不斷發(fā)展，目前此領(lǐng)域技術(shù)亦在進(jìn)行著不斷深入的研究，應(yīng)用也越來(lái)越廣泛。加之現(xiàn)代社會(huì)對(duì)生態(tài)環(huán)境和諧的要求越來(lái)越高，因此鉛離子的檢測(cè)也將朝向高精度、高效率、低成本方向發(fā)展。

作者:吳凱 陳浩 單位:邵陽(yáng)學(xué)院生物與化學(xué)工程系

引用：

[1]食品中重金屬鉛污染狀況及其檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J].趙靜,孫海娟,馮敘橋.食品與發(fā)酵工業(yè).2014(09).

[2]生物化學(xué)技術(shù)在鉛檢測(cè)中的研究進(jìn)展[J].戢太云,張春華,周培.上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào).2010(01).