導語：如何才能寫好一篇生物檢測技術，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

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人體測量技術在機場的主要應用是控制人員進入“專用區(qū)”。機場的這部分一般人不能進入的區(qū)域主要包括停機坪，在安全方面自然是很“敏感”的。人體測量技術的作用在于準確地辨別獲準進入其中的人員。

指紋辨別技術將會得到最快發(fā)展。這種方法要求先將指紋登記在案。將手指放在一臺閱讀器上，指紋就會被輸入到一個形象處理軟件。該軟件會標明指紋的末端、分叉、曲線，等等，這些都是指紋的特征點。所有這些特征點(30―80個)就組成了微型指紋，這些資料再被用代碼表示。但該領域的專業(yè)公司――Zalix生物統(tǒng)計公司的總經(jīng)理阿蘭?舒克龍肯定地說：“擾頻很嚴重，有時甚至會導致無法破譯某人的信息，有時則出現(xiàn)一些只對能夠比較兩個微型指紋的算法才有意義的數(shù)字?！?/p>

微型指紋被記錄之后，就會存儲在一張磁卡里。當你需要辨別身份時，系統(tǒng)就會將磁卡中保存的微型指紋與你放在閱讀器上的指紋進行比較。如果按規(guī)定最小數(shù)目的特征點是一致的(具體數(shù)值由特征點比較算法決定），系統(tǒng)就會確認你的身份。之所以不要求特征點百分之百地吻合，那是為了給手臟等情況留有余地。可以根據(jù)要求的安全程度來提高吻合的百分比。

為什么微型指紋要存儲在個人磁卡里而不是中央卡片柜里呢？已經(jīng)提出了這方面要求的國家信息與自由委員會的有關人士解釋說： “這是為了避免指紋檔案的重復。”最近，該委員會就好幾個使用生物統(tǒng)計技術的事例給出了建議。必須注意的是，考慮到需要保護的利益，生物統(tǒng)計技術不能過度使用。國家信息與自由委員會指出：“我們絕不可能允許學校食堂使用指紋辨別技術?！敝讣y辨認被認為是一種“非常具有入侵性質(zhì)”的手段，因為這種方法非?？煽浚覀儺斨械拿總€人的指紋幾乎都可以說是獨一無二的。

視網(wǎng)膜辨認的原理與指紋辨認原理相似，只不過放在掃描儀前的是眼睛，為了證實你沒有試圖用一只玻璃假眼來欺騙系統(tǒng)，一個二極管會發(fā)射一股微弱的光信號，真正的眼睛會對此產(chǎn)生反應，而系統(tǒng)能夠檢測出這種反應。視網(wǎng)膜上的特征點有250個左右。

視網(wǎng)膜辨認技術已經(jīng)在倫敦的希羅機場得到應用。這種技術被認為是最保險的辨認技術，也是目前最尖端的人體測量技術，出錯率為10-8。而指紋辨別和手掌辨認技術的出錯率都約為10-7。

人的手如同一把鑰匙。手掌辨認原理同前兩種方法的原理大致相同，但比較的不是特征點，而是由掃描儀仔細檢查每個手指的長度，手掌的寬度、厚度，皺紋部分的面積……不到1秒鐘的時間里要進行90項檢查。紅外線掃描儀能夠辨別出放在上面的是只真手還是塑料假手。這項技術已經(jīng)在美國的好幾個機場得到應用。

最后，還有一個部位可以用于辨別身份：人的面部。在澳大利亞，澳洲航空公司的機組人員是這種光學辨別系統(tǒng)的首批使用者。該系統(tǒng)的功能是確認站在前面的人與身份證件照片上的是同一人。此外，專家們認為聲音辨認技術還沒有“完全調(diào)試成功”。

（選摘自《參考消息?科學技術》）

閱讀提示

為了防止混進機場，進行恐怖襲擊，“機場使用了一些新方法來應對恐怖威脅”。這種新方法就是“通過識別指紋、手掌和視網(wǎng)膜來辨認身份將能提高安全度”。這篇科技說明文，通過深入淺出的語言陳述，把這種生物檢測技術，從科幻電影引入到人們的實際生活，每一位乘飛機旅行的人，特別是機場工作人員都將與這種技術發(fā)生關聯(lián)。也就是說，凡要進機場乘坐飛機的人，就要走進機場專用區(qū)，要將指紋、視網(wǎng)膜和手掌等“交給”閱讀器，閱讀器會根據(jù)這些信息辨認來者身份。此文頗具實用性和時效性，它教給讀者安檢方面的知識，使我們?nèi)绻跈C場遇到比較復雜的手續(xù)時，至少不會嫌麻煩。

探究練習

1.本文開篇說的應對恐怖威脅的一些新方法，主要指的是什么？本文這種直截了當?shù)拈_頭有什么作用？

2.本文第二自然段中有兩處使用了“引號”，使用引號的作用是什么？

3.本文重點說明的是什么內(nèi)容？在重點說明這項技術的原理和作用時，指出其現(xiàn)在還存在的是什么問題？

4.文中在說明“視網(wǎng)膜”和“手掌”辨認技術的原理和作用時，在表達上與“指紋”辨認技術的說明有什么不同？

5.從哪些地方可以看出本文“說明有序”，條分縷析的特點？

解答提要

1.本文開篇直接入題，介紹機場生物檢測技術的一些新方法，并開門見山地指出新方法主要指的是“通過識別指紋、手掌和視網(wǎng)膜等來辨認身份將能提高安全度”。這種直截了當?shù)拈_宗明義，可以一下子把讀者的思維引向正題，循著文章的結(jié)構和脈理去探究引人關注的這一科學技術問題。

2.文中第二自然段中的“專用區(qū)”和“敏感”二詞都加了引號，這是因為有時候在某一詞語前加引號，并不表示這是成語和熟語，而只是因為它是個專門術語，或是因為其他理由要讀者特別注意，或是借譬以示強調(diào)?！皩Ｓ脜^(qū)”“敏感”均屬上述情況，所以加了引號。

3.本文重點說明的是“指紋辨別技術”，一是因為它將會得到最快的發(fā)展，二是它的研究比較深入，所以本文作了較詳細的說明。但是這項技術也還存在問題，那就是“擾頻很嚴重”，導致無法破譯某人的信息，“有時則出現(xiàn)一些只對能夠比較兩個微型指紋的算法才有意義的數(shù)字?！睘榱俗屓藗兘邮苓@一技術，以之配合，文章對指紋辨認的原理及其過程作了說明，而且指出它是“非常具有入侵性質(zhì)”的手段，因此不能任意進行使用。

4.正因為“視網(wǎng)膜”辨認和“手掌”辨認的原理和方法與“指紋”辨認原理和方法大致相同，所以在較詳細地介紹了“指紋”辨認技術的原理、方法以后，“視網(wǎng)膜”和“手掌”的辨認，說明從簡，只需要指出其不同的地方就行了。

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【關鍵詞】快速檢測方法 食品 微生物 應用

食品是人們能夠在社會上生存和發(fā)展一個重要前提，食品的質(zhì)量問題直接關系到人們的生存質(zhì)量和水平。微生物在食品中最為常見，是一種難以避免的客觀存在，同時也是影響食品安全和食用人身體健康的一個重大因素。通常情況下，評價一種食品是否安全可以通過檢測食品中微生物的種類和數(shù)量判定。目前，負責進行食品微生物檢測的快速檢測技術主要有顯微鏡鏡檢法、瓊脂平板培養(yǎng)法（這兩種為傳統(tǒng)快速檢測技術），氣相色譜法、免疫學檢測法、傳感器檢測法、分子生物學檢測法、抗阻測定法以及自動檢測法（這五種為現(xiàn)代快速檢測技術）等多種快速檢測技術。為了更加詳細的探討快速檢測技術在食品微生物檢測中的應用概況，本研究以免疫學檢測法中的酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）應用概況為例探討快速檢測技術應用概況，具體內(nèi)容如下分析。

一、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）

（一）作用原理

該檢測方法的原理是在確保不損壞抗原或者抗體免疫活性的前提下將其放入固相載體中，然后對包含待測的抗原或者抗體的受檢樣品按照規(guī)范步驟與原先放入固相載體中的抗原或者抗體結(jié)合，兩者反應后產(chǎn)生復合物，這種復合物與仍待檢測的抗原或者抗體總量之間形成一定比例。最后對這個反應液中其他不需要的物質(zhì)進行洗滌排出后放入酶反應底物，反應后底物會逐漸生成有色產(chǎn)物，然后對這些有色產(chǎn)物進行定量和定性分析就能夠得出測試物的具體微生物含量。

（二）檢測方法

酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）具體測定時一般有直接和間接兩種方法。其中，所謂的直接法就是指標記抗體與固定抗原直接作用并放入底物后直接得出有色產(chǎn)物的方式。而所謂的間接法指的是待測樣本抗體首先與已知抗原進行作用后再放入酶標記物，酶標記物與免疫復合物作用后才放入底物產(chǎn)生有色物質(zhì)。另外，該檢測方法還有多種改良方法，比如雙抗體、雙抗體夾心以及競爭法等。雙抗體方法一般是在醫(yī)學檢測中應用比較多，而競爭法則在食品微生檢測中應用較多。

（三）影響免疫法結(jié)果的因素

酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定時一般主要涉及到酶底物、抗原、酶、交聯(lián)劑等多種物質(zhì)，所以也就意味著這些物質(zhì)性質(zhì)和質(zhì)量對整個檢測結(jié)果會產(chǎn)生直接或間接的影響。通常情況下，抗原對檢測結(jié)果影響主要在于其包被質(zhì)量上，所謂的抗原包被就是在聚苯乙烯微量反應板中固定上抗原的物質(zhì)，其質(zhì)量與檢測結(jié)果有很大關系；酶底物在免疫檢測中的作用是穩(wěn)定反應呈色，防止有色物質(zhì)變色。所以，也就是說若酶底物的穩(wěn)定能力不足，那么將直接影響反應有色物質(zhì)的呈色時間，影響檢測結(jié)果。當前選擇的酶底物在HRP和AKP中選擇不同，前者多選鄰苯二胺，后者多選硝基苯磷酸鹽；酶一般是使用HRP較多，而實際最主要的有HRP、ARP以及GO和半乳糖苷酶幾種。

二、食品微生物檢測中應用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）的概況

酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）在食品微生物檢測中應用時主要是檢測食物中的真菌毒素、細菌以及介導病毒三個主要內(nèi)容進行檢測，具體檢測步驟如下分析：

（一）測定真菌毒素方法

食品真菌毒素測定主要是指黃曲霉毒素B1的測定，測定的具體方法有反向直接競爭酶聯(lián)免疫吸附法、間接競爭酶聯(lián)免疫吸附法、直接競爭酶聯(lián)免疫吸附法以及生物素親和素酶聯(lián)免疫吸附法法等多種方法。實驗結(jié)果證實，直接和間接酶聯(lián)免疫吸附法對食品中的黃曲霉素度B1的測定靈敏度高，具有更為簡便、更加廉價和安全的特點，非常適合在一些經(jīng)濟水平較差的基層地區(qū)中使用。1996年陸戈等研究人員使用了單克隆抗體（專門用于抗黃曲霉毒素B1）對常見食品（比如食用油、大米以及玉米等）中的黃曲霉毒素B1進行間接競爭法測定，并確定了專門的間接競爭測定法。實際測定結(jié)果顯示，改方法測定是最低檢出濃度達0.01lng/g，精密度高達2.0～24.3%，對某一地區(qū)的1620食品樣品檢測結(jié)果中，其檢出率高達97%，而一些靈敏度比較低的方法根本無法檢測出黃曲霉素度B1。所以也就意味著，酶聯(lián)免疫吸附法檢測食品中的真菌毒素效果非常顯著，且價格便宜，可以在多個地區(qū)應用。

（二）測定細菌方法

食品中對人體健康影響最大的一種細菌為沙門氏菌，1996年文其藝等多位研究者使用酶聯(lián)免疫吸附法對460分食品進行檢測顯示，沙門氏菌的陽性率非常高的，甚至比國際上的標準檢測方法陽性率還要高?？梢?，酶聯(lián)免疫吸附法在測定食物細菌上結(jié)果非常可靠。1990年Cryan等研究者使用DNA探針技術和酶聯(lián)免疫設法兩種反法對大腸埃希氏桿菌內(nèi)毒素進行檢測后發(fā)現(xiàn)，酶聯(lián)免疫吸附法的靈敏性和檢出率以及檢出時間均明顯優(yōu)于DNA探針技術。而在1986年R.M.Lister等研究者使用酶聯(lián)免疫吸附法對番茄醬中的霉菌進行檢測發(fā)現(xiàn)，酶聯(lián)免疫吸附法的靈敏性要遠遠大于化學檢測法的靈敏性另外，還有研究者對魚蝦、蛋品等產(chǎn)品的霉菌進行檢測也發(fā)現(xiàn)酶聯(lián)免疫吸附法的檢出率非常高?？傃灾嘎?lián)免疫吸附法檢測食品細菌檢出率非常高，值得作為一種有效方法進行推廣。

（三）測定介導病毒方法

介導病毒測定主要是對一些食品從業(yè)人員進行測定后分析食品微生物病毒感染性質(zhì)的方法。一直以來，酶聯(lián)免疫吸附法都在食品相關人員的乙肝病毒感染監(jiān)測中得以應用。且除了在這些最常見的病毒感染可疑人員進行測定之外，該方法還應用在克山病疾病的血清監(jiān)測中，主要是監(jiān)測這類疾病患者血清中是否存在柯薩奇B組病毒，從而了解該病毒在克山病患者中的存在情況，有助于醫(yī)護人員根據(jù)這些測定結(jié)果采取針對性消滅病毒，治愈疾病的方法。

總而言之，食品微生物快速檢測方法非常多，在進行檢測時應該選擇效果更為明顯且操作簡便和價格便宜的方法，比如酶聯(lián)免疫吸附法，真正提高食品微生物檢出率，保障食品安全。

參考文獻：

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【關鍵詞】 食品；微生物；檢測技術；研究；進展

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.11.842 文章編號：1004-7484（2013）-11-6815-02

食品在生產(chǎn)加工、儲備保存、運輸銷售等過程中，容易產(chǎn)生大量的微生物，導致食品變質(zhì)，并引發(fā)食源性中毒或者感染，尤其是在環(huán)境污染不斷加重情況下，微生物繁殖速度不斷加快，食品安全問題越來越嚴重了。隨著微生物檢測技術在食品微生物檢測中的推廣和應用，簡化了食品檢測程序，縮短檢測時間，提高檢測質(zhì)量，為食品衛(wèi)生安全提供了重要的技術保障。

1 食品微生物檢測技術

1.1 遺傳學檢測技術

1.1.1 PCR檢測技術 PCR檢測技術，即聚合酶鏈反應，是一種體外擴增DNA的檢測方法，能夠在短時間內(nèi)，讓某個微量DN斷特異性快速擴增，最多可超過百萬倍。PCR檢測技術，把模板DNA、Taq酶、鎂離子、引物等物質(zhì)進行有效的混合，并放入到PCR微型管內(nèi)，在PCR編程調(diào)控儀作用下完成檢測，其具有操作簡便、檢測迅速、特異性高等應用優(yōu)勢，可通過擴增DNA，以判斷是否存在某類微生物[1]。同時PCR檢測技術能夠?qū)ε囵B(yǎng)難度較大微生物進行檢測，使得微生物檢測效率大大增加?，F(xiàn)階段，PCR檢測技術在大腸埃希氏菌、李斯特菌及沙門氏菌等檢測中已得到成功應用，但是在假陽性、陰性、定量檢測上還存在不足。

1.1.2 基因芯片檢測技術 基因芯片檢測技術主要通過纖維打印或者原位合成的形式進行檢測，能夠?qū)?shù)萬個DNA探針置于支持物體表層，并獲取相應的DNA探針序列，再和標記樣品雜交，以雜交信號對樣品進行快速的檢測和判斷。在食品致病菌檢測中，基因芯片檢測技術能夠通過并行或者通量形式進行檢測，僅一次實驗，即可獲取完成檢測數(shù)據(jù)，操作簡便、速度較快，可在短時間內(nèi)獲取檢測結(jié)果，而且其特異性較強、靈敏性較高。但是檢測設備、材料昂貴，檢測操作要求高。

1.2 免疫學檢測技術

1.2.1 ELISA檢測技術 ELISA檢測技術，即酶聯(lián)免疫吸附，又可稱為熒光酶標免疫檢測技術，其主要將抗體吸附或者抗原吸附到固相載體中，并在固相載體上對免疫酶進行染色，當?shù)孜镲@色之后，通過定量或者定性形式，對有色產(chǎn)物量進行分析，可明確樣品待檢測物的含量[2]。ELISA檢測技術集合了放射免疫與免疫熒光兩種檢測技術的優(yōu)點，具有操作簡便、靈敏性高、適用范圍廣、檢測迅速、成本低等應用優(yōu)勢，能夠同時對數(shù)千份樣品進行檢測和分析。隨著ELISA檢測技術不斷發(fā)展和優(yōu)化，其在食品衛(wèi)生安全中得到廣泛應用，能夠?qū)瘘S色葡萄球菌、大腸埃希氏菌及沙門氏菌等進行有效檢測。

1.2.2 MS檢測技術 MS檢測技術，即免疫磁性微球檢測。由于很多食品樣品多以固液混合形式存在，常規(guī)檢測方法無法分離出食品中部分微生物，必須在免疫磁性微球分離作用下，才能快速將微生物分離出來。免疫磁性微球分離檢測技術主要是將特異性較強抗體偶聯(lián)于免疫磁性顆粒的表層，與實驗樣板被檢測微生物特異性進行有效結(jié)合，載有微生物免疫磁性顆粒能夠在外部磁場反應條件下，慢慢聚集到磁極方向，將檢測樣板混合液去除，不僅能夠達到分離微生物作用，同時掌握微生物的密集程度。免疫磁性微球檢測分離技術能夠在大量混雜致病菌中，選擇性將被檢測微生物分離出來，使得微生物分離效果大大提高，檢測時間也有所縮短，在食品衛(wèi)生安全檢測中具有良好的應用效果。

1.3 培養(yǎng)學檢測技術

1.3.1 干片檢測技術 干片檢測技術，即快速檢測試片，主要是將膠片、紙片或者紙膜作為微生物培養(yǎng)基的載體，把特定顯色物質(zhì)、培養(yǎng)基放置到載體上，通過對微生物生長特性或者顯色反應，以對食品中存在致病微生物進行測定[3]。Forg研究者，采用快速紙片檢測方法，對大腸菌群進行快速檢測，將原有檢測時間從72小時縮短至15小時，檢測程序得到簡化，檢測成本也大大降低，對高分子、微生物及化學等集于一體檢測技術研究和發(fā)展起到有效的促進作用。近幾年來，Petrifilm研究者，以濾紙作為載體檢測試片在食品微生物檢測中得到廣泛應用，能夠?qū)φ婢?、大腸菌群及大腸桿菌等微生物進行有效檢測[4]。

1.3.2 全自動化檢測技術 全自動化檢測技術主要是在電阻抗原基礎上，對微生物進行有效的檢測及計數(shù)的一個系統(tǒng)。在培養(yǎng)微生物過程中，能夠把培養(yǎng)基內(nèi)大分子（如碳酸化合物或蛋白質(zhì)等）電惰性物質(zhì)轉(zhuǎn)變成為小分子（乳酸或氨基酸等）活性物質(zhì)，以降低培養(yǎng)微生物阻抗，使培養(yǎng)基內(nèi)電導性發(fā)生變化，并通過定量形式獲取微生物量[5]。全自動化檢測技術，能夠依據(jù)不同檢測需求，選擇不同培養(yǎng)基，以對樣品致病菌落總數(shù)進行有效檢測，如酵母菌、乳酸菌及大腸菌群等，檢測時間不超過24小時，樣品勻液無需稀釋，且食品受到微生物污染程度越高，檢測速度越快[6]。

1.3.3 ATP檢測技術 ATP檢測技術在活性生物檢測中得到廣泛應用，當生物死亡之后，ATP將在兩個小時內(nèi)被分解[7]。所以，通過對樣品ATP濃度進行測定，即可獲取活性菌群數(shù)量。熒光素酶能夠在ATP輔助下對D-熒光素產(chǎn)生氧化反應，并形成熒光，熒光強度和ATP濃度在特定范圍內(nèi)，能夠形成一定的線性關系，然后使用發(fā)光光度計情況下，能夠?qū)Ρ粶y液體ATP量進行檢測，若活性生物ATP量較為穩(wěn)定，熒光定量能夠清楚呈現(xiàn)出系統(tǒng)代謝活性細胞情況。熒光反應檢測技術在HACCP關鍵控制點管理中具有重要作用，大大提高了控制點的檢測速度和效率，而且便攜式熒光光度計在現(xiàn)場檢測中較為適用，不僅能夠極微量致病微生物水平進行檢測，同時可以對食品生產(chǎn)加工條件進行有效評估，對食品衛(wèi)生安全監(jiān)測具有重要意義。

1.4 傳感器檢測技術

1.4.1 光學檢測傳感器 光學檢測傳感器主要是將被檢測細胞放置在傳感器的表層，在厚度變化、光折射情況下，能夠?qū)ξ⑸镂⑿∽兓M行測定[8]?，F(xiàn)階段，光纖波導、共振鏡、及干擾儀等光學檢測傳感器在食品致病微生物檢測中已經(jīng)得到成功應用。Watts等研究者，利用共振鏡對食品中的金黃色葡萄球菌進行檢測，測定限能夠達到8×106cells/ml，檢測時間僅需5分鐘。Schneider等研究者，利用全內(nèi)反射測量方法，對沙門氏菌進行檢測，檢測靈敏性能夠達到5×108cfu/ml，檢測時間較短，為5分鐘。大量研究表明，光學檢測傳感器具有操作簡便、檢測速度快、檢測時間段、成本低等優(yōu)點，但是只能對存在熒光素微生物進行檢測，靈敏性有待提高。

1.4.2 壓電免疫檢測傳感器 壓電免疫檢測傳感器主要是在金或者銀晶體的電極表層上設置一層固定抗原或者抗體活性物，當液相在免疫反應作用下，固定抗原或者抗體分子能夠樣品存在抗體或抗原進行識別，然后與特異性進行有效結(jié)合，可產(chǎn)生免疫混合物，在電極表明上沉積，使得電極表層負載發(fā)生變化[9]。在免疫反應過程可作為被檢測晶體的振動頻率變化量，通過變化量可獲取被測樣品含量。Koenig等研究者，利用免疫檢測傳感器對沙門氏菌進行檢測，獲取線性范圍的達到了106至108cell/ml，檢測時間共需45分鐘。近年來，免疫檢測傳感器在活性生物檢測中發(fā)揮著越來越重要的作用，并成為了食品微生物檢測研究重點。

1.4.3 生物發(fā)光檢測傳感器 通過對熒光素酶轉(zhuǎn)入噬菌體進行深入研究，生物發(fā)光檢測傳感器在微生物檢測中得到廣泛應用。Folley-Thomas等研究者，利用TM4抗菌素對結(jié)核桿菌進行檢測，檢測靈敏性達到104cells/ml，檢測時間為兩個小時。Blasco等研究者，通過構建靈敏性高生物傳感檢測系統(tǒng)，能夠?qū)Υ竽c桿菌、沙門氏菌等微生物進行檢測，在整個檢測反應中，噬菌體能夠?qū)⑽⑸锼拗鬟M行分解，并通過生物發(fā)光傳感器，對檢測樣品釋放產(chǎn)生細胞容物內(nèi)ATP進行測定，并依據(jù)菌體數(shù)量和ATP間形成的先行關系，可獲取微生物總數(shù)。生物發(fā)光檢測傳感器具有良好的特異性，能夠?qū)钚晕⑸锖退劳鑫⑸镞M行鑒別，但是檢測時間性相對較長，靈敏性相對較低[10]。

2 結(jié) 語

現(xiàn)階段，食品微生物檢測技術得到有效提高，并向著檢測程序簡便、檢測精確度高、檢測效率高、自動化檢測等方向發(fā)展，為食品安全檢測和管理提供重要技術支持。食品微生物檢測方法較多，各有各的優(yōu)勢，檢測人員應該依據(jù)食品微生物檢測項目標準和要求選擇適宜檢測技術，或者將各種檢測技術進行有效的結(jié)合，以提高食品微生物檢測精確度，以保證食品衛(wèi)生安全管理有效性。

參考文獻

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[2] 孫顯，李玉峰.食品微生物檢測技術[J].生命科學儀器，2009，5（05）：54-56.

[3] 林文輝.淺談食品微生物檢測方法的進展[J].才智，2009，2（20）：34-35.

[4] 陳鵬云.淺談食品微生物檢測技術和方法[J].價值工程，2010，8（35）：90-92.

[5] 何建仁.試論食品微生物檢測技術新發(fā)展[J].科技資訊，2011，6（20）：78-79.

[6] 許子剛.淺談食品微生物檢驗內(nèi)容與檢測技術分析[J].科技與企業(yè)，2012，4（07）：54-56.

[7] 楊全鳳.基因芯片技術在微生物檢測中的應用研究[J].中國醫(yī)藥指南，2012，12（02）：43-44.

[8] 葉思霞，蔡美平，羅燕娜.食品微生物檢測技術研究進展[J].安徽農(nóng)學通報（上半月刊），2009，3（19）：56-57.

篇4

關鍵詞：食品、微生物檢測、快速檢測技術

食品病原微生物檢測是保障食品安全的重要組成部分，依靠采用培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)、分離、生化鑒定及革蘭染色鏡檢等傳統(tǒng)檢測方法，對實驗室技術人員的專業(yè)技術、操作技能以及工作經(jīng)驗要求極高，操作步驟復雜繁瑣，檢測周期長，靈敏度低，準確性差，容易出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果。近年來，微生物快速檢測技術發(fā)展迅速，運用分子生物學、電子技術、生物化學、免疫學等技術對微生物進行分離、鑒定和計數(shù)，與傳統(tǒng)檢測方法相比，更快、更方便、更靈敏、更準確。

一、主要食品微生物快速檢測技術

1 分子生物學技術

（1）PCR技術

通過大量復制目的菌的高度保守的一段或幾段特異性DNA并確認這些DN段的大小來完成檢測，如果樣品中存在目的菌，就能復制出有關特異性DN段，而復制特異性DN段靠聚合酶鏈反應―PCR技術。

該技術已大量運用到食品微生物檢測領域，并形成標準化，如SN/T 1632.2-2005《奶粉中阪崎腸桿菌檢驗方法 第3部分:熒光PCR方法》、DIN 10135:1999《沙門氏菌聚合酶連鎖反應（PCR）檢驗方法、ISO 20837:2006《食品和動物飼料微生物學―聚合酶鏈反應（PCR）檢測食源病原體―定性檢測用樣品的制備》

目前利用PCR技術檢測病原菌的商品化儀器有被AOAC、USDA-FSIS、Health Canada、AFNOR等權威機構認可的BAX@全自動病原菌檢測系統(tǒng)，可檢測沙門氏菌、大腸桿菌O157、單增李斯特菌等致病菌，此外還有RiboPrinter@微生物鑒定系統(tǒng)，可鑒定沙門氏菌、大腸桿菌O157、單增李斯特菌和阪崎腸桿菌等致病菌在內(nèi)的1400多種細菌。

在1996年由美國AB公司推出的實時熒光定量PCR儀，與常規(guī)PCR儀相比，它具有特異性更強、有效解決PCR產(chǎn)物污染、自動化程度高，同時能對起始模板進行準確定量等特點。

（2）核酸探針技術

核酸探針是指帶有標記的特異DN段。根據(jù)堿基互補原則，核酸探針能特異性地與目的DNA雜交，最后用特定的方法測定標記物。探針標記方式為放射性標記、非放射性標記，具有直觀、準確等特點，基于核酸探針雜交的基因芯片技術，雖然其靈敏度與PCR技術相當，但其具有高通量、多參數(shù)、高精確度和快速分析等特征，所以備受青睞。我國已將此技術引入到行業(yè)標準中來，如SN/T 1543-2005《食源性致病菌基因芯片鑒定方法》。

2 免疫學技術

（1）熒光抗體法

用熒光物質(zhì)標記抗血清的抗體，即抗抗體。使用熒光顯微鏡觀察樣品中的目的菌-熒光標記抗體結(jié)合物或目的菌-抗體-熒光標記抗抗體結(jié)合物來判斷結(jié)果。在食品微生物檢測領域內(nèi)，國內(nèi)使用的較多是mini-VIDAS全自動熒光酶標免疫測試系統(tǒng)，該系統(tǒng)已被AOAC、AFNOR等權威機構認可，可檢驗沙門氏菌、單增李斯特氏菌、大腸桿菌O157、葡萄球菌腸毒素等。

（2）免疫酶技術

以酶標記抗體或抗抗體，抗原與酶標記抗體，或抗原-抗抗結(jié)合物與酶標記抗抗體特異性結(jié)合。根據(jù)酶反應有色反應的有無及其濃度，即可間接推測被檢抗原或抗體是否存在及其數(shù)量。常用酶技術分為固相免疫酶測定技術、免疫酶定位技術和免疫酶沉淀技術。在食品微生物檢驗領域內(nèi)，國內(nèi)使用比較多的有Reveal@大腸桿菌O157：H7檢測系統(tǒng)、Reveal@沙門氏菌檢測系統(tǒng)及GeneQuence@李斯特氏菌檢測試劑盒、金黃色葡萄球菌乳膠凝集試劑盒等。

（3）免疫磁珠技術

用連接抗體的磁珠捕捉增菌液中的目的菌，然后將捕捉到的抗原即目的菌劃線于選擇性平板，觀察菌落?；蛴脽晒饣蛎笜擞浀目箍贵w進行檢測?；蛴镁酆厦告準椒磻夹g進行進一步檢測。此技術在ISO 166654:2001《食品和動物飼料微生物學―大腸桿菌O157基準檢驗方法》上得到了應用。目前可利用該技術對沙門氏菌、大腸桿菌0157、大腸桿菌0145、大腸桿菌O111等進行測試。

（4）免疫層析技術

該技術是一種膜固相免疫測定技術。滴加在膜一端的樣品溶液受膜的毛細管作用向另一端移動，猶如層析一般。移動過程中被分析物與固定于膜上某一區(qū)域的抗原或抗體結(jié)合而被固相化，無關物質(zhì)則越過該區(qū)域而被分離，然后通過標記物的顯色來判定實驗結(jié)果。以膠體金為標記物的實驗稱為膠體金免疫層析技術，該技術具有簡單、快速、準確和無污染等優(yōu)點，可對食品中大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、布氏桿菌、霍亂弧菌等進行檢測。

（5）其它免疫技術

細菌直接計數(shù)法主要包括流式細胞儀(flow cytometry，F(xiàn)CM)和固相細胞計數(shù)(solid phasecytometry，SPC)法。FCM通常以激光作為發(fā)光源，經(jīng)過聚焦整形后的光束垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細胞在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。光散射信號基本上反映了細胞體積的大?。粺晒庑盘柕膹姸葎t代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度，由此可通過儀器檢測散射光信號和熒光信號來估計微生物的大小、形狀和數(shù)量。流式細胞計數(shù)具有高度的敏感性，可同時對目的菌進行定性和定量鑒定。目前已經(jīng)建立了細菌總數(shù)、致病性沙門氏菌、大腸埃希氏菌等的FCM檢驗方法。

3.其它技術

即用型紙片法

3M公司的perrifilmTMPlate@系列微生物測試片，可分別檢測菌落總數(shù)、大腸菌群計數(shù)、霉菌和酵母計數(shù)。由RCP Scientific Inc公司開發(fā)上市的Regdigel@系列，除上述項目外還有檢測乳桿菌、沙門氏菌、葡萄球菌的產(chǎn)品。3M公司生產(chǎn)的PF(Petrifilm)試紙還加入了染色劑、顯色劑，增強了菌落的目視效果，而且避免了熱瓊脂法不適宜受損細菌恢復的缺陷。霉菌快速檢驗紙片，應用于食品檢驗中的霉菌具有操作簡便，僅需36℃培養(yǎng)，不需要低溫設備；快速，僅需2d就可觀察結(jié)果，比現(xiàn)在的國家標準檢驗方法縮短3～5d，大大提高了工作效率。紙片法與國標法在霉菌檢出率上差異無統(tǒng)計學意義，且菌落典型，易判定。

二、食品微生物快速檢測技術的局限性

快速檢測技術的評估結(jié)果表明，其對于某類食品的性能優(yōu)于其他食品，很大程度上是由于食品成分干擾所致，有些食品成分對于快速檢測方法中所應用的技術是比較麻煩的。例如在采用PCR技術時，食物中的高蛋白、高脂肪對Taq酶具有抑制作用，可能導致檢測結(jié)果假陰性。同時PCR操作過程要求嚴格，微量的外源性DNA進入PCR后可以引起無限放大產(chǎn)生假陽性結(jié)果。

三、結(jié)束語

隨著某一快速檢測技術更加頻繁的使用，其好處與局限性同時變得更加明顯，使用者在選擇這些快速檢測技術時，應考慮此技術的準確性、特異性、實用性、穩(wěn)定性、靈敏度以及采用此技術的供應價格、認可程度和售后服務等因素，綜合判別后進行選擇。

參考文獻：

[1]雷質(zhì)文，等.食品微生物實驗室質(zhì)量管理手冊[M].北京:中國標準出版社,2006.

[2]李志明，等.食品衛(wèi)生微生物檢驗學[M].北京:化學工業(yè)出版社,2008.

[3]熊國華，等.實時熒光PCR定量檢測食品中的單增李斯特菌［J］．中國食品衛(wèi)生雜志，2007,19（3）：248-250.

篇5

【關鍵詞】食品；微生物檢驗；檢驗內(nèi)容；檢測技術

一、食品微生物檢驗的要求

1、操作人員和操作細節(jié)

實驗室應當聘請具有一定微生物學資質(zhì)的人來操作，并且要經(jīng)過考核合格后方能上崗。要求其具有較熟練的操作技能，強烈的質(zhì)量意識，并且嚴格遵守無菌操作規(guī)程，減少人為因素帶來的困擾。

操作要求：操作人員牢記無菌觀念，整個過程要求無菌操作，嚴格按照GB／T4789食品微生物檢驗標準進行操作。用無菌工具無菌操作取樣。按照 GB／T4789標準方法進行數(shù)據(jù)處理，得出實驗結(jié)果。

2、檢測環(huán)境和設施設備

實驗室應當具有適宜微生物檢驗進行的設施設備條件，包括檢測設施及輔助設施，并且要特別注意特殊的設備要在特殊的環(huán)境下放置和操作。無菌實驗室的建設應符合GB19489的規(guī)定，符合無回路的原則。設有人流和物流通道。在時問和空間上有效隔離各種檢測活動。為保證檢測樣品的完整性，操作時應按照規(guī)定的程序并采取預處理措施。

(1)紫外線消毒：在室溫下，220V，30W紫外燈下方垂直位置lm處的253.7nm紫外線輻射強度應≥70μW／cm2，低于此值時應更換，適當數(shù)量紫外燈，確保平均每立方米應不少于1.5W。

(2)臭氧消毒：封閉無菌室內(nèi)，無人條件下，采用20mg／m3濃度的臭氧作用時間應≥30min，消毒后室內(nèi)臭氧濃度≤0.2mg／m2時方可人內(nèi)作業(yè)。

(3)無菌室空氣滅菌效果驗證方法(沉降法)：一般情況下無菌室面積≤30m2時從所設定的一條對角線上選取3點，即中心l點、兩端各距墻1米處各取一點；無菌室面積≥30m2時選取東、南、西、北、中點均距墻lm各取一點。

3、檢測設備和檢測藥品

(1)培養(yǎng)箱、水浴鍋、于熱滅菌箱和高壓滅菌鍋的安裝要求：在首次安裝時要校對溫度的穩(wěn)定性和一致性。記錄以上設施其溫度穩(wěn)定性達到平衡時所需要的時間。要求定期對以上設備進行清潔和消毒。最好是使用感應器來對運轉(zhuǎn)循環(huán)情況進行控制和監(jiān)控。

(2)藥品配置：培養(yǎng)基采用高壓濕熱滅菌法，121℃滅菌15分鐘。部分培養(yǎng)基如膽硫乳培養(yǎng)基則需采用煮沸滅菌法。對于熱敏感的培養(yǎng)基采用膜過濾法。

4、樣品的采集、運輸和保存

采集具有代表性的樣品，并且樣品采集必須在無菌操作下進行，以防止樣品受到外源性污染和細菌的生長。采樣用具及包裝物必須是滅菌的。在樣品的運輸和保存過程中應避免日光照射，防止外來物的污染。采樣后，應將樣品在接近原有貯存溫度條件下盡快送往實驗室檢驗。運輸時應保持樣品完整。一般不應超過3小時。如不能及時運送，應在接近原有貯存溫度條件下貯存。

二、食品微生物檢驗內(nèi)容和技術

食品微生物檢驗的內(nèi)容

1、對食品污染程度指示菌的檢驗。細菌總數(shù)又被稱為菌落總數(shù)，指食品及生活飲用水檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下經(jīng)過培養(yǎng)后，所得1g或1mc檢樣中所含細菌菌落個數(shù)，是判斷食品及生活飲用水被污染程度的重要指標。大腸菌群系指一群在37℃培養(yǎng)24h后能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)配、產(chǎn)氣、需氧或兼性厭氧的革蘭氏染色陰性無芽孢桿菌。其主要來源于人和牲畜的糞便，所以研究中經(jīng)常采用糞便污染指標菌來評價生活飲用水及食品的衛(wèi)生質(zhì)量。

2、對食品中致病菌的檢測。在GB4789食品微生物學檢驗標準中，已明確規(guī)定某些微生物的數(shù)量，所以我們除要檢測食品污染程度指示菌，如菌落總數(shù)、大腸菌群(MPN)的測定外，還有致病菌如金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和志賀氏菌等。

食品微生物檢驗的技術

多年以來，對食品微生物的檢測，通常采用瓊脂平板培養(yǎng)法，共需2―3d才能完成。近幾年各國的許多機構和學者都致力于快速檢測技術和方法的研究，已改進和開發(fā)了一些快速的檢測技術和方法，提高了食品微生物檢驗的高效性、準確性和可靠性，其中新方法有以下幾種。

1、采用電阻抗法。其原理是細菌在培養(yǎng)基內(nèi)生長繁殖的過程中，將會使培養(yǎng)基中的火分電惰性物質(zhì)如碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂類等，代謝為具有電活性的小分子物質(zhì)，其能增加培養(yǎng)基的導電性，從而使阻抗發(fā)生變化，所以我們可以通過檢測培養(yǎng)基的電阻抗變化情況來判定細菌在培養(yǎng)基中的生長繁殖特性，即可檢測出相應的細菌。該法已用于霉菌、大腸桿菌等細菌的檢測。

2、采用快速酶觸反應及代謝產(chǎn)物的檢測。細菌在生長繁殖過程中可合成和釋放某些特異性的酶，所以根據(jù)其特性來選用相對應的底物和指示劑，并記錄反應的結(jié)果。如美國3MPetiffilmTM微生物測試片可分別快速測定細菌總數(shù)、金黃色葡萄球菌等。

3、采用分子生物學技術。其又包括兩種技術：(1)核酸探針技術。根據(jù)堿基互補的原則，用特定的方法測定標記物。(2)聚合酶鏈式反應(PCR)技術。其原理為通過加熱使雙鏈DNA經(jīng)裂解成兩條單鏈，成為引物和DNA聚合酶的模板；然后降低溫度，使寡聚核苷酸引物與DNA分子上的互補序列退火。一般情況下退火溫度越高，擴增特異性越好。

4、采用免疫學方法檢測細菌抗原和抗體的技術。其有三種技術：(1)熒光抗體檢測技術(IFA)，包括直接法和間接法。直接熒光抗體檢測法是在檢樣上直接滴加已知特異性熒光標記的抗血清，經(jīng)洗滌后在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。間接法是在檢樣上滴加已知細菌特異性抗血清，待作用后經(jīng)洗滌，再加入熒光標記的抗體后在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。(2)免疫酶技術(EIA)，其是將抗原、抗體特異性反應和酶的高效催化作用原理結(jié)合，是一種新穎且實用的免疫學分析技術。通過共價結(jié)合將酶與抗原或抗體結(jié)合，形成酶標抗原或抗體，或通過免疫方法使酶與抗酶抗體結(jié)合，形成酶抗體復合物。(3)免疫磁珠分離法 (IMS)，即應用抗體包被的免疫磁珠，用一個磁場裝置收集鐵珠。

5、采用儀器法。(1)微型全自動熒光酶標分析儀(Mini―VIDAS)，其主要采用具有優(yōu)異的敏感性和特異性的酶聯(lián)熒光技術(ELFA)，所測的熒光與抗體中抗原的含量成正比。(2)全自動微生物分析系統(tǒng) (Vietk―AMS)。其可以同時對60-~480個樣品進行分析，并且鑒定時間只需2～3h，這是效率非常高的一個檢驗系統(tǒng)，并且也是今后食品微生物檢驗技術發(fā)展的一個方向。

結(jié)束語

近年來,食物中毒事件逐年增多，隨著科技發(fā)展和人們生活水平的提高，食品安全和衛(wèi)生已經(jīng)成為人們關注的焦點。國際衛(wèi)生組織非常關注食品微生物污染問題，食品微生物檢驗成為了食品質(zhì)量安全控制方面的重要技術之一，對控制微生物引起的食源性疾病具有重要作用，因而加強食品的安全檢測就顯得更加重要。

參考文獻

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關鍵詞：肉類食品 微生物 安全現(xiàn)狀 控制檢測技術

肉類食品安全問題關系到千家萬戶老百姓的切身利益，已日益成為人民群眾普遍關注的社會焦點問題。然而，近年來，社會上由致病性微生物導致的肉類食品安全事件頻繁發(fā)生，造成人們對食品安全的憂慮與恐懼，嚴重威脅著人民群眾的生命健康安全。

1、肉類食品安全

肉類食品安全是指剔除不可接受的損害風險的情況，在規(guī)范條件下，施以科學合理的生產(chǎn)方式生產(chǎn)出來的優(yōu)質(zhì)、安全的肉類食品。所謂“損害風險”指的是肉類食品對人類自身及社會 “潛在的傷害”，這里主要包括不安全的肉類食品可能導致人類出現(xiàn)中毒、致病、致殘甚至致命等等嚴重情形。肉類食品存在諸多的不安全因素，主要來自微生物性污染（包括沙門氏菌、葡萄球菌、大腸桿菌、肉毒梭菌等等）、化學性污染（包括農(nóng)藥殘留、食品添加劑等等）、食品新技術及非法生產(chǎn)等等，其中微生物性污染是導致我國肉類食品不安全的重要因素。

2、我國肉類食品微生物安全現(xiàn)狀及其影響因素

我國是肉類食品的生產(chǎn)、加工、消費大國，肉類食品已經(jīng)成為人民群眾餐飲中不可或缺的美味產(chǎn)品，消費者對于肉類食品需求意愿的逐步加強，帶動了肉類食品行業(yè)的相關產(chǎn)品的發(fā)展，使得我國的肉類食品企業(yè)行業(yè)規(guī)模不斷發(fā)展壯大。但是，我們同時也要注意和發(fā)現(xiàn)其中存在的一些問題：從事肉類食品加工的企業(yè)規(guī)模大小不一、生產(chǎn)技術水平高低不齊、質(zhì)量的管理控制能力優(yōu)劣參半等等原因都時刻要求肉類食品企業(yè)在關注產(chǎn)品銷量的同時，更要注重產(chǎn)品的質(zhì)量安全，以確保取得消費者對本企業(yè)產(chǎn)品的認同，保證企業(yè)的健康穩(wěn)步的發(fā)展。近年來，我國發(fā)生的豬鏈球菌中毒事件、高致病性H5N1型禽流感、瘦肉精事件、生蛆門事件、亞硝酸鹽嚴重超標、引起食源性疾病的微生物感染等肉類食品安全事件，致使肉類食品安全問題成為了群眾普遍關注的焦點問題。

污染我國肉類食品源頭的不安全因素很多，但在肉制品中食源性致病菌和各種病毒造成的微生物性污染最為嚴重。其中需要嚴格防控的微生物病原體主要包括沙門氏菌、李斯特氏菌、出血性大腸桿菌O157：H7、豬鏈球菌以及其他腸道致病菌。雖然，目前全世界范圍內(nèi)對肉類食品安全的微生物性污染控制有了很大的發(fā)展，但其中一些病原體的變異等可能出現(xiàn)的狀況仍需要高度關注。長期以來，我國的食品衛(wèi)生質(zhì)量監(jiān)督部門對肉類食品的檢查監(jiān)督非常嚴格，但由于肉類食品的營養(yǎng)豐富，十分適合致病微生物的繁衍，加上微生物污染的傳播途徑很多且不容易被察覺發(fā)現(xiàn)，從而導致了肉類食品微生物安全事件的發(fā)生較為頻繁。概括來講，導致我國肉類食品微生物安全的影響因素主要有以下幾個方面：畜禽屠宰環(huán)節(jié)存在多次感染微生物的機會，微生物可通過多種途徑和傳播媒介對肉類表層造成污染。肉類食品的加工過程中常常會發(fā)生微生物交叉感染，導致肉制品中的菌群數(shù)量超標，容易滋生出病原菌，加速肉類食品的腐爛變質(zhì)。肉類食品在流通環(huán)節(jié)中如果沒有完整的冷鏈體系和健全的檢測體系，就會造成微生物的二次污染，從而影響到肉類食品的安全。為了保證肉類食品的微生物安全，必須加強對微生物變異及未知病原體的觀察和研究，提高檢測和控制技術以應對有可能突發(fā)的肉類食品安全危害。

3、引起我國肉類食品安全事件的常見微生物

3.1 大腸桿菌

大腸桿菌，學名 “大腸埃希菌”， 屬腸道桿菌大類中的一種，經(jīng)常存在于人和動物的腸道中，數(shù)量非常多，主要寄生于大腸內(nèi)，是一種兩端鈍圓、能運動、無芽孢的革蘭氏陰性短桿菌。它是和我們的日常生活關系結(jié)合得比較密切的一類細菌，結(jié)構比較簡單、易于培養(yǎng)，也是生物學上十分重要的實驗材料之一。在正常情況下，大多數(shù)大腸桿菌是比較安分守己的，不會對人類的身體健康造成任何傷害，反之還能夠抵御其他致病菌的襲擊，幫助合成維生素B和K。只有當身體出現(xiàn)免疫力下降，腸道長期缺乏刺激等特殊情況時，這些大腸桿菌才會侵入人類體內(nèi)一些部位，比如膽囊、尿道、膀胱等處，極易引起感染，導致出現(xiàn)胃痛、嘔吐、腹瀉和發(fā)熱等不適癥狀。因此，大部分大腸桿菌通常被看作機會型致病菌，可以經(jīng)過帶菌人的手、食物和日常生活用品進行廣泛傳播，還可以經(jīng)過空氣或者水源進行傳播，帶菌肉類食品也會由于生熟交叉污染、熟后污染或者加熱不夠徹底等引起一系列的中毒安全事件。

3.2 李斯特氏菌

李斯特氏菌是一種能夠促使人畜共同患病的病原菌，廣泛存在于自然環(huán)境中，屬于革蘭氏陽性菌類球型桿菌，能夠引起敗血癥、腦膜炎、心內(nèi)膜炎、流產(chǎn)等病癥，對人類生命健康安全具有嚴重的威脅性。然而，通過加熱能夠消滅李斯特氏菌，高溫肉制品不會產(chǎn)生李斯特氏菌，不需加熱的即食類低溫肉制品必須控制李斯特氏菌的產(chǎn)生。經(jīng)過實驗證實，肉類、蛋類、禽類、海產(chǎn)品、乳制品、蔬菜等等都是李斯特氏菌的感染源。在自然環(huán)境中時時處處都存在著李斯特氏菌，而且在大多數(shù)食品中也都能找到李斯特氏菌的蹤跡。因此，在肉類食品衛(wèi)生安全微生物檢驗中，必須加以引起足夠重視。

3.3 沙門氏菌

沙門氏菌屬于腸桿菌科，是革蘭氏陰性腸道桿菌的一種。它天然存在于鳥類、哺乳類、爬行類和兩棲類動物的腸道內(nèi)，帶菌率較高，是引起食物中毒的常見病原菌。沙門氏菌的主要傳播媒介是肉類產(chǎn)品、家禽和蛋奶類制品，感染主要是由這種病菌的血清型和食用者的身體狀況決定的，小孩、老人及免疫力低下的人群是受威脅最嚴重的。沙門氏菌感染食物的原因主要有：生熟食品未進行詳細分類而造成交叉性感染；病畜或者病禽的糞便污染了食物；帶菌者在生產(chǎn)食物的過程中污染了食物等等，都會導致發(fā)生不同程度的食物中毒安全事故。據(jù)統(tǒng)計，在全世界各國的細菌性食物中毒中，沙門氏菌引起的食物中毒往往名列榜首。

3.4 金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌是葡萄球菌屬中的一種典型病原菌，廣泛存在于空氣、水、灰塵以及人和動物的排泄物中，可致使許多食品受到感染，其引起的食物中毒感染幾率僅次于大腸桿菌。人畜化膿感染部位常常成為金黃色葡萄球菌的污染源，可造成局部化膿感染，甚至引發(fā)肺炎、心包炎、敗血癥、和膿毒癥等傳染疾病。金黃色葡萄球菌自身產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶是決定其致病力強弱的主要因素，它可通過以下途徑污染食品：食品加工人員或銷售人員帶菌可造成食品污染；食品在加工前本身帶菌或在加工過程中受到了污染，產(chǎn)生了腸毒素，引起食物中毒；奶?；蓟撔匀橄傺谆蚯菪缶植炕摃r，對肉體其他部位的污染。

3.5 志賀氏菌

志賀氏菌和大腸桿菌都屬于腸桿菌科，其形態(tài)與一般腸道桿菌無明顯區(qū)別，為革蘭氏陰性桿菌，能分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。志賀氏菌在外界環(huán)境中的生存力比較差，一般在潮濕土壤中僅能存活34天，對高溫和化學消毒劑很敏感，很容易產(chǎn)生耐藥性。志賀氏菌在人員大量集中擁擠的地方和不衛(wèi)生條件下能迅速傳播，常為食物爆發(fā)型或經(jīng)水傳播病。它主要通過消化道途徑進行傳播，是引起細菌性痢疾的主要病原菌。

3.6 肉毒梭菌

肉毒梭菌屬于厭氧性梭狀芽胞桿菌屬，在厭氧情況下生長，在正常加熱溫度下存活，容易形成芽胞，芽胞比繁殖體寬，呈梭狀，新鮮培養(yǎng)基的革蘭氏染色為陽性，產(chǎn)生劇烈細菌外毒素，即肉毒毒素。這些肉毒霉素容易引起人和動物的肉類中毒，導致肉毒梭菌的致病性。肉毒梭菌廣泛存在于自然界中，是從土壤、水、蔬菜、肉奶制品、海洋沉積物、魚類腸道、蟹和貝類的腮和內(nèi)臟中分離出來的，極易被人和動物所感染，引起腹瀉、嘔吐、頭腦眩暈、呼吸和吞咽困難等等癥狀，是致死性最高的病原體之一。肉毒梭菌常見于真空包裝的罐裝食品或半加工的食品中，一般通過高溫加熱殺死芽胞或者改變?nèi)忸愂称返臓顩r抑制其產(chǎn)生肉毒毒素等來控制肉毒梭菌的擴散。

4、我國肉類食品中致病性微生物的檢測技術

4.1 食源性致病微生物的傳統(tǒng)檢測技術

食源性致病菌的傳統(tǒng)檢測方法包括微生物形態(tài)和培養(yǎng)特性評價，根據(jù)不同微生物在形態(tài)結(jié)構上的不同從而對微生物進行區(qū)別和鑒定，由于不同微生物在同種培養(yǎng)基中生長繁殖形成的菌落特征差異很大，而同種細菌的培養(yǎng)特征在同等條件下具有一定的穩(wěn)定性，可以利用此點不同之處對不同微生物進行區(qū)別鑒定，微生物培養(yǎng)特性的觀察也是微生物檢驗鑒別中的重要組成內(nèi)容。傳統(tǒng)檢測方法包括前制作標本、選擇性增菌、挑選單個可疑菌落、鏡檢以及血清學試驗等步驟，具有操作繁瑣、檢測周期長、工作量很大且得到的結(jié)果準確性較低等缺點。目前，人們在肉類食品微生物安全快速檢測技術上投入了大量的精力，主要有以下幾種方法進行對肉類食品中的致病性微生物進行檢測。

4.2 生物傳感技術

隨著生物工程及各種科學技術的快速發(fā)展、彼此間相互滲透、進而形成了生物傳感技術。目前， 主要用于食品毒素檢測的生物傳感是通過以表面等離子激元共振生物傳感技術應用為主的光學生物傳感器對肉類食品中的各種毒素進行檢測。表面等離子激元共振生物傳感器把受體固定在金屬膜上，利用信號識別顆粒譜峰對金屬膜表面上的電解質(zhì)變化較為敏感的特性產(chǎn)生的表面等離子激元共振現(xiàn)象來檢測受體和液相配體之間特異性結(jié)合的情況。信號識別顆粒檢測存在有一些缺陷，如對特異的靶物質(zhì)和金屬膜芯片表面其他樣本的非特異交叉反應物無法進行區(qū)分辨別；同時分析物質(zhì)的種類個數(shù)少于四種；還有在受體發(fā)生點突變、功能活性變化或者是化學改變的時候，SRP無法將其與完整的分析物區(qū)分開來。雖然SRP檢測方法存在諸多缺陷，但它作為一種使用簡單、快速和行之有效的檢測技術方法在食品安全領域仍然得到了廣泛的推廣和使用。

4.3 基因芯片技術

基因芯片技術作為一項新型的生物技術誕生于二十世紀末，它的基本原理就是將各種基因寡核昔酸點樣于基因芯片表面，然后微生物樣品DNA經(jīng)聚合酶鏈式反應擴增后制備成熒光標記探針，再通過其與芯片上的寡核昔酸點雜交，最后通過掃描儀定量和分析熒光分布模式來確定檢測樣品是否存在某些特異微生物?；蛐酒夹g理論上可以檢測各種介質(zhì)當中的微生物，在一次實驗中檢出所有潛在的致病菌，也可以用同一張芯片檢測某一致病原的各種遺傳學指標，從而研究復雜微生物群落的基因表達情況?；蛐酒夹g與傳統(tǒng)的微生物檢測方法相比，具有特異性強、敏感性高、操作簡單便捷、一次實驗可以得出全部結(jié)果等優(yōu)點，因而在致病原分析檢測方面有著良好的的未來發(fā)展前景。但是基因芯片技術也有著自身的一些缺點：基因芯片檢測對操作人員的專業(yè)技術水平要求較高，極大的限制了其普及應用；樣品制備和標記工作繁重、過程復雜，由于樣品放映過程中極易受到污染會影響信噪比的檢測情況；沒有統(tǒng)一的質(zhì)量控制標準且需要專門的儀器設備，檢測費用昂貴，造成該項技術在國內(nèi)很難推廣。

4.4多重PCR技術

多重PCR是在常規(guī)PCR基礎上發(fā)展起來的一種新型PCR擴增技術， 以其特異性強、靈敏度高和快速準確等優(yōu)點在食品微生物檢測領域得以廣泛應用。多重聚合酶鏈式反應技術其工作原理與常規(guī)聚合酶鏈式反應技術相同，只是在同一反應體系中加入一對以上的特異性引物，如果存在與各引物對特異性互補的模板，則可同時在同一反應管中擴增出一條以上的目前的DN段，采用這一技術可同時檢測多種病原微生物。這種方法減少了操作步驟及試劑，保留了常規(guī)PCR的特異性與敏感性，具有高效性、系統(tǒng)性和經(jīng)濟簡便性等特色，可以實現(xiàn)一次擴增的同時檢測多種微生物的目的。但是多重PCR技術存在擴增效率不高、敏感性偏低；出現(xiàn)引物干擾等缺點，有待進一步完善該項技術手段，從而在肉類食品微生物安全方面進行推廣和應用。

肉類食品的安全問題是各國政府和人民群眾關注的社會焦點問題之一，解決肉類食品安全問題，加快致病性微生物的控制檢測技術研究可以對食源性疾病的發(fā)生和傳播進行有效地預防與控制，還能避免全球范圍內(nèi)食源性疾病的流行，促進世界各國在肉類食品微生物安全方面的技術交流和科研合作。世界各國通過建立健全肉類食品法規(guī)、加強肉類食品檢驗力度和提高肉類食品中致病性微生物的快速檢測技術來加強對肉類食品的安全監(jiān)控，確保肉類食品的安全與出口貿(mào)易。

參考文獻：

[1]中華人民共和國衛(wèi)生部.食品衛(wèi)生微生物學檢驗.北京：中國標準出版社，2004

[2]王華，塔莉，耿建暖等.從微生物指標中看我國肉類食品安全狀況[J].中國環(huán)境管理干部學院學報，2008（1） ：80-82

[3]張建民，楊瑞軍，金莞爾等.衢州市2007年熟肉制品微生物學檢驗監(jiān)測分析[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2008，18（8）：1593-1594

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關鍵詞：現(xiàn)場教學 微生物 課程開發(fā)

《微生物分析檢測技術》是包頭輕工職業(yè)技術學院工業(yè)分析與檢驗專業(yè)開設的一門專業(yè)課程，是從事分析化驗工作人員所必備的專業(yè)知識。傳統(tǒng)的教學方法是以課堂講授為主，學生實習、實訓為輔的教學方法，這樣就造成了學生對于學習這門課程的意義缺乏認識，學生學習的積極性不高，即使掌握了一些理論知識，也不可能對其在生產(chǎn)實踐中的作用有較深刻的理解。而現(xiàn)場教學法，可以很好的規(guī)避這些矛盾，學生不僅能較容易地學好理論知識，而且能較早的接觸和體驗到實際工作場地和工作內(nèi)容。

1 《微生物分析檢測技術》課程中應用現(xiàn)場教學法的必要性

在職業(yè)教育中，培養(yǎng)學生的動手和應用能力是非常重要的，針對于《微生物分析檢測技術》這樣一門實踐性很強的課程，實施現(xiàn)場教學法無疑是最佳的選擇。第一，現(xiàn)場教學法突出教學的現(xiàn)實性，能引起學生的學習興趣，使學生積極主動地融入教學過程中，教師不再直接告訴學生如何去做，而是讓學生通過已經(jīng)學過的知識，去分析問題、解決問題，使理論和時間有機的結(jié)合起來。第二，現(xiàn)場教學法實現(xiàn)了以學生為主體，改變傳統(tǒng)教學教學方法中始終以教師為主導的現(xiàn)狀，在現(xiàn)場教學環(huán)境中，學生通過教師的引導分析問題，提出解決方案，始終處于主導地位。第三，現(xiàn)場教學法充分調(diào)動了教學的互動性，整個教學過程始終處于動態(tài)之中，改變傳統(tǒng)教學時間和空間的制約，實現(xiàn)師生的雙向互動，提高學生的溝通和交流的能力，并且很好的學習并踐行了團隊精神。第四，現(xiàn)場教學法完善了對學生的評價，現(xiàn)場教學中，對學生最終成績的評定體現(xiàn)在三個方面，分別是理論考試、技能考試、平時表現(xiàn)成績?nèi)齻€部分，能對學生的綜合表現(xiàn)給予全面的評價。

2 《微生物分析檢測技術》課程中應用現(xiàn)場教學法的條件

現(xiàn)場教學法與傳統(tǒng)的教學在實施過程中有很大的不同，因此實施現(xiàn)場教學法必須具備相應的條件。第一，師資條件，從事現(xiàn)場教學法的教師首先要具有良好的職業(yè)操守；要具有較強的理論基礎，并且實踐動手能力和綜合能力必須過硬，同時最好有在企業(yè)的工作經(jīng)驗。第二，配套的教學環(huán)境，現(xiàn)場教學法打破了傳統(tǒng)的教學模式，教師不再是站在講臺上授課，學生也不是坐在教室里一味的聽，而是教室與學生同時進入企業(yè)或仿真實訓基地，使學生對陌生的專業(yè)知識有一個感性的認知，所以教學環(huán)境的選擇和建設是非常重要的。第三，合適的教材，現(xiàn)場教學法改變了傳統(tǒng)的章節(jié)式的教學內(nèi)容，而是以典型的工作任務為單元進行，所以合適的教材也是必備條件之一。

3 《微生物分析檢測技術》課程中應用現(xiàn)場教學法的實施效果

我包頭輕工職業(yè)技術學院工業(yè)分析與檢驗專業(yè)于2003年開始對《微生物分析檢驗技術》這門課程實施教學改革，通過實踐證明，現(xiàn)場教學法直觀、生動，與理論教學相輔相成，取得了良好的效果。第一，課堂氣氛明顯改善，學習熱情顯著增強，現(xiàn)場教學法實現(xiàn)了邊做邊學的教學模式，使學習環(huán)境變得靈活寬松了，學習內(nèi)容與實踐貼近，更加生動有趣了，師生間的互動明顯增強，師生關系更加融洽了。第二，學生的動手能力明顯提高，學習成績顯著改善，通過具體的操作訓練，提高了學生對各項微生物分析檢測技術的掌握程度，更好地體現(xiàn)了高職教育的培養(yǎng)目標。第三，團隊精神明顯增強，協(xié)作意識顯著提升，現(xiàn)場教學法中學生的學習與實踐均以小組形式進行，通過無數(shù)次的討論、爭辯以及合作，團隊精神和協(xié)作意識不知不覺的在學生心中生根了。

4 結(jié)語

經(jīng)過一年的教學實踐，雖然現(xiàn)場教學法在《微生物分析檢測技術》課程教學中的應用取得了預期的教學效果。但在今后的教學實踐中還要進一步加大投入，組織教師編寫適合的教材，完善教學現(xiàn)場所需的各種儀器設備，創(chuàng)造更好的現(xiàn)場條件以取得更好的現(xiàn)場教學效果。

參考文獻：

[1]魯?shù)裸y.現(xiàn)場教學的三大要領[J].教學與管理，2001（1）：51-52.

[2]浙江行政學院課題組，劉振華.現(xiàn)場教學法研究[J].天津行政學院學報，2008（05）.

[3]周永.基于校企對接的現(xiàn)場教學法在專業(yè)課程教學中的應用[J].長春理工大學學報，2013（01）.

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【關鍵詞】水污染；生物監(jiān)測；檢測方法

一、水污染的生物監(jiān)測原理和優(yōu)點

1.水污染生物監(jiān)測的原理

在某種前提條件下，水生生物群落及水的環(huán)境有著相互關聯(lián)并且有著相互制約的現(xiàn)象，保持著非常自然的、暫時性的均衡體系。水環(huán)境中注入的污染物質(zhì)，必將會作 用于生物本身和其種群或者其群落，影響到生態(tài)系統(tǒng)的固有生物種群其數(shù)量和物種組成與及其更多特點、固有特點、生產(chǎn)力和生理狀況等，使某些水生生物逐步消 失，然而在別的某些水生生物卻能夠繼續(xù)生長下去，其本身和其種群的數(shù)量逐步增加。運用水質(zhì)檢測技術儀器監(jiān)測水污程度，從這種變化的水污染生物體現(xiàn)，得出水 環(huán)境質(zhì)量的變化，這就是水污生物監(jiān)測概念和依據(jù)。

生物監(jiān)測是指利用水生生物個體、種群或群落對水體污染或變化所產(chǎn)生的反應來判斷水體污染狀況的一種水體污染監(jiān)測方法。生物與環(huán)境相互作用，相互影響，環(huán)境 的改變能影響生物的生長和生活習性，直至改變生理功能；生物的存在也能影響和改變環(huán)境，如生物的攝取能量、新陳代謝等。生物與其環(huán)境的這種統(tǒng)一性和協(xié)同進 化是環(huán)境質(zhì)量生物監(jiān)測的生物學基礎。

2.水污染生物監(jiān)測的優(yōu)點

總的來說，生物監(jiān)測具有敏感性、富集性、長期性和綜合性等特點，具有一定的優(yōu)越性。水污染生物監(jiān)測有自身的特點：

①監(jiān)測功能多樣化。由于可以使用水污染監(jiān)測的生物種類很多，加上每種生物對不同污染物都能產(chǎn)生反應，并且表現(xiàn)不同的癥狀，因此監(jiān)測功能強大。

②監(jiān)測污染狀況客觀。發(fā)揮水污染監(jiān)測功能的生物一般生活在固定的區(qū)域，且有一個穩(wěn)定的時期，與理化監(jiān)測相比，更能把某一水域的長期污染狀況客觀地反映出來。

③監(jiān)測結(jié)果可靠。某些監(jiān)測生物對一些污染物非常敏感，它們能夠?qū)δ切┻B精密儀器都無法檢測的微量污染物產(chǎn)生反應，并表現(xiàn)出相應的受損傷的效應

④便于綜合評價。理化監(jiān)測只能檢測特定條件下水環(huán)境中污染的類別和含量等，而生物監(jiān)測可以反映出多種污染物在自然條件下對生物的綜合影響，從而可以更加客觀、全面地評價水環(huán)境。

⑤監(jiān)測成本低。理化監(jiān)測使用的監(jiān)測儀器涉及維修和保養(yǎng)，而生物監(jiān)測不涉及這些工作，因此監(jiān)測成本較低。

二、水污染生物監(jiān)測技術

1.運用指示生物在水體里出現(xiàn)或者消失及其數(shù)量有多少的辦法監(jiān)測水質(zhì)

在許木啟的實驗里，運用了白洋淀水體里的浮游動物群種其變化來判斷其水體的污染程度和自凈能力。其實驗的最終結(jié)果是府河D白洋淀的水體從上游至下游中，其 浮游動物的耐污種類逐步減少，而廣布型種類逐步增多，而其下游眾多正常水體卻出現(xiàn)了浮游動物種類均勻分布的現(xiàn)象。同一時間，原生動物在上游的鞭毛蟲一直到 中游卻出現(xiàn)了纖毛蟲。然而，下游卻發(fā)現(xiàn)眾多平常分布在潔凈型水體的種類。這一來，表示府河D白洋淀的水體由上游一直到下游水體其污染程度在不斷減少，河流 水體擁有顯著的而且比較穩(wěn)定的自凈功能。

2.運用水生生物群落布局的變化來監(jiān)測水質(zhì)

在蔣昭鳳的實驗中，使用底棲動物的變化來評估湘江水質(zhì)污染情況，最后答案發(fā)現(xiàn)湘江的支流底棲動物有大型無脊椎動物種及多類性指數(shù)，其物種由上游至下游走向 呈現(xiàn)減少情況，從這個實驗看來，毒死生物的有效毒物其作用對湘江的污染卻比較顯著。同時還可以依據(jù)湘江支流各斷面種類數(shù)及其減少程度來判斷出各斷面其污染 地步。另外，還監(jiān)測到隨著時間的推移，在底棲大型無脊椎的動物種類數(shù)及多類特點指數(shù)方面，也呈現(xiàn)出消少的趨勢。從這種情況看來，有毒污染仍然存在發(fā)展的趨勢。

三、水污染生物監(jiān)測和檢測的應用

環(huán)境的污染物是人類及其它生物最為嚴峻的危害，其難點就是對細胞遺傳物資組成的損害。近幾十年中環(huán)境生物的檢測技術，特別是細胞微核技術及四分體微核技 術，已經(jīng)在動植物及人類染色體受到外界理化因子損害等方面得到應用。同時，對環(huán)境監(jiān)測的技術的刻苦鉆研已經(jīng)取得巨大的進展。微核在于生物細胞內(nèi)的生成路徑 和染色體畸變的相應特點早就被人們所認識，用微核測定方法取代染色體畸變的方法來監(jiān)測環(huán)境污染物具有很多優(yōu)點，如對生物遺傳物質(zhì)的傷害較小、操作簡便和靈 活度高等。最常用的蠶豆根尖細胞微核的試驗技術就是以染色體傷害和紡錘絲低毒的優(yōu)點等使其成為測試植物微核監(jiān)測新方法。這項技術自發(fā)現(xiàn)以來，在環(huán)境誘變及 致癌因子檢測鉆研中，更是在水質(zhì)污染與及致突變劑的檢測研究領域取得廣泛運用。

四、水污染監(jiān)測技術的發(fā)展動向

1.水污染自動監(jiān)測技術

水污染自動監(jiān)測是對污染源排放的廢水（經(jīng)過處理的或未經(jīng)過處理的）以及地表水和地下水被污染的情況進行連續(xù)自動采樣、測定、傳輸和數(shù)據(jù)處理的定時監(jiān)測網(wǎng)絡。

水污染自動監(jiān)測技術起源于美國，美國在1958年開始對俄亥俄河進行水質(zhì)自動監(jiān)測。在日本，各水域和工礦排水幾乎都設立了自動監(jiān)測系統(tǒng)利用計算機來管理及處理數(shù)據(jù)川。

我國自20世紀80年代開始，在黃浦江、天津引灤濟津段以及吉化、寶鋼、武鋼等大企業(yè)的供排水系統(tǒng)建立了水污染自動監(jiān)測站，開始了對自動水質(zhì)監(jiān)測系統(tǒng)的研究。

2.水污染遙感監(jiān)測技術

水污染遙感指應用地面、航空、航天等遙感平臺對河流、湖泊、水庫和海洋進行探測，診斷水體的反射、發(fā)射、吸收特征的變化，從而實現(xiàn)快速地確定水污染的分布狀況和位置的水污染監(jiān)測方法。水污染遙感常用的儀器有紅外掃描儀、多光譜掃描儀、微波系統(tǒng)和激光雷達等。監(jiān)測對象主要是水面油污染、水中懸浮物、污水排放、赤潮藻類的類型和密度等。在20世紀70年代末，我國遼寧省環(huán)境科學研究所利用紅外技術對大連灣的油污染進行了監(jiān)測。1980-1983年在天津一渤海地區(qū)組織了一次航空遙感試驗研究，對天津地區(qū)污染水體的光譜特性進行了初步的分析研究。

綜上所述，對于水資源越來越緊缺的生態(tài)環(huán)境下，水體污染仍然不斷受到不同程度的惡化。這樣一來，即客觀條件迫使水污染監(jiān)測技術不斷改進。水生生物監(jiān)測水體即能夠反應 水環(huán)境質(zhì)量狀況，對毒物監(jiān)測靈敏度高，同時需要的測試儀器也比較簡單。當前，國內(nèi)的水污染生物監(jiān)測方法和監(jiān)測物還在不斷更新，監(jiān)測的靈活度越來越高。用某 些方法同樣能夠?qū)μ囟ǖ哪承┗蛘叨喾N污染物作出不同程度的監(jiān)測，污染程度高低同樣能夠明顯反映出來。但是，要完成傳統(tǒng)生物監(jiān)測方法沒法來完成的水體中種某 些污染物質(zhì)的檢測，還需要共同努力。現(xiàn)在有一些水生生物監(jiān)測技術仍然難以確定水體中污染物的種類和含量，所以，應該采納多種監(jiān)測方法進行綜合監(jiān)測，以保證 監(jiān)測最終結(jié)果的精確性和完整等特點。

參考文獻：

[1]許木啟.從浮游動物群落結(jié)構與功能的變化看府河D白洋淀水體的自凈效果[J].水生生物學報，1996，20，（3）：212-220.

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關鍵詞 生物技術；食品檢測；應用

中圖分類號TS2 文獻標識碼A 文章編號 1674-6708（2014）106-0127-02

近幾年，因城市工業(yè)化日漸加深，使得環(huán)境問題越來越嚴重，人們對食品安全的關注也越來越多，食品安全已經(jīng)成為牽動人心的焦點問題。然而，對于現(xiàn)在的食品檢測，傳統(tǒng)的方法已經(jīng)與現(xiàn)代社會發(fā)展需求完全脫軌，當前在食品檢測中廣泛應用的是PCR技術、生物芯片、基因探針法、生物傳感器技術、免疫技術等生物技術。眼前，人們越來越關注食品安全，即是食品質(zhì)量的安全。在我國，影響并制約食品安全的因素有很多，比如法規(guī)法律尚不完善，政府監(jiān)管松懈以及科學技術上遭遇“瓶頸”等。因此，生物技術的廣泛應用使人們實現(xiàn)了簡便快捷、特異性強、靈敏度高的食品檢測方法。

1基因探針法

基因（DNA）探針法又稱分子雜交技術，其原理是利用基因的重復性、變性和其堿基互補配對的精確性來探查某一DNA序列的新技術。當前，DNA探針雜交法有兩種，分別同相雜交和異相雜交，其技術的關鍵就是構建基因探針。近幾年，基因探針雜交技術十分廣泛的應用于食品微生物的檢測中，如今可檢測食品中存在的大腸桿菌、沙門氏菌、李斯特氏菌、葡萄球菌和志賀氏菌等。相較于傳統(tǒng)的檢測方法，DNA探針技術在克服了傳統(tǒng)檢測方法缺點的同時，其操作簡便快捷、靈敏度高、特異性強的優(yōu)點使食品檢測結(jié)果更精準。但是，DNA探針技術也存在著速度慢、成本高、效率低等局限性，在今后的科學研究中還需改進。

2 PCR 技術

PCR技術的原理是以需要擴增的DNA分子作為模板，用分別和模板互補的一對寡核苷酸的片段作引物，遵從半保留復制原則，在DNA聚合酶的作用下完成擴增，因此，又稱聚合酶鏈反應技術，由變性、復性和延伸三個步驟構成。僅需要用很少的物質(zhì)便可大量擴增所需的基因片段，并可以定量、定性地分析檢測樣品，這是PCR技術的一大優(yōu)點。與此同時，由于檢測儀器昂貴，操作復雜、技術含量較高，因此對其技術人員有較高且嚴格的要求。由于現(xiàn)在分子生物學技術正在突飛猛進的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因食品已經(jīng)隨處可見，由此可見轉(zhuǎn)基因食品逐漸進入了人們的生活，它們在人們的餐桌上出現(xiàn)的同時，轉(zhuǎn)基因食品的安全性也倍受人們的關注，成為了百姓飯前茶后所談論的熱點話題。由于在傳統(tǒng)的食物中，并不存在轉(zhuǎn)基因食品中的蛋白質(zhì)和新遺傳物質(zhì)，使消費者存在隱憂。為了讓人們的健康有一個可靠的保障，使消費者消除顧慮，讓商品流通和國際貿(mào)易更加有利，研發(fā)一個快速、簡便、準確的食品安全檢測技術迫在眉睫。

3 免疫學檢測技術

免疫學檢測技術的基本原理是抗體和抗原的結(jié)合反應，一般可將其分為三類：免疫沉淀反應、免疫標記技術和免疫凝集試驗。目前，免疫學檢測技術在檢測方法中用途最為廣泛，其具有方便快捷、特異性強、檢測成本低、靈敏度高、分析容量大等特點，特別表現(xiàn)在食品檢測方面，在分析蛋白質(zhì)的結(jié)構中通常會用到。當前，免疫技術中的酶聯(lián)免疫法已在食品檢測中得到普及。近幾年，在傳統(tǒng)檢測方法的基礎上，免疫學開發(fā)出新的檢測技術，其中包括放射免疫測定、熒光免疫測定、免疫傳感器、免疫磁性分離和酶免疫測定，比如PCR-ELISA技術，就是將酶聯(lián)免疫技術與PCR技術結(jié)合，可用于檢測大腸桿菌，效果良好。酶聯(lián)免疫技術是將酶標記在特異的抗體上，即為酶標抗體。它具有酶的底物催化和抗體抗原反應的特性，它和與它對應的抗原相結(jié)合，添加底物，便可依據(jù)底物顯色程度作出定量或定性地判斷。由于酶的催化效率高，能夠最大限度的將反映效果放大，使測定結(jié)果穩(wěn)定且靈敏度高。但其也具有局限性，因此多數(shù)用于檢測鮮活組織和基因工程生物體改造的初步檢測。

4生物芯片技術

生物芯片技術的原理是按照預先的設置將大量生物分子排列并固定在載體表面，因為生物分子具有特異性親和反應，可利用其對生物分子的量和存在進行分析，比如抗體抗原反應和核酸雜交反應等。高通量是基因芯片最為突出的優(yōu)點。相較于傳統(tǒng)檢測方法，生物芯片技術可克服具有系統(tǒng)誤差的缺點，許多基因探針雜交和標記等只需一個過程即可完成，并且生物芯片技術自動化程度高且其數(shù)據(jù)可靠客觀。但是由于基因芯片技術無法判斷在細胞類型較多的組織中檢測基因的精確定位。與基因芯片相比，處于研發(fā)中的蛋白質(zhì)芯片可能將此種情況改善。

上文中論述的生物技術在食品檢測方面其運用前景是十分廣闊的，除此以外，逐漸會有越來越多的更加先進的生物技術在食品檢測中得以應用，它的前景很值得期待。

由于生物技術具有高效、經(jīng)濟等特點，廣大科學研究人員對其越來越認可，在食品檢測中生物技術成為了重要的力量。在我國科技不斷發(fā)展科研人員不斷努力創(chuàng)新研究的背景下，在今后的食品檢測中，生物技術一定會更加成熟的應用其中，使我國的食品質(zhì)量安全得到保障。食品安全不僅關系到人類的健康，更與國家的經(jīng)濟、政治息息相關。近幾年，我國大力推進食品檢測技術及食品安全的應用及研究，并增強了相應法規(guī)法律的制定。與此同時，還需大量投入資金在食品檢測的技術研究中，并對食品科學技術的專業(yè)隊伍加強建設。綜上所述，生物技術在食品檢測中已經(jīng)愈來愈顯其優(yōu)越性，但其檢測方法或多或少都存在著局限性，因此在其應用中需要搭配和選擇使用，同時也期待生物技術的改進、優(yōu)化以及創(chuàng)新，為食品安全提供可靠保障。

參考文獻

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關鍵詞：鉛成分檢定;生化工藝;檢測程序;技術策略

在全部的環(huán)境毒害品類一族中，鉛成分是一類極為普遍的毒性元素，它不可給人體造成相當程度的毒害后果，而且還可在很大程度上損害到各類自然生物的身體健康和生態(tài)條件之間的平衡效果。過去的檢定手段則更是五花八門，其中涵蓋光譜測定、電泳分析法、液態(tài)色譜測試法及二硫腙比照法等多種方法，雖然以往的檢定手段是依托于精密型的測試裝置，此類精密設備促使其檢定數(shù)據(jù)的精準性很高，然而其運作程序和檢定費用均不可能達到多維度的鉛成分檢定目標。所以業(yè)內(nèi)行家們持續(xù)追逐于探求更為節(jié)約、便捷、實用的檢定工藝，此種形勢下生化工程檢定工藝隨之出現(xiàn)，而且其憑借于自身豐富的特點，讓它在目前受到了極為有效的運用。在這一形勢下對于鉛成分檢定中的生化分析工藝運用展開深入的探究，有助于給推進本工藝研修工作的深入開展提供相關的借鑒。

1核酸定量檢測工藝

核酸定量檢測工藝，其總稱為分子型信標核酸定量檢定工藝，英文縮寫FRET。此項工藝原理是依托熒光動態(tài)能量的共振遷移來實施的化學組分檢定工藝，依托此手段來求取寡型核苷酸類探針，讓其和對應的核酸成分呈現(xiàn)互為彌補功能，在靶型分子混交的生物反應效力作用下，產(chǎn)生出熒光效應，依照熒光效應的高低水平來給檢測過程的實施構建出對應的條件。在鉛離子濃度檢定過程當中，分子型信標核酸撿定工藝的運用也是依托此項工藝原理來實施的，在通常溫度條件下，可以完成鉛離子的快捷測試，有助于減低溫度變化對探針式反應產(chǎn)生的相關效力，而且其約束指標的功能亦被減低[1]。大量研究表明，混合物中鉛離子的濃度高低完全決定了鉛檢定反應的熒光能力大小，利用此方法可以檢定出的鉛離子的濃度最低值是1.69×10mol/L。再有業(yè)內(nèi)學者特別把此項工藝的探討構建于脫氧型核酶的催化性水解專屬條件之上，且以此作為根據(jù)對其檢測工藝實施了深入化的探究，把它利用到了鉛離子的檢定過程之中，獲取了相當驚人的效果[2]。

2免疫型檢測工藝

免疫型鉛離子檢定工藝重點是依托于抑制體及抑制源之間的專屬性反應條件下擬定的生化檢定方法，它的特點在于檢測精準度極高而且奇特性極強。立足于抑制體具備著相異的類別，所以免疫型檢定方法也可區(qū)分成單型克隆出的抑制體及多型克隆出抑制體兩類，現(xiàn)階段應用比較普遍的檢定方法重點包括酶聯(lián)型免疫方法及熒光型偏振式免疫方法。而其中酶聯(lián)型免疫方法是應歸為單體克隆型抑制體檢定方法，依托人工合成鉛離子抗源體來做小鼠的免疫試驗。欲求獲取鉛離子的真正抑制體，即應當先求取鉛離子。依托功能的二螯合模式，求取反應過程的原性，爾后再利用螯合制劑和載體型蛋白推進其獲取免疫的原生性，在其小鼠身體內(nèi)注入以后再分離出抑制源，從而實施鉛成分的檢定過程。而采取熒光型的偏振式免疫方法的操作原理基本是利用分析樣品內(nèi)所含的鉛離子與超量的螯合劑之間產(chǎn)生的溶液態(tài)反應，依托免疫型復式結(jié)構化合物之間存在的競爭狀態(tài)，求取多型克隆抑制體當中的個異性，最終利用熒光型偏振分析儀展開測驗過程，將獲取的數(shù)據(jù)結(jié)論對照于基準型性能曲線，即可求得二價鉛離子濃度的具體測定數(shù)值[3]。這種測試方法運用的便捷性能已經(jīng)被大量研究結(jié)果所證明，譬如有某些的研究過程選取由螯合物反應制得的多型克隆抑制體在熒光類偏振測試儀當中檢驗出了139個土壤型樣品結(jié)構中的二價鉛離子成分含量，熒光型偏振法的免疫功能同火焰型原子吸取光譜方法以及電感型耦合體等離子化合物所測定出的和其結(jié)果密切相關的運算系數(shù)選值各自為0.96及0.93，由此可知其檢定的領域范圍極廣，而且其重合反應比率很低，在真正實現(xiàn)可在室內(nèi)圓滿檢測的過程中，尚可進行室外部的檢定過程,并且可獲得理想的測定結(jié)果。

3超分子Pb2+生物化學傳感檢測技術

在超分子化學技術不斷發(fā)展的推動作用下，用于檢測Pb2+的多種檢測技術已被研發(fā)生成。此方式檢測技術主要是通過超分子生物化學傳感儀來實現(xiàn)，原理是在離子誘導的作用下使超分子熒光信號產(chǎn)生相應的變化[4]。已有研究采用在PVC膜上固定乙醇介質(zhì)的熒光傳感器用來檢測Pb2+，優(yōu)勢特點表現(xiàn)為具有著極強的敏感性與選擇性，反應快速而及時；另外還有研究采用一種新型熒光肽金屬離子傳感器形成新的螯合物，該傳感器的特點是含有酰胺與色氨酸，在與金屬離子作用后，用于檢測，能夠通過熒光的響應來識別。

總而言之，隨著相關技術的不斷發(fā)展，目前此領域技術亦在進行著不斷深入的研究，應用也越來越廣泛。加之現(xiàn)代社會對生態(tài)環(huán)境和諧的要求越來越高，因此鉛離子的檢測也將朝向高精度、高效率、低成本方向發(fā)展。

作者:吳凱 陳浩 單位:邵陽學院生物與化學工程系

引用：

[1]食品中重金屬鉛污染狀況及其檢測技術研究進展[J].趙靜,孫海娟,馮敘橋.食品與發(fā)酵工業(yè).2014(09).

[2]生物化學技術在鉛檢測中的研究進展[J].戢太云,張春華,周培.上海農(nóng)業(yè)學報.2010(01).