水產(chǎn)養(yǎng)殖使用益生菌思索
時(shí)間:2022-07-19 02:29:35
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在發(fā)現(xiàn)微生物之前,其已經(jīng)被無(wú)意識(shí)的應(yīng)用于食品保藏,這些憑經(jīng)驗(yàn)的方法用于提高人類的健康狀態(tài)。GibsonandRoberfroid1995將益生菌定義為:通過(guò)選擇性的刺激腸道中的一種或一定數(shù)目的菌株的生長(zhǎng)和活性已達(dá)到增強(qiáng)宿主健康狀態(tài)的一種不易消化的食物成分。因此呋喃糖化物作為一種食品添加劑來(lái)刺激人類和陸地動(dòng)物腸道內(nèi)微生物群中的雙歧桿菌和乳酸菌。紅海鯉尾腸中的微生物群可以發(fā)酵乳糖,當(dāng)用寡糖喂養(yǎng)魚(yú)之后發(fā)現(xiàn)其前端和后部的腸上的粘膜層的厚度會(huì)增加。這個(gè)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)說(shuō)明一些發(fā)酵產(chǎn)物會(huì)增強(qiáng)魚(yú)類腸道對(duì)疾病侵襲的抵抗能力,這一點(diǎn)也在人類中發(fā)現(xiàn)了。尋找一種可被候選益生菌特異性消化的物質(zhì)是很有用的,這樣不但會(huì)增強(qiáng)對(duì)病原菌的抵抗能力,也可以刺激動(dòng)物組織的防護(hù)能力。
1益生菌群的作用
1.1益生菌群是水體物質(zhì)循環(huán)的推動(dòng)者
1.2益生菌群在水體污染中的指示作用
1.3益生菌可以凈化水體
1.4益生菌群作為餌料的作用
1.5益生菌群能防止病害
1.6益生菌群可以刺激提高免疫力
2益生菌的研究現(xiàn)狀
國(guó)內(nèi)對(duì)于水產(chǎn)動(dòng)物病害的研究起步較晚。于占國(guó)等在論述異養(yǎng)菌于對(duì)蝦病的關(guān)系的研究時(shí)特別指明:弧菌喜歡在富營(yíng)養(yǎng)環(huán)境生長(zhǎng),并已經(jīng)成為蝦池中的優(yōu)勢(shì)菌屬。它的數(shù)量與對(duì)蝦發(fā)病有著密切的關(guān)系。薛清剛還指出:在全世界主要對(duì)蝦養(yǎng)殖區(qū),弧菌病到目前為止仍時(shí)對(duì)蝦危害最大、造成損失最嚴(yán)重的疾病之一,它影響著所有種類對(duì)蝦的幾乎所有發(fā)育期,在養(yǎng)殖條件下容易爆發(fā)性流行,且流行范圍已遍及全球。如不及時(shí)采取妥善治療措施,其危害后果是在短時(shí)間內(nèi)死亡率為100%,即使采取一些控制措施,也仍有很高的死亡率。許兵等(1993)曾對(duì)中國(guó)對(duì)蝦病原菌及其致病機(jī)理作過(guò)探討。孟慶顯在其論著中也記述了弧菌的危害。供給養(yǎng)殖生物一個(gè)包括有益微生物群落在內(nèi)的健康環(huán)境是很重要的。從養(yǎng)殖環(huán)境中除去細(xì)菌或使用抗微生物藥物控制細(xì)菌種群將會(huì)使生態(tài)平衡遭到破壞,因此,使用益生菌將具有很大的潛力。但在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中有效使用益生菌的證據(jù)還比較缺乏,而且其準(zhǔn)確的作用機(jī)理方式也不十分清楚,尤其是菌株體外抑菌物質(zhì)的產(chǎn)生或是競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)與其體內(nèi)益生菌效果的關(guān)系。益生菌在水生動(dòng)物體內(nèi)與其他菌群的相互作用仍然需要闡明,益生菌的免疫刺激效果也值得進(jìn)一步研究。為了益生菌能應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖,必須對(duì)其大規(guī)模生產(chǎn)條件下的生產(chǎn)工藝流程、多種菌的生產(chǎn)、保藏及確保其質(zhì)量方面進(jìn)行深入地研究。
3水生環(huán)境微生物的分離和鑒別
海洋細(xì)菌中普遍都存在著抗菌性。許多海洋抗菌微生物屬于假單胞菌或者是弧菌。淡水微生物群中也普遍存在著抗菌活性。某些乳酸菌也對(duì)魚(yú)類的病原菌有抵抗能力。在許多體外實(shí)驗(yàn)中,致病的弧菌和氣單胞菌都會(huì)被抑制。而且一些細(xì)菌對(duì)于濾過(guò)性細(xì)菌也具有一定的抵抗能力,因此它們可以作為濾過(guò)性細(xì)菌的生物防治劑。值得注意的是不但抗菌素具有抑制微生物病原菌的能力,其它一些物質(zhì)也具有相同的作用,如有機(jī)酸,過(guò)氧化氫,含鐵細(xì)胞等。這些物質(zhì)的抗菌能力很大程度上依賴于實(shí)驗(yàn)條件,而這些對(duì)于體內(nèi)和體外是不同的。因此,這些抗菌性菌株的在體外的實(shí)驗(yàn)是不足以作為篩選候選益生菌的唯一標(biāo)準(zhǔn),也不能僅僅憑此來(lái)進(jìn)行菌株的篩選。在魚(yú)的幼苗和甲殼類動(dòng)物中,通過(guò)解剖分開(kāi)胃和腸道可以從消化系統(tǒng)分離出不同的微生物群。附著在上皮細(xì)胞上的微生物可以從其附著部分的黏液中分離得到。這種分離方法不適用于幼蟲(chóng)狀態(tài)和活著的養(yǎng)殖餌料,但是可以用0.1%苯甲銨氯化物的鹽溶液來(lái)沖洗魚(yú)幼苗的外表來(lái)分離附著在表面的微生物,這些微生物也來(lái)自于通過(guò)它們腸道內(nèi)的排泄物。多數(shù)微生物可以用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行分離篩選。然后可以通過(guò)一些常規(guī)方法對(duì)它們進(jìn)行鑒別。
4益生菌在水產(chǎn)動(dòng)物中的應(yīng)用情況
益生菌的概念是在應(yīng)與于陸地生物的過(guò)程中發(fā)展起來(lái)的,對(duì)于水生生物卻還是有許多的不同之處,最基本的問(wèn)題是益生菌在水體養(yǎng)殖環(huán)境中的應(yīng)用。人類和陸地生物經(jīng)歷了一個(gè)在胞衣中由胚胎發(fā)育的過(guò)程,然而大多數(shù)的魚(yú)和貝類在最初的個(gè)體發(fā)育階段都是在外部環(huán)境中進(jìn)行的。因?yàn)樗鼈兊挠紫x(chóng)在消化系統(tǒng)還沒(méi)有完全發(fā)育好,而且免疫系統(tǒng)還不完善,此時(shí)就開(kāi)始喂食,它們腸道內(nèi)相關(guān)微生物菌群混亂的情況會(huì)很大。因此,在幼蟲(chóng)階段特別需要使用益生菌。在人類和陸地養(yǎng)殖動(dòng)物的腸道微生物菌群中,格蘭氏陽(yáng)性專一性活兼性厭氧性微生物占有優(yōu)勢(shì)地位。在人類排泄物中,主要的微生物群是類桿菌,格蘭氏陽(yáng)性厭氧球菌,真菌和雙歧桿菌,而在豬的排泄物中其主要的微生物菌群是]鏈球菌和乳酸菌。大部分益生菌都屬于這些微生物群中的主要或者次主要種屬,如雙歧桿菌,乳酸菌和鏈球菌。在魚(yú)和貝類的消化道里格蘭氏陰性兼性厭氧菌占主要,而在某些食草的熱帶魚(yú)中,共生的厭氧菌占主導(dǎo)?;【图賳伟诩讱ゎ惿?,海魚(yú)和雙殼類生物中很普遍。在淡水魚(yú)中,氣單胞菌和腸桿菌占有優(yōu)勢(shì)。水體微生物群特性的一系列結(jié)果說(shuō)明可以有效應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的益生菌與來(lái)自于陸地的種類有些不同。在人類和陸地家畜的腸道為生長(zhǎng)于其中的微生物創(chuàng)造了一個(gè)公平穩(wěn)定的居住環(huán)境,它們由此受益。然而,在水生動(dòng)物中,大部分的微生物群都是暫時(shí)的。這些動(dòng)物都是變溫的,它們相關(guān)的微生物群會(huì)隨著溫度的變化而改變。鹽度的變化也會(huì)影響微生物群,而海魚(yú)不得不經(jīng)常的喝水以補(bǔ)充身體水分的損失。持續(xù)的水的進(jìn)入增強(qiáng)了周圍環(huán)境的影響能力,同時(shí),根據(jù)觀察一些濾食動(dòng)物如雙殼類,蝦幼蟲(chóng)及其食物,我們也發(fā)現(xiàn)了這一點(diǎn)。對(duì)于幼蟲(chóng)來(lái)說(shuō),由于缺少胃的保護(hù)作用,這些影響是很重要的。所以,水生動(dòng)物腸道內(nèi)的微生物群會(huì)因?yàn)閬?lái)自于水和食物的微生物群而發(fā)生很快的改變。在雙殼類生物中,其相關(guān)的微生物群和那些海水和沉淀物中的非常相似。在Penaeusjaponicus對(duì)蝦的內(nèi)臟和海水中也發(fā)現(xiàn)了相同的細(xì)菌,但是微生物群中正常的種群是通過(guò)食物引入的。在魚(yú)的幼蟲(chóng)和幼苗階段,食物的影響是決定性的。而且,在第一次的喂食中,通過(guò)活的食物帶入的細(xì)菌的影響是非常顯著的。第一次用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的益生菌本來(lái)是設(shè)計(jì)給陸地動(dòng)物使用的。一株分離自土壤的細(xì)菌孢子可以降低因感染愛(ài)德華氏菌日本鰻鱺的死亡率,相同的飼料添加物可以提高鯡魚(yú)的生長(zhǎng)率。孢子可以很容易的混在復(fù)合食物中,但是還沒(méi)有有關(guān)它們?cè)隰~(yú)的消化道中生長(zhǎng)繁殖的實(shí)驗(yàn)方面的報(bào)道。對(duì)于孢子在腸道內(nèi)的生長(zhǎng)情況取決于停留的時(shí)間和養(yǎng)殖的溫度,這一點(diǎn)是值得去研究的。Kozasa使用的菌株在輪蟲(chóng)中進(jìn)行了試驗(yàn),可以提高大比目魚(yú)的生長(zhǎng)速率,但是在其幼苗階段和輪蟲(chóng)中都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)這種微生物群。稍后,另一組實(shí)驗(yàn)使用了含有桿菌IP5832孢子的飼料添加物,通過(guò)計(jì)數(shù)和鑒別與用孢子飼養(yǎng)的輪蟲(chóng)和大比目魚(yú)相關(guān)的細(xì)菌的特征來(lái)檢驗(yàn)其效果。實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)把孢子加入到水中一小時(shí)之后,其可以生長(zhǎng)的菌株的數(shù)目急劇下降,大部分的桿菌孢子在不到一個(gè)半小時(shí)內(nèi)濾過(guò)吸收。這些孢子因此可以在輪蟲(chóng)中復(fù)活生長(zhǎng),但是這段時(shí)間可能太短以至于益生菌還來(lái)不及發(fā)揮其作用。許多細(xì)菌可以產(chǎn)生抗生素,特別是在孢子形成階段,通過(guò)植物細(xì)胞的蛋白質(zhì)水解也可以生產(chǎn)抗生素。當(dāng)輪蟲(chóng)用孢子飼養(yǎng)時(shí),其弧菌的數(shù)目會(huì)降低,這可能是由于桿菌中產(chǎn)生了的抗菌素的緣故。以用孢子處理過(guò)的輪蟲(chóng)為飼料發(fā)現(xiàn)大比目魚(yú)體中幾乎沒(méi)有可以復(fù)活的細(xì)菌。盡管這種處理方式增強(qiáng)了大比目魚(yú)幼苗對(duì)于病原菌的抵抗力,但是還不能說(shuō)這就是使用了益生菌的直接作用的結(jié)果。在成品使用中,活的乳酸菌也被加入到比目魚(yú)幼苗的餌料中。通過(guò)這種方法,增加了輪蟲(chóng)的產(chǎn)量和提高了大比目魚(yú)和日本比目魚(yú)的生長(zhǎng)速度。某些乳酸菌的使用也限制了輪蟲(chóng)中細(xì)菌的增殖,但是在這些研究中并沒(méi)有說(shuō)明乳酸菌的生長(zhǎng)情況]。其他一些鏈球菌制品可以提高以色列鯉魚(yú)的生長(zhǎng)速度和飼料利用率。當(dāng)在鯉魚(yú)養(yǎng)殖中使用益生菌制品十四天后,埃希氏菌屬的大腸桿菌完全從其消化道微生物群中消失了。其開(kāi)發(fā)者宣稱這種制品對(duì)鯉魚(yú)消化道中的上皮細(xì)胞具有很高的附著能力。對(duì)于陸生動(dòng)物使用益生菌的實(shí)驗(yàn)顯示了其在水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料中的使用微生物添加劑的重要性,但是,在水生動(dòng)物腸道內(nèi)可以存活的微生物群還不是太確定?,F(xiàn)在的研究主要著重于從水生動(dòng)物中尋找其自身的可以作為益生菌的微生物。
5結(jié)論
5.1可以在水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用益生菌,但是還需要更努力的研究。第一個(gè)問(wèn)題就是益生菌在養(yǎng)殖水體和水生動(dòng)物腸道中的生長(zhǎng)繁殖的情況并不是太清楚,這一點(diǎn)在很多情況下都沒(méi)有得到解答。隨著免疫和分子探針的出現(xiàn),這將為追蹤益生菌細(xì)胞提供一種有利的工具。對(duì)于益生菌的最好使用方式和最佳的劑量還需要進(jìn)一步的調(diào)查研究,同時(shí)也要解決一些技術(shù)問(wèn)題,特別是要保持干藥球中益生菌的活力。
5.2細(xì)菌的孢子很容易添加到干燥的餌料中,這也是這些可能的候選益生菌的另一種優(yōu)勢(shì)。乳酸菌和酵母都是很好的選擇對(duì)象,應(yīng)該對(duì)它們進(jìn)行深入的研究。我們應(yīng)該進(jìn)行長(zhǎng)期的調(diào)查研究以確認(rèn)這些細(xì)菌是無(wú)害的,而且不會(huì)出現(xiàn)任何可能有害的變異這種風(fēng)險(xiǎn)。
5.3從實(shí)際角度出發(fā),還應(yīng)對(duì)益生菌的作用范圍和作用的持續(xù)時(shí)間與抗菌劑、疫苗、免疫刺激劑的相對(duì)照。為使其具有實(shí)際意義,必須在能保證質(zhì)量控制的工業(yè)生產(chǎn)條件下生產(chǎn)出應(yīng)用與大規(guī)模的水產(chǎn)養(yǎng)殖中益生菌。在多種接種物的生產(chǎn)和保存及質(zhì)量保證方法等方面還需進(jìn)行更多研究。
5.4關(guān)于益生菌對(duì)于腸道內(nèi)微生物群影響的情況了解的還不多,但是隨著采用分子生物學(xué)分析微生物群落的技術(shù)的發(fā)展和傳播,這方面更入深的研究是充滿希望的。