導(dǎo)語：如何才能寫好一篇表揚(yáng)通報(bào)，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

表揚(yáng)獎(jiǎng)勵(lì)通報(bào)范文一

公司各部門、各分公司：

XX分公司經(jīng)理XX同志自進(jìn)入公司以來工作勤奮努力，他所帶領(lǐng)的團(tuán)隊(duì)富有強(qiáng)烈的開拓意識和協(xié)作精神，已在XX市場取得了可喜的成績，為中交科技的員工樹立了良好的榜樣。

經(jīng)公司領(lǐng)導(dǎo)研究決定，現(xiàn)對XX分公司區(qū)域經(jīng)理XX予以通報(bào)表揚(yáng)并獎(jiǎng)勵(lì)該員工人民幣1000元整以資鼓勵(lì)。

希該員工再接再厲，同時(shí)望全體員工積極向他學(xué)習(xí)，共創(chuàng)XX科技輝煌。

特此通報(bào)

人事行政中心

二XX年九月四日

表揚(yáng)獎(jiǎng)勵(lì)通報(bào)范文二

各位員工：

本年度在各位員工的共同努力下，研發(fā)工作有了很大的突破。為了再創(chuàng)佳績，經(jīng)公司研究，決定對本次研發(fā)新產(chǎn)品表現(xiàn)突出的優(yōu)秀員工予以通報(bào)獎(jiǎng)勵(lì)，表彰他們發(fā)揚(yáng)主人翁的精神，以企業(yè)發(fā)展為前提，以提高經(jīng)濟(jì)效益為目標(biāo)，在各自的崗位上勤奮工作、積極進(jìn)取的精神。希望收到表彰的員工在今后的工作中再接再厲，取得更好的成績。

xx集團(tuán)有限公司

xx年x月x日

表揚(yáng)獎(jiǎng)勵(lì)通報(bào)范文三

各街道辦事處，區(qū)人民政府各工作部門，各直屬機(jī)構(gòu)：

xxxx年，全區(qū)上下牢固樹立安全發(fā)展理念，始終堅(jiān)持“安全第一、預(yù)防為主、綜合治理”的安全生產(chǎn)工作方針，以開展“隱患治理年”活動(dòng)為契機(jī)，深入開展安全生產(chǎn)“百日督查”專項(xiàng)行動(dòng)，強(qiáng)化組織領(lǐng)導(dǎo)，構(gòu)建長效機(jī)制，落實(shí)安全責(zé)任，加大安全投入，有效地減少了事故的發(fā)生，保持了安全生產(chǎn)形勢的持續(xù)穩(wěn)定，涌現(xiàn)出了一大批先進(jìn)單位和先進(jìn)個(gè)人。

為發(fā)揮先進(jìn)單位和先進(jìn)個(gè)人的模范帶頭作用，進(jìn)一步調(diào)動(dòng)全區(qū)上下抓好安全生產(chǎn)工作的積極性，經(jīng)區(qū)政府研究，決定對大明宮街道辦事處等19家安全生產(chǎn)目標(biāo)管理先進(jìn)單位、三橋街道辦事處和六村堡街道辦事處2個(gè)安全生產(chǎn)工作創(chuàng)新單位、xxx等35名安全生產(chǎn)先進(jìn)個(gè)人予以表彰。

希望受表彰的先進(jìn)單位和先進(jìn)個(gè)人珍惜榮譽(yù)，發(fā)揚(yáng)成績，再接再厲，為我區(qū)安全生產(chǎn)工作繼續(xù)做出新的貢獻(xiàn)。全區(qū)各單位、各企業(yè)要以受表彰的先進(jìn)單位和先進(jìn)個(gè)人為榜樣，銳意進(jìn)取，扎實(shí)工作，鞏固和擴(kuò)大安全生產(chǎn)成果，為維護(hù)全區(qū)社會穩(wěn)定和促進(jìn)經(jīng)濟(jì)發(fā)展作出更大貢獻(xiàn)。

年月日

 

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篇2

20**年2月x日上午10點(diǎn)，xx學(xué)院200x級x班xx、xx、xx三位同學(xué)在食堂附近撿到現(xiàn)金400元整。因沒有任何證件可證明失主的身份，三人及時(shí)將現(xiàn)金交于校學(xué)生處，以便通過校方盡快將錢物歸原主。這三位同學(xué)的行為充分體現(xiàn)出當(dāng)代大學(xué)生的優(yōu)秀精神風(fēng)貌。學(xué)院通報(bào)表揚(yáng)信范本

經(jīng)學(xué)院研究決定，現(xiàn)對xx、xx、xx三位同學(xué)提出全院通報(bào)表揚(yáng)，希望大家學(xué)習(xí)他們拾金不昧的精神。學(xué)院通報(bào)表揚(yáng)信范本

xx學(xué)院

20**年2月

篇3

表曝型氧化溝工藝是污水處理的傳統(tǒng)工藝，其工藝特點(diǎn)結(jié)構(gòu)簡單、運(yùn)行可靠、出水水質(zhì)優(yōu)良而被城市污水處理廣泛的采用。表曝型氧化溝自動(dòng)化控制系統(tǒng)通過對設(shè)置在氧化溝中污水檢測儀表的數(shù)據(jù)采集例如：MLSS、DO，結(jié)合氧化溝總進(jìn)水量、進(jìn)水水質(zhì)，通過運(yùn)算、比較、分析 選擇合理的曝氣曲線指導(dǎo)表曝機(jī)有規(guī)律的運(yùn)行，使得氧化溝中各段溶解氧的含量在合理的范圍內(nèi)，不產(chǎn)生曝氣不足和飽和曝氣現(xiàn)象。由于污水中溶解氧的消耗和污泥濃度MLSS等因素有關(guān)具有滯后性、延緩特征，因此采取恒定曝氣和間歇性曝氣是針對溶解氧在污水中的傳遞達(dá)到平衡的理想解決辦法，實(shí)踐證明自動(dòng)化曝氣不僅提高了氧化溝整體經(jīng)濟(jì)運(yùn)行效率，而且使得出水水質(zhì)更好。

關(guān)鍵詞：表曝型氧化溝自動(dòng)化節(jié)能系統(tǒng)、曝氣曲線、經(jīng)濟(jì)運(yùn)營、自動(dòng)調(diào)節(jié)、恒定曝氣和間歇性曝氣

Abstract:

Table type aerating oxidation ditch process of sewage treatment is the traditional process, the process features of simple structure, reliable operation, good water quality and water by the urban sewage treatment widely adopted. Table type aeration oxidation ditch automation control system through to set in the oxidation ditch in sewage measurement instrument of data collection for example: MLSS, DO, combined with the oxidation ditch into water, total feed water quality, through the operation, the comparison and analysis of the reasonable selection of aeration curve guidance table aeration machine regular operation, make the oxidation ditch the dissolved oxygen content in paragraphs in the reasonable scope, DO not produce the aeration shortage and saturated aeration phenomenon. Due to the consumption of dissolved oxygen in sewage sludge concentration and other factors, such as the MLSS with hysteresis and delay characteristics, so adopt constant aeration and intermittent aeration is dissolved oxygen in the transmission in sewage balance of the ideal solution, the practice has proved automation aeration not only increase the oxidation ditch overall economic efficiency, but also make better effluent water.

Key Words: Table type aeration oxidation ditch automation control systems, aeration curve, economic operation, automatic regulation, Constant aeration and intermittent aeration

中圖分類號：TE08文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：

一、城市污水廠自動(dòng)化運(yùn)行現(xiàn)狀

我國城鎮(zhèn)污水處理廠自動(dòng)化控制技術(shù)起步較晚，20世紀(jì)90年代以后，污水處理廠才開始引入自動(dòng)控制系統(tǒng)，但多是直接引進(jìn)國外成套自控設(shè)備，國產(chǎn)自動(dòng)控制系統(tǒng)在污水處理廠應(yīng)用很少，由于污水處理涉及的技術(shù)較專業(yè)，且行業(yè)跨度較大使得專門從事污水自動(dòng)化技術(shù)研究的專業(yè)技術(shù)人員相對匱乏；主要體現(xiàn)在污水綜合自動(dòng)化技術(shù)發(fā)展較為落后和應(yīng)用水平方面。以智能決策為目標(biāo)的信息化技術(shù)則相對遲緩，“信息孤島”現(xiàn)象依然嚴(yán)重，自動(dòng)化技術(shù)和信息化技術(shù)缺乏融合，大量的過程數(shù)據(jù)都靜靜地“躺”在現(xiàn)場，而沒有發(fā)揮其應(yīng)有的作用。

二、污水處理氧化溝工藝的特點(diǎn)

氧化溝工藝是集有機(jī)物降解、脫氮、除磷三功能于一體的生物處理技術(shù)，因此該工藝運(yùn)行控制要同時(shí)滿足三個(gè)功技術(shù)要求。針對污水廠的進(jìn)水水質(zhì)特點(diǎn)及進(jìn)水量、出水水質(zhì)要求的基礎(chǔ)上得出具體的優(yōu)化控制方式。

篇4

目的 研究缺氧誘導(dǎo)因子1α（hypoxiainducible factor1α，HIF1α）在缺氧的胃癌細(xì)胞SGC7901的表達(dá)及其同缺氧時(shí)Fas、PCNA關(guān)系， 探討HIF1α同缺氧時(shí)胃癌細(xì)胞增殖凋亡的關(guān)系。方法 產(chǎn)氣袋法(GasPaK)制造缺氧細(xì)胞培養(yǎng)條件，細(xì)胞免疫化學(xué)觀察SGC7901細(xì)胞HIF1α、PCNA及Fas的變化。結(jié)果 缺氧時(shí)SGC7901細(xì)胞HIF1α表達(dá)明顯上調(diào)，HIF1α表達(dá)隨缺氧時(shí)間延長而增加。缺氧時(shí)HIF1α表達(dá)與Fas呈負(fù)相關(guān)（P

【關(guān)鍵詞】 缺氧誘導(dǎo)因子1α 胃癌細(xì)胞SGC7901 細(xì)胞凋亡；增殖

Expression of HIF1α and Its Relationship to Apoptosis and Proliferation in Gastric Cancer Cell During Hypoxia

Key words：Hypoxiainducible factor1α; Gastric cancer cell SGC7901; Apoptosis; Proliferation

資料顯示，實(shí)質(zhì)性腫瘤發(fā)生過程中，由于血管生長的相對滯后和腫瘤細(xì)胞的快速增殖導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞缺氧[13]。缺氧是實(shí)質(zhì)性腫瘤微環(huán)境的基本特征之一。缺氧誘導(dǎo)因子（hypoxiainducible factor，HIF1）是在缺氧條件下廣泛存在于人和哺乳動(dòng)物體內(nèi)的一種轉(zhuǎn)錄因子。由HIF1α 和HIF1β亞單位組成，HIF1α是HIF1特有的受缺氧調(diào)控的亞基，決定HIF1的活性。HIF1α是迄今為止發(fā)現(xiàn)的唯一一個(gè)特異性缺氧狀態(tài)下發(fā)揮活性的轉(zhuǎn)錄因子。近年來，隨著對HIF1α研究的進(jìn)一步深入，發(fā)現(xiàn)它廣泛存在于動(dòng)物和人類的多種腫瘤細(xì)胞中，其活性對維持腫瘤細(xì)胞能量代謝、新生血管形成、促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移起重要作用。探討HIF1α同缺氧條件下腫瘤細(xì)胞凋亡、增殖的關(guān)系，了解其在腫瘤細(xì)胞凋亡、增殖的作用。對于研究HIF1α在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用及探索以HIF1α為靶點(diǎn)的抗腫瘤治療有重要意義。本研究通過對人胃癌細(xì)胞SGC7901中HIF1α的表達(dá)及其同缺氧時(shí)Fas、PCNA表達(dá)的檢測，探討HIF1α在胃癌發(fā)生、發(fā)展中可能的作用。

1 材料及方法

1.1 材料

人胃癌細(xì)胞株SGC7901，重慶醫(yī)科大學(xué)病理生理教研室提供。兔抗人Fas多克隆抗體（工作濃度1∶200），SP免疫組化試劑盒，購于北京中山生物技術(shù)有限公司。鼠抗人PCNA多抗（工作濃度1∶400）購于武漢博士德生物工程公司。鼠抗HIF1α單抗（工作濃度1∶25），購于晶美生物工程公司。

1.2 方法

1.2.1 微缺氧條件的制造

運(yùn)用產(chǎn)氣袋法(GasPaK)制造微缺氧條件。通過血?dú)夥治鰞x監(jiān)測含小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中PO2、PCO2和pH的變化，本裝置在48h內(nèi)PO2、PCO2和pH穩(wěn)定，并能達(dá)到微缺氧細(xì)胞培養(yǎng)的條件（1%～5%氧、5%CO2及90%氮）。

1.2.2 不同氧狀態(tài)下細(xì)胞爬片的制備

取對數(shù)生長期的SGC7901細(xì)胞，用含10%小牛血清RPMI1640培養(yǎng)液，配成濃度為5×104 /ml的細(xì)胞懸液。并分為對照組、缺氧4h組、缺氧8h組、缺氧16h組。各取細(xì)胞懸液2ml/孔分別接種于裝有蓋玻片的6孔培養(yǎng)板內(nèi)。對照組入CO2培養(yǎng)箱（20%氧、5%CO2、75%氮、37℃）中培養(yǎng)72h，缺氧4h組、缺氧8h組、缺氧16h組。分別入CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)68、64、56h后，再入微缺氧裝置內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)4、8、16h。

1.2.3 SP免疫組化法檢測HIF1α、Fas、PCNA

取出6孔板內(nèi)已爬滿細(xì)胞的蓋玻片，PBS洗滌，4%多聚甲醛固定， 0.3%H2O2/甲醇作用30min， 正常羊血清阻斷30min， 分別給缺氧組和對照組依次加入稀釋的一抗HIF1α、Fas、PCNA，4℃孵育過夜，生物素化二抗和辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素依次處理(37℃，孵育30min)， 期間均用PBS洗滌， AEC顯色， 水溶性封片劑封片。每次染色時(shí)均以PBS代替一抗作為陰性對照。

1.2.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)

排除爬片邊沿細(xì)胞，10×10低倍鏡下隨機(jī)選取10個(gè)細(xì)胞分布均勻的視野，10×20中倍鏡下隨機(jī)計(jì)數(shù)50個(gè)細(xì)胞／每視野。按著色強(qiáng)弱分4個(gè)等級，按公式HSCORE＝∑Pi(i+1)(i=0、1、2、3;Pi表示評分為i的比例) 計(jì)算HSCORE得分。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)均用±s表示，采用F檢驗(yàn)及q檢驗(yàn)分析，數(shù)據(jù)均用統(tǒng)計(jì)軟件包SAS8.0分析。用Spearman等級相關(guān)分析HIF1α同SGC7901細(xì)胞PCNA、Fas的相互關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 不同氧狀態(tài)下人胃癌細(xì)胞株SGC7901 HIF1α、Fas 、PCNA的表達(dá)

常規(guī)培養(yǎng)條件下SGC7901細(xì)胞僅個(gè)別細(xì)胞有HIF1α陽性表達(dá)，低氧處理4h后HIF1α出現(xiàn)陽性表達(dá)，并隨低氧處理時(shí)間的延長逐漸增加（rs=0.935），見圖1。常規(guī)培養(yǎng)條件下Fas、PCNA均在SGC7901細(xì)胞有陽性表達(dá)，低氧處理4h后Fas表達(dá)增加，但隨低氧處理時(shí)間的延長，F(xiàn)as表達(dá)所有下降（rs=-0.972），見圖2、3。PCNA在不同氧狀態(tài)下的表達(dá)無明顯差異，見表1。表1 不同氧狀態(tài)下HIF1α、Fas 和PCNA在SGC7901細(xì)胞的表達(dá)常規(guī)培養(yǎng)條件下由于HIF1α在SGC7901細(xì)胞低表達(dá)，無法判斷其同F(xiàn)as及PCNA的關(guān)系。缺氧條件下SGC7901細(xì)胞HIF1α表達(dá)同F(xiàn)as表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（rs=-0.961，P0.05）。

3 討論

3.1 HIF1α在不同氧狀態(tài)下人胃癌細(xì)胞株SGC7901的表達(dá)

Zhong 等[7]對包括胃癌、胰腺癌等癌組織標(biāo)本及人體正常組織分析發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)人體正常組織中沒有或僅有弱陽性的HIF1表達(dá)，而癌組織中HIF1呈過度表達(dá)。體外實(shí)驗(yàn)也證實(shí)HIF1α在多種腫瘤細(xì)胞株缺氧時(shí)呈陽性表達(dá)[8，9]，本研究發(fā)現(xiàn)SGC7901細(xì)胞在常氧下僅個(gè)別細(xì)胞HIF1α呈陽性表達(dá)，陽性表達(dá)部位在胞核， 陽性率僅在1%～3%。可以認(rèn)為在常氧下SGC7901細(xì)胞不表達(dá)HIF1α，在低氧處理后，HIF1α表達(dá)明顯上調(diào)?？赡芡毖踝柚沽薍IF1α的降解，使在非缺氧時(shí)易降解的HIF1α蛋白穩(wěn)定性增加。HIF1α蛋白水平呈指數(shù)增加有關(guān)[10，11]。本研究還發(fā)現(xiàn)HIF1α表達(dá)隨缺氧時(shí)間的延長逐漸增加，是否同SGC7901細(xì)胞逐漸適應(yīng)缺氧有關(guān)，尚待進(jìn)一步研究。

3.2 缺氧狀態(tài)下SGC7901細(xì)胞HIF1α的表達(dá)同細(xì)胞凋亡的關(guān)系

缺氧能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，己在實(shí)驗(yàn)研究中得到證實(shí)[9]。但缺氧時(shí)HIF1α的表達(dá)同細(xì)胞凋亡的關(guān)系尚存有爭議。Akakura等［10］在胰腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)HIF1α高表達(dá)的胰腺癌細(xì)胞比無HIF1α表達(dá)的更能抵抗缺氧和無糖所誘導(dǎo)的凋亡。HIF1α高表達(dá)可以明顯地增加bcl2的表達(dá)[11]，而在樊利芳等[12]研究中顯示，HIF1α表達(dá)同bcl2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，表明HIF1α促進(jìn)缺氧環(huán)境下腫瘤細(xì)胞凋亡。本實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)，在缺氧環(huán)境下SGC7901細(xì)胞HIF1α表達(dá)明顯上調(diào)，同參與細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)的Fas基因的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，從而使SGC7901細(xì)胞能抵抗缺氧所誘導(dǎo)的凋亡。可能同受HIF1所調(diào)控，參與能量代謝和運(yùn)輸基因及蛋白以不同方式參與腫瘤細(xì)胞對缺氧的適應(yīng)過程有關(guān)。

3.3 缺氧狀態(tài)下SGC7901細(xì)胞HIF1α的表達(dá)同細(xì)胞增殖的關(guān)系

PCNA是DNA聚合酶的輔助因子，參與DNA的合成。已廣泛使用于評定腫瘤細(xì)胞增殖活性。HIF1α同腫瘤細(xì)胞增殖的關(guān)系一直存有爭議。Carmeliet等[5]研究表明HIF1α的缺陷阻止了細(xì)胞在缺氧條件下的生長，但在細(xì)胞分裂時(shí)可刺激其增殖。Horiuchi等[13]發(fā)現(xiàn)缺氧時(shí)卵巢癌細(xì)胞株的細(xì)胞數(shù)目不減少，同HIF1α表達(dá)增加從而增加了p27的表達(dá)和降低cyclinD1及cyclinRB表達(dá)有關(guān)。Zhong等[14]發(fā)現(xiàn)在前列腺癌組織及乳腺癌組織中，HIF1α表達(dá)與Ki67指數(shù)相關(guān)。Volm等[15]研究小細(xì)胞肺癌時(shí)HIF1α與cyclinA表達(dá)和細(xì)胞周期的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)HIF1α與細(xì)胞增殖無關(guān)，存在不同的結(jié)果可能同研究的腫瘤組織及檢測指標(biāo)不同有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)表明，在缺氧條件下SGC7901細(xì)胞HIF1α表達(dá)同PCNA無關(guān)。

本實(shí)驗(yàn)通過對缺氧條件下SGC7901細(xì)胞HIF1α、Fas及PCNA表達(dá)的觀察，分析了HIF1α表達(dá)同細(xì)胞凋亡及增殖的相關(guān)性，結(jié)果表明HIF1α抑制缺氧所誘導(dǎo)的胃癌細(xì)胞凋亡而與細(xì)胞增殖無關(guān)。認(rèn)識HIF1α在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用，將為胃癌治療提供新靶點(diǎn)及思路。

【參考文獻(xiàn)】

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篇5

【關(guān)鍵詞】 脂肪細(xì)胞 蒲黃總黃酮 游離脂肪酸 PPAR家族

Objective: To explore the effects of Pollen Typhae total flavones (PTF) on the mRNA expressions of peroxisome proliferatoractivated receptors (PPARs) α， γ， β/δ so as to analyze its possible mechanism in improving the insulin sensitivity of 3T3L1 adipocytes.

Methods: Adipocytes were treated with PTF， and expressions of PPARα、PPARγ、PPARβ/δ mRNAs relating to the adipocyte glucose and lipid metabolism were determined by reverse transcription polymerase chain reaction.

Results: PTF obviously upregulated the expressions of PPARα and PPARγ mRNAs， all showing significant differences as compared with those in the normal control group (P

Conclusion: With its function as an insulin sensitizer， PTF may enhance the PPARα and PPARγ mRNA expressions in 3T3L1 adipocytes.

Keywords: 3T3L1 adipocyte; Pollen Typhae total flavones; free fatty acid; peroxisome proliferatoractivated receptors

游離脂肪酸（free fatty acid， FFA）的溢出是早期胰島素抵抗及其靶器官代謝異常的中心環(huán)節(jié)之一，也是近年來代謝領(lǐng)域研究的重點(diǎn)［1］。脂肪組織是機(jī)體能量調(diào)節(jié)器官，其脂肪代謝及糖代謝的異常在早期胰島素抵抗發(fā)生發(fā)展中起著極其重要的作用。蒲黃是調(diào)節(jié)血脂的常用中藥，對胰島素抵抗亦有改善作用［2］。在臨床上廣泛應(yīng)用于糖脂代謝異常的患者。本研究所在前期的細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)蒲黃的有效成分蒲黃總黃酮（Pollen Typhae total flavones， PTF）可改善成熟脂肪細(xì)胞的葡萄糖消耗和游離脂肪酸的溢出［3］。本次研究通過觀察蒲黃總黃酮對3T3L1脂肪細(xì)胞過氧化物酶體增生物激活受體（peroxisome proliferatoractivated receptor， PPAR）家族基因表達(dá)的影響，進(jìn)一步探討蒲黃總黃酮改善胰島素抵抗的機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 藥物和試劑 羅格列酮（rosiglitazone，ROS）由浙江天馬制藥有限公司提供；蒲黃總黃酮由上海信誼藥業(yè)有限公司提供；達(dá)爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基（Dulbecco's modified Eagle's medium， DMEM）和TRIzol由GIBCO公司提供；地塞米松、異丁基甲基黃嘌呤和胰島素購自Sigma公司；油紅O購自Sigma公司；牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA)為SinoAmerican Biotech公司產(chǎn)品；逆轉(zhuǎn)錄酶AMV第一鏈cDNA合成試劑盒為BioBasic公司產(chǎn)品；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction， PCR）擴(kuò)增試劑盒購自Invitrogen公司。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)及分組 3T3L1細(xì)胞株購自America Type Culture Collection公司，其培養(yǎng)與誘導(dǎo)分化方法同文獻(xiàn)［4］。將3T3L1前脂肪細(xì)胞接種于培養(yǎng)板，用含10%小牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)，待細(xì)胞融合2 d后，加含0.5 mmol/L異丁基甲基黃嘌呤、0.25 nmol/L地塞米松和10 μg/ml胰島素的10%胎牛血清高糖DMEM培養(yǎng)48 h，換以含10 μg/ml胰島素的含10%胎牛血清培養(yǎng)液再培養(yǎng)48 h，隨后以10%胎牛血清高糖DMEM繼續(xù)培養(yǎng)，2 d換培養(yǎng)液1次，誘導(dǎo)分化8～12 d，3T3L1細(xì)胞90%呈脂肪細(xì)胞表型［1］。將24孔培養(yǎng)板中分化成熟的脂肪細(xì)胞以含0.2% BSA的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)12 h后，分為空白對照組（不加藥）、蒲黃總黃酮組（0.2 g/L）和羅格列酮組（5 μmol/L），藥物均使用去離子水配置，藥物干預(yù)培養(yǎng)24 h。

1.3 PPAR mRNA表達(dá) 采用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測。藥物處理同上，抽提細(xì)胞總RNA，以AMV第一鏈cDNA合成試劑盒逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。上下游引物由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。PPARγ上游引物：5'TTT CAA GGG TGC CAG TTT CG3'；下游引物：5'GGG AGG CCA GCA TCG TGT A3'。PPARα上游引物：5'TAC GGC AAT GGC TTT ATC AC3'；下游引物：5'CCC TCC TGC AAC TTC TCA AT3'。PPARβ/δ上游引物：5'TGC GGC AAC GTG AAA GGA AT3'；下游引物：5'ACG CGG TAT CCA CGT CAA GTA3'?？醇一蚋视腿┆?磷酸脫氫酶（glyceraldehyde3phosphate dehydrogenase， GAPDH）上游引物：5'AAG GTC GGA GTC AAC GGA TT3'；下游引物：5'CTG GAA GAT GGT GAT GGG ATT3'。參照試劑盒說明書，反應(yīng)體系為25 μl，內(nèi)含5×PCR Buffer 5.0 μl，Mg2+ 0.3 μl，dNTP 0.75 μl，引物1.0 μl，25×SYBR GreenⅠ1.0 μl，校準(zhǔn)液 1.0 μl，ExTaq酶0.25 μl，ddH2O 14.7 μl，模板1.0 μl。實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)在Cotbett RotoGene 3000實(shí)時(shí)定量PCR儀中進(jìn)行。反應(yīng)程序?yàn)椋?5 ℃預(yù)變性10 s，60 ℃ (GAPDH)退火30 s，55 ℃延伸10 s，共80個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)結(jié)束后采集熒光信號。最后繪溶解曲線以確定反應(yīng)產(chǎn)物無引物二聚體及非特異性擴(kuò)增。當(dāng)熒光信號強(qiáng)度超過基線時(shí)，其域值循環(huán)數(shù)（cycle threshold，Ct）被記錄下來。在實(shí)時(shí)定量PCR中，Ct值被認(rèn)為與被擴(kuò)增基因的初始濃度密切相關(guān)。擴(kuò)增后根據(jù)Ct值及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出目的基因拷貝數(shù)與106 GAPDH的相對值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 11.0 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間比較采用單因素方差分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)用x±s表示。

2 結(jié) 果

蒲黃總黃酮組3T3L1細(xì)胞PPARα、PPARγ mRNA表達(dá)量均明顯高于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

3 討 論

脂肪代謝的改變及其對糖代謝異常的影響在早期胰島素抵抗的中心作用一直是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。研究藥物對脂肪細(xì)胞糖脂代謝的影響，對于防治與胰島素抵抗密切相關(guān)的2型糖尿病、血脂異常、脂肪肝和動(dòng)脈粥樣硬化等代謝性疾病的發(fā)病及減輕其危害具有重要意義。近年來FFA在胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展中的核心作用正成為倍受關(guān)注的研究熱點(diǎn)。前期研究已經(jīng)證實(shí)，蒲黃總黃酮可直接抑制成熟3T3L1脂肪細(xì)胞FFA的外溢，同時(shí)可改善脂肪細(xì)胞對葡萄糖的攝取和利用，提示蒲黃總黃酮可改善脂肪及葡萄糖代謝，由此對胰島素抵抗特別是早期胰島素抵抗有一定的改善作用［3］。

PPARs屬激素核受體超家族成員，由PPARα、PPARγ、PPARβ/δ 3個(gè)亞型組成。其中，PPARα在脂質(zhì)代謝中起著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用［5］。PPARα活化可以調(diào)節(jié)與脂肪酸氧化有關(guān)的基因的轉(zhuǎn)錄，參與脂質(zhì)代謝、能量動(dòng)態(tài)平衡和胰島素敏感性等生物學(xué)過程的調(diào)節(jié)等。PPARγ最具脂肪組織特異性，對脂肪細(xì)胞的分化起著重要作用［6］，并在一定程度上抑制脂肪組織分泌TNFα等脂肪細(xì)胞因子，有利于改善胰島素抵抗［7］。PPARβ/δ近年才受到廣泛關(guān)注，也被發(fā)現(xiàn)與脂肪生成和脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)有密切關(guān)系［8］。大量研究表明，PPARs的調(diào)節(jié)劑有望成為2型糖尿病、肥胖、高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化等疾病的治療藥物。PPARα的激動(dòng)劑貝丁酸和PPARγ的激動(dòng)劑噻唑烷二酮類（thiazolidinediones， TZD）藥物，已被臨床成功用作降脂藥和胰島素增敏劑。PPARβ/δ的激動(dòng)劑可能會通過對骨骼肌的作用而成為另一個(gè)新型胰島素增敏及降脂藥物。因?yàn)?種PPAR亞型在代謝綜合征的發(fā)病中作用不完全相同，所以近來的研究集中于開發(fā)一種全新的藥物，使其要么具有更高的選擇性，要么具有兩個(gè)或全部PPAR活化特性。PPARα/PPARγ激動(dòng)劑tesaglitazar就被認(rèn)為可改善脂肪餐后的糖脂代謝［9］。

TZD類藥物羅格列酮是目前治療胰島素抵抗的代表藥物，它促進(jìn)PPARγ表達(dá)增加和脂肪細(xì)胞的分化，促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)，增加脂肪組織胰島素敏感性，但卻有肥胖等脂質(zhì)積聚的副作用［6］。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明蒲黃總黃酮可提高PPARα和PPARγ mRNA的表達(dá)，說明它能在一定程度上改善胰島素抵抗引起的糖脂代謝紊亂。而且蒲黃總黃酮促進(jìn)脂肪細(xì)胞的分化，促進(jìn)PPARγ mRNA表達(dá)的效應(yīng)與PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮相似，但PPARγ mRNA的上升幅度卻小于羅格列酮，說明其在脂肪細(xì)胞的積聚這一副作用可能小于羅格列酮。這對臨床選擇治療胰島素抵抗中藥有一定的指導(dǎo)作用。

但蒲黃總黃酮改善胰島素敏感性的確切機(jī)制及能量的去處尚有待于深入研究。而且，在體內(nèi)的作用與離體的作用并不完全相同，會受到其他因素的影響，因此進(jìn)一步研究蒲黃總黃酮改善胰島素抵抗的機(jī)制，探究其在體內(nèi)的作用及影響因素是一項(xiàng)頗具意義的工作。

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篇6

【摘要】

目的: 探討紅景天苷激活HIF-1α表達(dá)， 抑制缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡的可能的信號通路。方法: 將原代培養(yǎng)的心肌細(xì)胞分為4組: 正常對照組、 缺氧組、 缺氧+100 mg/L紅景天苷組、 缺氧+100 mg/L紅景天苷+LY294002組。MTT法測定細(xì)胞存活率， Hoechst33258染色、 DNA-ladder檢測細(xì)胞凋亡， 通過免疫熒光染色、 Western blot檢測細(xì)胞Akt、 磷酸化Akt、 HIF-1α的表達(dá)。結(jié)果: LY294002處理后， 紅景天苷對缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用被明顯減弱， 細(xì)胞存活率明顯下降（P

【關(guān)鍵詞】 紅景天苷 心肌細(xì)胞 PI(3)K/Akt HIF-1α

大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)， 缺氧可誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡， 造成心肌損傷，進(jìn)而參與心力衰竭的發(fā)病過程［1］。紅景天苷（salidroside， Sal）為傳統(tǒng)中藥紅景天的有效萃取物之一。近年研究表明，紅景天苷具有抗缺氧、 抗疲勞、 抗輻射、 抗衰老和抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞［2］等多種藥理作用。通過前期實(shí)驗(yàn)， 我們已經(jīng)證實(shí)紅景天苷對缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡具有良好的抑制作用， 且這種抑制作用具有劑量依賴性， 并首次證實(shí)其分子機(jī)制可能與激活缺氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia induced factor-1α， HIF-1α）的表達(dá)， 誘導(dǎo)其轉(zhuǎn)位有關(guān)。但其具體的信號通路， 至今仍不明確。本研究擬通過研究Akt變化， 進(jìn)一步探討紅景天苷激活HIF-1α表達(dá)可能的信號通路。

1 材料和方法

1.1 材料 紅景天苷（純度>99%）購自中國藥品生物制品鑒定所。新生牛血清、 DMEM低糖培養(yǎng)基購自Gibco公司。膠原酶I、 噻唑藍(lán)（MTT）、 5-溴-2′-脫氧尿苷（bromodeoxyuridine， BrdU）、 LY294002、 RNase A均購自Sigma公司。Hoechst 33258染料、 BCA蛋白定量試劑盒購自碧云天生物技術(shù)研究所。蛋白酶K購自Merck。HIF-1α兔多克隆抗體購自美國Novus。Akt、 磷酸化Akt抗體均購自CST。HRP、 FITC標(biāo)記羊抗兔二抗均購自北京中山。其余試劑為國產(chǎn)分析純級。

1.2 方法

1.2.1 心肌細(xì)胞原代培養(yǎng) 取新生1～3 d SD大鼠（第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供）心室肌組織并剪碎， 用0.95 g/L的膠原酶I37℃分次消化， 分離心肌細(xì)胞。以含100 mL/L新生牛血清的DMEM低糖培養(yǎng)基制備細(xì)胞懸液， 差速貼壁后加入100 μmol/L BrdU純化心肌細(xì)胞， 使純度達(dá)到90%以上， 接種細(xì)胞至培養(yǎng)板。

1.2.2 缺氧模型建立 采用Koyama等［3］方法配制缺氧液(mmol/L): NaH2PO40.9、 NaHCO36.0、 CaCl21.0、 MgSO4 1.2、 乳酸鈉 40、 HEPES 20、 NaCl 98.5、 KCl 10.0， pH6.8， 37℃， 以高濃度氮?dú)怙柡停?99.9% 1 L/min×30 min）， 測其血?dú)釶O2≤4.0 kPa。用缺氧液置換正常培養(yǎng)液， 三氣培養(yǎng)箱(Kendro， Germany)， 調(diào)整氣體濃度為950 mL/L N2+50 mL/L CO2， 孵育6 h。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)分組 將培養(yǎng)的心肌細(xì)胞分為4組: （1）正常對照組（Control）: 用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞; （2）缺氧組（Hypoxia）: 參照上述方法， 建立缺氧模型; （3）100 mg/L紅景天苷預(yù)處理組（Hypoxia+Sal）: 缺氧前， 100 mg/L紅景天苷預(yù)處理24 h， 參照（2）行缺氧處理。（4）LY294002+紅景天處理組 (Hypoxia+Sal+LY): 100 mg/L紅景天苷預(yù)處理24 h后繼續(xù)用20 μmol/L LY294002處理1 h， 參照（2）行缺氧處理。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 細(xì)胞存活率 MTT比色法檢測細(xì)胞存活率。細(xì)胞接種于96孔板， 缺氧處理后， 每孔加入5 g/L MTT 20 μL， CO2孵箱孵育4 h， 棄上清液， 每孔加入DMSO 150 μL， 震蕩10 min， 酶聯(lián)免疫檢測儀上490 nm波長測定各孔光吸收度。

1.3.2 Hoechst 33258染色 各組細(xì)胞處理后， 40 g/L多聚甲醛固定， PBS沖洗2次， 5 g/L Hoechst 33258染料孵育10 min， PBS沖洗2次后紫外線激發(fā)， 熒光倒置顯微鏡下任選5個(gè)視野觀察計(jì)數(shù)并拍照。

1.3.3 DNA瓊脂糖凝膠電泳 參照文獻(xiàn)［4］方法提取心肌細(xì)胞DNA。配制20 g/L瓊脂糖凝膠， 加入8 μg DNA樣品， TBE緩沖液中電泳， 凝膠成像系統(tǒng)中成像。

1.3.4 HIF-1α免疫熒光染色 培養(yǎng)細(xì)胞于12孔板， 處理細(xì)胞后40 g/L多聚甲醛固定并透化處理， PBS充分清洗后， 100 g/L羊血清封閉， 加入HIF-1α兔多克隆抗體（1∶400） 4℃過夜孵育。PBS充分清洗， 羊抗兔FITC標(biāo)記的熒光二抗孵育30 min， 熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照。

1.3.5 Western blot檢測 培養(yǎng)細(xì)胞于6孔板， 缺氧處理后， 參照文獻(xiàn)［5］裂解細(xì)胞BCA試劑盒蛋白定量后， SDS-PAGE系統(tǒng)電泳轉(zhuǎn)膜后加入一抗， 包括HIF-1α抗體（1∶1000）、 Akt抗體（1∶1000）、 p-Akt抗體（1∶1000）、 β-actin抗體（1∶2000）， 二抗為HRP標(biāo)記羊抗兔抗體（1∶1000 ）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示， 用Graphpad Software統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組與組之間單因素方差分析。

2 結(jié)果

2.1 LY294002使細(xì)胞存活率下降 MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明， 缺氧后心肌細(xì)胞存活率為（43.19±8.84）%， 較正常組細(xì)胞明顯下降， 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

圖1 MTT比色法測定細(xì)胞存活率（略）

1: 正常組; 2: 缺氧組; 3: 缺氧+Sal組; 4: 缺氧+Sal+LY組. bP

2.2 LY294002使細(xì)胞凋亡增多 細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)， 染色質(zhì)會固縮， Hoechst33258染色顯示細(xì)胞核呈致密濃染， 或呈碎塊狀致密濃染（如圖 2B、 C、 D箭頭所示）。每組細(xì)胞任選5個(gè)視野進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)， 計(jì)算染色陽性細(xì)胞比率， 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。統(tǒng)計(jì)結(jié)果（圖2E）顯示， 缺氧組細(xì)胞Hoechst染色陽性細(xì)胞率與正常組細(xì)胞比較有明顯差異（P

2.3 LY294002阻斷Akt的磷酸化 大量資料證實(shí)， LY294002為PI(3)K特異性抑制劑， 它可以阻斷PI(3)K的下游靶蛋白Akt的磷酸化表達(dá)。結(jié)果如圖4所示， Sal與LY294002均未改變細(xì)胞Akt總蛋白水平， 與正常組細(xì)胞比較， 缺氧后細(xì)胞磷酸化Akt水平明顯升高， Sal預(yù)處理后其磷酸化水平進(jìn)一步提高， 而LY294002處理后， Sal的這種提高Akt磷酸化的作用被阻斷， 磷酸化Akt蛋白表達(dá)水平明顯下降。

圖2 Hoechst 33258染色檢測細(xì)胞凋亡率（×200）（略）

A: 正常組; B: 缺氧組; C: 缺氧+紅景天苷組; D: 缺氧+紅景天苷+LY; E: Hoechst染色陽性細(xì)胞比率. 1: 正常組; 2: 缺氧組; 3: 缺氧+Sal組; 4: 缺氧+Sal+LY組. bP

圖3 DNA ladder檢測細(xì)胞凋亡（略）

M: DNA marker; 1: 正常組; 2: 缺氧組; 3: 缺氧+紅景天苷組; 4: 缺氧+紅景天苷+LY組.

圖4 Western blot檢測心肌細(xì)胞p-Akt及Akt蛋白表達(dá)（略）

1: 正常組; 2: 缺氧組; 3: 缺氧+Sal組; 4: 缺氧+Sal+LY組. aP

2.4 LY294002阻斷HIF-1α的表達(dá) 近來研究證實(shí)， PI(3)K的抑制劑可抑制HIF-1α的穩(wěn)定及表達(dá)［6］。免疫熒光及Western blot試驗(yàn)結(jié)果均與之一致（圖5、 6）常培養(yǎng)的細(xì)胞HIF-1α迅速降解， 故較少有蛋白表達(dá); 缺氧后， 細(xì)胞HIF-1α表達(dá)穩(wěn)定， 免疫熒光及Western blot結(jié)果均顯示HIF-1α蛋白表達(dá)量明顯增加; Sal可進(jìn)一步激活HIF-1α的表達(dá)， 而PI(3)K特異性抑制劑LY294002抑制了HIF-1α的表達(dá)， 蛋白表達(dá)水平較Sal預(yù)處理組明顯減少（P

圖5 免疫熒光染色檢測心肌細(xì)胞HIF-1α蛋白的表達(dá)（×200）（略）

A: 正常組; B: 缺氧組; C: 缺氧+Sal組; D: 缺氧+Sal+LY組.

圖6 Western blot檢測心肌細(xì)胞HIF-1α蛋白表達(dá)（略）

1: 正常組; 2: 缺氧組; 3: 缺氧+Sal組; 4: 缺氧+Sal+LY組. bP

3 討論

近年， 大量的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ图捌淙祟愋呐K疾病證實(shí)， 凋亡造成的心肌細(xì)胞的減少在人類多種類型的心臟疾病中占極其關(guān)鍵地位， 并最終導(dǎo)致心臟功能的衰竭。因此， 阻斷細(xì)胞凋亡進(jìn)程可以延緩甚至阻斷心衰的發(fā)生。本研究中， 通過檢測細(xì)胞存活率、 細(xì)胞凋亡比率及其相關(guān)蛋白表達(dá)水平， 證明了心肌細(xì)胞經(jīng)PI(3)K特異性阻斷劑LY294002處理后， 紅景天苷對缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用被明顯減弱，細(xì)胞存活率明顯下降， 細(xì)胞凋亡比率明顯增加， 瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示特異性“l(fā)adder”灰度明顯加深， 磷酸化Akt、 HIF-1α2種蛋白表達(dá)水平明顯降低， 這些結(jié)果均提示， 在紅景天苷抑制缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡過程中， Akt起到了重要的作用， 通過它的磷酸化誘導(dǎo)了HIF-1α的表達(dá)。

PI(3)K/Akt信號通路可激活一系列生長信號通路， 阻斷一系列凋亡信號通路， 從而促進(jìn)細(xì)胞的存活、 增殖。相反， 阻斷PI(3)K/Akt信號通路， 可導(dǎo)致細(xì)胞的凋亡。研究證實(shí)， 缺氧或胰島素等生長因子可激活A(yù)kt的磷酸化， 進(jìn)而誘導(dǎo)HIF-1α蛋白的穩(wěn)定及其轉(zhuǎn)錄， 增加其表達(dá)［7］。但其具體的機(jī)制至今仍不明確。Sodhi等［8］研究證實(shí)， HIF-1并不含有Akt磷酸化后的結(jié)合位點(diǎn)， Akt磷酸化并不能直接誘導(dǎo)HIF-1α的表達(dá)， 但Akt激活后， 可激活其下游靶蛋白GSK-3(glycogen synthase kinase-3， 糖原合成激酶3)磷酸化的增加， 從而抑制HIF-1α的降解， 增加其表達(dá)。也有研究證實(shí)， Akt可能通過激活mTOR（mammalian target of rapamycin， 哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白）的表達(dá)， 從而促進(jìn)HIF-1α的轉(zhuǎn)錄［9]。通過本實(shí)驗(yàn)， 我們發(fā)現(xiàn)PI(3)K抑制劑LY294002可明顯減少HIF-1α表達(dá)， 紅景天苷處理后細(xì)胞凋亡率明顯升高， 這些結(jié)果顯示， 紅景天苷對缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡的抑制作用可能是通過激活A(yù)kt的磷酸化進(jìn)而誘導(dǎo)了HIF-1α的穩(wěn)定表達(dá)途徑而實(shí)現(xiàn)的。

綜上所述， 紅景天苷對缺氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡的抑制作用可能與激活PI(3)K/Akt的磷酸化進(jìn)而誘導(dǎo)HIF-1α的表達(dá)有關(guān)。本研究將為紅景天苷開發(fā)用于缺氧造成的心臟疾病的治療制劑提供了一定的理論基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

［1］ Mehrhof FB， Müller FU， Bergmann MW， et al. In cardiomyocyte hypoxia， insulin-like growth factor-induced antiapoptotic signaling requires phoshpatidylinositol-3-OH -kinase-dependent and mitogen-activated protein kinase-dependent activation of the transcription factor cAMP response element-binding protein［J］. Circulation， 2001， 104(17): 2088-2094.

［2］ 隋岫蘭， 楊 峰， 陳榮華， 等. 紅景天抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長的初步研究［J］. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志， 2006， 22(4): 524-525.

［3］ Koyama T， Temma K， Akera T， et al. Reperfusion induced contracture develops with a decreasing Ca2+: in single heart cells［J］. Am J Physiol Heart Circ Physiol， 1991， 261(15): 1115-1122.

［4］ Xu MF， Uemura R， Dai Y， et al. In vitro and in vivo effects of bone marrow stem cells on cardiac structure and function［J］. J Mol Cell Cardiol， 2007， 42(2): 441-448.

［5］ Von HR， Li PF， Dietz R. Signaling pathways in reactive oxygen species-induced cardiomyocyte apoptosis［J］. Circulation， 1999， 99(22): 2934-2941.

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［7］ Johnson DB， Rust RT， Hsieh TC， et al. Hypoxia activates Akt and induces phosphorylation of GSK-3 in PC12 cells［J］. Cell Signal， 2001， 13(1): 23-27.

篇7

表彰優(yōu)秀員工通報(bào)范文一

**各部門：

201X年度**全體員工在XXX董事長的正確領(lǐng)導(dǎo)下，充分發(fā)揮主觀能動(dòng)性，拼搏進(jìn)取，勤奮工作，促進(jìn)了**的穩(wěn)定快速發(fā)展。在此過程中，涌現(xiàn)出了一批為企業(yè)發(fā)展不辭辛苦、無私奉獻(xiàn)的優(yōu)秀員工。根據(jù)201X年年度員工考核結(jié)果，各部門負(fù)責(zé)人向公司推薦X位優(yōu)秀員工候選人：(名字)。為了總結(jié)成績，激勵(lì)先進(jìn)，弘揚(yáng)典型，進(jìn)一步激發(fā)廣大員工的積極性和創(chuàng)造性。

經(jīng)**總經(jīng)理辦公會評議，授予以下人員為“201X年度優(yōu)秀員工”的光榮稱號：XX部門：XXX XX部門：XXX XX部門：XXX XX部門：XXX XX部門：XXX XX部門：XXX XX部門：XXX、XXX、XXX XX部門：XXX

望以上受表彰的員工能在今后的工作中再接再厲，取得更好的成績。

同時(shí)希望其他員工向他們學(xué)習(xí)，在工作中積極進(jìn)取，不斷創(chuàng)新，為公司的更好發(fā)展貢獻(xiàn)自己的力量。

北京**有限公司

年 月 日

表彰優(yōu)秀員工通報(bào)范文二

公司屬各部門、企業(yè)：

為進(jìn)一步做好績效考評工作，弘揚(yáng)先進(jìn)，根據(jù)《XX管理辦法》的有關(guān)規(guī)定，對20xx年第三季度績效考核等級為A的張三、李四等20人予以通報(bào)表彰(名單附后)。

希望受表彰的員工再接再厲，繼續(xù)保持優(yōu)良的工作作風(fēng)，營造良好的工作氛圍，做好模范帶頭作用，為公司能更好的發(fā)展作出貢獻(xiàn)。

人力資源部

xx年x月x日

表彰優(yōu)秀員工通報(bào)范文三

20xx年公司在全體員工的共同努力下,較好地完成了公司下達(dá)的生產(chǎn)經(jīng)營指標(biāo),各項(xiàng)工作取得了可喜的成績。

為了鼓勵(lì)先進(jìn)，再創(chuàng)佳績，經(jīng)員工自評、部門互評、決策會總評，決定對彭傳勇、沈克芬等幾位同志予以通報(bào)表彰。希望受到表彰的同志在今后的工作中再接再厲，取得更好的成績。 受表彰員工名單附表：

特此通知。

xxx有限公司

xx年x月x日

 

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篇8

二、環(huán)衛(wèi)科每周對主次干道、背街小巷、居民樓院的環(huán)境衛(wèi)生狀況和清掃保潔、垃圾清運(yùn)、雜物清理等情況進(jìn)行一遍全面地督查，發(fā)現(xiàn)不符合城市環(huán)境衛(wèi)生長效管理辦法的情況，逐一進(jìn)行拍照并向有關(guān)責(zé)任單位（各社區(qū)、環(huán)衛(wèi)科、城建科、園林科）下發(fā)限期整改責(zé)任書，整改責(zé)任單位整改到位之后向辦事處寫出整改報(bào)告，環(huán)衛(wèi)科到現(xiàn)場復(fù)核后予以消號。

三、對各社區(qū)環(huán)境衛(wèi)生的周檢查、月評比工作，由環(huán)衛(wèi)科組織，在辦事處環(huán)境衛(wèi)生領(lǐng)導(dǎo)小組正副組長和成員參與下實(shí)施，每月4次，其中社區(qū)主任參與1次，社區(qū)主抓環(huán)衛(wèi)工作的副職參與2次，分包社區(qū)科室長參與1次，每季度辦事處全體班子成員和社區(qū)支書參與1次。參與周檢查的人員每個(gè)人對各社區(qū)環(huán)境衛(wèi)生工作情況進(jìn)行排序，排序分建成、半建成區(qū)兩塊進(jìn)行，各排出1—8名，每個(gè)參與檢查人員的排序情況相加之后的數(shù)字即為各社區(qū)的周檢查結(jié)果。

四、計(jì)分辦法：每月考評按百分制計(jì)算，周檢查每次為10分，檢查結(jié)果最高計(jì)9分，最低計(jì)6分；被市電視臺曝光一次扣10分，沒有按限期整改到位加倍扣分；在愛衛(wèi)辦等單位檢查中被扣分的，每處扣6分，限期整改不到位的加倍扣分；被市領(lǐng)導(dǎo)和創(chuàng)建辦、市委市政府督查考評辦公室、市委市政府兩辦批評一次扣5分，限期不整改到位的加倍扣分；辦事處領(lǐng)導(dǎo)和環(huán)衛(wèi)督查考評科日督查發(fā)現(xiàn)的問題，下發(fā)一處整改通知書扣1分，限期整改不到位的加倍扣分。被市電視臺表揚(yáng)一次加獎(jiǎng)5分，被市委市政府通報(bào)表揚(yáng)一次加獎(jiǎng)5分，被市創(chuàng)建辦、市委市政府督查考評辦通報(bào)表揚(yáng)一次加獎(jiǎng)3分。

五、每月對日督查、周檢查以及按計(jì)分辦法計(jì)算的情況，提交黨工委辦事處領(lǐng)導(dǎo)班子會議審議，對各社區(qū)及有關(guān)責(zé)任單位進(jìn)行通報(bào)并提出表揚(yáng)和批評。

篇9

一、電商精準(zhǔn)扶貧措施

（一）就業(yè)創(chuàng)業(yè)幫扶。電商園區(qū)、電商企業(yè)、電商商戶、電商服務(wù)網(wǎng)點(diǎn)要根據(jù)貧困戶不同情況，積極吸納其從事采摘、分揀包裝、物流快遞、公益性崗位、生產(chǎn)加工等工作就業(yè)、增收，幫助有意愿有能力的貧困人員通過電商就業(yè)創(chuàng)業(yè)。

（二）農(nóng)產(chǎn)品上行幫扶。電商園區(qū)、電商企業(yè)、電商商戶、電商服務(wù)網(wǎng)點(diǎn)要優(yōu)先幫助貧困戶種養(yǎng)殖的農(nóng)特產(chǎn)品上行，通過電商拓寬銷售渠道，增加增收。

（三）突出精準(zhǔn)，落實(shí)到戶。各相關(guān)縣區(qū)政府要明確由縣區(qū)扶貧部門牽頭，商務(wù)部門配合，利用各方面的資源和力量，協(xié)調(diào)指導(dǎo)鄉(xiāng)鎮(zhèn)黨委、政府共同做好電商政策宣傳、組織培訓(xùn)、政策措施的貫徹落實(shí)。各相關(guān)縣區(qū)商務(wù)局在統(tǒng)計(jì)匯總每個(gè)月電商精準(zhǔn)扶貧情況的基礎(chǔ)上，在上報(bào)市局的同時(shí)，及時(shí)反饋到縣區(qū)扶貧辦和鄉(xiāng)鎮(zhèn)黨委、政府，與扶貧辦一起，協(xié)調(diào)鄉(xiāng)鎮(zhèn)黨委政府，把電商幫扶貧困戶就業(yè)、農(nóng)產(chǎn)品上行情況由各鄉(xiāng)鎮(zhèn)脫貧攻堅(jiān)責(zé)任組負(fù)責(zé)，精準(zhǔn)落實(shí)到貧困戶幫扶措施和收入信息表上，并根據(jù)扶貧對象家庭收入增減變化，調(diào)整扶貧方案，做到精準(zhǔn)施策，取得實(shí)效。

（四）建立工作臺賬。有扶貧攻堅(jiān)任務(wù)的縣區(qū)要建立詳實(shí)的電商精準(zhǔn)扶貧工作臺賬，詳細(xì)記錄電商幫扶貧困村、貧困戶的信息，如實(shí)填寫貧困戶農(nóng)產(chǎn)品上行信息、貧困戶就業(yè)信息和收入情況并按月反饋，確保電商扶貧每一項(xiàng)工作都落實(shí)到貧困村、貧困戶。

二、電商精準(zhǔn)扶貧要求

（一）月報(bào)制度。有脫貧攻堅(jiān)任務(wù)的縣區(qū)于每月10日前，按照開封市電商精準(zhǔn)扶貧工作臺賬分模塊報(bào)送電商扶貧工作開展情況，同時(shí)，積極總結(jié)、報(bào)送電商扶貧典型和鮮活案例。

（二）通報(bào)制度。電商扶貧工作將實(shí)行月通報(bào)、季小結(jié)、年總結(jié)制度，對電商扶貧工作開展好的縣區(qū)和負(fù)責(zé)同志進(jìn)行表揚(yáng)，對在電商扶貧工作中涌現(xiàn)出的好做法、好經(jīng)驗(yàn)積極表揚(yáng)并進(jìn)行推介,對差的縣區(qū)通報(bào)批評。

（三）督查制度。為確保電商扶貧工作抓牢抓實(shí)、抓出實(shí)效，我市將建立督查考核機(jī)制，圍繞電商精準(zhǔn)扶貧工作臺賬采用聽取匯報(bào)、查閱資料、實(shí)地察看和隨機(jī)抽查等方式對電商扶貧開展情況進(jìn)行督導(dǎo)，市扶貧辦、市政協(xié)等部門也將對我市電商精準(zhǔn)扶貧工作開展督導(dǎo)調(diào)研。

篇10

關(guān)鍵詞：軍用公文；公文文種；辨析

2006年1月1日開始實(shí)施的《中國人民機(jī)關(guān)公文處理?xiàng)l例》（以下簡稱《條例》）規(guī)定，機(jī)關(guān)公文的種類有：命令、指示、決定、通令、通知、通報(bào)、請示、批復(fù)、報(bào)告、函、會議紀(jì)要和通告十二種，并且對每一種文種的使用范圍作了具體詳細(xì)的規(guī)定。在軍用公文寫作中，注意把握文種特點(diǎn)，正確選用公文文種，對于準(zhǔn)確反映首長意圖，及時(shí)發(fā)揮公文效力起著舉足輕重的作用。但在實(shí)際機(jī)關(guān)工作中，有的參謀對各文種的使用范圍不加區(qū)分、不作辨析，導(dǎo)致文種選擇失當(dāng)。

一、請示與報(bào)告

某總隊(duì)后勤部寫了兩份文件，都是關(guān)于要錢的內(nèi)容，一個(gè)是《關(guān)于解決直屬二支隊(duì)建設(shè)經(jīng)費(fèi)的請示》，另一個(gè)是《關(guān)于解決倉庫建設(shè)經(jīng)費(fèi)的報(bào)告》，這兩份文件選用的文種，誰對誰錯(cuò)，我們用《條例》來判斷。請示和報(bào)告是《條例》當(dāng)中的兩種上行文，并且《條例》當(dāng)中只有這兩種上行文，加之在公文史上這兩種文種有時(shí)分有時(shí)合，導(dǎo)致了現(xiàn)在工作中少數(shù)人的錯(cuò)誤選用。

1.二者的使用范圍不同

請示是用于請求上級機(jī)關(guān)指示、批準(zhǔn)、解決事項(xiàng)時(shí)使用的文種，是需要上級機(jī)關(guān)答復(fù)的期復(fù)性上行文。而報(bào)告是用于向上級機(jī)關(guān)匯報(bào)工作、反映情況、提出意見建議、答復(fù)詢問時(shí)使用的文種，是不需要上級機(jī)關(guān)答復(fù)的陳述性上行文。上面兩份文件都是請求上級解決問題，并且希望得到滿意的答復(fù)，故均應(yīng)用“請示”，用“報(bào)告”為文種錯(cuò)用。

2.二者的行文時(shí)間不同

請示是事前行文。請示當(dāng)中的事項(xiàng)須征得上級領(lǐng)導(dǎo)同意后才能行動(dòng)，上級領(lǐng)導(dǎo)不同意則不能做；而報(bào)告在事前、事中、事后均可行文，在事前匯報(bào)工作的準(zhǔn)備情況及對這項(xiàng)工作的設(shè)想；事中反映工作的進(jìn)展程度；事后匯報(bào)完成任務(wù)的情況或者是事件的整體情況。

3.二者的行文范圍不同

請示為了求得問題更快更好地解決，不得多頭主送，它只主送一個(gè)上級機(jī)關(guān)，并且是直接的上級機(jī)關(guān)。而報(bào)告，作為上級，只是了解情況，因而可以多頭主送。

4.二者的內(nèi)容容量不同

請示只能是一文一事，內(nèi)容單一，結(jié)構(gòu)簡單。這一點(diǎn)在行文規(guī)則的第二十條也有所規(guī)定：“請示應(yīng)當(dāng)一文一事”而報(bào)告既可以是一文一事，也可以是一文幾事，行文長短不定，文字多的結(jié)構(gòu)易于變化。報(bào)告既有專題性的，又有綜合性的，其結(jié)構(gòu)也是根據(jù)需要來安排。

5.二者的結(jié)束語不同

請示的結(jié)束語是必備項(xiàng)目。而報(bào)告不單獨(dú)寫結(jié)束語。在《武警總部機(jī)關(guān)公文處理規(guī)定》中提出：“正文收結(jié)時(shí)，不要使用‘此通知’、‘此報(bào)告’之類的結(jié)語，但‘請示’公文，必須另起一行，使用‘妥否，請批示?！容^規(guī)范的表述語言收結(jié)?！?/p>

二、通令與通報(bào)

通令和通報(bào)都具有表揚(yáng)先進(jìn)、批評錯(cuò)誤的作用。武警總部發(fā)了標(biāo)題為《批準(zhǔn)×××等30名教員獲××××年度軍隊(duì)院校育才獎(jiǎng)銀獎(jiǎng)的通令》的一個(gè)表彰性文件，到底是用通令還是用通報(bào)呢？我們首先了解通令與通報(bào)的區(qū)別：

1.二者褒揚(yáng)或懲戒的程度不同

通令適用于按《紀(jì)律條令》規(guī)定，宣布對單位、個(gè)人給予的獎(jiǎng)勵(lì)和處分；通報(bào)則適用于宣布給予單位、個(gè)人不在《紀(jì)律條令》獎(jiǎng)懲范圍內(nèi)的表揚(yáng)鼓勵(lì)或批評。而《紀(jì)律條令》對個(gè)人和單位的獎(jiǎng)勵(lì)項(xiàng)目有：嘉獎(jiǎng)、三等功、二等功、一等功、榮譽(yù)稱號（用命令）這五項(xiàng)內(nèi)容，“軍隊(duì)院校育才獎(jiǎng)銀獎(jiǎng)”不是《紀(jì)律條令》規(guī)定的項(xiàng)目，故不應(yīng)用通令，而應(yīng)該用通報(bào)。采用通報(bào)行文，從內(nèi)容和文字上要比通令詳細(xì)、具體。有原因分析，并且非常深刻、透徹。讓受文單位對照檢查，防患于未然；或者是起步前進(jìn)、趕超先進(jìn)，真正起教育、警示的作用。

2.二者的署名不同

通令是首長署名；通報(bào)是機(jī)關(guān)署名。

三、請示與函

事例一：某市公安局?jǐn)M購置八輛摩托車，向市財(cái)政局行文，標(biāo)題是《關(guān)于擬購置八輛摩托車的請示》。事例二：某總隊(duì)欲向總部請求撥錢修建營房，標(biāo)題是《關(guān)于撥給經(jīng)費(fèi)修建營房的請示》。這兩份文件選用的文種是否正確，我們同樣用《條例》加以辨析。

大部分“函”和“請示”一樣，具有向?qū)Ψ教岢稣埱蟮奶攸c(diǎn)，都要收文單位作出答復(fù)，都希望對方滿足自己的需求（答復(fù)函除外），二者基本上屬于請求性文種，正因?yàn)樗鼈兙哂姓埱笮赃@一共同的特點(diǎn)，所以，在實(shí)際行文中，有的機(jī)關(guān)將“請示”與“函”相混淆，本來應(yīng)當(dāng)用“函”，卻用了“請示”。有的機(jī)關(guān)工作人員認(rèn)為既然是有求于人，就要客氣一點(diǎn)，用“請示”更顯尊重對方，而用“函”就覺得與對方平起平坐，有“不敬”的嫌疑，這是對“函”的錯(cuò)誤認(rèn)識。請示和函既有聯(lián)系，又有其自身存在的空間和領(lǐng)域，主要從以下三個(gè)方面予以把握：

1.二者行文雙方的隸屬關(guān)系不同

請示適用于向上級機(jī)關(guān)請求指示、批準(zhǔn)、解決事項(xiàng)時(shí)使用的公文文種。它是下級機(jī)關(guān)向相隸屬的上級機(jī)關(guān)行文，行文雙方必須有隸屬關(guān)系。函適用于不相隸屬機(jī)關(guān)之間相互商洽工作，詢問和答復(fù)問題，請求批準(zhǔn)和答復(fù)審批事項(xiàng)等時(shí)使用的公文文種。使用“函”的雙方?jīng)]有隸屬關(guān)系。發(fā)文時(shí)是用“請示”還是用“函”，選擇的最根本區(qū)別是行文雙方有無隸屬關(guān)系。

前文的兩個(gè)事例，事例一：市公安局與市財(cái)政局之間是無隸屬的平級關(guān)系，選擇“請示”行文是錯(cuò)誤的，應(yīng)該用“函”行文。事例二：某總隊(duì)與武警總部之間是直接的上下級關(guān)系，即有隸屬關(guān)系，選擇“請示”是準(zhǔn)確的。

2.二者的行文方向不同

軍用公文的12種文種中，按照其行文方向和作用可分為三大類：上行文、平行文、下行文。上行文是指按照隸屬關(guān)系，下級機(jī)關(guān)向上級機(jī)關(guān)呈送的公文，如請示、報(bào)告等；平行文是指同級機(jī)關(guān)或不相隸屬機(jī)關(guān)之間來往的公文，如函等；下行文是指上級機(jī)關(guān)向下級機(jī)關(guān)發(fā)出的公文，如命令、決定、通報(bào)、批復(fù)等。

“請示”是上行文，只用于下級機(jī)關(guān)向上級機(jī)關(guān)行文，而不能用作平行文和下行文，函則屬于平行文，以不相隸屬為行文條件，即使行文雙方的級別高低不同，也因?yàn)闆]有直接的隸屬關(guān)系，不存在誰向誰請示的問題，行文雙方處于平等地位。

3.二者的收文單位回復(fù)的公文文種不同