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篇1

關(guān)鍵詞 紫花苜蓿；耐逆；性狀遺傳；分子生物學(xué)

中圖分類(lèi)號(hào) S551+.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2012）20-0304-02

苜蓿（Medicago sativa）是世界上重要的豆科牧草，現(xiàn)已成為僅次于小麥、玉米、大豆之后的第四大作物，其粗蛋白含量達(dá)18%以上，干草產(chǎn)量可達(dá)18 t/hm2，種植一次可利用4～5年。正是因?yàn)檐俎I(yíng)養(yǎng)高、產(chǎn)量高、利用年限長(zhǎng)的特點(diǎn)，因此被譽(yù)為“牧草之王”。近年來(lái)，我國(guó)苜蓿種植面積和種植區(qū)域不斷擴(kuò)大，西北、華北、東北各省有大量栽培，南方各地也開(kāi)始栽種。對(duì)苜蓿的遺傳改良一直是苜蓿遺傳與育種工作者的目標(biāo)。但由于栽培苜蓿的四倍體特性，且具有蟲(chóng)媒傳粉、自交衰退的特點(diǎn)，使得苜蓿的遺傳改良較其他作物進(jìn)展緩慢。受氣候和土壤的影響，紫花苜蓿在我國(guó)南方推廣受到制約，對(duì)南方草食畜禽的發(fā)展產(chǎn)生了極大阻礙。隨著分子生物學(xué)的不斷發(fā)展進(jìn)步，各種誘變技術(shù)和生物技術(shù)在遺傳和育種方面的運(yùn)用逐漸發(fā)展和提高。因此，為了推動(dòng)苜蓿產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，利用這些技術(shù)手段研究紫花苜蓿的耐逆性狀，從而豐富我國(guó)苜蓿種質(zhì)資源，并為其耐逆育種提供一定的參考。

1 耐逆遺傳基礎(chǔ)研究

1.1 耐逆遺傳

國(guó)內(nèi)有關(guān)紫花苜蓿耐逆性狀遺傳的研究不多見(jiàn)，因?yàn)樽匣ㄜ俎＿z傳基礎(chǔ)復(fù)雜，其是異花授粉植物，為同源四倍體，國(guó)外報(bào)道也不全面。很多植物能夠在一定干旱脅迫閾值內(nèi)表達(dá)相關(guān)抗旱基因，體現(xiàn)抗旱性[1]。湛虎[2]利用Reverse Northern技術(shù)和DDRT-PCR技術(shù)，篩選了干旱脅迫表現(xiàn)的基因片段，研究表明該片段可能為干旱誘導(dǎo)表達(dá)的新基因。目前的研究表明，基因組成決定了紫花苜蓿的抗寒性，其受到多重環(huán)境因素影響，如土壤、光照、溫度等，還與秋眠性密切相關(guān)。Cunningham et al[3]以非秋眠性、不抗寒品種CUF101為親本，在選擇高秋眠性植株的同時(shí)，也提高了入選植株的抗寒性。Cunningham et al[4]研究表明，根系和根莖中Gas基因的表達(dá)和隨后的脯氨酸聚積與苜蓿越冬存活率緊密相關(guān)。楊青川等[5]對(duì)紫花苜蓿耐鹽性的基因效應(yīng)和遺傳力進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)個(gè)體間耐鹽性差異大于品種間差異，主要表現(xiàn)為加性效應(yīng)。Al-Khatib et al[6]揭示了不同紫花苜蓿品種群體具有不同的耐鹽基礎(chǔ)，用NCⅡ雜交法研究了經(jīng)耐鹽選擇后的遺傳方差和非遺傳方差。Johnson et al[7]認(rèn)為，紫花苜蓿各生育階段的耐鹽機(jī)制可能不同。Campbell et al[8]研究表明通過(guò)表型輪回選擇可提高紫花苜蓿對(duì)鋁耐受性。

1.2 耐逆性狀的分子標(biāo)記

在抗寒和抗旱性方面，國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者對(duì)紫花苜蓿進(jìn)行了分子標(biāo)記方面的研究，如分子標(biāo)記圖譜構(gòu)建[9]、RAPD技術(shù)引物篩選[10]、品種耐寒性檢測(cè)[11]等。在耐鋁毒方面，Sledge et al[12]采用RFLP技術(shù)對(duì)二倍體紫花苜蓿耐鋁性進(jìn)行QTL位點(diǎn)識(shí)別的研究，發(fā)現(xiàn)了2個(gè)與耐鋁毒相關(guān)的基因，并定位在苜蓿RFLP圖譜。在耐鹽性方面，楊青川等[13]研究獲得1個(gè)與苜蓿耐鹽基因相連鎖的RAPD標(biāo)記，并推斷該標(biāo)記與苜蓿耐鹽主效QTL緊密連鎖。劉志鵬等[14]用SSR標(biāo)記對(duì)耐鹽和敏鹽苜蓿種質(zhì)群體內(nèi)和群體間的遺傳變異進(jìn)行了研究分析。

在抗病性方面，王 瑜等[15]采用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)結(jié)合集群分離分析法對(duì)褐斑病抗性基因進(jìn)行分子標(biāo)記研究，初步確定了幾個(gè)與褐斑病抗性基因連鎖的分子標(biāo)記，為建立苜蓿褐斑病的分子標(biāo)記輔助選擇（MAS）育種技術(shù)體系、抗病基因的定位克隆以及深入研究奠定了基礎(chǔ)，為紫花苜蓿抗褐斑病的鑒定和分子標(biāo)記輔助抗病育種提供了重要依據(jù)。

劉曙娜等[17]以篩選出的高抗寒黃花苜蓿與高產(chǎn)紫花苜蓿雜交產(chǎn)生F1代個(gè)體，并且由F1代個(gè)體自交構(gòu)建F2群體。利用隨機(jī)擴(kuò)增DNA多態(tài)性分子遺傳標(biāo)記（RAPD）對(duì)F2群體進(jìn)行分析。應(yīng)用MAPMAKER/EXP（3.0）與JionMap4.0并結(jié)合MapDrawV2.1軟件構(gòu)建四倍體苜蓿遺傳連鎖圖譜。從192個(gè)隨機(jī)引物中篩選出72個(gè)引物，對(duì)94個(gè)F2個(gè)體及F1雙親DNA樣本進(jìn)行RAPD擴(kuò)增，獲得51個(gè)RAPD標(biāo)記，構(gòu)建了四倍體苜蓿分子遺傳連鎖框架圖，其中包含8個(gè)連鎖群，標(biāo)記覆蓋的基因組總長(zhǎng)度約為1261.5 cm，標(biāo)記間平均距離為24.73 cm。該圖譜為構(gòu)建飽和的苜蓿遺傳連鎖圖譜提供了框架結(jié)構(gòu)，并為開(kāi)展苜蓿分子育種研究奠定基礎(chǔ)。

1.3 耐逆基因克隆

紫花苜蓿耐鹽堿/抗旱、抗寒能力強(qiáng)，目前已從紫花苜蓿中分離、克隆了多個(gè)與耐逆境相關(guān)的基因。在耐鹽堿性方面，Ginzberg et al[18]從鹽脅迫紫花苜蓿的根cDNA文庫(kù)中成功克隆2個(gè)編碼Pro的關(guān)鍵合成酶基因cDNA克隆。龍瑞才等[19]根據(jù)已知的與鹽脅迫相關(guān)的EST序列，采用SMART RACE方法克隆了紫花苜蓿果糖—1，6一二磷酸醛縮酶（ALD）全長(zhǎng)cDNA，命名為MsALD。結(jié)果表明，cDNA全長(zhǎng)1 487 bp，包含一個(gè)1 194 bp的最大開(kāi)放閱讀框，編碼398個(gè)氨基酸。經(jīng)同源比對(duì)和進(jìn)化樹(shù)分析，MsALD基因編碼的氨基酸與馬鈴薯、煙草、紅三葉草等的果糖—l，6—二磷酸醛縮酶（ALD）氨基酸序列一致性達(dá)90%以上，確定其屬第1類(lèi)果糖—1，6—二磷酸醛縮酶。半定量RT-PCR分析表明，MsALD基因可能與紫花苜?？果}性相關(guān)。在抗旱性方面，Bartels[20]發(fā)現(xiàn)，干旱脅迫誘導(dǎo)的乙醛糖還原酶在苜蓿中已被克隆，此種酶可減輕乙醛活化，為苜蓿抗旱育種提供了思路。在抗寒性方面，Mohapatra et al[21-22]分別從紫花苜蓿Apica品種中分離出1個(gè)受干旱、寒冷、ABA脅迫誘導(dǎo)的cDNA和 3個(gè)冷馴化特異性cDNA。Castonguay et al[23]從冷馴化的苜蓿根頸中分離了1個(gè)冷調(diào)節(jié)基因msaCIC。Laberge et al[24]分離了編碼富甘氨酸的MsaciA。

2 誘變耐逆性

在逆境條件下，各物質(zhì)的相互關(guān)系是相當(dāng)復(fù)雜的。近年來(lái)植物耐逆性大多局限于逆境下生理機(jī)制的變化，缺乏各生理機(jī)制之間相關(guān)性的研究，目前引起這些作用的分子機(jī)制尚未完全研究清楚。因此，就簡(jiǎn)單的說(shuō)某種物質(zhì)在逆境條件下的升降，只能作為受到脅迫的參考依據(jù)。

2.1 物理誘變

李 波等[24]采用紫外線(xiàn)對(duì)苜蓿的愈傷組織進(jìn)行誘變處理，并用PEG模擬干旱脅迫，然后對(duì)抗旱性生理指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，脯氨酸含量、可溶性蛋白、過(guò)氧化物酶（POD）等生理指標(biāo)均高于對(duì)照，趨于一致。王 瑛等[25]利用經(jīng)衛(wèi)星搭載的苜蓿種子誘導(dǎo)愈傷組織，并篩選抗羥脯氨酸變異體，獲得變異細(xì)胞系，其游離脯氨酸含量高于對(duì)照2倍以上，同時(shí)對(duì)PEG和NaCl還具有交叉抗性。

在抗鹽性方面，李 紅等[26]對(duì)苜蓿莖段進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，并進(jìn)行NaN3和紫外線(xiàn)誘變處理。脯氨酸篩選后，作Na2CO3 和NaHCO3堿性脅迫，鑒定各項(xiàng)抗堿性生理指標(biāo)，如脯氨酸含量、可溶性糖、POD等。研究結(jié)果表明，在提高苜蓿的抗堿性作用方面，2種方法均可提高苜蓿抗堿性，其中紫外線(xiàn)誘變效果優(yōu)于NaN3化學(xué)誘變。

2.2 化學(xué)誘變

在抗旱性方面，張志勝等[27]通過(guò)3種途徑利用PEG分別獲得抗20%PEG帶芽愈傷組織、抗20%PEG愈傷組織、抗旱性穩(wěn)定的愈傷組織。在抗寒性方面，李 波等[28]利用疊氮化鈉誘變3個(gè)紫花苜蓿品種幼莖誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織，經(jīng)-7℃低溫篩選，發(fā)現(xiàn)經(jīng)誘變的愈傷組織抗寒性顯著提高，之后李 波等[29]用硫酸二乙酯（DES）誘變紫花苜蓿愈傷組織，也發(fā)現(xiàn)經(jīng)DES處理后的愈傷組織抗寒力增強(qiáng)。繼 紅等[30]以EMS為誘變劑，對(duì)紫花苜蓿葉片誘導(dǎo)愈傷組織作低溫篩選，獲得了耐寒突變體。

誘變育種是植物耐逆育種的重要手段，誘變育種在組織培養(yǎng)中也得到了廣泛的應(yīng)用，應(yīng)注重誘變技術(shù)與生物技術(shù)、航天育種技術(shù)相結(jié)合，加強(qiáng)多學(xué)科的滲透，以獲得更多新成果。在分子水平上，已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了將一些與逆境相關(guān)的基因?qū)氲街仓牦w內(nèi)，從而提升植株的耐逆性能。植物的耐逆性受多基因控制，存在多種調(diào)控途徑并可能發(fā)生交叉，運(yùn)用傳統(tǒng)育種技術(shù)與現(xiàn)代分子育種技術(shù)相結(jié)合是現(xiàn)階段植物抗逆育種的一個(gè)新方向。

3 參考文獻(xiàn)

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篇2

1、分子生物學(xué)（molecular biology)是從分子水平研究生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能從而闡明生命現(xiàn)象本質(zhì)的科學(xué)。自20世紀(jì)50年代以來(lái)，分子生物學(xué)是生物學(xué)的前沿與生長(zhǎng)點(diǎn)，其主要研究領(lǐng)域包括蛋白質(zhì)體系、蛋白質(zhì)-核酸體系 （中心是分子遺傳學(xué))和蛋白質(zhì)-脂質(zhì)體系（即生物膜）。

2、1953年沃森、克里克提出DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型是分子生物學(xué)誕生的標(biāo)志。

（來(lái)源：文章屋網(wǎng) ）

篇3

關(guān)鍵詞：農(nóng)學(xué)專(zhuān)業(yè)；分子生物學(xué)；教學(xué)改革與實(shí)踐

前言

上個(gè)世紀(jì)中期，核酸被確定為主要的遺傳物質(zhì)，隨后DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)被揭示；進(jìn)入到上世紀(jì)后期，遺傳重組技術(shù)、PCR技術(shù)以及核酸測(cè)序技術(shù)相繼出現(xiàn)、發(fā)展迅猛。分子生物學(xué)作為一門(mén)學(xué)科也應(yīng)運(yùn)而生，并成為當(dāng)前最前沿、最活躍的學(xué)科之一[1，2]。分子生物學(xué)相關(guān)理論與技術(shù)方法已經(jīng)滲透了生命科學(xué)各個(gè)研究領(lǐng)域，全面促進(jìn)了當(dāng)今理、工、農(nóng)、醫(yī)等多個(gè)學(xué)科的發(fā)展，是從事生命及農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和工作必備的工具和知識(shí)體系，該學(xué)科的教學(xué)工作至關(guān)重要[3]。該課程已成為高校生物類(lèi)、農(nóng)學(xué)以及醫(yī)學(xué)等專(zhuān)業(yè)的基礎(chǔ)課程，也是學(xué)生掌握生物技術(shù)的最重要課程之一。國(guó)內(nèi)高等院校自上世紀(jì)80年代以來(lái)，陸續(xù)開(kāi)設(shè)分子生物學(xué)課程。華南農(nóng)業(yè)大學(xué)辦學(xué)歷史悠久，已經(jīng)面向農(nóng)學(xué)專(zhuān)業(yè)開(kāi)設(shè)該課程長(zhǎng)達(dá)20余年。針對(duì)該課程存在的研究方法與手段發(fā)展極為迅速、理論知識(shí)抽象、實(shí)踐教學(xué)環(huán)節(jié)薄弱等問(wèn)題，結(jié)合前人的經(jīng)驗(yàn)和多年的教學(xué)實(shí)踐，從教材選用、教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)模式以及課程學(xué)習(xí)效果等方面進(jìn)行研究和探索，充分說(shuō)明教什么、怎么教以及教的怎么樣幾個(gè)教學(xué)中的關(guān)鍵問(wèn)題。全方位、多維度地提高教學(xué)效率，增強(qiáng)學(xué)生學(xué)習(xí)效果，為培養(yǎng)服務(wù)于現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的高素質(zhì)、創(chuàng)新型人才奠定基礎(chǔ)。

一、立足專(zhuān)業(yè)培養(yǎng)方案，整體規(guī)劃教學(xué)內(nèi)容

經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期實(shí)踐，分子生物學(xué)成為華南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)專(zhuān)業(yè)必修課、農(nóng)學(xué)丁穎創(chuàng)新班的專(zhuān)業(yè)選修課。在課程開(kāi)設(shè)前，相關(guān)專(zhuān)業(yè)的學(xué)生已經(jīng)修習(xí)了生物化學(xué)、遺傳學(xué)等專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課程，且在課程內(nèi)容中與分子生物學(xué)存在一定的交叉；部分學(xué)生還會(huì)繼續(xù)選修基因組學(xué)、生物信息學(xué)以及基因工程實(shí)驗(yàn)等課程，分子生物學(xué)成為學(xué)習(xí)這些課程的必要基礎(chǔ)。因此，我們根據(jù)農(nóng)學(xué)專(zhuān)業(yè)人才培養(yǎng)方案和本課程教學(xué)大綱進(jìn)行總體設(shè)計(jì)，根據(jù)學(xué)生已有的知識(shí)體系，突出教學(xué)重點(diǎn)，強(qiáng)調(diào)課程特色，提高教學(xué)效率。采用的具體措施主要包括以下兩個(gè)方面。

（一）合理選用教材

分子生物學(xué)幾乎是現(xiàn)代生命科學(xué)研究領(lǐng)域發(fā)展最為迅速、最具活力的學(xué)科。該學(xué)科相關(guān)的出版教材也非常豐富，包括《現(xiàn)代分子生物學(xué)》（朱玉賢，高教出版社，2007）、《分子生物學(xué)教程》（趙亞華，科學(xué)出版社，2006）、《基礎(chǔ)分子生物學(xué)》（鄭用璉，高教出版社，2012）等。針對(duì)于農(nóng)學(xué)專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)業(yè)特點(diǎn)，我們選用鄭用璉主編的《基礎(chǔ)分子生物學(xué)》作為參考書(shū)；在實(shí)際教學(xué)中，適當(dāng)脫離教材，對(duì)于本書(shū)中所涉及的遺傳學(xué)和生物化學(xué)教學(xué)內(nèi)容做必要提示，自學(xué)為主；對(duì)于研究前沿，密切追蹤，及時(shí)跟進(jìn)，將最新的研究方法和研究進(jìn)展融入到課堂教學(xué)。在教學(xué)過(guò)程中，引導(dǎo)學(xué)生查閱《GeneVIII》（Lewin.B，OxfordUniversityPress，2007）、《MolecularBiology》影印版（RobertF.Weaver科學(xué)出版社2001）等英文書(shū)籍和專(zhuān)業(yè)文獻(xiàn)，在學(xué)習(xí)專(zhuān)業(yè)知識(shí)的同時(shí)，提高英文閱讀水平，拓寬知識(shí)面。

（二）優(yōu)化教學(xué)大綱

制定教學(xué)大綱時(shí)，充分考慮遺傳學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)等課程的教學(xué)內(nèi)容，結(jié)合開(kāi)設(shè)的實(shí)驗(yàn)課程，進(jìn)行總體設(shè)計(jì)。經(jīng)過(guò)多年實(shí)踐，制定了總學(xué)時(shí)為48學(xué)時(shí)的課程教學(xué)大綱。其中，36個(gè)課時(shí)用于系統(tǒng)講述基本理論知識(shí)，12個(gè)學(xué)時(shí)用于課堂討論。理論知識(shí)包括核酸的結(jié)構(gòu)、DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)翻譯以及基因表達(dá)調(diào)控等。在具體教學(xué)時(shí)間分配上，2個(gè)課時(shí)用于系統(tǒng)介紹本學(xué)科的歷史沿革、發(fā)展現(xiàn)狀及未來(lái)趨勢(shì)；核酸結(jié)構(gòu)部分內(nèi)容在生物化學(xué)等課程有所涉及，本課程重點(diǎn)闡述核酸結(jié)構(gòu)與性質(zhì)在分子生物學(xué)研究中的意義與應(yīng)用、基因概念內(nèi)涵的演變和發(fā)展，總計(jì)8個(gè)課時(shí)；在中學(xué)階段已經(jīng)學(xué)習(xí)過(guò)DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄相關(guān)內(nèi)容，本課程教學(xué)中僅突出講述以往尚未接觸的內(nèi)容，安排6個(gè)課時(shí)；蛋白質(zhì)翻譯過(guò)程是生物化學(xué)課程的學(xué)習(xí)內(nèi)容，本課程將重點(diǎn)放在蛋白翻譯的保真機(jī)制上，總計(jì)4個(gè)課時(shí)；基因表達(dá)調(diào)控是整門(mén)課程中的重點(diǎn)、難點(diǎn)，分配16個(gè)課時(shí)；所選教材中涉及的基因突變及利用、基因工程等方面的內(nèi)容，分別在本專(zhuān)業(yè)開(kāi)設(shè)的遺傳學(xué)、植物基因工程等課程中進(jìn)行講述，本課程不再進(jìn)行單獨(dú)的講述。現(xiàn)在分子生物學(xué)技術(shù)等內(nèi)容主要結(jié)合12個(gè)課時(shí)的課堂討論進(jìn)行學(xué)習(xí)，結(jié)合具體研究案例，引導(dǎo)學(xué)生及時(shí)跟進(jìn)學(xué)科前沿，提高解決問(wèn)題的能力。通過(guò)將理論教學(xué)與進(jìn)展討論有機(jī)結(jié)合，達(dá)到夯實(shí)理論基礎(chǔ)，面向應(yīng)用，展望前沿，拓寬思路，全面提升專(zhuān)業(yè)素質(zhì)的目的。

二、多種教學(xué)方法融合，全面提高教與學(xué)的效率

（一）堅(jiān)持德育優(yōu)先，情感教育貫穿課程教學(xué)

教育的本質(zhì)是立德樹(shù)人，只有保持一個(gè)國(guó)家、一個(gè)民族的道德先進(jìn)性，才能保持這個(gè)國(guó)家、這個(gè)民族持續(xù)前進(jìn)的動(dòng)力。德育是任何課程教育都不容忽視的、極為重要的教學(xué)組成部分。在授課過(guò)程中，通過(guò)學(xué)習(xí)相關(guān)研究進(jìn)展以及理論和方法的產(chǎn)生與發(fā)展歷程，結(jié)合該學(xué)科在我國(guó)的歷史沿革和現(xiàn)狀、具體到我校在相關(guān)領(lǐng)域的貢獻(xiàn)，弘揚(yáng)前輩的愛(ài)國(guó)奉獻(xiàn)精神和實(shí)事求是的道德品質(zhì)；由此培養(yǎng)學(xué)生建立科學(xué)的發(fā)展觀(guān)、形成嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目蒲袘B(tài)度，激發(fā)家國(guó)情懷，形成內(nèi)在的學(xué)習(xí)動(dòng)力和學(xué)習(xí)熱情，提高學(xué)習(xí)效果。作為主講老師，我們盡量多地了解學(xué)生個(gè)人學(xué)習(xí)情況和日常動(dòng)態(tài)，建立良好的師生互信，全方位服務(wù)教學(xué)工作。

（二）打破教材限制，靈活采用教學(xué)手段

分子生物學(xué)課程知識(shí)更新速度非?？欤疑婕暗闹R(shí)面廣、信息量大。我們根據(jù)實(shí)際需求，不拘泥于教材，及時(shí)跟進(jìn)研究前沿?zé)狳c(diǎn)，將最新的研究成果引用到課堂教學(xué)，鼓勵(lì)學(xué)生利用所掌握的知識(shí)點(diǎn)探究前沿?zé)狳c(diǎn)問(wèn)題，培養(yǎng)學(xué)生主動(dòng)獲取知識(shí)的能力和創(chuàng)新意識(shí)。例如，將近年來(lái)的研究熱點(diǎn)———基因編輯技術(shù)融入到“基因表達(dá)調(diào)控”的內(nèi)容，一起進(jìn)行教學(xué)。該課程還存在知識(shí)抽象、復(fù)雜，難以理解的問(wèn)題，學(xué)生容易產(chǎn)生畏難情緒。針對(duì)于此，我們?cè)谑谡n過(guò)程中，充分挖掘教學(xué)資源，以學(xué)生們所熟悉的本校教師及其研究成果進(jìn)行舉例，化抽象為具體，學(xué)以致用，培養(yǎng)學(xué)生利用所學(xué)的知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力。在多媒體課件制作方面，注意色彩搭配，重難點(diǎn)突出，合理規(guī)劃放映流程，深入淺出地展示學(xué)習(xí)內(nèi)容。充分發(fā)揮現(xiàn)代化教育技術(shù)的優(yōu)勢(shì)，在采用多媒體課件進(jìn)行展示的基礎(chǔ)上，充分利用網(wǎng)絡(luò)傳媒，綜合使用動(dòng)畫(huà)、投影，增強(qiáng)表現(xiàn)力，使教學(xué)內(nèi)容更加直觀(guān)形象，達(dá)到啟迪思維，增進(jìn)理解，強(qiáng)化記憶的效果。在課堂講述之外，安排課前導(dǎo)讀、課堂討論和課后作業(yè)，從多個(gè)教學(xué)環(huán)節(jié)對(duì)學(xué)習(xí)內(nèi)容進(jìn)行拓展，培養(yǎng)學(xué)生歸納總結(jié)、獨(dú)立分析和思考的能力，逐步形成科學(xué)的思維方式，提高綜合素質(zhì)。

（三）班組結(jié)合，凸顯學(xué)生學(xué)習(xí)主體的地

我校主要采用小班制教學(xué)模式，集中授課是主要的教學(xué)組織形式。本課程采用了大班授課和小組學(xué)習(xí)相結(jié)合，同時(shí)輔助以個(gè)別指導(dǎo)的教學(xué)形式。每個(gè)授課班一般為50人左右，每個(gè)小組通常為3-5人。通過(guò)擬定課外學(xué)習(xí)內(nèi)容，督促學(xué)生自發(fā)組成課外學(xué)習(xí)小組，自主選定主題并圍繞該主題進(jìn)行調(diào)研、在課堂上進(jìn)行討論?！鞍嗉?jí)-小組-個(gè)人”相結(jié)合的分層學(xué)習(xí)模式使每位同學(xué)都能充分參與到教學(xué)活動(dòng)中，激發(fā)學(xué)習(xí)的積極性。課堂討論環(huán)節(jié)中，以小組為主體闡述觀(guān)點(diǎn)，結(jié)合教師點(diǎn)評(píng)，自由提問(wèn)和辯論，形成師生間的有效互動(dòng)，活躍課堂氣氛。在啟發(fā)式的翻轉(zhuǎn)課堂過(guò)程中，充分發(fā)揮學(xué)生的主體地位，有效調(diào)動(dòng)學(xué)習(xí)熱情，提高自主學(xué)習(xí)能力，推動(dòng)學(xué)生的創(chuàng)造性學(xué)習(xí)。

（四）以問(wèn)題為導(dǎo)向，打造立體式學(xué)習(xí)環(huán)境

農(nóng)學(xué)專(zhuān)業(yè)學(xué)生從大學(xué)二年級(jí)即開(kāi)始畢業(yè)論文研究工作，從事的研究工作往往涉及到不同層次的分子生物學(xué)問(wèn)題；在整體的培養(yǎng)方案中，也有與分子生物學(xué)課程相關(guān)的實(shí)驗(yàn)性課程。我們以此為契機(jī)，通過(guò)在課程中引入讀書(shū)報(bào)告、闡明實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原理和方法，指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行研究性學(xué)習(xí)，促進(jìn)學(xué)生運(yùn)用本課程的理論知識(shí)解決實(shí)踐教學(xué)中的具體問(wèn)題；有目的地引導(dǎo)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，提出疑問(wèn)，以問(wèn)題為導(dǎo)向，激發(fā)興趣、積極探索，在問(wèn)題解決的過(guò)程中積累知識(shí)。以上方案有效地促進(jìn)了不同課程知識(shí)點(diǎn)的融合，形成立體式學(xué)習(xí)環(huán)境，全面培養(yǎng)學(xué)生的自學(xué)能力和研究能力。

篇4

【關(guān)鍵詞】數(shù)量遺傳學(xué)；分子遺傳學(xué)；動(dòng)物育種；研究進(jìn)展

自20世紀(jì)80年代以來(lái)，隨著現(xiàn)代分子生物技術(shù)和信息技術(shù)的迅速發(fā)展，動(dòng)物育種計(jì)劃和動(dòng)物分子遺傳學(xué)研究取得了大量的突破性成果，國(guó)際上的動(dòng)物育種已逐漸進(jìn)入分子水平，從傳統(tǒng)的育種方法朝著快速改變動(dòng)物基因型甚至是單倍體型的方向發(fā)展。

1．?dāng)?shù)量遺傳學(xué)與動(dòng)物育種

數(shù)量遺傳學(xué)選擇原理充分考慮了環(huán)境因素對(duì)微效多基因控制的數(shù)量性狀的影響力，從表型方差中剖分出基因型方差，通過(guò)運(yùn)用資料設(shè)計(jì)和統(tǒng)計(jì)模型估計(jì)有關(guān)的遺傳參數(shù)，最后達(dá)到選種的目的。數(shù)量遺傳學(xué)主要應(yīng)用于估計(jì)遺傳參數(shù)、通徑分析和動(dòng)物育種估計(jì)的模型方法等幾個(gè)方面。

1.1遺傳參數(shù)估計(jì)

從統(tǒng)計(jì)學(xué)上講，遺傳參數(shù)的估計(jì)可歸結(jié)為方差或協(xié)方差組分估計(jì)。從親子回歸、同胞分析到方差分析法；到了20世紀(jì)50年代，C R Henderson提出了針對(duì)非均衡資料的Henderson方法Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ；之后出現(xiàn)了極大似然法約束極大似然法、最小范數(shù)二次無(wú)偏估計(jì)法和最小方差二次無(wú)偏估計(jì)法以及貝葉斯估計(jì)等方法。目前，約束最大似然法是世界各國(guó)育種學(xué)家采用的主要方法。

1.2育種值估計(jì)

畜禽遺傳評(píng)定即評(píng)估畜禽種用價(jià)值的高低，是畜禽育種工作的中心任務(wù)。畜禽種用價(jià)值的高低是用育種值來(lái)衡量的，影響數(shù)量性狀表型值的是微效多基因的加性效應(yīng)值(A)、等位基因之間的顯性效應(yīng)值(D)和非等位基因間的上位效應(yīng)值(I)。其中，只有基因的加性效應(yīng)值即育種值能夠穩(wěn)定的遺傳給后代，但是育種值不能直接測(cè)量，只能使用一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法通過(guò)表型值對(duì)其間接加以估計(jì)，所以遺傳評(píng)定的主要工作就是對(duì)育種值的估計(jì)。畜禽的估計(jì)育種值是選擇種畜的主要依據(jù)，育種值估計(jì)的準(zhǔn)確性在很大程度上影響著畜禽育種效果的好壞。用于育種值估計(jì)的方法概括起來(lái)主要有選擇指數(shù)法、群體比較法和混合線(xiàn)性模型法。

2.分子數(shù)量遺傳學(xué)與動(dòng)物育種

分子數(shù)量遺傳學(xué)是分子生物技術(shù)與數(shù)量遺傳學(xué)相結(jié)合的一門(mén)發(fā)展中的新的交叉學(xué)科，目前仍屬于數(shù)量遺傳學(xué)范疇?，F(xiàn)代分子生物技術(shù)的發(fā)展，使得從分子水平上研究數(shù)量性狀的基因成為可能。

2.1對(duì)QTL作出遺傳標(biāo)記

目前對(duì)決定數(shù)量性狀的多基因還不能準(zhǔn)確定位，但如果能找到一個(gè)可以識(shí)別的基因或基因組的DNA多態(tài)，或是一個(gè)染色體片段與這一目標(biāo)性狀有密切的關(guān)聯(lián)，就可作為對(duì)目標(biāo)性狀選擇的遺傳標(biāo)記。遺傳標(biāo)記還可應(yīng)用于基因轉(zhuǎn)移、基因定位和基因作圖等研究。

2.2 QTL的分離和克隆

分子數(shù)量遺傳學(xué)的目標(biāo)是要分離和克隆決定數(shù)量性狀的基因，研究其結(jié)構(gòu)和功能，最終達(dá)到從分子水平上改良數(shù)量性狀的目的。雖然在理論上可以將分子生物學(xué)領(lǐng)域發(fā)展的各種基因克隆技術(shù)用于QTL，但是數(shù)量性狀的遺傳表達(dá)一般涉及多個(gè)基因座位。例如，奶牛的產(chǎn)奶量既受繁殖和泌乳的內(nèi)分泌系統(tǒng)基因的控制，又受消化酶系統(tǒng)基因的控制，情況相當(dāng)復(fù)雜，很難把這些基因一一分離和克隆。但也可以根據(jù)已有的知識(shí)，通過(guò)對(duì)候選基因的篩選找出一個(gè)或幾個(gè)對(duì)某個(gè)數(shù)量性狀有較大效應(yīng)的QTL，就可以對(duì)這個(gè)QTL用一般的基因克隆方法進(jìn)行克隆，作為數(shù)量性狀的一個(gè)重要基因來(lái)研究。例如，有資料報(bào)道豬的雌激素受體基因可影響產(chǎn)仔數(shù)。

3.動(dòng)物育種方法前景

動(dòng)物分子育種是依據(jù)分子數(shù)量遺傳學(xué)理論，利用分子生物學(xué)技術(shù)來(lái)改良畜禽品種的一門(mén)新型學(xué)科，是傳統(tǒng)的動(dòng)物育種理論和方法的新發(fā)展。從目前發(fā)展?fàn)顩r來(lái)看，它應(yīng)包含兩方面內(nèi)容:以基因組分析為基礎(chǔ)的標(biāo)記輔助選擇和以轉(zhuǎn)基因技術(shù)為基礎(chǔ)的轉(zhuǎn)基因育種。由于動(dòng)物分子育種是直接在水平上對(duì)性狀DNA的基因型進(jìn)行選擇，因此其選種的準(zhǔn)確性會(huì)大大提高;同時(shí)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用還能根據(jù)人們的需求創(chuàng)造出一些非常規(guī)性的畜牧產(chǎn)品[7-8]。可以說(shuō)，動(dòng)物分子育種是動(dòng)物遺傳育種學(xué)科發(fā)展的必然，它將是21世紀(jì)動(dòng)物育種的一種重要方法，對(duì)21世紀(jì)世界畜牧業(yè)產(chǎn)生巨大的影響。

【參考文獻(xiàn)】

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［4］李寧，吳常信.動(dòng)物分子育種:一門(mén)發(fā)展中的新型學(xué)科[J].農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào).

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［6］盛志廉，陳瑤生.數(shù)量遺傳學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社.

篇5

概念：分子生物學(xué)是從分子水平研究生命本質(zhì)為目的的一門(mén)新興邊緣學(xué)科，它以核酸和蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)及其在遺傳信息和細(xì)胞信息傳遞中的作用為研究對(duì)象，是當(dāng)前生命科學(xué)中發(fā)展最快并正在與其它學(xué)科廣泛交叉與滲透的重要前沿領(lǐng)域。分子生物學(xué)的發(fā)展為人類(lèi)認(rèn)識(shí)生命現(xiàn)象帶來(lái)了前所未有的機(jī)會(huì)，也為人類(lèi)利用和改造生物創(chuàng)造了極為廣闊的前景。 

  

所謂在分子水平上研究生命的本質(zhì)主要是指對(duì)遺傳、生殖、生長(zhǎng)和發(fā)育等生命基本特征的分子機(jī)理的闡明，從而為利用和改造生物奠定理論基礎(chǔ)和提供新的手段。這里的分子水平指的是那些攜帶遺傳信息的核酸和在遺傳信息傳遞及細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞間通訊過(guò)程中發(fā)揮著重要作用的蛋白質(zhì)等生物大分子。這些生物大分子均具有較大的分子量，由簡(jiǎn)單的小分子核苷酸或氨基酸排列組合以蘊(yùn)藏各種信息，并且具有復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)以形成精確的相互作用系統(tǒng)，由此構(gòu)成生物的多樣化和生物個(gè)體精確的生長(zhǎng)發(fā)育和代謝調(diào)節(jié)控制系統(tǒng)。闡明這些復(fù)雜的結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系是分子生物學(xué)的主要任務(wù)。 

  

發(fā)展歷史： 

  

一、準(zhǔn)備和醞釀階段 

  

19世紀(jì)后期到20世紀(jì)50年代初，是現(xiàn)代分子生物學(xué)誕生的準(zhǔn)備和醞釀階段。在這一階段產(chǎn)生了兩點(diǎn)對(duì)生命本質(zhì)的認(rèn)識(shí)上的重大突破：  

  

確定了蛋白質(zhì)是生命的主要基礎(chǔ)物質(zhì) 

 

19世紀(jì)末buchner兄弟證明酵母無(wú)細(xì)胞提取液能使糖發(fā)酵產(chǎn)生酒精，第一次提出酶（enzyme）的名稱(chēng)，酶是生物催化劑。20世紀(jì)20-40年代提純和結(jié)晶了一些酶（包括尿素酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、黃酶、細(xì)胞色素c、肌動(dòng)蛋白等），證明酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)。隨后陸續(xù)發(fā)現(xiàn)生命的許多基本現(xiàn)象（物質(zhì)代謝、能量代謝、消化、呼吸、運(yùn)動(dòng)等）都與酶和蛋白質(zhì)相聯(lián)系，可以用提純的酶或蛋白質(zhì)在體外實(shí)驗(yàn)中重復(fù)出來(lái)。在此期間對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的認(rèn)識(shí)也有較大的進(jìn)步。1902年emilfisher證明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)是多肽；40年代末，sanger創(chuàng)立二硝基氟苯（dnfb）法、edman發(fā)展異硫氰酸苯酯法分析肽鏈n端氨基酸；1953年sanger和thompson完成了第一個(gè)多肽分子--胰島素a鏈和b鏈的氨基全序列分析。由于結(jié)晶x-線(xiàn)衍射分析技術(shù)的發(fā)展，1950年pauling和corey提出了α-角蛋白的α-螺旋結(jié)構(gòu)模型。所以在這階段對(duì)蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)都有了認(rèn)識(shí)。 

  

確定了生物遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)是dna 

  

雖然1868年f.miescher就發(fā)現(xiàn)了核素（nuclein），但是在此后的半個(gè)多世紀(jì)中并未引起重視。20世紀(jì)20-30年代已確認(rèn)自然界有dna和rna兩類(lèi)核酸，并闡明了核苷酸的組成。由于當(dāng)時(shí)對(duì)核苷酸和鹼基的定量分析不夠精確，得出dna中a、g、c、t含量是大致相等的結(jié)果，因而曾長(zhǎng)期認(rèn)為dna結(jié)構(gòu)只是“四核苷酸”單位的重復(fù)，不具有多樣性，不能攜帶更多的信息，當(dāng)時(shí)對(duì)攜帶遺傳信息的侯選分子更多的是考慮蛋白質(zhì)。40年代以后實(shí)驗(yàn)的事實(shí)使人們對(duì)酸的功能和結(jié)構(gòu)兩方面的認(rèn)識(shí)都有了長(zhǎng)足的進(jìn)步。1944年o.t.avery等證明了肺炎球菌轉(zhuǎn)化因子是dna；1952年a.d.hershey和m.cha-se用dna35s和32p分別標(biāo)記t2噬菌體的蛋白質(zhì)和核酸，感染大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明了是遺傳物質(zhì)。在對(duì)dna結(jié)構(gòu)的研究上，1949-52年s.furbery等的x-線(xiàn)衍射分析闡明了核苷酸并非平面的空間構(gòu)像，提出了dna是螺旋結(jié)構(gòu)；1948-1953年chargaff等用新的層析和電泳技術(shù)分析組成dna的鹼基和核苷酸量，積累了大量的數(shù)據(jù)，提出了dna鹼基組成a=t、g=c的chargaff規(guī)則，為鹼基配對(duì)的dna結(jié)構(gòu)認(rèn)識(shí)打下了基礎(chǔ)。

二、現(xiàn)代分子生物學(xué)的建立和發(fā)展階段 

  

 　這一階段是從50年代初到70年代初，以1953年watson和crick提出的dna雙螺旋結(jié)構(gòu)模型作為現(xiàn)代分子生物學(xué)誕生的里程碑開(kāi)創(chuàng)了分子遺傳學(xué)基本理論建立和發(fā)展的黃金時(shí)代。dna雙螺旋發(fā)現(xiàn)的最深刻意義在于：確立了核酸作為信息分子的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ);提出了鹼基配對(duì)是核酸復(fù)制、遺傳信息傳遞的基本方式；從而最后確定了核酸是遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)，為認(rèn)識(shí)核酸與蛋白質(zhì)的關(guān)系及其在生命中的作用打下了最重要的基礎(chǔ)。在此期間的主要進(jìn)展包括： 

  

遺傳信息傳遞中心法則的建立 

  

在發(fā)現(xiàn)dna雙螺旋結(jié)構(gòu)同時(shí)，watson和crick就提出dna復(fù)制的可能模型。其后在1956年a.kornbery首先發(fā)現(xiàn)dna聚合酶；1958年meselson及stahl用同位素標(biāo)記和超速離心分離實(shí)驗(yàn)為dna半保留模型提出了證明；1968年okazaki（岡畸）提出dna不連續(xù)復(fù)制模型；1972年證實(shí)了dna復(fù)制開(kāi)始需要rna作為引物；70年代初獲得dna拓?fù)洚悩?gòu)酶，并對(duì)真核dna聚合酶特性做了分析研究；這些都逐漸完善了對(duì)dna復(fù)制機(jī)理的認(rèn)識(shí)。 

  

在發(fā)現(xiàn)dna雙螺旋結(jié)構(gòu)同時(shí)，watson和crick就提出dna復(fù)制的可能模型。其后在1956年a.kornbery首先發(fā)現(xiàn)dna聚合酶；1958年meselson及stahl用同位素標(biāo)記和超速離心分離實(shí)驗(yàn)為dna半保留模型提出了證明；1968年okazaki（岡畸）提出dna不連續(xù)復(fù)制模型；1972年證實(shí)了dna復(fù)制開(kāi)始需要rna作為引物；70年代初獲得dna拓?fù)洚悩?gòu)酶，并對(duì)真核dna聚合酶特性做了分析研究；這些都逐漸完善了對(duì)dna復(fù)制機(jī)理的認(rèn)識(shí)。 

  

在研究dna復(fù)制將遺傳信息傳給子代的同時(shí)，提出了rna在遺傳信息傳到蛋白質(zhì)過(guò)程中起著中介作用的假說(shuō)。1958年weiss及hurwitz等發(fā)現(xiàn)依賴(lài)于dna的rna聚合酶；1961年hall和spiege-lman用rna-dna雜交證明mrna與dna序列互補(bǔ)；逐步闡明了rna轉(zhuǎn)錄合成的機(jī)理。

 

在此同時(shí)認(rèn)識(shí)到蛋白質(zhì)是接受rna的遺傳信息而合成的。50年代初zamecnik等在形態(tài)學(xué)和分離的亞細(xì)胞組分實(shí)驗(yàn)中已發(fā)現(xiàn)微粒體（microsome）是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的部位；1957年hoagland、zamecnik及stephenson等分離出trna并對(duì)它們?cè)诤铣傻鞍踪|(zhì)中轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的功能提出了假設(shè)；1961年brenner及gross等觀(guān)察了在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中mrna與核糖體的結(jié)合；1965年holley首次測(cè)出了酵母丙氨酸t(yī)rna的一級(jí)結(jié)構(gòu)；特別是在60年代nirenberg、ochoa以及khorana等幾組科學(xué)家的共同努力破譯了rna上編碼合成蛋白質(zhì)的遺傳密碼，隨后研究表明這套遺傳密碼在生物界具有通用性，從而認(rèn)識(shí)了蛋白質(zhì)翻譯合成的基本過(guò)程。 

  

上述重要發(fā)現(xiàn)共同建立了以中心法則為基礎(chǔ)的分子遺傳學(xué)基本理論體系。1970年temin和baltimore又同時(shí)從雞肉瘤病毒顆粒中發(fā)現(xiàn)以rna為模板合成dna的反轉(zhuǎn)錄酶，又進(jìn)一步補(bǔ)充和完善了遺傳信息傳遞的中心法則。 

對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的進(jìn)一步認(rèn)識(shí) 

篇6

目前，急性早幼粒細(xì)胞白血病的實(shí)驗(yàn)室診斷主要是以細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查為基礎(chǔ)，結(jié)合免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)以及分子生物學(xué)檢驗(yàn)的MICM綜合性診斷技術(shù)。近幾年，D-二聚體在急性早幼粒細(xì)胞白血病中的診斷價(jià)值也逐漸被臨床重視。本文將對(duì)這些實(shí)驗(yàn)室診斷方法進(jìn)行綜述。

關(guān)鍵詞：

急性早幼粒細(xì)胞白血??；MICM分型；D-二聚體；FISH；FCM

急性早幼粒細(xì)胞白血?。╝cutepromyelocyticleukemia，APL）是急性髓細(xì)胞白血?。╝cutemyeloblasticleukemia，AML）的M3亞型[1]，多伴有異常染色體t（15；17）而形成PML-RARα融合基因。以異常早幼粒細(xì)胞增生為主，臨床上除有發(fā)熱、感染、貧血和浸潤(rùn)等急性白血病的癥狀外，廣泛而嚴(yán)重的出血常是本病的特點(diǎn)，易并發(fā)彌散性血管內(nèi)凝血（DIC），可發(fā)生原發(fā)性纖溶亢進(jìn)。經(jīng)誘導(dǎo)化療或骨髓移植后達(dá)到臨床完全緩解（CR），但體內(nèi)依然會(huì)殘存約106~108個(gè)微量白血病細(xì)胞（MRLC），即微量殘留白血病（minimalresiduaidisease，MRD）[2]，而這些細(xì)胞則是APL復(fù)發(fā)的根源。近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，通過(guò)聯(lián)合測(cè)定PML-RARα融合基因進(jìn)行診斷，即將形態(tài)學(xué)（morphology，M）、免疫學(xué)（immunology，I）、細(xì)胞遺傳學(xué)（cytogenetics，C）和分子生物學(xué)（molecu-lar，M）相聯(lián)合的MICM分型技術(shù)[3]，極大地提高了APL診斷的準(zhǔn)確率，并為MRD提供了更為可靠的診斷依據(jù)。本文結(jié)合近幾年相關(guān)學(xué)者利用MICM分型技術(shù)和D-二聚體檢測(cè)等在APL上的診斷報(bào)道及相應(yīng)研究成果，對(duì)這些診斷方法進(jìn)行綜述，并探討各診斷方法的優(yōu)劣。

1血細(xì)胞形態(tài)學(xué)在診斷中的應(yīng)用

1.1血象APL的血涂片觀(guān)察，可見(jiàn)血紅蛋白和紅細(xì)胞呈不同程度的減少；血小板中度到重度減少，多數(shù)為（10~30）×109/L。白細(xì)胞計(jì)數(shù)大多病例在15×109/L以下，明顯減少者見(jiàn)于全血細(xì)胞減少，但也可有明顯增高（M3v型），分類(lèi)以異常早幼粒細(xì)胞為主，也可見(jiàn)少數(shù)原粒及其他階段粒細(xì)胞，胞漿易見(jiàn)Auer小體。

1.2骨髓象多數(shù)APL病例骨髓增生極度活躍，個(gè)別病例增生低下。各階段幼紅細(xì)胞和巨核細(xì)胞明顯減少，細(xì)胞形態(tài)分類(lèi)以早幼粒細(xì)胞為主，占30%~90%（NEC），可見(jiàn)少量的原粒和中幼粒細(xì)胞。增多的早幼粒細(xì)胞形態(tài)異常，大小不一，外形呈橢圓形或不規(guī)則形。胞核扭曲變形，可見(jiàn)雙核，核染色質(zhì)疏松有明顯核仁。胞質(zhì)中含多量大小不等的嗜苯胺藍(lán)顆粒[4]，根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的不同可分為3個(gè)亞型：粗顆粒型（M3a），顆粒粗大深染密集；細(xì)顆粒型（M3b），顆粒密集而細(xì)?。蛔儺愋停∕3v），顆粒極少甚至沒(méi)有。

1.3細(xì)胞化學(xué)染色過(guò)氧化物酶（POX）、蘇丹黑染色（SBB）、酸性磷酸酶（ACP）、非特異性脂酶（NSE）均呈陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性；且非特異性脂酶（NSE）不被NaF抑制，中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）積分減低。通過(guò)APL細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征而對(duì)其進(jìn)行分型主要依據(jù)1976年法（F）、美（A）、英（B）三國(guó)協(xié)作組提出的急性白血病FAB形態(tài)學(xué)分型方案及診斷標(biāo)準(zhǔn)（1985年有修改）[5]。借助光學(xué)顯微鏡和一定的細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)，在形態(tài)學(xué)上對(duì)APL做出初步的分型診斷。由于僅是憑借人眼進(jìn)行分型，其在細(xì)胞形態(tài)的辨認(rèn)上易受檢驗(yàn)人員學(xué)識(shí)水平、工作經(jīng)驗(yàn)等因素影響，從而影響對(duì)APL分型的準(zhǔn)確性；且靈敏度低，對(duì)于MRD的監(jiān)測(cè)也很難實(shí)施。近幾十年，國(guó)際上在白血病FAB分型的基礎(chǔ)上又開(kāi)展了免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)的研究工作，大大提高了對(duì)白血病診斷的準(zhǔn)確性也更利于對(duì)MRD的監(jiān)測(cè)[6]。但利用光學(xué)顯微鏡的形態(tài)學(xué)診斷也一直被臨床沿用，主要由于光學(xué)顯微鏡方便易得，成本相對(duì)較低，利于普及，特別是基層醫(yī)院，可以作為白血病篩查的主要手段；且對(duì)于細(xì)胞形態(tài)典型的病例，血細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷更是有利于疾病的及時(shí)診斷和治療。

2免疫學(xué)分型在診斷中的應(yīng)用

典型的APL免疫學(xué)表型呈CD13、CD33陽(yáng)性，CD34及HLA-DR陰性，CD34陽(yáng)性的APL惡性細(xì)胞顆粒小而少，且易出現(xiàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)增高，預(yù)后較差[7]。近年來(lái)隨著單克隆抗體的不斷開(kāi)發(fā)及流式細(xì)胞術(shù)的廣泛開(kāi)展，急性白血病免疫表型研究得到迅猛發(fā)展，極大地提高了APL診斷和分型的準(zhǔn)確性[8]。同時(shí)隨著流式細(xì)胞儀（FCM）性能的不斷完善，也使得MRD的檢測(cè)更為靈敏。FCM是將單克隆抗體、流體力學(xué)、免疫熒光、計(jì)算機(jī)等技術(shù)相結(jié)合，測(cè)量射門(mén)參數(shù)在單細(xì)胞水平上辨認(rèn)細(xì)胞形態(tài)、大小和熒光等特征，其檢測(cè)快速、簡(jiǎn)便，特異性好、敏感度高，能對(duì)大量細(xì)胞進(jìn)行定量分析，使用的單克隆抗體容易購(gòu)買(mǎi)，價(jià)格相對(duì)便宜，便于臨床推廣。但由于目前缺乏理想的抗體組合，F(xiàn)CM檢測(cè)APL患者M(jìn)RD的靈敏度還較低[9]；且隨著病程發(fā)展，細(xì)胞表面的抗原發(fā)生改變，亦會(huì)導(dǎo)致結(jié)果假陰性。因此，較多研究中心建議同時(shí)采用多種不同的免疫表型會(huì)使這種影響降至最低[10]。張紅靈等[11]人采用一組四色熒光標(biāo)記單克隆抗體組合（CD15-CD11b-CD33-CD45）的流式細(xì)胞儀對(duì)40例初診時(shí)經(jīng)形態(tài)學(xué)及流式免疫分型診斷為APL的白血病患者及其治療后12例骨髓標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)檢測(cè)正常對(duì)照8例。以CD45/SSC選定粒細(xì)胞門(mén)，選出其中CD33+細(xì)胞再進(jìn)一步分析CD11b及CD15的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)CD33+APL白血病細(xì)胞群均表達(dá)CD15-CD11b-CD33+，有少數(shù)病例同時(shí)含有少量CD15-CD11b+CD33+分化細(xì)胞。而在正常骨髓標(biāo)本中以CD45/SSC設(shè)門(mén)粒細(xì)胞群CD15-CD11b-CD33+細(xì)胞多數(shù)為0，以CD15++CD11b++細(xì)胞為主，少數(shù)表達(dá)CD15+CD11b++，CD15+CD11b+，CD15++CD11b+和CD15++CD11b-細(xì)胞，表現(xiàn)出與白血病早幼粒細(xì)胞明顯不同的表型。因此四色組合FCM可用于APL中MRD的檢測(cè)。

3細(xì)胞遺傳學(xué)在診斷中的應(yīng)用

約70%~90%的APL具有特異染色體t（15；17）易位，形成PML-RARα融合基因，這是APL特有的細(xì)胞遺傳學(xué)標(biāo)志[12]。PML-RARα產(chǎn)物可抑制RARα-RXR二聚體，進(jìn)而使早幼粒細(xì)胞分化成熟障礙[13]。臨床上全反式維甲酸ATRT誘導(dǎo)分化治療能使85%左右的APL患者獲得緩解，預(yù)后較好；極少數(shù)無(wú)此融合基因者，維甲酸治療不敏感，預(yù)后較差。常規(guī)細(xì)胞遺傳學(xué)中的染色體檢驗(yàn)主要包括染色體顯帶/非顯帶技術(shù)、染色體高分辨技術(shù)和染色體脆性部位顯示技術(shù)等。侯繼申等人[14]研究表明APL的細(xì)胞遺傳學(xué)與形態(tài)學(xué)的相關(guān)性并不總是一致的。少數(shù)具變異易位核型、變異型APL患者常表現(xiàn)不典型的形態(tài)學(xué)特征，易誤診為其他白血病。其研究的39例APL患者中有2例APL初診時(shí)被誤診為M2和M5，其中1例早幼粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)富含多個(gè)空泡、顆粒稀少，可能與早幼粒細(xì)胞顆粒缺失導(dǎo)致空泡形成有關(guān)，經(jīng)核型分析確診。因此常規(guī)染色體核型分析在形態(tài)不典型的APL診斷中具有重要作用，可提高APL診斷的準(zhǔn)確性和靈敏度。常規(guī)染色體核型分析作為經(jīng)典的分析細(xì)胞遺傳學(xué)方法，已研究的較為成熟，由于著眼于所有染色體因此容易發(fā)現(xiàn)新的染色體異常，其主要不足是對(duì)于標(biāo)本質(zhì)量要求較高，靈敏度較低，容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果，且對(duì)于導(dǎo)致白血病復(fù)發(fā)的微小殘留病監(jiān)測(cè)較不敏感[15]。

4分子生物學(xué)檢驗(yàn)在診斷中的應(yīng)用

4.1熒光原位雜交技術(shù)熒光原位雜交技術(shù)（FISH）是一種高分辨率和高靈敏度的染色體和基因分析技術(shù)[16]，通過(guò)將生物素標(biāo)記的DNA探針與互補(bǔ)的DNA鏈染色體原位雜交，熒光顯色后顯微鏡觀(guān)察，其將細(xì)胞遺傳學(xué)和分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)充分結(jié)合，不僅用于分裂中期細(xì)胞，還可用于細(xì)胞分裂間期，拓展了檢測(cè)范圍，提高了白血病診斷和MRD檢測(cè)的靈敏度[17]。鄭玲等人[18]利用多重?zé)晒庠浑s交（M-FISH）技術(shù)對(duì)20例APL患者進(jìn)行檢測(cè)，并與常規(guī)細(xì)胞遺傳學(xué)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）結(jié)果相比較，從而揭示了M-FISH對(duì)于APL的診斷及其MRD的檢測(cè)有重要應(yīng)用價(jià)值：M-FISH雖不如RT-PCR敏感，但其反映的是處于增殖期的單個(gè)白血病細(xì)胞的狀況，通過(guò)反復(fù)檢測(cè)可以動(dòng)態(tài)地觀(guān)察體內(nèi)白血病細(xì)胞負(fù)荷的消長(zhǎng)，似比RT-PCR更能預(yù)測(cè)白血病的復(fù)發(fā)。同時(shí)GordonDewaldW[19]在其報(bào)道中表明FISH還可以檢測(cè)一些變異型的RARα融合基因，且檢測(cè)效率高，利于標(biāo)準(zhǔn)化開(kāi)展。

4.2聚合酶鏈反應(yīng)聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）是一種用于體外擴(kuò)增核酸片段的技術(shù)[20]，在進(jìn)行APL檢測(cè)時(shí)目前臨床常用的是逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）以及在PCR反應(yīng)體系中加入了熒光基團(tuán)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RQ-PCR）[21]。趙威等人[22]利用實(shí)時(shí)定量PT-PCR技術(shù)可檢測(cè)出10-5μg人急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株（NB4）細(xì)胞cDNA中的PML-RARα融合基因，其靈敏度高、重復(fù)性好，且有助于監(jiān)測(cè)白血病微小殘留病灶。實(shí)時(shí)定量RT-PCR是在普通PCR反應(yīng)中加入能與PCR產(chǎn)物結(jié)合的熒光探針或熒光染料，使之熒光信號(hào)隨著擴(kuò)增產(chǎn)物的增加而成比例增長(zhǎng)，儀器實(shí)時(shí)檢測(cè)每一個(gè)循環(huán)結(jié)束后的熒光強(qiáng)度，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)比得出定量結(jié)果[23]，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)PML-RARα融合基因，以及PML-RARα亞型[24]，來(lái)檢測(cè)APL細(xì)胞的殘余數(shù)量和預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)，還可以預(yù)測(cè)白血病患者的治療反應(yīng)，從而成為指導(dǎo)臨床個(gè)體化治療、預(yù)防復(fù)發(fā)和提高患者生存率的重要手段。

5D-二聚體檢測(cè)在APL中的臨床價(jià)值

近年來(lái)，D-二聚體在幫助診斷凝血系統(tǒng)和纖溶亢進(jìn)，特別是繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)等方面的臨床價(jià)值越來(lái)越受到醫(yī)學(xué)專(zhuān)家的重視[25]。急性早幼粒細(xì)胞白血?。ˋPL）在疾病進(jìn)程和治療期最常見(jiàn)的臨床表現(xiàn)是廣泛而嚴(yán)重的出血[26]，甚至出現(xiàn)顱內(nèi)出血，且易并發(fā)彌散性血管內(nèi)凝血（DIC），從而繼發(fā)纖溶亢進(jìn)。究其原因，有研究表明因?yàn)锳PL的異常早幼粒細(xì)胞具有合成釋放大量促凝物質(zhì)的能力，如組織因子，這些促凝物質(zhì)會(huì)激活凝血系統(tǒng)，引起繼發(fā)性的纖溶功能亢進(jìn)，當(dāng)這些細(xì)胞增多到一定程度時(shí)，血液將呈現(xiàn)為高凝狀態(tài)，機(jī)體內(nèi)微循環(huán)廣泛形成血栓，進(jìn)一步促進(jìn)繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)，造成嚴(yán)重出血等并發(fā)癥狀。因而血漿D-二聚體的檢測(cè)對(duì)APL有一定的診斷意義。董大鵬等人[27]通過(guò)臨床上72例APL患者治療前和治療后D-二聚體含量檢測(cè)結(jié)果分析得出該指標(biāo)有較高的靈敏度，能夠較好的反應(yīng)早期患者體內(nèi)的纖溶亢進(jìn)及凝血系統(tǒng)激活狀態(tài)。通過(guò)檢測(cè)患者血D-二聚體含量可以直接反映D-二聚體水平和患者病情的變化情況，因此能夠作為APL病情進(jìn)展及預(yù)后的重要參考指標(biāo)[28]，且該指標(biāo)的檢測(cè)在臨床上簡(jiǎn)便、快速、成本低，利于普及。但值得注意的是，任何引起DIC的疾病都會(huì)導(dǎo)致D-二聚體的增高，因此缺乏特異性，一般只作為APL繼發(fā)DIC診斷的實(shí)用性指標(biāo)[29]。

篇7

關(guān)鍵詞 動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)；細(xì)胞分子生物學(xué)；實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革；能力培養(yǎng)

中圖分類(lèi)號(hào) G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）11-0270-02

Exploration on Experimental Teaching Reform of Cell Molecular Biology for Animal Science Major

ZHAO Jia-fu 1，2 DUAN Zhi-qiang 1，2 ZHANG Yi-yu 1，2 NI Meng-meng 1，2 RUAN Yong 1，2

（1 Key Laboratory of Animal Genetics Breeding and Reproduction in the Plateau Mountainous Region，Ministry of Education，Guiyang Guizhou 550025； 2 College of Animal Science，Guizhou University）

Abstract As an essential course，cell molecular biology plays an important role in the training of high-quality innovative talents in the field of life science.Along with the rapid development of life science，more and more attention to the cultivation of students′ ability to operate experiments need to be improved，especially as an agricultural subject with extensive application.In order to improve students′ interest in experiment course of molecular biology and promote the students′ ability of experiment operation，this paper discussed the reform of experiment teaching content，experiment teaching methods，teaching evaluation ways of animal science，and put forward the concrete reform plan，based on the experimental teaching experiences of cell molecular biology.In conclusion，this article has important guiding significance to the cultivation of the students′ practical ability and research quality.

Key words animal science major；cell molecular biology；experimental teaching reform；ability training

細(xì)胞分子生物學(xué)是研究細(xì)胞內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能，并從分子水平上闡述它們之間相互作用的關(guān)系及基因表達(dá)調(diào)控機(jī)理的學(xué)科[1]，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、農(nóng)林牧漁等學(xué)科領(lǐng)域。我國(guó)是畜牧業(yè)生產(chǎn)和消費(fèi)大國(guó)，需要大量基礎(chǔ)理論扎實(shí)、創(chuàng)新實(shí)踐能力強(qiáng)的畜牧科技人才。因此，重視畜牧獸醫(yī)類(lèi)本科生細(xì)胞分子生物學(xué)的理論與實(shí)踐教學(xué)工作，引導(dǎo)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、分析問(wèn)題、解決問(wèn)題，并進(jìn)一步加強(qiáng)其動(dòng)手能力和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)，對(duì)培養(yǎng)畜牧獸醫(yī)領(lǐng)域的復(fù)合型創(chuàng)新人才具有重要意義。動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)作為生命科學(xué)領(lǐng)域一門(mén)實(shí)踐性較強(qiáng)的學(xué)科，畢業(yè)生應(yīng)具備牢固的專(zhuān)業(yè)理論知識(shí)和較強(qiáng)的實(shí)踐動(dòng)手能力[2]。以貴州大學(xué)為例，該校動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)一直以來(lái)沒(méi)有分子生物學(xué)這門(mén)基礎(chǔ)課程，然而為培養(yǎng)學(xué)生基本的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作能力，又區(qū)別于生物學(xué)相關(guān)專(zhuān)業(yè)，因而學(xué)校增加了細(xì)胞分子生物學(xué)這門(mén)課程供學(xué)生選修。P者結(jié)合具體實(shí)踐教學(xué)經(jīng)驗(yàn)，從實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法、組織形式、考核方式等方面進(jìn)行論述。

1 實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容的改革

1.1 增加實(shí)驗(yàn)教學(xué)課時(shí)比例

在貴州大學(xué)2016版動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)培養(yǎng)方案中，與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)相關(guān)的專(zhuān)業(yè)課程只有動(dòng)物分子遺傳學(xué)和細(xì)胞分子生物學(xué)2門(mén)課程。動(dòng)物分子遺傳學(xué)為專(zhuān)業(yè)個(gè)性選修課，占2學(xué)分，共36學(xué)時(shí)，其中理論課28學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)課8學(xué)時(shí)；細(xì)胞分子生物學(xué)為學(xué)科大類(lèi)選修課，占4學(xué)分，其中理論課72學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)課時(shí)。從基本的課時(shí)設(shè)置上不難看出，細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課時(shí)與理論課時(shí)比例嚴(yán)重失調(diào)，許多重要的實(shí)驗(yàn)難以開(kāi)設(shè)，培養(yǎng)學(xué)生分子生物學(xué)實(shí)踐操作能力的效果大大折扣。因此，亟須調(diào)整本校動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)教學(xué)方案，增加細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課時(shí)所占比例。

1.2 編寫(xiě)適于動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)指導(dǎo)

目前，大部分高校細(xì)胞分子生物學(xué)課程均采用現(xiàn)成的實(shí)驗(yàn)教學(xué)指導(dǎo)，實(shí)驗(yàn)內(nèi)容大同小異，并未體現(xiàn)出生物科學(xué)、生物技術(shù)、生物工程等理學(xué)類(lèi)相關(guān)專(zhuān)業(yè)和動(dòng)物科學(xué)、動(dòng)物醫(yī)學(xué)、水產(chǎn)養(yǎng)殖、草業(yè)科學(xué)等農(nóng)學(xué)類(lèi)相關(guān)專(zhuān)業(yè)在教學(xué)對(duì)象上的區(qū)別，均以大腸桿菌這類(lèi)模式生物為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，沒(méi)有體現(xiàn)出不同專(zhuān)業(yè)研究對(duì)象的區(qū)別。因此，需要編寫(xiě)適合動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)的細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)指導(dǎo)，將動(dòng)物組織中RNA的提取、不同組織中mRNA的表達(dá)差異檢測(cè)、細(xì)胞中總蛋白的提取與分離鑒定等實(shí)用性、針對(duì)性強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)編入教學(xué)指導(dǎo)。

1.3 改單個(gè)實(shí)驗(yàn)為綜合性設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)

根據(jù)貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)細(xì)胞分子生物學(xué)培養(yǎng)方案中實(shí)驗(yàn)課時(shí)的規(guī)定，同時(shí)為加強(qiáng)貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程的針對(duì)性和實(shí)用性，目前該實(shí)驗(yàn)課程只能安排4 個(gè)單個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目共時(shí)，分別是目的基因的擴(kuò)增與連接、細(xì)胞的培養(yǎng)與凍存、細(xì)胞蛋白的提取與鑒定、細(xì)胞蛋白的免疫熒光染色。由于每節(jié)課只有2 h，所以對(duì)于許多實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目學(xué)生只能參與其中的部分內(nèi)容，有些實(shí)驗(yàn)的來(lái)龍去脈很多學(xué)生還沒(méi)有搞清楚。為達(dá)到開(kāi)設(shè)這門(mén)課程的目的，嘗試將單個(gè)實(shí)驗(yàn)全部設(shè)計(jì)為綜合性實(shí)驗(yàn)，每個(gè)綜合性實(shí)驗(yàn)融合了多個(gè)單個(gè)實(shí)驗(yàn)[3]，如豬GH基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)、豬LPL基因的亞細(xì)胞定位研究、豬MSTN基因在不同組織的表達(dá)差異研究、豬APOA1基因在HEK-293T細(xì)胞中的免疫熒光檢測(cè)、HEK-293T細(xì)胞總蛋白的提取、純化與鑒定等綜合性實(shí)驗(yàn)，這些實(shí)驗(yàn)學(xué)生只要參與完成其中一個(gè)項(xiàng)目，就基本上掌握了分子生物學(xué)的常用實(shí)驗(yàn)操作技能。

2 實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法的改革

2.1 現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法的弊端

一是教師課堂上講授，學(xué)生到實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證，這種教學(xué)方式?jīng)]有發(fā)揮學(xué)生的主觀(guān)能動(dòng)性，學(xué)生處于被動(dòng)接受的狀態(tài)，很難引起學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性；二是教師準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)，學(xué)生只完成驗(yàn)證的那部分實(shí)驗(yàn)，這種方法無(wú)法培養(yǎng)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力，更難以培養(yǎng)學(xué)生基本實(shí)驗(yàn)的操作能力；三是針對(duì)部分實(shí)驗(yàn)，存在教師操作、學(xué)生觀(guān)看的現(xiàn)象，如與細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)，由于本科教學(xué)與研究生教學(xué)相比，參加實(shí)驗(yàn)人數(shù)多，易造成細(xì)胞室污染，所以很多實(shí)驗(yàn)都由任課教師親自完成，學(xué)生基本上采用觀(guān)摩的形式參與其中。以上教學(xué)方法上的弊端，嚴(yán)重影響了本專(zhuān)業(yè)學(xué)生實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力的培養(yǎng)，不利于學(xué)生自身的發(fā)展。

2.2 實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法改革的具體方案

“翻轉(zhuǎn)課堂”是一種新型的教學(xué)理念，最早由教育學(xué)者薩爾曼?汗創(chuàng)造性地提出，該模式提出了混合使用技術(shù)和親自動(dòng)手活動(dòng)的教學(xué)環(huán)境[4]。它把傳統(tǒng)的“灌輸式”教學(xué)完全翻轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)變成學(xué)生課前預(yù)習(xí)、提前領(lǐng)會(huì)知識(shí)要點(diǎn)的教學(xué)方式，是一種強(qiáng)調(diào)自主性和針對(duì)性的教學(xué)理念[5-6]，對(duì)提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)水平，培養(yǎng)出基礎(chǔ)知識(shí)扎實(shí)、具有應(yīng)用性和開(kāi)拓性的創(chuàng)新型人才具有重要意義。為達(dá)到培養(yǎng)學(xué)生實(shí)踐動(dòng)手能力的目的，細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程也引進(jìn)“翻轉(zhuǎn)課堂”的教學(xué)理念，轉(zhuǎn)變師生角色，以學(xué)生為主體，發(fā)掘?qū)W生的個(gè)人潛力，培養(yǎng)學(xué)生的團(tuán)隊(duì)協(xié)作精神。按照“翻轉(zhuǎn)課堂”的教學(xué)模式，在充分發(fā)揮學(xué)生主觀(guān)能動(dòng)性的前提下，制定細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法改革具體方案。一是教師設(shè)計(jì)好綜合性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱(chēng)，提前供學(xué)生選擇（至少10個(gè)綜合性性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱(chēng)）；二是按項(xiàng)目分組（每組7～10人），選出組長(zhǎng)，分工進(jìn)行資料查詢(xún)、方案設(shè)計(jì)和PPT制作；三是每組20 min進(jìn)行PPT匯報(bào)，任課教師隨堂對(duì)方案進(jìn)行點(diǎn)評(píng)修改；四是參照實(shí)驗(yàn)方案開(kāi)展研究，學(xué)生不必受實(shí)驗(yàn)課程時(shí)間的限制，在實(shí)驗(yàn)教師的參與下，根據(jù)各自時(shí)間安排完成整個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目；五是撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目報(bào)告，并寫(xiě)出個(gè)人體會(huì)和相關(guān)收獲。

3 實(shí)驗(yàn)教學(xué)考核方式的改革

3.1 現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)教學(xué)考核方式的弊端

以往的實(shí)驗(yàn)教學(xué)考核方式過(guò)于簡(jiǎn)單，且沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，只注重是否來(lái)上課、是否交了實(shí)驗(yàn)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否合理等方面，忽略了學(xué)生在發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、主動(dòng)思考、團(tuán)隊(duì)協(xié)作、解決問(wèn)題和語(yǔ)言表達(dá)等環(huán)節(jié)綜合能力的考核。因此，實(shí)驗(yàn)教學(xué)考核方式的改革，應(yīng)更重視學(xué)生綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)分析問(wèn)題和解決問(wèn)題等方面能力的考察[7]。

3.2 實(shí)驗(yàn)教學(xué)考核方式改革的具體方案

考核標(biāo)準(zhǔn)和考核方式對(duì)教師和學(xué)生都具有指揮棒的作用?？己耸裁?、怎么考核直接影響到教師如何教、教什么和學(xué)生怎么學(xué)、學(xué)什么的問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)課本著對(duì)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、分析問(wèn)題、解決問(wèn)題及實(shí)驗(yàn)操作等方面能力的培養(yǎng)，特制定如下考核方案：按百分制，其中實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)和PPT報(bào)告占40%，實(shí)驗(yàn)技能操作和實(shí)驗(yàn)報(bào)告占30%，實(shí)驗(yàn)技術(shù)提問(wèn)和團(tuán)隊(duì)協(xié)作占20%，考勤和紀(jì)律占10%。這樣的考核標(biāo)準(zhǔn)不僅可以公正、公平地衡量學(xué)生的實(shí)驗(yàn)成績(jī)，更重要的是調(diào)動(dòng)了學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性和自主性，鍛煉了學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力。

4 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)對(duì)動(dòng)物科學(xué)專(zhuān)業(yè)細(xì)胞分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、教學(xué)方法和考核方式的改革，進(jìn)一步打破了實(shí)驗(yàn)教學(xué)與科學(xué)研究之間的界限，使學(xué)生能夠根據(jù)自己的興趣開(kāi)展實(shí)驗(yàn)研究，充分體現(xiàn)了學(xué)生作為實(shí)驗(yàn)教學(xué)的主體地位，不僅鍛煉了學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力，還鍛煉了學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作、文獻(xiàn)檢索、PPT制作、團(tuán)隊(duì)協(xié)作及語(yǔ)言表達(dá)等方面的能力，達(dá)到了實(shí)驗(yàn)教學(xué)與科研素質(zhì)培養(yǎng)的有機(jī)結(jié)合，為其今后從事相關(guān)研究工作或進(jìn)一步深造奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

5 參考文獻(xiàn)

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篇8

關(guān)鍵詞：五年制臨床醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)；醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)；教學(xué)改革；PBL教學(xué)模式

醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)是從分子水平上研究人體在正常和疾病狀態(tài)下的生命活動(dòng)規(guī)律，從分子水平開(kāi)展人類(lèi)疾病的預(yù)防、診斷和治療研究的一門(mén)科學(xué)[1]。五年制臨床醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)學(xué)生是未來(lái)臨床醫(yī)生的主力軍，疾病預(yù)防、診斷和治療技術(shù)的更新也要求他們必須與時(shí)俱進(jìn)。我校將醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)設(shè)置為五年制臨床醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課，但是考慮到臨床醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)學(xué)生學(xué)習(xí)任務(wù)重，因此學(xué)時(shí)設(shè)置較少。醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)理論課較為抽象，難于理解，學(xué)生學(xué)起來(lái)吃力，老師教起來(lái)費(fèi)力。為了更好地提高教學(xué)質(zhì)量[2,3]，根據(jù)五年制臨床醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)培養(yǎng)目標(biāo)，結(jié)合我校實(shí)際情況，我們對(duì)醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程進(jìn)行了教學(xué)改革，探索和實(shí)踐了PBL教學(xué)模式。

1在醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)中采用PBL教學(xué)模式的必要性

21世紀(jì)以來(lái)，醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)發(fā)展迅猛，各種新技術(shù)、新手段層出不窮，與其他學(xué)科的交叉和滲透越來(lái)越廣泛和深入。面對(duì)新形勢(shì)、新技術(shù)，高等學(xué)校如何適應(yīng)這種快速發(fā)展的新局面？如何改進(jìn)教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)模式？如何及時(shí)將這些新知識(shí)、新技術(shù)融入到具體教學(xué)中？對(duì)于從事該學(xué)科教學(xué)的高等教育工作者而言，是一個(gè)不得不面對(duì)的巨大挑戰(zhàn)。醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程內(nèi)容抽象繁雜、不易理解，尤其是其中涉及到較多的分子生物學(xué)技術(shù)內(nèi)容，對(duì)于學(xué)時(shí)有限的五年制醫(yī)學(xué)生而言，理解掌握難度更大，很難在有限的課堂教學(xué)中將該學(xué)科的經(jīng)典知識(shí)內(nèi)容與最新進(jìn)展全部涉及。在此情況下，如果沿用傳統(tǒng)的課堂式教學(xué)模式，學(xué)生很容易因?qū)W習(xí)內(nèi)容枯燥乏味、知識(shí)點(diǎn)繁雜難記而產(chǎn)生厭學(xué)心理，甚至喪失對(duì)醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)學(xué)習(xí)的興趣。由此可見(jiàn)，探索一套行之有效的醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)模式非常必要。PBL(Problem-BasedLearning)教學(xué)法，最早于1969年由加拿大McMaster大學(xué)創(chuàng)立，同年引入高等醫(yī)學(xué)教育，并很快在全球廣泛運(yùn)用。它的宗旨是“提出問(wèn)題，學(xué)生為主體，小組討論形式，解決問(wèn)題”。課堂上教師以輔導(dǎo)為主，學(xué)生為主體，學(xué)生圍繞某一醫(yī)學(xué)專(zhuān)題或具體病例的診治等問(wèn)題進(jìn)行討論研究。教師的作用是提出論題、聽(tīng)取學(xué)生上臺(tái)報(bào)告、組織學(xué)生討論、指出學(xué)生知識(shí)體系中的問(wèn)題，引導(dǎo)學(xué)生掌握學(xué)習(xí)內(nèi)容的重點(diǎn)和難點(diǎn)，以此達(dá)到解決問(wèn)題的目的[4-6]。實(shí)踐證明，PBL教學(xué)法有利于激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，有效彌補(bǔ)課程安排少、教學(xué)手段單一、學(xué)生參與度不夠等問(wèn)題，增強(qiáng)學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性，提高學(xué)生獨(dú)立分析問(wèn)題與解決問(wèn)題的能力[7,8]。學(xué)生通過(guò)PBL法，在自主學(xué)習(xí)過(guò)程中可以廣泛地涉獵學(xué)生自己感興趣的、薄弱的知識(shí)環(huán)節(jié)，做到有的放矢，因材施教，同時(shí)不受學(xué)時(shí)的限制，能迅速提高自己獲取新知識(shí)的能力。

2PBL教學(xué)模式在醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)中的實(shí)施方法

2013年，我們?cè)凇夺t(yī)學(xué)分子生物學(xué)》國(guó)家精品資源共享課程立項(xiàng)的基礎(chǔ)上，在五年制臨床醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)的醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)中開(kāi)始采用PBL教學(xué)模式。具體實(shí)施如下：

2.1PBL教學(xué)的開(kāi)展形式

在開(kāi)始PBL教學(xué)前，教師會(huì)根據(jù)教學(xué)內(nèi)容，尤其是教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn)設(shè)計(jì)討論專(zhuān)題，提前發(fā)給學(xué)生，并做必要的說(shuō)明與解釋?zhuān)o學(xué)生充足的時(shí)間做好準(zhǔn)備，如收集資料、自主學(xué)習(xí)、制作課件、小組討論、教師指導(dǎo)等，通過(guò)這些環(huán)節(jié)確保課堂教學(xué)中學(xué)生演講、小組討論與教師指導(dǎo)的有效性。在課堂教學(xué)中，將學(xué)生分成10~15人一組，推選組長(zhǎng)一名，配指導(dǎo)老師一名。學(xué)生可充分利用學(xué)校圖書(shū)館和互聯(lián)網(wǎng)等資源，針對(duì)性地搜尋資料，做好討論準(zhǔn)備。討論課共分為四次，每次兩個(gè)學(xué)時(shí)。每位同學(xué)查找資料和準(zhǔn)備每個(gè)討論題的PPT課件，課件由任課教師認(rèn)真審核、評(píng)點(diǎn)。根據(jù)學(xué)生的PPT情況，任課教師安排一位或幾位同學(xué)主講每個(gè)討論題，時(shí)間為25min左右，然后進(jìn)行10min的小組討論，最后10min由老師總結(jié)。

2.2PBL教學(xué)的討論內(nèi)容設(shè)置

PBL教學(xué)討論的內(nèi)容主要針對(duì)教學(xué)中重難點(diǎn)問(wèn)題的展開(kāi)和本學(xué)科熱點(diǎn)問(wèn)題的追蹤。在此過(guò)程中，教師起組織者、引導(dǎo)者的作用，學(xué)生通過(guò)獨(dú)立選取和組織討論的內(nèi)容，用集中討論的形式解決課程學(xué)習(xí)中存在的疑惑，了解學(xué)科領(lǐng)域的最新進(jìn)展?？紤]到課程內(nèi)容涉及到較多的分子生物學(xué)技術(shù)內(nèi)容，加上學(xué)時(shí)有限，難于理解，因此PBL教學(xué)學(xué)時(shí)設(shè)置為占總學(xué)時(shí)的三分之一，內(nèi)容設(shè)置上側(cè)重強(qiáng)調(diào)分子生物學(xué)技術(shù)的原理設(shè)計(jì)及應(yīng)用。如：DNA測(cè)序技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用；遺傳病的基因診斷；腫瘤基因治療的基本策略和常用方法；根據(jù)基因克隆技術(shù)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，在大腸埃希菌中表達(dá)已知目的基因的cDNA序列。通過(guò)學(xué)習(xí)和討論分子生物學(xué)領(lǐng)域中理論與實(shí)踐相結(jié)合的內(nèi)容，有助于提高理論教學(xué)效果，提升學(xué)生的科研設(shè)計(jì)能力，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)課程和科研訓(xùn)練做好準(zhǔn)備。2.3PBL教學(xué)的考核形式PBL教學(xué)中討論課成績(jī)由三部分組成：課件制作(占35%)、宣講狀態(tài)(占35%)和討論環(huán)節(jié)(占30%)。討論課成績(jī)?yōu)槠綍r(shí)成績(jī)，占總成績(jī)的30%。課件制作的主要評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：內(nèi)容正確，重點(diǎn)突出，圖文規(guī)范，運(yùn)用圖片、音頻、視頻、動(dòng)畫(huà)等多種形式，吸引力強(qiáng)。宣講狀態(tài)的主要評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：準(zhǔn)備充分，內(nèi)容嫻熟，表述清晰，條理分明。討論環(huán)節(jié)的主要評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：主動(dòng)思考，積極參與，提問(wèn)富有啟發(fā)，回答問(wèn)題中肯。

3在醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)中實(shí)施PBL教學(xué)模式的效果評(píng)價(jià)

為了驗(yàn)證PBL教學(xué)模式的實(shí)際效果，我們隨機(jī)抽取四個(gè)班進(jìn)行了問(wèn)卷調(diào)查。問(wèn)卷調(diào)查以無(wú)記名方式進(jìn)行，共調(diào)查了150名學(xué)生，問(wèn)卷回收率100％，結(jié)果(見(jiàn)表1)顯示，PBL教學(xué)模式廣泛被學(xué)生接受，被調(diào)查學(xué)生一致認(rèn)為該模式能激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性。如討論DNA測(cè)序技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用時(shí)，素材從好萊塢紅星安吉麗娜-朱莉通過(guò)基因測(cè)序后接受預(yù)防性雙切除術(shù)以降低罹癌風(fēng)險(xiǎn)，到世界首批全基因組測(cè)序試管嬰兒在中信湘雅誕生。讓原本在學(xué)生心中“高大上”的醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)技術(shù)更貼近我們的生活，讓他們發(fā)現(xiàn)原來(lái)這些技術(shù)與生活息息相關(guān)。在討論另一主題遺傳病的基因診斷時(shí)，除采用經(jīng)典的血紅蛋白疾病為例，同時(shí)結(jié)合我校醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室一些遺傳疾病診斷的實(shí)際案例，啟發(fā)學(xué)生采用經(jīng)典和先進(jìn)的技術(shù)設(shè)計(jì)不同疾病診斷的方法。不僅讓學(xué)生對(duì)這些技術(shù)的醫(yī)學(xué)應(yīng)用有了直接的了解，更加深了學(xué)生對(duì)這些技術(shù)原理的求知欲，并產(chǎn)生了進(jìn)入相關(guān)研究領(lǐng)域進(jìn)行科研訓(xùn)練的濃厚興趣。從調(diào)查中看，超過(guò)84%的學(xué)生體會(huì)到了這種討論可提高學(xué)習(xí)的積極性。90%以上的學(xué)生認(rèn)為PBL有利于提高學(xué)生的自學(xué)能力和獨(dú)立分析解決問(wèn)題的能力。在進(jìn)行小組討論的過(guò)程中，老師起到了引導(dǎo)作用，引導(dǎo)學(xué)生開(kāi)放性思考問(wèn)題，激發(fā)他們的創(chuàng)新思維，充分肯定他們思考的新角度，提高他們討論的積極性。學(xué)生分工合作，查詢(xún)資料和制作課件，然后統(tǒng)一討論，通過(guò)自學(xué)和查資料對(duì)問(wèn)題進(jìn)行解答。實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，通過(guò)這種模式的學(xué)習(xí)后學(xué)生對(duì)于解答問(wèn)題的積極性明顯提高，分析和解決問(wèn)題的能力也明顯增強(qiáng)。不過(guò)，很多學(xué)生認(rèn)為該教學(xué)模式花費(fèi)了過(guò)多時(shí)間，擠占了其他學(xué)科的時(shí)間。此外，一些學(xué)生還對(duì)改進(jìn)醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)PBL教學(xué)模式的運(yùn)用提出了許多中肯的意見(jiàn)和建議，如查閱資料較費(fèi)時(shí)，易產(chǎn)生懈怠和依賴(lài)?yán)蠋熆偨Y(jié)的情況；各學(xué)生間能力不一，有些學(xué)生容易脫節(jié)等，對(duì)本課程今后的教學(xué)具有重要的參考和鑒戒作用。

4對(duì)醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)PBL教學(xué)模式的思考

根據(jù)學(xué)生反饋結(jié)果，我們認(rèn)為在醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)中采用PBL教學(xué)模式是有效的，對(duì)學(xué)生的“自主學(xué)習(xí)、協(xié)作、溝通、創(chuàng)新”等能力培養(yǎng)方面效果顯著。但我們也應(yīng)該看到，PBL教學(xué)模式在醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)教學(xué)應(yīng)用中也存在不少問(wèn)題：首先由于醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程教學(xué)大綱和課程本身性質(zhì)的限制，討論專(zhuān)題內(nèi)容的選取和設(shè)計(jì)有一定的難度：如果討論題目過(guò)大，太注重分子生物學(xué)的前沿進(jìn)展，就容易流于抽象，只能泛泛而談，不利于學(xué)生更深入地學(xué)習(xí)和理解學(xué)習(xí)內(nèi)容；如果討論題目過(guò)分強(qiáng)調(diào)與實(shí)踐結(jié)合，又容易產(chǎn)生偏離，對(duì)于基礎(chǔ)知識(shí)的重點(diǎn)難點(diǎn)掌握無(wú)法把握。因此，如何體現(xiàn)學(xué)科發(fā)展的前沿性同時(shí)又兼顧基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)，是我們?cè)谡n堂教學(xué)中必須要平衡的一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。其次，在PBL教學(xué)模式中，教師職能從過(guò)去在課堂上對(duì)知識(shí)進(jìn)行講解和詮釋轉(zhuǎn)變?yōu)閷?duì)學(xué)生進(jìn)行引導(dǎo)和總結(jié)校正。這一過(guò)程實(shí)施對(duì)教師提出了很高的要求，不但要求教師掌握本專(zhuān)業(yè)學(xué)科知識(shí)，而且要有相關(guān)學(xué)科的知識(shí)，在滿(mǎn)足這一要求的過(guò)程中也可以促進(jìn)教師知識(shí)面的進(jìn)一步拓寬；要求教師不斷學(xué)習(xí)和更新知識(shí)結(jié)構(gòu)，將學(xué)科前沿知識(shí)與經(jīng)典知識(shí)結(jié)合；PBL教學(xué)不僅能培養(yǎng)學(xué)生建立個(gè)性化的學(xué)習(xí)方法和思維方式，而且能激勵(lì)教師在教學(xué)中不斷探索新的教學(xué)方法。第三，因?yàn)镻BL教學(xué)模式要求學(xué)生自主學(xué)習(xí)，學(xué)生需要根據(jù)教師提出的問(wèn)題進(jìn)行分析，查閱大量的資料，整理所得到的結(jié)果。在此過(guò)程中，很多學(xué)生還會(huì)產(chǎn)生新的問(wèn)題，需要進(jìn)一步分析解決，這就要求要有足夠的時(shí)間供學(xué)生自主支配。但是因?yàn)獒t(yī)學(xué)生課程較多，很難保證有充分的時(shí)間做準(zhǔn)備。這方面可以通過(guò)老師指導(dǎo)，在不影響學(xué)生發(fā)散思維的前提下縮小討論范圍。也可以進(jìn)一步研究更合適的解決途徑。第四，學(xué)生自主學(xué)習(xí)需要足夠的資料進(jìn)行查閱，且開(kāi)設(shè)小班討論需要足夠的多媒體教室，因此這一教學(xué)模式的開(kāi)展還需要得到學(xué)校和學(xué)院相關(guān)部門(mén)的大力支持。

5結(jié)語(yǔ)

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關(guān)鍵詞：血液；實(shí)驗(yàn)室檢查與分析；臨床應(yīng)用

中圖分類(lèi)號(hào)：R331.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C 文章編號(hào)：1005-0515（2013）11-054-01

隨著現(xiàn)代醫(yī)療實(shí)驗(yàn)技術(shù)的提高，實(shí)驗(yàn)室的檢查結(jié)果漸漸成為診斷醫(yī)療的有力依靠。人體機(jī)能在發(fā)生某些變化時(shí)，血細(xì)胞成分的數(shù)量質(zhì)量也會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的改變，在確定病患基本資料，了解病史之后，借助現(xiàn)代化的自動(dòng)化的檢測(cè)手段對(duì)患者進(jìn)行血液檢查，有利于疾病的快速確診。由于檢查方法的日益增加，檢查結(jié)果涉及的種類(lèi)與檢查精度也同時(shí)增加。以常規(guī)檢查為基礎(chǔ)，檢查主要圍繞血細(xì)胞中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血紅蛋白、血小板的測(cè)定，而新興的骨髓檢查、生化檢查、組織病理學(xué)檢查、免疫學(xué)檢查、細(xì)胞遺傳學(xué)檢查和分子生物學(xué)檢查則可對(duì)其他相關(guān)血液進(jìn)行探究，甚至可以在分子生物學(xué)的高度對(duì)患者細(xì)胞內(nèi)染色體情況進(jìn)行研究探查。本文重點(diǎn)就血液常規(guī)檢查進(jìn)行探討，具體報(bào)告如下。

1 一般血液檢查

1.1 檢查項(xiàng)目與指標(biāo)

常規(guī)血液檢查的主要對(duì)象是外周血中的血細(xì)胞的數(shù)量與質(zhì)量的變化。外周血中白細(xì)胞和紅細(xì)胞的質(zhì)數(shù)變化能夠反應(yīng)患者的骨髓的造血情況的一些病理變化。

隨著自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù)的推廣與應(yīng)用，血液的實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查已經(jīng)從半自動(dòng)的計(jì)數(shù)儀發(fā)展成為外周血細(xì)胞的全自動(dòng)血球分析儀，可以對(duì)血細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)分析。大型醫(yī)院或者與醫(yī)院有合作關(guān)系的大型實(shí)驗(yàn)室甚至配有根據(jù)流式細(xì)胞儀原理進(jìn)行血液分析的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀。這都給血細(xì)胞的分析檢查提供了更便捷、更廣泛、更精確的方法。

全自動(dòng)的血液分析儀在取代傳統(tǒng)人工顯微鏡的技術(shù)方法后，可以在檢查中為醫(yī)生準(zhǔn)確提供外周血液血細(xì)胞計(jì)數(shù)，包括：測(cè)出紅細(xì)胞總數(shù)（RBC）、白細(xì)胞總數(shù)（WBC）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、紅細(xì)胞分布寬度（RDW）、血紅蛋白含量（Hb）、平均血紅蛋白含量（MCH）與濃度（MCHC）、血細(xì)胞比容（Hct）、血小板總數(shù)（PLT）、平均血小板體積（MPV）、血小板分布寬度（PDW）、白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)（DC）、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（Ret）等等，并且通過(guò)全自動(dòng)檢測(cè)儀，這些數(shù)據(jù)可以同時(shí)測(cè)得。

在分析紅細(xì)胞、白細(xì)胞及血小板形態(tài)的病理變化時(shí)，僅僅有上述數(shù)據(jù)還不足以判斷，還要通過(guò)涂片染色顯微鏡檢查。需要注意的是，檢查中要觀(guān)察有無(wú)異常細(xì)胞或者寄生蟲(chóng)的存在，如白血病細(xì)胞、微絲蚴、瘧原蟲(chóng)等。

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Biology, University of Toronto, Canada

(Ed.)

Genes, Development

and Cancer

The Life and Work of Edward B. Lewis

2004, 557pp.

Hardcover $ 190.00

ISBN 1-4020-7591-X

Kluwer Academic Publishers

愛(ài)德華?B?劉易斯（Edward B. Lewis）因在遺傳學(xué)和發(fā)育生物學(xué)方面的貢獻(xiàn)而聞名世界，此外，他在電離輻射與癌癥關(guān)系的研究方面也走在前列。但由于種種原因他的論文很少有人拜讀過(guò)。本書(shū)由與劉易斯共事20年的Howard Lipshitz編輯出版，書(shū)中收集了劉易斯在遺傳、發(fā)育生物學(xué)和輻射與癌癥關(guān)系三方面的重要文章，將他在這三方面發(fā)表的重要論文結(jié)集出版是第一次。

在遺傳學(xué)的研究中，20世紀(jì)的前50年中實(shí)驗(yàn)遺傳學(xué)是主導(dǎo)，而最后的25年中分子遺傳學(xué)方法引發(fā)了該領(lǐng)域中的革命，愛(ài)德華?B?劉易斯的研究正是連接這二者的橋梁。劉易斯因在發(fā)育遺傳學(xué)領(lǐng)域的突出貢獻(xiàn)獲得了諾貝爾獎(jiǎng)，也為我們目前采用的控制動(dòng)物發(fā)育的廣泛的、進(jìn)化保守的策略打下了基礎(chǔ)。劉易斯在電離輻射和人類(lèi)癌癥關(guān)系的研究也曾經(jīng)推動(dòng)了公眾在核武器試驗(yàn)方面的大討論。

全書(shū)共分五個(gè)部分：基因、基因與發(fā)育、分子與發(fā)育、輻射與癌癥和歷史觀(guān)點(diǎn)，這些也反映了他研究焦點(diǎn)的改變。但是很多文章都是以總結(jié)的形式發(fā)表，結(jié)果也往往以摘要的形式給出，書(shū)中的實(shí)驗(yàn)方法、結(jié)果等對(duì)讀者而言比較晦澀。所以Howard Lipshitz在編輯此書(shū)時(shí)，在每個(gè)部分的前面都從歷史的角度講述了當(dāng)時(shí)的研究基礎(chǔ)和背景，包括劉易斯自己的觀(guān)點(diǎn)和當(dāng)時(shí)學(xué)術(shù)界的觀(guān)點(diǎn)，還闡述了劉易斯采用的科學(xué)方法以及驅(qū)使他作出課題選擇的動(dòng)力，這些信息可以幫助讀者很好的理解本書(shū)。

本書(shū)對(duì)廣大從事生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的研究人員會(huì)有莫大的幫助，其中包括遺傳學(xué)家、發(fā)育生物學(xué)家、分子生物學(xué)家、放射生物學(xué)家和癌癥研究者。本書(shū)也可以作為高年級(jí)本科生和碩士研究生在遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、輻射與癌癥的課程學(xué)習(xí)資料。另外，這本書(shū)不僅收錄了原始的論文，也包括相應(yīng)的注釋?zhuān)识鴮?duì)科學(xué)史學(xué)家也有重要的價(jià)值。

劉玉琴，教授

(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所)