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關(guān)鍵詞：病原微生物;實驗室;生物安全;備案

【中圖分類號】R115【文獻標識碼】B【文章編號】1672-3783(2012)07-0116-01

病原微生物實驗室從事與病原微生物菌（毒）種、樣本有關(guān)的研究、教學、檢測、診斷等活動，應(yīng)具備一定生物安全防護水平，而防護水平的級別與其接觸的風險因子是相對應(yīng)的。所以，認識病原微生物的風險級別及相關(guān)實驗室生物安全的要求并進行備案工作很有必要。

1病原微生物分類

國家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對個體或者群體的危害程度，將病原微生物分為四類： 第一類是指能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物； 第二類是指能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物； 第三類是指能夠引起人類或者動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物； 第四類是指在通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。

第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。

2病原微生物實驗室

2.1病原微生物實驗活動危險度評估:基于病原微生物危害程度分類，同時考慮實驗室活動中可能涉及的傳染或潛在傳染因子等其他因素進行綜合評價。幫助實驗活動操作者正確選擇生物安全水平，評估職業(yè)性疾病風險、制定相應(yīng)的操作規(guī)程與管理規(guī)程，采取相應(yīng)安全防護措施，減少危險性事故發(fā)生。根據(jù)《人間傳染的病原微生物名錄》病原微生物的危害程度分類，可以判斷并選擇實驗活動所需生物安全實驗室級別。

2.2病原微生物實驗室實行分級管理。依照實驗室生物安全國家標準的規(guī)定，病原微生物實驗室分為生物安全一級、二級、三級和四級（以下簡稱BSL-1、BSL-2 、BSL-3、 BSL-4）。

2.3設(shè)施和設(shè)備要求:生物安全實驗室在結(jié)構(gòu)上由一級防護屏障和二級防護屏障組成。BSL-1、BSL-2 、BSL-3、 BSL-4實驗室的安全設(shè)備和設(shè)施不同，主要有：物理隔離區(qū)，用物理隔斷和密封門把實驗室與公共的外環(huán)境隔離開；負壓通風過濾技術(shù)，通過控制氣流速度和方向，可以使實驗室內(nèi)的空氣只能通過HEPA濾器過濾排放；消毒滅菌設(shè)備，主要有高壓滅菌器、紫外線燈等，用于對具有感染性的固、液體廢棄物的徹底滅菌和對物體表面及空氣的消毒。

3實驗活動備案

3.1備案管理:衛(wèi)生部負責BSL-3、 BSL-4備案審批工作。按照屬地管理原則，設(shè)區(qū)的市級衛(wèi)生行政部門負責轄區(qū)內(nèi)BSL-1、BSL-2實驗室和實驗室活動的備案工作。新建、改建或者擴建BSL-1、BSL-2實驗室，應(yīng)當向所在設(shè)區(qū)的市級衛(wèi)生行政部門提交《病原微生物實驗室及實驗室活動備案表》，設(shè)區(qū)的市級衛(wèi)生行政部門在規(guī)定的時間內(nèi)完成備案材料的審核和現(xiàn)場驗收。審核通過的實驗室，發(fā)給省級《病原微生物實驗室及實驗活動備案證明》，予以備案。

3.2備案材料:提交的病原微生物實驗室及實驗室活動備案表》一般包括,實驗室基本信息，實驗室活動基本情況，實驗室設(shè)立單位的法人資格證明，實驗室設(shè)立單位的生物安全組織管理框架圖，實驗室布局平面圖及受理部門要求提交的其它資料。

3.3備案條件:BSL-1、BSL-2申請備案登記，應(yīng)當具備以下條件：實驗室的設(shè)立單位應(yīng)當具有獨立法人資格，根據(jù)實驗室設(shè)立單位的職能，合法從事與病原微生物菌(毒)種、樣本的活動，實驗室的生物安全防護水平與所從事的病原微生物實驗活動相適應(yīng)，實驗室應(yīng)當具備與所從事的實驗活動相適應(yīng)的實驗設(shè)施設(shè)備及個體防護措施，從事實驗活動的人員應(yīng)當參加生物安全培訓(xùn)并通過考核取得上崗證書，設(shè)立單位有完善的生物安全管理體系。

參考文獻

[1]《中華人民共和國傳染病防治法》.

[2]《病原微生物實驗室生物安全管理條例》.

[3]《醫(yī)療廢物管理條例》.

[4]《微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則》（WS233-2002）.

[5]《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2004）.

[6]《生物安全實驗室建設(shè)技術(shù)規(guī)范》 (GB50346-2004).

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基于多年實驗室工作經(jīng)驗結(jié)合開放性微生物實驗室自身特點，除了一般性的設(shè)備損壞、被盜，以及實驗室廢棄物環(huán)境污染等方面外，筆者將對開放性微生物實驗室安全事故隱患進行歸類，并就其成因逐一進行分析。

1.消防安全隱患。微生物實驗室的消防安全隱患主要來自以下：（1）用電隱患。一方面是供電系統(tǒng)問題，主要是供電線路老化，以致漏電著火，也有電容量不足，長期超負荷使用導(dǎo)致的事故。另一方面是用電設(shè)備使用不當問題：①設(shè)備“超期服役”，留下安全隱患，導(dǎo)致失火。②設(shè)備出現(xiàn)故障未及時發(fā)現(xiàn)和維修。③長時間離開實驗室時忘記關(guān)閉電源，致使設(shè)備通電時間過長，因溫度過高而失火[2]。（2）用火隱患。操作不慎，使火源接觸易燃物質(zhì)，引起著火。（3）高壓容器隱患。高壓蒸汽滅菌器是微生物實驗室的常用設(shè)備，如果未按規(guī)定定期檢驗發(fā)生壓力表失靈，安全閥堵塞等情況，極易引發(fā)惡性事故，造成人員傷亡和財產(chǎn)損失。

2.危險化學品安全隱患。微生物實驗室中的化學品安全隱患主要有以下方面：①毒害性危害。普通微生物實驗室內(nèi)較少使用劇毒藥品，但許多常用藥品具有毒性。如，作為生物抑制劑的鏈霉素懷疑為致癌劑和突變誘導(dǎo)劑，可導(dǎo)致過敏反應(yīng)，吸入、攝入、皮膚吸收可造成損傷。②腐蝕性危害。實驗室常用的鹽酸、氫氧化鈉、苯酚等試劑，若操作不慎，不僅會對實驗儀器造成腐蝕性破壞，對人體組織也會造成化學灼傷，使其在4小時內(nèi)出現(xiàn)壞死現(xiàn)象，損傷難以痊愈。但由于這些是常用藥品，操作者容易掉以輕心，不按規(guī)程操作，從而釀成嚴重后果。

3.生物安全隱患。生物安全隱患是微生物實驗室特有的安全隱患，其危害可能產(chǎn)生的后果不亞于其他任何一種安全隱患，2004年11月12日國務(wù)院頒布了《病原微生物安全管理條例》，說明生物安全問題已經(jīng)引起了政府和社會的高度重視，微生物實驗室的管理人員更應(yīng)提高認識，切實做好實驗室生物安全管理工作。筆者通過深入調(diào)查研究，總結(jié)其產(chǎn)生隱患的原因如下：①實驗室環(huán)境條件差，管理不善。微生物實驗室布局不合理，無清潔區(qū)、緩沖區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)之分，未配置生物安全柜，操作空間不足等都是造成生物污染的誘因[3]。由于開放實驗室的服務(wù)面向廣，實驗室內(nèi)可能有多個實驗項目同時進行，如果管理不嚴格，可能因為試驗樣品混淆導(dǎo)致試驗失敗，甚至可能因菌種變異導(dǎo)致嚴重的危害。②實驗人員安全意識淡薄。許多師生認為普通微生物實驗室內(nèi)無致病性菌種，因此消毒意識淡薄。但在某些特定條件下，細菌可能產(chǎn)生變異，由非致病菌轉(zhuǎn)變?yōu)橹虏【?，如果人體感染就非常危險，特別是身體上有傷口時危險性就更大。

4.輻射安全隱患。對于微生物實驗室，輻射危害的主要來源是用于消毒操作的紫外線燈。紫外線具有殺滅細菌的作用，但過量的紫外線照射可使人體免疫系統(tǒng)受到抑制，引起癌變。一些實驗室對于紫外線燈開關(guān)未進行特殊標識，致使學生誤開紫外燈而無任何防范措施，直接在紫外燈下操作實驗，導(dǎo)致身體損傷。

二、開放性微生物實驗室安全管理的建議

1.安全教育優(yōu)先。絕大多數(shù)安全事故的發(fā)生都與實驗人員的安全意識淡薄和安全知識不足有關(guān)，因此重視安全教育，提高防范意識應(yīng)放在首位。在新生進實驗室之前，必須由實驗室負責人對其進行安全教育，內(nèi)容包括安全操作和各種應(yīng)急措施。在條件具備的情況下，可以制定開放實驗室的準入制度，對進入實驗室開展教學、科研活動的各類人員進行必要的安全培訓(xùn)并考核，獲得實驗室準入資質(zhì)方可進入實驗室，以確保事前的安全教育不缺失。

2.完善制度為重。俗話說“無規(guī)矩不成方圓”，安全事故的防范重在規(guī)章制度的完善。制定制度容易，執(zhí)行制度才是關(guān)鍵。實驗室難管理往往不是因為制定的制度太少，而是因為監(jiān)督管理不到位，導(dǎo)致規(guī)章制度如同虛設(shè)，所以要落實制度，必須抓好監(jiān)督管理。

3.規(guī)范操作是目的。事前教育，規(guī)章制度的執(zhí)行都是為了最終保證實驗室內(nèi)的每一個實驗操作能夠規(guī)范。如果實驗室內(nèi)的操作都能夠按照實驗流程、儀器設(shè)備操作規(guī)程正確操作，則安全隱患就可以降低到最低水平。因此，讓每個學生和工作人員都能在了解實驗流程、熟悉儀器操作后才正式開始實驗十分重要。

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doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.01.620文章編號：1004-7484（2014）-01-0515-01

微生物實驗室是疾病預(yù)防控制與院感控制中一個非常重要的技術(shù)支持部門，主要承擔著各種突發(fā)公共衛(wèi)生事業(yè)的應(yīng)急檢驗工作、傳染病監(jiān)測工作、醫(yī)療機構(gòu)和托幼機構(gòu)消毒效果監(jiān)測檢驗工作等。在微生物學檢測過程中，大多數(shù)檢驗工作內(nèi)容為定性試驗，工作方式為手工操作，結(jié)果的觀察是依靠主觀判斷，所以有時就會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。為了保證結(jié)果的準確、可靠和可重復(fù)性，在工作當中我們必須開展實驗室的質(zhì)量控制。做好室內(nèi)質(zhì)量控制直接關(guān)系到日常的檢測質(zhì)量，是結(jié)果可靠的基礎(chǔ)和核心，室內(nèi)質(zhì)量控制包括對環(huán)境設(shè)施、培養(yǎng)基、試劑、儀器、實驗過程和實驗人員的監(jiān)控。

1微生物室內(nèi)質(zhì)量控制

1.1檢驗技術(shù)人員的質(zhì)量控制從事微生物的技術(shù)人員必須經(jīng)過嚴格的基礎(chǔ)知識學習和專業(yè)化的實驗技能培訓(xùn)，經(jīng)考核合格后持證上崗[1]；技術(shù)人員還需要培養(yǎng)高度的責任感和嚴謹求實的工作態(tài)度及參加各類短、長期培訓(xùn)班，到設(shè)備先進業(yè)務(wù)水平高的實驗室進修學習、參加學術(shù)交流會、專題討論會等，以提高技術(shù)水平；并通過閱讀專業(yè)期刊和書籍，掌握新技術(shù)和新知識，應(yīng)用到實際工作中去。

1.2操作手冊微生物實驗室必須要有根據(jù)本實驗室條件而編寫的標準操作手冊并定期組織專業(yè)人員進行修改和補充，用于指導(dǎo)實驗室日常工作，使實驗操作不因人員的變動而有所改變。主要包括以下內(nèi)容：各級人員的職責和權(quán)限、實驗室生物安全措施、實驗室可開展的項目、培養(yǎng)基和試劑的配制方法、菌（毒）種管理、質(zhì)量控制方案、環(huán)境設(shè)施監(jiān)控要求、廢棄物處理；配備細菌學參書籍和有權(quán)威性的專業(yè)雜志。

1.3標準菌（毒）株標準菌株的來源必須從認可的菌種或標本收集途經(jīng)獲得，必須來自權(quán)威機構(gòu)或認可部門，如我國的衛(wèi)生部藥品生物鑒定所菌種保藏中心等。對于標準菌（毒）株的選擇，在試驗過程中，無論是定性試驗，還是定量試驗，質(zhì)控系統(tǒng)必須有足夠的靈敏度檢測出試驗中出現(xiàn)的誤差，因而質(zhì)量的監(jiān)測點就得設(shè)在一個敏感的位置。這個敏感點，對定性試驗，應(yīng)在較弱陽性范圍內(nèi)；對于定性試驗，則應(yīng)位于解釋試驗結(jié)果的決定水平附近。標準菌（毒）株由專人管理，并在文件中規(guī)定其職責，非管理者不能隨意獲得。

1.4質(zhì)量控制標準

1.4.1培養(yǎng)基的質(zhì)量控制標準通常以細菌能否在培養(yǎng)基中生長或形成典型菌落來衡量。培養(yǎng)基要求細菌不但能生長，而且還要求發(fā)育好并表現(xiàn)出典型的菌落特征。配制的培養(yǎng)基一般質(zhì)量要求為：①培養(yǎng)基應(yīng)有明確的標記與配制日期，液體培養(yǎng)基應(yīng)澄清、透明，含導(dǎo)管者，倒管中不得有氣泡且導(dǎo)管內(nèi)充滿液體；固體培養(yǎng)基必須保持適當?shù)挠捕龋诮臃N前應(yīng)為無菌。②不定期檢查PH值，要求在規(guī)定的PH值±0.2內(nèi)，有指標劑的培養(yǎng)基應(yīng)保持其應(yīng)有的顏色。③傾注瓊脂平板的體積一般為15ml，斜面不超過試管的2/3。④無菌分裝的培養(yǎng)基應(yīng)在培養(yǎng)箱（36℃）過夜，無菌生長才能使用，高壓滅菌培養(yǎng)基應(yīng)隨機抽取5%-10%作無菌試驗。⑤培養(yǎng)基應(yīng)放在適當溫度下保存。⑥培養(yǎng)基必須在有效期內(nèi)使用，使用時觀察是否變質(zhì)。記錄所有的結(jié)果。商品化的培養(yǎng)基質(zhì)量控制由廠家負責。

1.4.2試劑和染色液的質(zhì)量控制標準試劑和染色液必須注明配制或購買日期；按要求貯存并在有效期內(nèi)使用；對穩(wěn)定性差的試劑，試驗時必須同時進行陽性和陰性對照試驗，并記錄結(jié)果。

1.4.3抗血清的質(zhì)量控制標準抗血清的來源必須可靠，并按制造商的使用說明使用和保存。使用前觀察抗血清是否澄清，定期用標準菌株進行監(jiān)控，并記錄結(jié)果，注意抗血清的有效期和效價。

1.5儀器設(shè)備的監(jiān)控高壓滅菌器和干熱滅菌器的監(jiān)測時如果是大容量滅菌器，則在其不同位置放置滅菌指示物，以全面評價滅菌性能。高壓滅菌器使用生物學方法和化學方法兩種方法監(jiān)測其滅菌效果[2]并記錄結(jié)果；培養(yǎng)箱、冰箱、水浴箱的監(jiān)測，每天開始工作前和結(jié)束工作后都要記錄溫度，如不符合要求則應(yīng)進行調(diào)整，隔水式培養(yǎng)箱和水浴箱，則要定期進行加水，冰箱則需定期進行除霜；二氧化碳培養(yǎng)箱的監(jiān)測，每天觀察記錄二氧化碳培養(yǎng)箱的溫度，其溫度要求在36℃，濃度要求在5%-10%，必要時調(diào)整其溫度，測試其二氧化碳的濃度；生物安全柜的監(jiān)測，生物安全柜的過濾網(wǎng)更換由專業(yè)技術(shù)人員進行更換，紫外線燈每3個月檢查一次消毒性能。對檢測結(jié)果有重大影響的儀器設(shè)備，在檢定期間內(nèi)還要進行期間核查。

1.6環(huán)境設(shè)施的監(jiān)控實驗室的環(huán)境應(yīng)滿足檢測要求，不能影響檢測結(jié)果的準確性、可靠性和有效性，此外還應(yīng)有利于工作人員自身的安全和儀器的維護。對檢測結(jié)果有重大的影響的環(huán)境，必須對其環(huán)境條件實施監(jiān)控并記錄加以控制。微生物實驗室主要分為無菌實驗室、凈化實驗室、生物安全實驗室等。對有不同要求的區(qū)域加以明確的標識并能有效的控制，防止病原體的擴散。涉及生物安全的檢測區(qū)域按照相關(guān)規(guī)定或要求配置相關(guān)的生物安全設(shè)施，如生物安全柜、無排放高壓滅菌器等，必須有妥善處理廢棄樣品和有害廢棄物的設(shè)施和制度，無菌室內(nèi)必須配備紫外線消毒裝置，定期進行紫外線消毒及空氣質(zhì)量監(jiān)測；凈化實驗室在使用之前先送風再進行紫外線消毒，工作結(jié)束后再進行消毒。工作人員在進入凈化實驗室之前，必須更換隔離服。使用生物安全實驗室的目的就是為了防止檢測人員的職業(yè)暴露。

1.7實驗過程的質(zhì)量控制影響過程輸出的因素很多，除了以上上6點以外還包括樣品的采集（分析前質(zhì)量控制）、原始記錄及報告（分析后質(zhì)量控制）等。采集的樣本必須有代表性，保證無菌采樣，同時記錄采樣時的環(huán)境狀況；采集的樣品必須以正確的方式運送到實驗室；實驗室內(nèi)樣品必須具備唯一性標識及樣品的儲存和處置應(yīng)有明確規(guī)定，以滿足樣品復(fù)檢。實驗室采取多種形式進行室內(nèi)質(zhì)量控制包括空白試驗、行雙樣、人員比對、樣品復(fù)檢、目擊試驗等。室內(nèi)質(zhì)量控制是產(chǎn)生精確和可靠結(jié)果的基礎(chǔ)和核心。

2室間質(zhì)量控制

室間質(zhì)量控制是由實驗室以外的機構(gòu)或組織對其已達到的質(zhì)量水準進行的評價，是上級實驗室進行質(zhì)量管理的手段。室間質(zhì)量控制是使實驗室從質(zhì)控過程中發(fā)現(xiàn)問題，制定措施，不斷改進檢驗技術(shù)水平。室內(nèi)質(zhì)量控制只能了解實驗的重復(fù)性好壞，而不能了解實驗的偏差或系統(tǒng)誤差，室間質(zhì)量控制能糾正實驗室存在的系統(tǒng)誤差直至減小或消除實驗室間的誤差，可對實驗室技術(shù)水平進行綜合評價，有利于實驗室技術(shù)水平的提高。

3討論

實驗室質(zhì)量控制是一項十分艱巨的工作，特別是對于疾病預(yù)防控制機構(gòu)微生物實驗室來說，由于其主要從事的是產(chǎn)品、公共場所等樣品的衛(wèi)生指標菌檢驗和傳染病監(jiān)測及突發(fā)公共衛(wèi)生事件中相關(guān)病原微生物的檢驗工作，所出具的實驗結(jié)果是衛(wèi)生行政執(zhí)法、突發(fā)公共衛(wèi)生事件有效應(yīng)對的重要技術(shù)支持和依據(jù)，具有一定的法律效力，因而疾病預(yù)防控制機構(gòu)微生物實驗室必須不斷加強實驗室的質(zhì)量控制工作，確保實驗室結(jié)果及時準確和公證，才能確保有關(guān)衛(wèi)生行政執(zhí)法能夠順利實施和確保突發(fā)公共衛(wèi)生事件的有效應(yīng)對。

參考文獻

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關(guān)鍵詞微生物實驗室醫(yī)院感染管理

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.10.222

Abstract:Microbial room monitoring and management of hospital infection in importance of the work and found that micro-organisms exist in the new situation room of some old problems,propose their own solutions accordingly,thus further ensuring that the management of hospital infection surveillance carried out smoothly.Hospital infection monitoring and management is the focus of hospital management.In this paper, the status quo of the microbiology laboratory and put forward a sound management system to strengthen the standardization of building,strengthening the daily management of a number of measures.

醫(yī)院感染監(jiān)測管理是一項系統(tǒng)工程,其涉及到醫(yī)院的許多部門,尤其是微生物實驗室在醫(yī)院感染的監(jiān)測中發(fā)揮著重要的作用。同時醫(yī)院感染的監(jiān)測也是醫(yī)院感染管理的一項重要內(nèi)容,客觀、及時準確的臨床病原微生物鑒定及醫(yī)院環(huán)境衛(wèi)生學和消毒滅菌效果監(jiān)測對控制醫(yī)院感染至關(guān)重要。因此,微生物實驗室在醫(yī)院感染的監(jiān)測中又發(fā)揮著關(guān)鍵的作用[1]。在醫(yī)院感染中的病原生物學檢驗和醫(yī)院環(huán)境的病原微生物學調(diào)查,保證滅菌、消毒的質(zhì)量,推動抗生素的合理使用,以及建設(shè)和執(zhí)行醫(yī)院的衛(wèi)生制度和措施等方面起重要作用。

目前在西部不發(fā)達地區(qū),多數(shù)醫(yī)院臨床微生物實驗室現(xiàn)狀,可以說與醫(yī)院感染監(jiān)測的任務(wù)和地位所要求的相去很遠,表現(xiàn)為以下幾方面。

從醫(yī)院外部環(huán)境看,政府各級相關(guān)部門工作滯后,領(lǐng)導(dǎo)重視不夠,觀念落后。由于長期相關(guān)部門對細菌檢驗的收費標準定價過低,嚴重影響臨床細菌學檢驗的分離、培養(yǎng)、鑒定和藥敏分析等質(zhì)量。目前還有一些縣級醫(yī)院仍將細菌室作為緩沖室可有可無,細菌檢驗可做可不做,硬件、軟件落后,不但制約了微生物實驗室的相關(guān)工作,同時也嚴重阻礙了醫(yī)院感染監(jiān)測管理工作。

從醫(yī)院內(nèi)部環(huán)境看,目前微生物實驗室所用的檢驗技術(shù)落后,主要表現(xiàn)在以下幾方面:①采樣及樣本容器的不規(guī)范:比如痰樣、尿樣、便樣,更不用說厭氧菌培養(yǎng)樣本等,忽視在監(jiān)測分析前的質(zhì)量保證;②樣本運送的不暢通:如采好的痰液和尿液不能及時的送檢;③分離培養(yǎng)不標準:如一個痰液培養(yǎng)應(yīng)該使用幾種平板,應(yīng)該有什么樣的培養(yǎng)環(huán)境等等;④菌種鑒定的不標準;⑤細菌藥敏檢測方法的不規(guī)范:使用K-B法檢測卻沒有對藥敏平板及藥品紙片進行定期的檢測;⑥報告結(jié)果單純,沒有結(jié)合臨床作任何解釋;⑦保存不重視;⑧目前多半實驗室仍僅限于對常見的普通細菌的鑒定,藥敏,對一些難于分離培養(yǎng)的細菌如嗜血桿菌,L型細菌,支原體,厭氧菌,真菌等缺乏認識和培養(yǎng)鑒定技術(shù);⑨由于臨床醫(yī)生對細菌方面的知識有限,造成對細菌檢驗的不重視[2]。

針對這些問題,①制定相應(yīng)的規(guī)章制度,根據(jù)《醫(yī)院感染預(yù)防控制規(guī)范》、《消毒管理辦法》以及其他防止醫(yī)院感染的有關(guān)規(guī)定,制定控制、預(yù)防醫(yī)院感染的規(guī)劃及措施;②定期向臨床科室報告醫(yī)院感染菌譜及抗菌藥物的敏感試驗結(jié)果,以供醫(yī)院感染管理和臨床醫(yī)生用藥參考;③對醫(yī)院環(huán)境、衛(wèi)生學及消毒滅菌效果進行定期監(jiān)測;④微生物實驗室作為一個檢驗專業(yè),有責任向廣大臨床醫(yī)務(wù)人員提供有關(guān)部門的信息[3],參與全院微生物及使用抗生素相關(guān)知識的培訓(xùn),強化醫(yī)務(wù)人員醫(yī)院感染意識,重視細菌培養(yǎng)和藥敏試驗,提高送檢率;⑤加強對醫(yī)院重點科室和人員的病原學監(jiān)測。發(fā)現(xiàn)異常細菌或有流行趨勢及時通報相應(yīng)科室,同時上報院內(nèi)感染科,采取有效措施,控制傳染源,切斷傳播途徑,保護易感人群。

我國也與世界各國一樣面臨著感染菌的耐藥性日益增多的威協(xié),盡管新的抗生素不斷地研制和生產(chǎn),但耐藥菌尤其是多重耐藥菌的遞增越來越給人類增添麻煩,近年來臨床微生物學檢驗手段逐漸提高,取得較為明顯的進步,但至今仍是檢驗醫(yī)學各學科中較為薄弱的環(huán)節(jié),目前國內(nèi)藥敏試驗中存在的主要問題是:①我國衛(wèi)生部推薦的是按美國NCCLS推薦紙片擴散法(K-B法)和肉湯稀釋法MIC,但目前所用的方法仍未統(tǒng)一和標準化;②市場所供的藥敏試驗的培養(yǎng)基、藥敏紙片及MIC稀釋板等缺乏嚴格的質(zhì)控,質(zhì)量難于保證;③細菌檢驗隊伍力量薄弱,從檢人員知識老化,缺乏對新技術(shù)、新方法、新信息以及標準化的了解;④藥敏結(jié)果報告慢,尤其是臨床實驗室脫離臨床,缺乏溝通致使藥敏試驗結(jié)果不能滿足臨床治療所需。

如何解決這些問題呢?這就需要:①按培養(yǎng)要求選擇高質(zhì)量的培養(yǎng)基和適合各種細菌生長的環(huán)境條件,如CO2濃度、厭氧環(huán)境、溫度等等;②認真執(zhí)行NCCLS的標準化方法并加強室內(nèi)質(zhì)控,分析前的質(zhì)控、樣本及分析后的質(zhì)控審核,發(fā)送報告,反饋臨床信息,密切聯(lián)系臨床;③對市售的藥敏培養(yǎng)基,藥敏紙片MIC稀釋板等進行嚴格的質(zhì)量控制;④試驗用的抗生素及臨床常用抗生素應(yīng)由醫(yī)院控制院感委員會中臨床醫(yī)師藥物學及微生物學專家共同按實際情況選定和查審;⑤加強地區(qū)間、國際區(qū)合作交流,學習新方法,引進新技術(shù)和配置必要的先進的儀器設(shè)備,加強硬件和軟件的投資,綜合培訓(xùn)從檢人員的素質(zhì),重視臨床微生物學檢驗隊伍的建設(shè);⑥密切監(jiān)視耐藥菌群如:耐萬古霉素的葡萄球菌,耐萬古霉素和耐高濃度氨基糖甙類的腸球菌,耐青霉素的肺炎鏈球菌,β-溶血鏈球菌和腦膜炎雙球菌,耐頭孢曲松的淋病奈瑟菌,耐泰能的腸桿菌及超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的細菌在我國出現(xiàn)和傳播。

綜上所述,微生物實驗室作為一個檢驗機構(gòu),要有計劃地向廣大醫(yī)務(wù)人員提供有關(guān)部門的信息,指導(dǎo)臨床有的放矢地使用抗生素,增強廣大醫(yī)務(wù)人員預(yù)防醫(yī)院感染的意識,重視細菌培養(yǎng)和藥敏試驗,有根有據(jù),探索更有效的控制措施,預(yù)防醫(yī)院感染[4]。

參考文獻

1王文平,周敏,楊進波.檢驗科醫(yī)院感染控制探討.中國誤診學雜志,2007,7(29):7025-7026.

2程龍,程明,張桂華,等.控制細菌耐藥性發(fā)展與抗生素的合理使用.中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2008,5(15):101-102.

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關(guān)鍵詞：高職生；儀器設(shè)備；設(shè)備管理

【中圖分類號】 G712【文獻標識碼】 B【文章編號】 1671-1297（2012）11-0027-02

高職教育需要高素質(zhì)技術(shù)應(yīng)用型人才，這類人才除了要掌握必備的基礎(chǔ)理論知識外，更主要的是還要具有較強的職業(yè)綜合能力和解決實際問題的能力。在教學中，必須重視實踐能力的培養(yǎng)，重視職業(yè)經(jīng)驗和職業(yè)技能的獲得。實踐教學是學生在校期間獲得實踐能力和職業(yè)綜合能力的最主要途徑和手段。本文主要從日常管理的角度來談微生物實驗室管理中存在的問題，以引起同行的注意。

一微生物實驗室儀器設(shè)備管理存在的弊端

1.儀器設(shè)備的購置缺乏科學性。（1）對專業(yè)的發(fā)展水平和發(fā)展方向不清楚。低水平，淺眼光而導(dǎo)致設(shè)備計劃的不明確。目前的儀器設(shè)備購置是由各專業(yè)提出購置計劃，再進行匯總，然后上報審批。各專業(yè)申報儀器設(shè)備計劃的依據(jù)是課本上的實驗項目。至于這個實驗項目是屬于什么類型的實驗、有無開展的必要、該實驗是否代表了最新的技術(shù)水平、儀器設(shè)備的功能是否先進齊全等等問題，很少有進行論證。很多兄弟院校的實驗室同行經(jīng)常到我院微生物實驗室參觀，問得最多的問題就是專業(yè)儀器設(shè)備需要哪些？這些設(shè)備干什么用的？從這些問題當中，就可以看出微生物專業(yè)在發(fā)展的技術(shù)水平程度和方向上的迷茫。（2）對設(shè)備計劃的隨意砍伐。由于資金的問題，上報的計劃被管理部分隨意砍伐，最后殘缺。

2.儀器設(shè)備利用率低，管理缺乏創(chuàng)新精神。 設(shè)備利用率低的主要原因有以下幾個方面：隸屬院系二級管理，主要由系管理的體制，使各系的實驗室建設(shè)處于分割狀態(tài)，不能建立資源共享體系；依據(jù)實驗項目而購置的儀器設(shè)備，隨著課程的整合而被閑置；隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展，原來一些熱門專業(yè)現(xiàn)在逐漸被冷落，招生的數(shù)量在減少；在購置儀器設(shè)備時，沒有進行充分地論證，購進之后，才發(fā)現(xiàn)用處不多；購置的儀器設(shè)備不系統(tǒng)，缺少一個環(huán)節(jié)后，其它的儀器設(shè)備就只有閑置。 設(shè)備利用率低下，還有一個重要的因素，是實驗室管理缺乏創(chuàng)新精神，在思想上放不開。如果我們的管理者再開放一點，在管理上創(chuàng)新一點，依靠實驗室，我們能辦出很多的小事業(yè)。這在一定的程度上，不但達到了提高設(shè)備利用率，還提高了效益，實現(xiàn)生產(chǎn)、教學、科研的有機結(jié)合。

3.實驗室的工作沒有得到應(yīng)有的重視。 現(xiàn)在所說的教學改革，一般都是指理論教學的改革。其實，經(jīng)過多年的實踐，理論教學改革的空間不太大，相反，在高職院校，最需要最有特色的改革，應(yīng)該是實踐教學的改革。在長期從事微生物實驗室的管理中，我感覺到，實驗室的工作還是沒有得到應(yīng)有的重視。這其中的原因，我認為有以下幾個方面：一是實踐教學需要大量的儀器設(shè)備和實訓(xùn)基地，因此投資較大，要真正重視實踐教學，沒有一定的財力是實現(xiàn)不了的，因此這也是領(lǐng)導(dǎo)無法直視的原因；二是實驗室的管理除包括正常的教學、實驗室建設(shè)外，還需要大量的高級專業(yè)人才對實驗項目進行評估，以使學生掌握的技能能跟上行業(yè)發(fā)展的步伐。目前這部分工作主要依靠教研室，而我們的教師把大量的時間用于對付理論教學，而教師的社會實踐也較少，專業(yè)技能不是太高，因此無法促進實驗室的發(fā)展，無法進行實踐教學的創(chuàng)新；三是目前的管理體制使實驗室工作人員所受的壓力太大，能夠獨立開展工作的機會不多，一舉一動都受到各方面的評價，因此四平八穩(wěn)比改革創(chuàng)新要穩(wěn)妥。由于缺人缺物，缺乏自利，使實踐教學方面受到很大的局限，這也使實驗室的管理工作難以得到應(yīng)有的重視。

二微生物實驗室儀器設(shè)備規(guī)范管理的改進措施

高職院校的建設(shè)與生存，沒有實驗實訓(xùn)是不可能發(fā)展下去的。經(jīng)歷了高職初期的擴張之后，各高職院校把內(nèi)涵發(fā)展作為今后努力的方向，實驗室的建設(shè)與管理是重中之重。管理的標準是要達到規(guī)范，我認為，可以從以下幾個方面進行改進。

1.成立獨立的實驗實訓(xùn)中心，實行專業(yè)管理。成立由學院主管的獨立的實驗實訓(xùn)中心，實行專業(yè)管理。這樣可以減少干擾，加強對實驗實訓(xùn)效果的監(jiān)督和考評，獲得獨立發(fā)展的空間。聘用專職的管理人員進行科學管理，建立與健全各項規(guī)章制度，加強實驗實訓(xùn)過程的監(jiān)控，科學合理地利用現(xiàn)有資源。獨立的實驗實訓(xùn)中心，可以利用自身的優(yōu)勢，進行產(chǎn)業(yè)的開發(fā)，為學生的實踐創(chuàng)造更大的空間。

2.健全規(guī)章制度，完善管理體制，規(guī)范管理程序。首先，要建立健全一套行之有效的規(guī)章制度，并涵蓋管理工作涉及的各個方面和各個環(huán)節(jié)。高校儀器設(shè)備管理的規(guī)章制度主要包括：儀器設(shè)備添置計劃編制與專家論證制度、儀器設(shè)備采購招投標制度、儀器設(shè)備入庫驗收與財產(chǎn)登記制度、儀器設(shè)備領(lǐng)用與保管及調(diào)配制度、儀器設(shè)備定期檢查與維修制度、儀器設(shè)備使用狀態(tài)信息收集與數(shù)據(jù)分析處理及其備案制度、儀器設(shè)備報廢注消制度、廢舊儀器設(shè)備再利用制度、儀器設(shè)備添置計劃與招投標及產(chǎn)品說明書等文書檔案管理制度，等等方面，并要隨著學校整體事業(yè)的發(fā)展以及教學、科研等活動對儀器設(shè)備需求及其特點的變化而進行及時的修改、補充和完善。同時要完善和改革不合時宜的管理體制，提高管理效率效果。

3.建立資源共享機制。 資源共享包括人員的合理流動，儀器設(shè)備的交流等。如微生物實驗室的儀器設(shè)備維護的費用大，而機電專業(yè)人員對儀器設(shè)備比較精通，實現(xiàn)資源共享機制，就可以節(jié)約部分費用。再如，各系大小不一，有的系比較大，計算機不夠用，而有的系小，機器空置的時間比較多。因此，建立資源共享機制，不僅提高設(shè)備的利用率，還可以提高人員的利用率。

4.擴大交流與合作。 高職院校如果想進一步發(fā)展，依靠自身的力量肯定是不夠的。開門辦學，開放辦學，依靠社會的力量來發(fā)展自己的實驗室力量，是必須要走的一步。學以致用，學生的明天是為社會服務(wù)，因此緊密聯(lián)系社會，依靠社會力量，提高專業(yè)實踐水平和儀器設(shè)備水平。交流與合作還體現(xiàn)在人才的交流上，要大膽聘用社會上的行業(yè)專家、高級技師參與到學院的實踐教學中來，通過交流與學習，一方面，提高學院整體專業(yè)水平，另一方面，可以促進內(nèi)部的競爭。 實現(xiàn)實驗室的開放管理，也是交流與合作的一部分。對于某些貴重的儀器，我們可以借助于其它單位；對于我們有的設(shè)備，也可以用來服務(wù)于學生和社會。買的作用是創(chuàng)造價值，不是為了擺樣子的。微生物實驗室的功能中有很多不錯的經(jīng)濟發(fā)展點，我們可以以點帶面，從一項或幾項專業(yè)實驗中衍生出生產(chǎn)項目來，進而可以向企業(yè)的方向發(fā)展。

5.更新管理手段，推行計算機網(wǎng)絡(luò)化管理。 儀器設(shè)備管理計算機網(wǎng)絡(luò)化的實施，將在一定程度上進一步促進高校管理工作科學化、現(xiàn)代化和群體化。校級分管領(lǐng)導(dǎo)可以通過校園網(wǎng)上設(shè)備信息的自動采集，對設(shè)備經(jīng)費的使用、儀器設(shè)備的購置、分布、使用頻率、運行狀態(tài)等情況進行隨時隨地查詢，掌握“家底”，為設(shè)備管理決策科學化提供有效依托。儀器設(shè)備管理部門可以通過網(wǎng)絡(luò)與各實驗室及有關(guān)設(shè)備使用者保持適時聯(lián)系，隨時獲取各處儀器設(shè)備的擁有量、使用時段、使用效益等信息，實現(xiàn)對全校的儀器設(shè)備動態(tài)管理。同時還可開發(fā)閑置或待報廢設(shè)備的再利用價值，儀器設(shè)備資源的共享程度也會因信息的及時獲取與交流而得以大大提高。當然，實行儀器設(shè)備的計算機網(wǎng)絡(luò)化管理也并非完全排斥傳統(tǒng)的管理方式。相反，一些好的做法與經(jīng)驗應(yīng)繼續(xù)保持，尤其是出于對原始資料真實性的信任和管理制度的規(guī)定，一些環(huán)節(jié)上的保留原始資料與記錄必須以傳統(tǒng)的形式進行保存，如領(lǐng)導(dǎo)的簽名、上級的批復(fù)等。

6.提高實驗室工作人員素質(zhì)。 要提高實驗室的管理水平，首先要提高工作人員的素質(zhì)。實驗室工作需要管理者及工作人員具有良好的道德素質(zhì)、專業(yè)素質(zhì)、職業(yè)素質(zhì)和學習素質(zhì)。加強培訓(xùn)、學習和交流，制訂量化考核標準，引入競爭機制等等，是提高實驗室工作人員素質(zhì)的關(guān)鍵。特別是在微生物科技日新月異的今天，新職業(yè)、新技術(shù)、新工藝不斷出現(xiàn)，對職業(yè)院校的微生物類專業(yè)來說是一個嚴峻的挑戰(zhàn)。我們只有打開門走出去，在觀念和水平上不斷更新，才能跟上社會發(fā)展的步伐，進而引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。

綜上所述，微生物實驗室管理的困難，是一個共性的問題，專業(yè)多、儀器設(shè)備類型多、微生物類專業(yè)不受重視、招生數(shù)量較少是問題的根源。目前很多的高職院校，在微生物實驗室的管理中，不管從制度還是方式上都存在一些漏洞，實驗室的資源并沒有得到充分的利用，部分實驗室的能力不能適應(yīng)高職的教學需要。我們不能因為困難而停止不前，我們可以在實驗室開放管理、實驗室的發(fā)展方向、實驗室在高職人才的培養(yǎng)中怎樣發(fā)揮作用等諸多方面，進行探討與實踐，也許隨著中國的高職實踐教學體系的完善，高職的微生物實驗室管理能逐步趨于規(guī)范。參考文獻

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關(guān)鍵詞：藥品微生物 食品微生物

新組建的國家食品藥品監(jiān)督管理總局，對生產(chǎn)、流通、消費環(huán)節(jié)的食品安全和藥品的安全性、有效性實施統(tǒng)一監(jiān)督管理。食品藥品檢驗所的檢驗人員，由先前的單一藥品檢驗改為食品、藥品全部檢驗。只有發(fā)現(xiàn)并掌握二者檢驗的異同，才能更好的開展檢驗工作。本文對日常工作中發(fā)現(xiàn)的藥品微生物限度檢查和食品微生物檢驗的異同，作如下概述。

1.檢驗標準

1.1藥品 《中華人民共和國藥典》2010年版 一部/二部 微生物限度檢查法。

1.2食品 《中華人民共和國國家標準》食品微生物學檢驗。

1.3比較 藥品標準近些年來五年更新一個版本，為能及時反映當前科學發(fā)展水平，通常在新版藥典出版之后，下一版藥典出版之前出版增補本。食品標準無固定更新周期。

2.實驗室環(huán)境

2.1藥品 微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行。檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標準進行潔凈度驗證。[1]微生物限度檢查應(yīng)有單獨的潔凈實驗室，每個潔凈實驗室應(yīng)有獨立的凈化空氣系統(tǒng)。涉及實驗室監(jiān)控菌株的分離鑒定、樣品陽性菌株的分離分析、方法驗證中的陽性菌操作等實驗活動，應(yīng)在專門的陽性菌實驗室進行。陽性菌操作不得在供試品檢驗用潔凈實驗室內(nèi)進行。[2]

2.2食品 實驗室環(huán)境不影響檢驗結(jié)果的準確性，布局應(yīng)采用單方向工作流程，避免交叉污染。實驗室內(nèi)環(huán)境的溫度、濕度、照度、噪聲和潔凈度等應(yīng)符合工作要求。一般樣品檢驗應(yīng)在潔凈區(qū)域進行，潔凈區(qū)域應(yīng)有明顯的標示。病原微生物分離鑒定工作應(yīng)在二級生物安全實驗室進行。[3]

2.3比較 二者對陽性菌和病原微生物的實驗室環(huán)境都有嚴格的限制。藥品微生物限度檢查對環(huán)境潔凈度、懸浮粒子、浮游菌和沉降菌有明確的要求，而食品沒有要求。

3.培養(yǎng)基

3.1藥品 藥品微生物限度檢查用的培養(yǎng)基應(yīng)進行培養(yǎng)基的適用性檢查，計數(shù)測定用培養(yǎng)基進行促生長能力的檢查，控制菌檢查用培養(yǎng)基進行促生長能力、抑制能力及指示能力的檢查。

3.2食品 培養(yǎng)基的制備和質(zhì)量控制按照GB/T 4789.28的規(guī)定執(zhí)行。

3.3比較 培養(yǎng)基質(zhì)量是影響微生物檢驗結(jié)果的重要環(huán)節(jié)，藥品對培養(yǎng)基有適用性檢查，食品對培養(yǎng)基有質(zhì)量控制。二者計數(shù)所用的培養(yǎng)基也有區(qū)別，應(yīng)當引起注意，如藥品細菌計數(shù)一般用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，食品菌落總數(shù)測定用平板計數(shù)培養(yǎng)基；藥品霉菌及酵母菌計數(shù)用玫瑰紅鈉培養(yǎng)基，食品霉菌和酵母計數(shù)用孟加拉紅培養(yǎng)基。

4.抽（采）樣

4.1藥品 一般采用隨機抽樣方法，其抽樣量應(yīng)為檢驗用量（2個以上最小包裝單位）的3-5倍。抽樣時，凡發(fā)現(xiàn)有異?；蚩梢傻臉悠?，應(yīng)選取有疑問的樣品，機械損傷、明顯破裂的包裝不得作為樣品。凡能從藥品、瓶口（外蓋內(nèi)側(cè)及瓶口周圍）外觀看出長螨、發(fā)霉、蟲蛀及變質(zhì)的藥品，可直接判為不合格品，無需再抽樣檢驗。

4.2食品 食品的采樣應(yīng)根據(jù)檢驗?zāi)康摹⑹称诽攸c、批量、檢驗方法、微生物的危害程度等確定采樣方案。采樣方案分為二級和三級采樣方案。應(yīng)采用隨機原則進行采樣，確保所采集的樣品具有代表性。

4.3比較 食品與藥品對抽（采）樣都有明確的要求。食品的采樣更加復(fù)雜和嚴格。不同類型的食品的有不同的采樣方案，采樣過程遵循無菌操作程序，防止一切可能的外來污染，樣品在保存和運輸?shù)倪^程中，應(yīng)采取必要的措施防止樣品中原有微生物的數(shù)量變化，保持樣品的原有狀態(tài)。

5.方法驗證

5.1藥品 當建立產(chǎn)品的微生物限度檢查法時，應(yīng)進行細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法和控制菌檢查方法的驗證，以確認所采用的方法適合于該產(chǎn)品的檢查。若產(chǎn)品的組分或原檢驗條件發(fā)生改變可能影響檢驗結(jié)果時，技術(shù)方法應(yīng)重新驗證。

5.2食品 食品標準中沒有方法學驗證實驗的規(guī)定。

5.2比較 微生物檢驗結(jié)果易受實驗條件的影響，特別是樣品中含有對微生物生長有抑制作用組分時，影響尤為突出。進行微生物檢驗時，應(yīng)保證在檢驗條件下的樣品濃度不足以抑制污染微生物的生長，確保檢驗結(jié)果的有效和準確。食品微生物檢驗由于沒有引入方法學驗證，若加工過程中添加防腐劑等抑制微生物生長的添加劑，可能會影響食品本身所含微生物的檢出，對檢驗結(jié)果的準確性產(chǎn)生影響。

6.動物實驗

6.1藥品 控制菌檢查標準中無做動物實驗的規(guī)定。

6.2食品 某些致病菌的檢驗需要做動物實驗，如：致瀉大腸埃希氏菌、肉毒梭菌、椰毒假單胞菌酵米面亞種、單核細胞增生李斯特氏菌。

6.3比較 動物實驗對檢驗者的操作技能要求較高，動物實驗的開展對評估致病菌對人體危害具有重要意義。

7.儀器設(shè)備

7.1藥品 標準中規(guī)定生化實驗用傳統(tǒng)方法。

7.2食品 標準中規(guī)定生化實驗可用傳統(tǒng)方法或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)。

7.3比較 微生物檢驗中的生化實驗對檢驗者的操作技能要求較高，全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)提高了鑒定水平，提升了檢驗效率和質(zhì)量。

8.總結(jié)

通過對比食品和藥品微生物檢驗各方面，可以發(fā)現(xiàn)二者既有相同點又有各自的特點。如藥品的方法驗證和標準按時更新是食品所沒有的，食品的全自動微生物生化檢定系統(tǒng)和動物實驗是藥品所沒有的。如果二者在標準制定過程中能相互借鑒，取長補短，二者的檢驗?zāi)芨弦粋€新臺階。作為食品藥品檢驗人員，要掌握二者的異同，以便更好的開展檢驗工作，保障人民的食品用藥安全。

參考文獻：

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].中國醫(yī)藥科技出版社，2010，附錄：附錄Ⅷ C 79-88.

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所有生物類學科中重要的基礎(chǔ)課之一就是微生物學，它在近幾年飛速發(fā)展，普及面廣，并且這門學科的應(yīng)用性極強，生命科學理論研究的核心也是它。微生物教學體系的重要環(huán)節(jié)之一就是微生物學實驗，它可以使理論性課堂教學的不足得到彌補。并且使學生理解理論知識的程度得以加深，使微生物學的教學發(fā)展得到促進，但是仍有一些問題存在于微生物實驗的教學過程中，文章對此進行了討論。

關(guān)鍵詞：微生物學；微生物學實驗；教學體系

【中圖分類號】

R365 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763（2014）07-0301-02

微生物學作為一門學科，具有很強的應(yīng)用性和實驗性，這門課程是重要組成部分就是微生物學實驗，人類為了使微生物資源得以開發(fā)和利用，使整個生命科學的發(fā)展得到推動，重要手段之一就是將微生物學實驗技術(shù)掌握。讓學生在認識微生物上從理性上升到感性，這是設(shè)置實驗課的目的，為了充分理解和掌握理論知識，并使學生們的操作技能得到提高，而且，學生們觀察、思考、分析以及解決問題的能力在實驗課上也能得到提高。

1 微生物學實驗教學的現(xiàn)狀

1.1 傳統(tǒng)教學的經(jīng)驗不足：

因為教學模式較為傳統(tǒng)，某些學校并沒有足夠重視微生物實驗教學，投入也不夠，這種現(xiàn)象在一些地方性中專衛(wèi)校尤為明顯，這樣導(dǎo)致過于陳舊的方法被應(yīng)用在微生物實驗中。以前的實驗課教學中，教師一手包辦了選擇教學內(nèi)容、設(shè)計實驗思路、準備實驗器材以及總結(jié)實驗結(jié)論等各個環(huán)節(jié)學生們在實驗課上只是一味地對教師指令照搬照抄，這樣雖然完成了實驗課，但是學生們的依賴思想也就從此而養(yǎng)成了，這樣產(chǎn)生的最直接的后果就是課前學生不在進行預(yù)習，做實驗的時候也不認真操作，不獨立思考，對結(jié)果的分析沒有到位等。

1.2 沒有合理安排實驗時間：

在安排微生物學實驗課的時間時通常較為緊密，頻率為兩周一次甚至每周一次，每次安排學時為1-2個，但是有時在觀察和分析課程實驗內(nèi)容的結(jié)果時需要花費較長時間，包括分離和培養(yǎng)微生物、其生化反應(yīng)和測定生長曲線等，如此導(dǎo)致整個實驗過程只通過一次實驗課是難以完成的，可是如果后續(xù)對結(jié)果的觀察在第二次課再進行的話，實驗結(jié)果的連續(xù)性和正確性恐怕就難以得到保證了。

1.3 考核方法單一：

以往主要是通過實驗報告來評定微生物實驗的成績，所以學生很多學生做實驗的目的只是單純的為了將實驗報告完成，這樣一來，一旦錯誤操作出現(xiàn)在了具體的實驗操作中，或者預(yù)期的實驗效果沒有被達到，大部分的學生不會去認真思考或分析錯誤的原因并以此來總結(jié)經(jīng)驗教訓(xùn)，他們一般編造數(shù)據(jù)來來完成實驗報告，有時甚至將他人的實驗結(jié)果抄襲在自己的報告中。這種通過完成報告來進行考核的方式引起了學生們不重視實驗的過程，從而將實驗課程的真正目的忽略了。

2 微生物學實驗教學中的措施

2.1 改革課程設(shè)置：

訓(xùn)練學生使他們能夠?qū)⑽⑸飳W最基本的操作技能得以掌握就是微生物實驗課的目的。通過學習實驗課使學生對微生物學的基本知識得以了解，使對微生物學的理論知識的理解通過課堂講授得以加深。但是根據(jù)當前的教學形式，想要培養(yǎng)出能夠適應(yīng)市場需求的經(jīng)濟型人才是相當困難的，這樣，就需要對過去一包到底的做法進行改革，流出足夠的動手時間給學生們。在具體做法上，第一應(yīng)該使學校加大投入在在實驗教學上，使實驗設(shè)備得到增加，讓每個人一組、自己獨立完成實驗的模式取代過去的多人一組、大家共同完成實驗的模式。這樣動手鍛煉的機會每個人都能得到，不但使學生們的動手能力得到提高，同時學生對微生物學的學習興趣也能得到提高。同微生物實驗課程比較抽象、復(fù)雜，我們可以利用科學技術(shù)手段，通過實驗、觀看多媒體課件等手段進行教學，通過形象生動的方式能激發(fā)學生對學習的興趣，使學生的感性認識得到提高。

第二，應(yīng)增加大量設(shè)計性和綜合性的實驗在實驗課程內(nèi)容的設(shè)計上。實驗課教學在以往的教學中，學生們從實驗的初始一直到實驗的結(jié)束都僅僅是在被動的操作和接受，這樣的直接后果就是導(dǎo)致學生的學習主動性差，缺乏創(chuàng)新意識。而在添加的設(shè)計性的實驗課程中，實驗的主要才真的是學生本身，實驗路線必須由學生們預(yù)先設(shè)計好，實驗器材也要自己選擇。而且，設(shè)計性、綜合性實驗具有以下特點：較為豐富的實驗內(nèi)容，具有較為多樣的試驗方法和較為靈活的實驗形式等，提供了極大的空間使學生能夠自由發(fā)揮，使其創(chuàng)造性思維得到培養(yǎng)。在實驗教學中需要引導(dǎo)學生自己主動動手、動腦，也要進行綜合性實驗的開設(shè)、實驗要具有自主設(shè)計性，要鼓勵學生學會主動查閱資料，進行實驗的設(shè)計，在實驗中獨立操作并進行仔細的觀察和分析實驗的結(jié)果，總結(jié)成實驗報告。這樣不僅培養(yǎng)了學生的科研意識，也增加了學生獨立思考、獨立實驗的機會，為所學的知識和實踐相結(jié)合奠定了基礎(chǔ)。

2.2 建立開放式微生物實驗室：

所謂的開放式實驗室，就是實驗室在按照一定規(guī)則的前提下要為教師和學生隨時進行復(fù)位提供，使有關(guān)實驗項目創(chuàng)造條件在完成時能更加方便，進而能夠保證實驗教學的質(zhì)量。另外，可以采取對學生完全的開放式在開放式微生物實驗室中，根據(jù)自己的知識水平和興趣愛好，學生可以自主的將一些自己的設(shè)計性實驗等在實驗室完成。

2.3 認真督促學生進行課前預(yù)習：

微生物實驗具有較為復(fù)雜的內(nèi)容，另外因為有課時的限制，有時候多個實驗項目要在同一次課中完成，這樣在將課前學生們就必須將預(yù)習工作做好。在每節(jié)微生物實驗課之前，教師必須要督促學生們實驗相關(guān)內(nèi)容進行閱讀，對實驗的目的、內(nèi)容以及原理加以了解，學生們也必須做到在實驗開始前就了解和明確實驗中的關(guān)鍵步驟，這樣在做實驗的時候才可以得心應(yīng)手，減少錯誤操作的出現(xiàn)。與此同時，在實驗課之前準備器材的時候，可以讓同學和老師們共同參與，這樣在一方面可以使學生們和教師之間的溝通得到增加，另一方面學生們動手的機會也可以得到增加，使他們在掌握實驗課的知識點時能理解的更加深刻。

3 結(jié)語

微生物是一門科學學科，它的基礎(chǔ)就是實驗，通過實驗才能形成它的概念和規(guī)律，通過微生物實驗，使課程理論得以驗證和升華，使微生物學教學水平得以提高的重要手段之就是抓好微生物實驗，想要將微生物學的教學工作切實做到最好，就必須使學校更加重視學校對實驗課程的重視。

參考文獻

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關(guān)鍵詞：微生物檢驗；實習生；教學模式

中圖分類號：G642.0 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2016）48-0208-03

近10年來，我國微生物學快速發(fā)展，特別是2012年我國衛(wèi)生和計劃生育委員會出臺的抗菌藥物專項整治項目工作的推進，臨床抗感染治療越發(fā)依靠參照實驗室的病原微生物診斷報告。美國臨床實驗室標準化協(xié)會（CLSI）的針對實驗室檢測方案的標準也每年隨之不斷更新。而這一現(xiàn)狀對臨床微生物檢驗人員也提出了更高的要求。為順應(yīng)臨床微生物學科的發(fā)展，讓即將投入工作崗位的醫(yī)學檢驗專業(yè)畢業(yè)生能更好地適應(yīng)新的臨床微生物檢驗學科發(fā)展，臨床實習期是關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其可幫助學生更好的理論聯(lián)系實際，同時培養(yǎng)其獨立工作的能力，使其更好的融入社會，服務(wù)社會。對學生施行各種帶教模式，切實提高臨床教學質(zhì)量，是臨床帶教工作必須要深度研究和思考的問題。

一、當前檢驗醫(yī)學發(fā)展對微生物人才的要求

根據(jù)我國醫(yī)學科技“十二五”規(guī)劃要求，目前臨床醫(yī)學的發(fā)展趨勢是個體化醫(yī)療、轉(zhuǎn)化醫(yī)學、可預(yù)測醫(yī)學、預(yù)防醫(yī)學和健康管理[1-3]。檢驗醫(yī)學的發(fā)展是這些醫(yī)學發(fā)展的基礎(chǔ)。沒有切實可行的個體化診斷，個體化醫(yī)療只是空談；沒有醫(yī)學檢驗指標及技術(shù)設(shè)備的發(fā)展，早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早預(yù)防、早治療等不可能實現(xiàn)。而微生物檢驗結(jié)果對臨床醫(yī)生顯得更為重要，其直接指導(dǎo)臨床醫(yī)生用藥。近年來，該學科的發(fā)展對我們微生物人提出了很高的要求，檢測項目擴展到細菌、真菌、病毒等多個領(lǐng)域，工作面從醫(yī)院常規(guī)檢驗到感染控制，參加臨床會診和病例討論。要求微生物人員能夠更多地深入臨床，參加查房、會診、閱讀病歷，關(guān)心患者疾病的發(fā)展和轉(zhuǎn)歸，關(guān)心檢驗報告對臨床診治的影響，將微生物學檢驗與臨床緊密結(jié)合，以便更及時、準確地服務(wù)于臨床，并不斷滿足臨床的需要。

二、臨床微生物檢驗實習生帶教面臨的現(xiàn)狀

檢驗專業(yè)學歷分為?？坪捅究?，其中檢驗專科教育存在的問題是?？粕碚撝R欠缺，對理論的理解能力相對較差，導(dǎo)致在實習中對操作注意點的理解不夠深刻。檢驗本科生較檢驗?？粕诶碚撝R的掌握上稍顯優(yōu)勢，但在動手能力上和?？粕鷽]有區(qū)別，有的專科生動手能力甚至比本科生還強?，F(xiàn)階段的學生大部分是獨生子女，缺乏吃苦耐勞的精神和承擔責任的意識，缺乏主動學習的精神。大部分實習同學六月底七月初到實習醫(yī)院，第二年的二三月份就心神不定了，一是參加各種類型的考試，如事業(yè)單位入職考試、研究生考試和公務(wù)員考試等；另外還參加各種類型的招聘會以及雙選會。同學將會花很多時間復(fù)習和參加各種輔導(dǎo)班，有的同學直接請假復(fù)習考試，這些都耽誤了大量的實習時間，嚴重影響了實習質(zhì)量[4]。

由于全國醫(yī)學檢驗專業(yè)學生人數(shù)的劇增，導(dǎo)致臨床實習資源匱乏。師資力量不足的問題更為突出，有時實習同學比教師還多，常常是同學帶教同學，嚴重影響了實習質(zhì)量。大部分臨床檢驗工作人員帶教的意識薄弱，認為將常規(guī)檢驗工作完成是他們主要的職責，只顧埋頭工作，不注重傳道、授業(yè)、解惑。

實習同學進入實習單位應(yīng)由實習單位主管部門、學校以及實習科室共同對實習過程進行管理。但實際情況是：一方面，實習同學一旦離開學校，學校對實習同學管理的責任似乎就全部交給了實習單位，平時幾乎沒有聯(lián)系；另一方面，一般的檢驗科沒有配備專職的實習管理人員。這樣就會出現(xiàn)實習同學懶散、消極的現(xiàn)象。

1.增強安全意識培養(yǎng)。臨床微生物學實驗室是針對病原微生物檢測分析的特定場所，是各種潛在傳染源相對集中的地方，所以要重視實驗室人員和實驗室周圍環(huán)境的安全。實習生進微生物室前要對其進行安全培訓(xùn)，如穿防護服、戴防護手套、戴口罩、加強手消毒等消毒措施，正確區(qū)分和處理黑色袋的生活垃圾及黃色袋醫(yī)療廢物；學習如何應(yīng)對職業(yè)暴露、標本溢灑等生物安全應(yīng)急事件的發(fā)生，并且要多舉一些工作中或?qū)W生實習時發(fā)生的實例，增進實習生對生物安全的認識[5]。

2.PBL教學模式在臨床微生物學檢驗實習期中的應(yīng)用。PBL（problem-based learning，PBL）教學模式由美國神經(jīng)病學教授Barrows于1969年在加拿大麥克瑪斯特大學醫(yī)學院首創(chuàng)，是以案例為先導(dǎo)、以問題為基礎(chǔ)、以學生為主體、以教師為導(dǎo)向的啟發(fā)式教學，通過PBL教學培養(yǎng)學生良好的合作精神和表達能力、系統(tǒng)掌握和綜合運用知識的能力、自主學習和創(chuàng)新能力[6-8]。傳統(tǒng)的教學方法不利于學生臨床思維和分析能力的培養(yǎng)，容易使學生感到枯燥乏味。以PBL教學模式的教學改革正在臨床醫(yī)學專業(yè)進行[9，10]。臨床微生物檢驗實習教學階段因其涵蓋了豐富的理論知識及實踐技能，應(yīng)用PBL教學法具有良好的前景，應(yīng)逐漸加以運用和完善，以滿足微生物學檢驗快速發(fā)展對人才培育的要求。

3.制訂帶教計劃，且與臨床實際相結(jié)合。我院是一所綜合性三級甲等醫(yī)院，承擔著醫(yī)療科研和大量教學工作。按照南京醫(yī)科大學的要求對帶教教師進行“教師資格”認定，帶教教師的工作熱情、教學意識和自身素質(zhì)直接影響到臨床實習教學的質(zhì)量[11]。微生物教師在帶教之前，首先按照實習生的實綱制訂帶教計劃，明確學生進行微生物實習后需要達到的目標，還需對課后學生應(yīng)具備的相關(guān)微生物檢驗?zāi)芰M行系統(tǒng)規(guī)劃。同時，每兩到三個月對學生的學習情況進行考核，采取口頭提問或試卷考核形式。根據(jù)考核情況適時調(diào)整帶教計劃，使帶教更加科學化、合理化。在帶教中要強化對典型病例的學習，如給出一個臨床病例，提出問題：（1）剖宮產(chǎn)術(shù)可能的污染菌有哪些？（2）血中感染為革蘭陰性桿菌通過什么途徑進入？（3）臨床如確診感染病例需要我們實驗做哪些檢查？（4）工作中碰到陽性瓶，但鏡下未找到細菌應(yīng)該怎么處理？等等。激發(fā)學生思考，讓每個學生闡述自己的見解，教師最終對學生的回答匯總點評，分析當中的正確與不足，把自己的知識和經(jīng)驗在熱烈的討論中傳授給學生。教導(dǎo)學生要主動走進臨床，很好的和臨床對話。比如一個感染科醫(yī)生高度懷疑病人是肺結(jié)核，而送了幾次痰找抗酸桿菌，結(jié)果都是未找到抗酸桿菌。此時你就要思考標本的采集、涂片、染色、鏡檢哪個環(huán)節(jié)會出問題，我們的方法有沒有改進的可能？怎么來提高檢出陽性率？標本采集是清晨第一口深部痰嗎？采集、送檢到實驗室的涂片有多長時間了？有條件送支氣管刷片嗎？只有通過與臨床的溝通交流，才能使我們的檢驗結(jié)果更可靠，更有價值，能更快更好地服務(wù)于臨床。

4.微信平臺在微生物檢驗帶教中的作用。隨著移動互聯(lián)網(wǎng)技術(shù)的飛速發(fā)展，依托于無線網(wǎng)絡(luò)的智能手機、智能APP迅速普及，信息傳遞更加方便快捷，極大地便利了學生的學習生活。QQ臨床微生物論壇、微生物公益大講堂、各種微生物論壇群以及公眾號臨床微生物論壇，讓我們足不出戶就可以了解微生物發(fā)展的最新前沿。目前上海醫(yī)院實驗診斷科周庭銀教授創(chuàng)建了十幾個臨床微生物論壇群，匯聚了全國各地各層次的微生物工作者近5000名，極大地豐富了微生物人的生活。實習中由教師組織學習，提出問題、討論、總結(jié)。還可以把日常工作中遇到的疑難問題發(fā)到群里請教，群里會有好多不相識的大咖為你指點迷津。網(wǎng)絡(luò)平臺中有微生物最新信息、學術(shù)講座視頻，讓局限在一個小空間的微生物的實習生請教到無數(shù)的教師，也能及時地學習掌握最新知識，跟上知識發(fā)展的步伐。通過微信平臺，使隨時隨處學習成為可能。

5.實習成績考核。學生在實習結(jié)束時，均需要進行出科考核。一方面，由微生物組長對學生進行考核，不僅要強化對重點知識點的考核，且涉及的內(nèi)容還應(yīng)全面，既要有各種實驗儀器的使用方法，還要對具體的實驗操作進行考查，強化對病例資料分析能力的考核，還要提高對交叉性知識的運用方式的考察力度，使學生能夠做到靈活運用各項知識，具備一定的自主分析判斷能力[12]；另一方面，結(jié)合學生平時的出勤情況和學習態(tài)度，最后進行評分。出科時給每個學生一個綜合性評價小結(jié)。

6.加強實習管理?？剖矣梢幻敝魅畏止芸蒲薪虒W工作，還配有一名教學秘書，主抓教學工作。對實習生進行規(guī)范管理，首先建立健全管理制度，包括實習生教學管理制度、實習教學質(zhì)量檢查、實習生請假制度、實習教學事故的判定及處理辦法等。制度是保障，管理靠制度，只有管理制度不斷完善，才能保障實習教學質(zhì)量[13]。

三、結(jié)語

本檢驗科自2013年通過ISO15189以來，實驗室的標準化管理發(fā)展迅速，對實習學員都按標準化教學流程管理，這將對他們?nèi)肼毢蟮穆殬I(yè)生涯有著深遠的影響。微生物檢驗方向是檢驗學專業(yè)的重要方向之一，微生物室的實習在微生物檢驗學習過程中起到了重要的作用。臨床實習教學質(zhì)量的好壞對實習學生的未來將產(chǎn)生很大的影響，所以先進的教學模式、完善的管理制度、優(yōu)秀的帶教隊伍、科學的考評制度是保證實習質(zhì)量的關(guān)鍵。

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關(guān)鍵詞：食品 微生物檢驗 質(zhì)量控制

隨著人民生活水平的提高，人們對食品的安全性要求也越來越高，不僅要求營養(yǎng)豐富、美味可口，而且要求安全、健康。微生物指標作為評價食品安全的重要指標之一，實驗室應(yīng)怎么控制好微生物檢驗就尤為重要了。目前，控制食品質(zhì)量的微生物檢驗項目主要有:菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌和酵母、腸道致病菌和致病性球菌等。

一、 食品微生物檢驗質(zhì)量控制概述

質(zhì)量控制是食品微生物學實驗室為了保證檢驗結(jié)果實事求是地反映客觀存在而建立的操作程序體系。是保證食源性致病菌的培養(yǎng)、分離、鑒定及血清學試驗等的準確性，避免因操作變化導(dǎo)致檢驗結(jié)果錯誤。

質(zhì)量控制分為室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評價。室內(nèi)質(zhì)量控制是實驗室內(nèi)部采取的以對比分析、跟蹤以及對實驗室工作的連續(xù)性控制計劃；室間質(zhì)量評價是通過互相校準和/或檢驗對實驗室的操作和結(jié)果所進行的評價。

二、 食品微生物檢驗的室內(nèi)質(zhì)量控制

食品微生物檢驗的室內(nèi)質(zhì)量控制是微生物檢驗質(zhì)量保證的核心和基礎(chǔ)，包括以下方面：

1.人員要求

微生物實驗室屬于專業(yè)性較強的實驗室，所需檢驗人員必須具備相應(yīng)的專業(yè)知識和一定的操作能力。除此之外，檢測人員還應(yīng)具備一定的經(jīng)驗和高度的主觀判斷力。微生物檢驗人員應(yīng)經(jīng)常參加內(nèi)部比對活動和能力驗證工作，定期對上崗人員進行考核，對新的檢測技術(shù)進行培訓(xùn)等。

2.設(shè)施和環(huán)境條件要求

從事微生物檢驗的實驗室屬于特殊實驗環(huán)境，也是實驗結(jié)果保證的一個重要環(huán)節(jié)。實驗室應(yīng)具備進行微生物檢驗所需的適宜、充分的實施條件，包括檢驗設(shè)施和輔助設(shè)施。同時應(yīng)制定合理的環(huán)境監(jiān)測程序，并對其記錄結(jié)果進行數(shù)據(jù)分析。根據(jù)實驗室所涉及微生物檢驗的種類和GB 19489-2008《實驗室 生物安全通用要求》確定實驗室屬于何種防護等級的生物安全實驗室，其基本配置是否滿足該等級微生物檢驗的要求和生物安全要求。

3.檢測設(shè)備要求

實驗室應(yīng)具備開展相關(guān)檢測項目的設(shè)備/儀器，并制定和實施相關(guān)設(shè)備/儀器的維護、校準和性能驗證的程序。以確保其處于良好工作狀態(tài)。并根據(jù)使用頻率在特定時間間隔內(nèi)進行維護和性能驗證，并保存相關(guān)記錄。

4.培養(yǎng)基及試劑等的質(zhì)量控制

培養(yǎng)基是微生物檢測中的基礎(chǔ)物質(zhì)，其質(zhì)量好壞直接影響檢測結(jié)果的準確性。GB/T 27405-2008《實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品微生物檢測理解與實施》中明確指出了微生物實驗室必須對培養(yǎng)基進行評估。因此微生物實驗室對每次購進的培養(yǎng)基必須采用標準質(zhì)控菌株或生化反應(yīng)等措施來進行必要的技術(shù)驗證，以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量。

5.檢驗過程的質(zhì)量控制

檢驗過程的質(zhì)量控制可采取以下方法：定期使用有證標準物質(zhì)和次級標準物質(zhì)（參考物質(zhì)）進行內(nèi)部質(zhì)量控制；參加實驗室間的比對或能力驗證；利用相同或不同方法進行重復(fù)檢測；對留存的樣品進行再檢測。在整個檢測過程中，要設(shè)立陽性、陰性對照，這項工作實際上是對操作過程的質(zhì)量控制，也是對人員能力、儀器設(shè)備、培養(yǎng)基、以及環(huán)境的設(shè)施的間接控制。在檢測過程中如果出現(xiàn)異常情況可及時查找原因，及時排除。

6.標準菌株的來源和保存

實驗室應(yīng)通過標準培養(yǎng)物來驗收培養(yǎng)基、驗證方法和評估實驗操作。因此，必須采用形態(tài)、染色反應(yīng)、生理生化及血清學特性典型和穩(wěn)定的標準菌株。標準菌株應(yīng)來源于認可的國內(nèi)或國外菌種收藏機構(gòu)。目前，標準菌株的保存常采用冷凍干燥法、冰凍保存法和培養(yǎng)基保存法。

7.實驗室安全防護

實驗室應(yīng)根據(jù)所操作的生物因子的危害程度采取相應(yīng)的防護措施，相關(guān)防護屏障要符合相應(yīng)生物安全級別的要求。為確保微生物檢驗人員不受危害，應(yīng)規(guī)定微生物實驗室的操作規(guī)程和檢驗人員應(yīng)配備個人防護用品。同時，微生物實驗室應(yīng)有警示標識，以警示進入實驗室的人員了解其可能產(chǎn)生的危害，必須進行相關(guān)防護后才能進入。加強檢驗人員的安全知識培訓(xùn)，樹立“安全第一，預(yù)防為主”的觀念，提高安全防范意識，確保相關(guān)人員人身安全和財產(chǎn)安全。微生物實驗室必須對實驗過程中所產(chǎn)生的廢棄物通過一定的滅菌處理后才能廢棄。

三、 食品微生物檢驗的室間質(zhì)量控制

食品微生物檢驗的室間質(zhì)量控制是對質(zhì)量控制的評價，通過互相校準和/或檢驗對實驗室的操作和結(jié)果進行的評價。

實驗室應(yīng)參加外部的質(zhì)量控制活動，對其開展的每一項檢測均應(yīng)參加相應(yīng)的室間質(zhì)量控制。室間質(zhì)量控制的一般性檢查項目包括：

1、儀器設(shè)備的操作書，使用、保養(yǎng)、維修記錄。

2、培養(yǎng)基和試劑的配制記錄、培養(yǎng)基的保存方法、滅菌質(zhì)量、有效期。

3、室內(nèi)全面質(zhì)量控制的建立，工作人員熟練程度的考核和盲樣試驗的進行情況，檢驗操作手冊及操作規(guī)范性。

工作人員熟練程度的考核用模擬食品標本做質(zhì)量評價是目前國內(nèi)外廣泛采用的方法，主要評價實驗室在病原菌的分離、鑒定試驗等方面的工作情況。由質(zhì)控管理機構(gòu)發(fā)放模擬標本或菌種，實驗室按照日常的操作方法進行相應(yīng)的分離鑒定試驗。實驗室完成鑒定后在規(guī)定時間內(nèi)將結(jié)果反饋至參考實驗室，進行評價。

質(zhì)控管理機構(gòu)對每次質(zhì)控結(jié)果進行統(tǒng)計分析，將每一實驗室的結(jié)果與標準進行比較和統(tǒng)計分析，發(fā)回評估報告。評估報告不僅可評定檢驗結(jié)果的偏差，還可以檢查整個質(zhì)量控制體系的有效性。

微生物檢驗數(shù)據(jù)的可靠性、準確性由許多因素構(gòu)成，包括人員、設(shè)施和環(huán)境、設(shè)備、檢驗方法的驗證和確認、各種培養(yǎng)基的質(zhì)量控制、標準菌株的質(zhì)量控制、檢測過程的質(zhì)量控制等活動。只有認真開展上述每項工作，最終才能保證檢驗數(shù)據(jù)的可靠、準確。

參考文獻：

[1]GB 19489-2008《實驗室 生物安全通用要求》

篇10

【關(guān)鍵詞】水質(zhì)檢測 微生物 質(zhì)量管理

中圖分類號：F253文獻標識碼： A

一前言

伴隨著經(jīng)濟的高速發(fā)展，人們生活水平逐漸提高，生活用水質(zhì)量決定生活質(zhì)量，對水質(zhì)控制與監(jiān)測就顯得很有必要。水質(zhì)檢測是一種保證水質(zhì)安全可靠的方式，檢測過程必須注意對質(zhì)量做好管理。作為水質(zhì)微生物進行檢驗的實驗室，做好質(zhì)量管理就是保證了檢驗結(jié)果的科學性與有效性。

二、建立實驗室內(nèi)的質(zhì)量管理體系

1.編制質(zhì)量體系文件

實驗室要建立有效的質(zhì)量體系，首先應(yīng)使之文件化，包括質(zhì)量手冊、程序文件和作業(yè)指導(dǎo)書的編制。在充足的資料和大量、有效的培訓(xùn)基礎(chǔ)上，實驗室就可以組織人員進行質(zhì)量管理體系文件的編寫工作，管理體系文件的制定通?？紤]：

（一）質(zhì)量手冊的編寫

質(zhì)量手冊是一份說明實驗室質(zhì)量方針以及實驗室為保證實施該方針而采用有效的制度和措施的文件，是質(zhì)量體系的一級文件。以書面形式制定的手冊，不僅是實驗室的必備條件之一，也是實驗室實現(xiàn)其質(zhì)量承諾的基本保證。制定質(zhì)量手冊的主要目的是實施一系列有效的運作制度，而非紙上談兵。編制手冊時應(yīng)使實驗室全體人員參加。

（二）程序文件的編寫

程序文件又稱為書面程序或文件化的體系程序，屬于質(zhì)量體系的二級文件。體系程序的文件化程度，取決于執(zhí)行該工作所使用的方法和所需技能的復(fù)雜程度以及有關(guān)人員所接受的培訓(xùn)情況。它應(yīng)能對所有影響質(zhì)量的活動進行恰當而連續(xù)的控制，并應(yīng)重視避免問題發(fā)生的預(yù)防措施。

（三）作業(yè)指導(dǎo)書的編寫

作業(yè)指導(dǎo)書為管理體系的三級文件，主要是指檢驗方法、儀器設(shè)備操作和維護、玻璃器皿洗滌與保存、標準物質(zhì)以及試劑的配制與保存、實驗室用水、實驗室安全、廢液處理、原始記錄表格、質(zhì)量記錄和其他不宜放入第一、二級文件但又是體系必不可少的管理文件。

2.質(zhì)量體系試運行與修改完善

在質(zhì)量體系文件編制完成批準后，需要試運行質(zhì)量體系，試運行期間一方面廣泛征求實驗室全體人員的意見，進一步查找質(zhì)量體系文件中的不符合指導(dǎo)手冊或不合理之處，以及在編寫時考慮不到或考慮不周的問題，在運行期間也會一一暴露出來，對這些不足之處進行修改、完善使之趨于完美；另一方面可以形成質(zhì)量體系運行的有關(guān)記錄，如內(nèi)部審核、管理評審、人員培訓(xùn)、測量不確定度評定、結(jié)果質(zhì)量保證等記錄，在以后的認可評審時可以作為質(zhì)量體系運行狀況的證據(jù)。

三、實驗室水質(zhì)微生物的檢測的幾個注意事項

水是生命之源、生產(chǎn)之要、生態(tài)之基。水質(zhì)檢測是我國進行水資源管理與保護的重要基礎(chǔ)和手段，水質(zhì)檢測提供的水質(zhì)信息十分重要。微生物檢測是水質(zhì)檢測中一個不可忽視的部分，對于微生物檢測的精確程度要求也越來越高。怎樣提高微生物檢測準確率，我認為可以從以下幾個方面考慮。

1.嚴格用具的清洗消毒

保證檢測用具的真正清潔、無菌是保證檢測精度的第一步。因此必須保證用具包括采樣瓶、平皿、吸管等消毒符合要求，及時更換消毒液，使之達到一定濃度，用具清洗必須徹底無殘留，濕法干法滅菌必須確保溫度、壓力及消毒時間達到規(guī)定要求。消毒后物品必須按規(guī)定要求存放防止二次污染。

2.加強實驗室無菌環(huán)境的控制

大量細菌能夠附著在空氣中的粉塵中，因此必須保持檢測室、尤其是無菌室四壁及地面光潔，空氣清潔，無菌室內(nèi)還要盡量少放置物品，便于消毒殺菌。無菌室濕度要達到要求，潮濕也是細菌滋生的一大因素。

3.合理存放及使用培養(yǎng)基

大家使用的合成培養(yǎng)基，一般為粉末狀，避光、干燥保存，并在保質(zhì)期內(nèi)使用。若培養(yǎng)基粉末變黃、變粘，則很可能變質(zhì)。已配制好的培養(yǎng)基應(yīng)在冰箱保存，并盡快使用。使用時，應(yīng)將培養(yǎng)基均勻加熱，使之熔化。若使用電爐加熱，應(yīng)避免熱糊。待其冷卻后，方可進行接種。培養(yǎng)基以其基體均一，色澤光亮、透明為優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基。

4.定期殺菌、標準接種

每次接種前，需將無菌室紫外燈打開消毒30分鐘，關(guān)閉紫外燈需要等待30分鐘后才能進入無菌室。進入無菌室后打開超凈工作臺方可工作。工作完畢后，再將紫外燈打開殺菌。經(jīng)常用酒精或來蘇爾進行器具滅菌。另外，微生物檢測室盡量避免外來人員出入，減少空氣流動，避免不潔空氣的帶入。在樣品移至無菌室前，先將采樣瓶體外壁連同盛裝樣品的容器一同用酒精棉擦拭，然后換上無菌工作服、拖鞋、手套、口罩等，再將其移至無菌室內(nèi)。接種時，動作準確，迅速，不要讓樣品灑落，造成交叉污染。

實驗室水質(zhì)檢測結(jié)果的質(zhì)量決定于檢測過程完成的質(zhì)量，過程存在質(zhì)量缺陷，將導(dǎo)致檢測結(jié)果不準確、不正確和不合理，因此，實驗室操作要在細節(jié)上下功夫，盡量避免誤差。

四、水質(zhì)監(jiān)測微生物實驗室內(nèi)的質(zhì)量控制

作為一名微生物檢驗技術(shù)人員，一方面要不斷總結(jié)經(jīng)驗，另一方面還要學習新知識，提高業(yè)務(wù)素質(zhì)。

1. 微生物的識別

扎實的理論基礎(chǔ)和豐富的工作經(jīng)驗在微生物的識別和判斷上起著決定性作用。根據(jù)微生物的生長特點、表型、生化反應(yīng)、及特殊試驗，綜合分析、判定。操作過程標準、規(guī)范、思路清晰，根據(jù)微生物表象特點，選擇相應(yīng)檢查程序，以迅速準確判定微生物的品種。同行之間應(yīng)廣泛交流經(jīng)驗，共同提高業(yè)務(wù)水平。

2.方法的選擇

化驗室技術(shù)人員，可視檢測物的需要而選擇方法，認真仔細，以免判斷錯誤。只有標準化、規(guī)范化，才能提高微生物鑒定的工作效率。在選取適當方法的同時，還需要做平行和空白對照組，用陰性、陽性標準菌株做確證試驗，以保證檢驗結(jié)果的可比性和防止污染引起的結(jié)果不準確。

3．鑒定的程序

為了迅速診斷，我們要判定微生物所屬類別，然后進行生化細分。對于球菌的判定較為方便，可以通過革蘭染色、顯微鏡下觀察的方法作出初步判定，然后送生化檢驗。對于桿菌的判定，用于區(qū)大腸桿菌、非發(fā)酵菌和弧菌科細菌，可選用葡萄糖氧化發(fā)酵試驗和氧化酶試驗。分科后，選用生化試驗分類、分屬。

總之，微生物檢驗要密切聯(lián)系實際，平時工作要仔細認真，善于歸納總結(jié)，積累經(jīng)驗，提高工作熟練度和技術(shù)水平。在上級主管部門的督察、指導(dǎo)下，檢驗科室質(zhì)量管理工作會進一步完善。加強環(huán)節(jié)質(zhì)量控制，保證檢測質(zhì)量的提高。同時，也加強了對突發(fā)事件的應(yīng)對能力。這是水質(zhì)化驗室管理的需要，也是人民群眾健康的需要。

五、微生物檢驗的實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制措施

1.實驗室環(huán)境控制

（一）實驗室要求有良好的通風而且能夠避免灰塵、通堂風和溫度和變化，最終好能要用集中式空調(diào)，這樣一來即能減少雜菌污染，又能保證培養(yǎng)箱的穩(wěn)定操作和減輕培養(yǎng)基、分析天平的受潮問題。

（二）設(shè)計實驗室，以要工作時使往來通行和訪客的影響能減少到最小程序為原則，并要具專門的區(qū)域供配制培養(yǎng)基和無菌操作用。

（三）用光滑的最后一道漆覆蓋墻壁，使之易于清洗和消毒，地面要求使指定的材料，做到放滲水、光滑、易于清潔；工作臺高寬適當、臺面要做到防止透水、抗腐蝕、光滑無逢。

2.主要實驗設(shè)備控制

（一）溫度計或七其它溫度計量一起每半年校對一次，以保證培養(yǎng)箱、冰箱、冷凍箱和干燥箱都能連續(xù)準確的反映操作溫度。

（二）天平的使用應(yīng)嚴格遵守操作規(guī)程，定期進行檢定。

（三）使用PH計，至少要配制兩種標準緩沖液(PH4．0，PH7．0或PH10)來校準PH計。

（四）分析用水最好采用去離子水或蒸餾水，反對使用滲透水。

（五）電熱滅菌箱應(yīng)定期(三個月)采用孢子試條或孢子懸浮液來測試其性能，確保操作準確顯在160~C～18O℃之間，己滅菌的器皿應(yīng)有標志區(qū)分。

3.對制成的培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

每次配制好的培養(yǎng)基應(yīng)記錄有配制人，配制日期，培養(yǎng)基名稱和配制批次、數(shù)量、滅菌溫度和所使用時問、PH值以及培養(yǎng)基中是否配有不穩(wěn)定成分等。并進行無菌檢驗及陽性的陰性對照培養(yǎng)檢查。

結(jié)果評價系統(tǒng)的質(zhì)量控制:

每做一次試驗，就必須用滅菌水為水樣，檢查培養(yǎng)基、濾膜、稀釋水、沖洗用水、玻璃器皿和器具的無菌性，如果有雜菌侵染，則用該材料做試驗所得的數(shù)據(jù)應(yīng)該否定。

每次試驗至少要對一個水樣做重復(fù)分析，原則上要對10％的水樣做出重復(fù)分析。

培養(yǎng)基配置要按使用量控制配置數(shù)量，防止長期存放。

4.操作方法的精密度的度量

（一）從某一特種型式的一批水樣中，選出最先l5個陽性水樣，做雙樣分析。

（二）計算每個數(shù)據(jù)的對數(shù)，如果在任何一雙樣結(jié)果中有任一者為零，則都加1然后算對數(shù)值。

（三）計算每個一雙對數(shù)的差城(用R表示)，并且計算出這些差城的平均值(R)。

六、結(jié)束語

對于水質(zhì)檢測微生物實驗室內(nèi)的質(zhì)量管理，本文從不同的角度進行了論述，質(zhì)量控制是一個系統(tǒng)工作。做好控制工作可以保證檢測部門檢測結(jié)果準確，為將要開展的生產(chǎn)生活提供必要的數(shù)據(jù)支撐。

參考文獻：

[1] 孫東衛(wèi) 水質(zhì)監(jiān)測微生物實驗室樣品的檢測與管理 中國衛(wèi)生檢驗雜志-2011年8期23頁

[2]于春霞 水質(zhì)檢測微生物實驗室內(nèi)的質(zhì)量管理 中國衛(wèi)生檢驗雜志-2010年9期58頁